LAboruntersuchungen bei Blutspende.Antigennachweis. Überprüfung der Validität der angewandten Tests. Virusprävalenzen auch abgetötete Partikel der Bevölkerung im Vergleich zu den Blutspendern mit unbekannten Antigenen, Antikörpern oder kürzlich erhaltenen Antigenen oder Genprodukten.

1. Prof. Dr. med. Christian Seidl
Institut für Transfusionsmedizin und
Immunhämatologie – Hs76
Querschnittsbereich 4 (QB4)
Vorlesungsteil - Transfusionsmedizin und
Immunhämatologie
Vorlesung 4 –
Hämotherapie – Teil II

2. Komponententherapie - Zelluläre Antigenexpression
Erythrozyten
ABO-Antigene und weitere
Blutgruppen-Antigene
Thrombozyten
HLA-Klasse I ( nicht Klasse II )
Thrombozyten-spez. Ag (HPA-1 - HPA-5)
ABH-Antigene schwach
kein Rhesus, Kell-,
Duffy, -Kidd
und Lutheran
Lymphozyten
HLA-Klasse I und -Klasse II Antigene
verschiedene Ag-System
Granulozyten
HLA-Klasse I ( nicht Klasse II )
Granulozyten-spez. Ag (NA - NE)
keine ABH-Antigene

3. Vollblut
Blutkomponenten
Plasma (GFP)
Leukozyten
Thrombozyten (TK)
Erythrozyten (EK)
–
–
–
–
Humanalbumin
Gerinnungsfaktoren
(PPSB, Faktor XIII)
Immunglobuline

4. Leukozytär-bedingte Nebenwirkungen zellulärer
Blutpräparate und diskutierte Grenzwerte
Bildung zytotoxischer Antikörper
- Transfusionsrefraktorität
CILL = Critical immunogenic leukocyte load
Febrile nicht-hämolytische
Transfusionsreaktion (FNHTR)
CALL = Critical antigenic leukocyte load
Graft-versus-Host Erkrankung (GvHD)
CMV-Infektion
5 x 106 (CILL)
5 x 108 (CALL)
<< 106
107

5. Restleukozytengehalt:
< 1,0 x 106 / Einheit
In-Line-Filtration
AK-Blut seit 01.10.2001
Zelluläre Blutkomponenten
- EK
- TK

6. Febrile nichthämolytische Transfusionsreaktion
(FNHTR)
Transfundierte
Leukozyten
1) Zytokine
Stimulation
Zytokine
2)
3)
allo-Antikörper
im Empfängerplasma
Zytokin-Freisetzung
bei Lagerung
Stimulation
Dzik et al., Tranf Med Rev 14:1 (2000)
Empfänger-
Leukozyten

7. pg/mL ng/mL
pg/mL ng/mL
Einfluß der Lagerungszeit auf die Spiegel
von Zytokinen in Pool-TK
IL-1
0
0
150
120
90
60
30
IL-6
0
400
300
200
100
0
400
300
200
100
IL-8
0
10
8
6
4
2
0
10
8
6
4
2
TNF-
0
100
80
60
40
20
0 3 5 0 3 5 0 3 5 0 3 5
0 3 5 0 3 5 0 3 5 0 3 5
Dauer der Lagerung (d)
Aye et al. Transfusion 35:117 (1995)
Ohne Filter
150
120
90
60
30
Inline-filtriert
0
100
80
60
40
20

8. 40
30
20
10
0
50
Control-Group
Filter-Pool
F-Apheresis
45
P < 0.001
18 17
Anti-HLA
Antibodies
P = 0.03
16
8
7
Platelet
Refractoriness
Bildung von zytotoxischen Lymphozytenantikörpern und
Refraktärzustanden nach Thrombozytengabe (TRAP-Studie)
TRAP Trial: N Engl J Med 337:1861 (1997)

9. Leukozytendepletion zellulärer Komponenten
-
-
-
Reduktion von
* Prävalenz
* Schwere
febriler Transfusionsreaktionen
Prävention der HLA-Alloimmunisierung
TRAP Trial: N Engl J Med 337:1861 (1997)
Minimierung des Risikos der Übertragung
Leukozyten-assoziierter Erreger (CMV)
Leukozyten-depletierte nicht CMV gestestete Präparate besitzen im Vergleich zu
CMV-negativ getesteten nicht Leukozyten-depletierten das gleiche reduzierte Restrisiko
einer CMV-Übertragung
Blood 86. 3598 (1995); Cell 91, 119 (1997); Transfusion 38,271 (1998), RiLi Hämotherapie (2003)

10. Relative Indikationen für CMV-negative und
Leukozyten-depletierte Blutpräparate
• Folgenden, besonders gefährdeten Patienten sollten CMV-AK-
negative zelluläre Blutpräparate transfundiert werden (7):
– - Feten (intrauterine Transfusion)
– - Frühgeborene
– - Empfänger eines allogenen Stammzellpräparates
– - Empfänger mit schweren angeborenen Immundefekten (SCID)
– - CMV-negative, HIV-infizierte Patienten
– - CMV-negative, schwangere Frauen.
BÄK Richtlinien Hämotherapie 2005

11. 2,2
6,7
0,6 2,1
11,2 10,2
0
10
20
ICBT TTI TRALI TA- PTP ATR DTR
Nebenwirkungen und Fehler
Serious Hazards of Transfusion (SHOT) Annual Report
66,7
70
60
50
40
30
GVHD
ICBT= Incorrect Blood Component Transfused; TTI=Transfusion Transmitted Infections;
ATR=Acute Transfusion Reaction; DTR=Delayed Transfusion Reaction

12. Graft versus Host (GvH)
Grad III-IV
Grad I-II

13. Transfusionsinduzierte GvH-Krankheit (TI-GVHD)
Klinik:
Therapie:
meist 4 - 30 Tage nach Transfusion
Fieber, Hautexanthem, Hepatitis,
Darmkrämpfe und Diarrhoe, Infekte,
Knochenmarkdepression.
Corticosteroide
+ weitere Immunsuppressiva
ca. 90% tödlich
Prophylaxe: Bestrahlung der Blutpräparate mit 30 Gy
(RiLi Hämotherapie 2005)
Leukozytengrenzwert << 106

14. Indikationen für bestrahlte Blutprodukte
BÄK Rili-Hämotherapie 2005
- alle Blutkomponente aus gerichteten Blutspenden von Blutsverwandten
- alle HLA-ausgewählte Blutkomponenten
- alle Granulozytenpräparate
Blutkomponenten für die
- Intrauterine Transfusion
- postpartale Austauschtransfusion*
- Transfusion von Frühgeborenen (bis zur Vollendung der 37. Schwangerschaftswochen)
- Transfusion von Neugeborenen bei Verdacht auf Immundefizienz
- Transfusion bei allogener Stammzell-/Knochenmarktransplantation
- Transfusion (7-14 Tage) vor autologer Blutstammzellentnahme
- Transfusion bei autologer Stammzell-/Knochenmarktransplantation
(ca. drei Monaten nach Transplantation)
- Transfusion bei schwerem Immundefektsyndrom oder Patienten mit AIDS
- Transfusion bei M. Hodgkin (alle Stadien)
- Therapie mit Purin-Analoga (Fludarabin, Cladrabin,Deoxycoformycin)
- Therapie mit Anti-T-Lymphozyten-Antikörpern (Alemtuzumab, ATG/ALG)
- Transfusion bei Hochdosis-Chemotherapie mit oder ohne Ganzkörperbestrahlung bei Leukämien,
malignen Lymphomen und soliden Tumoren*
•: * nicht gesicherte Indikationen
(Diese Auflistung ist der Entwicklung neuer immunsuppressiver Medikamente/Maßnahmen anzupassen)

15. Thrombozyten - Transfusion
Normalwert:
Täglich:
150.000 – 380.000 / µl
35x109 Thrombo / kg KG
Halbwertszeit: 7 – 10 Tage

16. • Thrombozytärer bzw.
vaskulärer Blutungstyp:
– Petechien
(Haut/Schleimhäute)
– Epistaxis
– Menorrhagien
• Plasmatischer Blutungstyp:
– Gelenk- u. Muskelblutungen
– Hämatome
– Ekchymosen

17. Thrombozyten - Transfusion
Rh-D
nur auf Erythrozyten, nicht auf Thrombozyten
cave ! Rh-pos TK können Anti-D verursachen
durch Erythrozytenkontamination
(Transfusion von Rh (D) positiven TK sollte mit einer Prophylaxe
erfolgen (300µg Anti-D (Rhesogam) bzw. 10µg Anti-D / 1ml Ery‘s)
Bei Kindern (insbesond. Mädchen) und Frauen im gebärfähigen Alter
sollte Rh-D berücksichtigt werden
ABO-System
Antigenstärke ca. 10% im Vergleich zu Erythrozyten
Transfusion: ABO-blutgruppengleich
bei Major-inkompatibel ca 20-50% vermindert
(z.B. Blutgruppe A für Patient mit O)
keine erythrozytäre Kreuzprobe erforderlich

18. Blutgruppenverträglichkeit im ABO-System
Patient
A
B
AB
O
EK
A oder O
B oder O
AB, (A, B) oder O
O
GFP
A, AB
B, AB
AB
O, A, B, AB
TK*
A, AB, O, B
B, AB, O, A
AB, A, B, O
O, A, B, AB
*BG-Wechsel mit
20-30% geringerem
Inkrement

19. Thrombozytenkonzentrat
(Pool-TK)
Herstellung:
gepoolt aus 4 Vollblutspende (4 TKs)
TK: ~ 3,3 x 1011
< 1 x 106
< 1 x 109
Thrombozyten
Leukozyten
(In-Line-Filtriert)
Erythrozyten
80 ml (~ 30 %)Plasma
200 ml Additiv-Lösung T-Sol®
Lagerung:
Indikation:
+ 22oC für 5 Tage
unter ständiger Agitation
Standardpräparat

20. Zytapherese-Thrombozytenkonzentrat
ca. 2 Stunden

21. ~ 4,4 x 10
Zytapherese-Thrombozytenkonzentrat
1. Inhalt
11
< 1 x 106
< 1 x 109
~ 280 ml
Thrombozyten
Leukozyten
Erythrozyten
Plasma
2. Verfügbarkeit
Individuelles Präparat
3. Indikation
Anti-HLA / HPA-Alloimmunisierung
bzw. unzureichender Anstieg auf Pool-TKs

22. Thrombozytäre Blutstillungsstörungen
Knochenmarks-Insuffizienzen
* Chemotherapie + Stammzell-Transplantation
* Aplastische Anämie, Myelodysplastisches Syndrom (MDS)
Akuter Thrombozytenmangel anderer Ursache
* starker Blutverlust
* Massivtransfusionen
* DIC (wenn primär thrombozytäre Komponente)
Besondere Patientenklientel
* mäßige Blutungsneigung: vor Operationen, bei Komplikationen
z.B. angeborene Thrombozytenfunktionsstörungen

23. Blutungsepisoden / 1000 Tage
Korrelation : Thrombozytenzahl und Blutungsrisiko
200
150
100
50
0
300
0-5 6-10 11-15 16-20 > 20
Thrombozytenzahl im Blut (x 109/l)
Leichte Blutungen
Schwere Blutungen
250
Gmür et al.
Lancet (1991)
Gil-Fernandez
Rebulla
Heckman
Wandt
(1996)
(1997)
(1997)
(1998)

24. Thrombozytentransfusion
>
<
<
<
<
80.000 / µl
50.000 / µl
20.000 / µl
10.000 / µl
5.000 / µl
Keine Blutungsneigung
Geringe Blutungsneigung
Signifikante Blutungsneigung
Geringe Blutungszeichen (Haut)
Signifikante Spontanblutung
(Stuhl)
Voraussetzung : Normale Thrombozytenfunktion
und normale plasmatische
Gerinnung
Thrombozytenzahl Allgemeines Blutungsrisiko

25. Empfehlungen für eine prophylaktische
Thrombozytensubstitution
< 10 x109/l:
< 20 x109/l:
< 30 x109/l:
* klinisch stabil
* langsam fallende PLT-Zahl
* Erholung der Hämatopoese
zu erkennen, oder zu erwarten
erhöhtes Blutungsrisiko:
* schnell fallende PLT-Zahl
* Promyelozytenleukämie
* Infektionen mit Sepsis
* entzündliche Schädigungen im GI-Trakt
* Hyperleukozytose
chirurgische Eingriffe (30-50 x109/l)

26. Erwachsene:
Kindern:
1 Pool-TK (4 TK) oder 1 Apherese-TK
(3-4 x 1011 Thrombozyten)
10ml TK / kg KG
Dosierung Thrombozytenkonzentrat (TK)
Anstieg um ca. 30.000 / µl im peripheren Blut
Dosis (Thrombozytenzahl)
= gewünschtes Inkrement ( x 109/L) x Blutvolumen* (L) x 1,5
* 70 ml / Kg KG beim normalgewichtigen Erwachsenen

27. 2,2
6,7
0,6 2,1
11,2 10,2
0
10
20
ICBT TTI TRALI TA- PTP ATR DTR
Nebenwirkungen und Fehler
Serious Hazards Of Transfusion (SHOT) Annual Report
66,7
70
60
50
40
30
GVHD
ICBT= Incorrect Blood Component Transfused; TTI=Transfusion Transmitted Infections;
ATR=Acute Transfusion Reaction; DTR=Delayed Transfusion Reaction

28. Posttransfusionspurpura (PTP)
Ätiologie:
Pathogenese:
Klinik:
Therapie:
Allo-Ak gegen Thrombozyten
(85% Anti-HPA-1a, selten andere)
> 90% Frauen 60-70 LJ
Latenzphase 6 - 10 Tage,
Elimination autologer Thrombozyten
durch Antikörper mit ‘Pseudospezifität’
oder durch Adsorption von Immunkomplexen
akute Thrombozytopenie (5.000-10.000/µl)
schwere hämorrhagische Komplikationen mit einer
Mortalität bis 10-20%
i.v. IgG (0,4 g/kg KG über 5 Tage / 1g /kg KG für 2 Tage)
(Blockade der Fc Rezeptoren des RES
oder autologer Thrombozyten)
- ggf. Plasmapherese, Kortikosteroide
- ggf. Gabe von HPA-kompatiblen TK

29. 1. Thrombotisch-thrombozytopenische Purpura (TTP)
(synonym: M. Moschcowitz)
2. post-transfusionelle Purpura (PTP)
3. Heparin-induzierte Thrombozytopenie (HIT)
4. Allergie gegen humane Plasmaproteine
(häufig aufgrund von Anti-IgA infolge IgA-Mangel)
Thrombozytentransfusion:
Relative Kontraindikationen
Therapie: Plasmapherese, Prednisolon
Therapie: i.v. Immunglobuline
Therapie: Heparin absetzen (Protamin)/ wechseln zu Hirudin (Heparinoiden)
Gabe von gewaschenen TK, Prednisolon und Antihistaminika

30. KI = Thrombozytenanstieg (x109/L) x Körperoberfläche (m2)
Anzahl transfundiertes Thrombozyten (x 1011)
KI ( nach 1 Stunde )
KI ( nach 20-24 Stunde )
< 7,5 x 109/ µl ( 7.500 / µl)
< 4,5 x 109/ µl ( 4.500 / µl)
Refraktärzustand
Fehlender Thrombozytenanstieg nach Transfusion (mind. 2-malig)
korrigiertes Inkrement (KI):

31. Ursachen für refraktäres Verhalten
- Ak gegen Thrombozyten:
HLA-Ak (80%)
thrombozytenspezifische Ak (3-10%)
- sekundär in Folge von: Splenomegalie, Fieber, Sepsis,
Verbrauchskoagulopathie (DIC)
Anti-A / -B Hämolysine
- sonstige: Medikamente
(Vancomycin, Heparin, Amphotericin B)

32. Vorgehen bei therapierefraktären Patienten:
- Nicht-immunologischen Verbrauch ausschließen
- Alloimmunisierung prüfen (Antikörperscreening)
- HLA-kompatible Präparate (evtl. Kreuzprobe)
- HPA-kompatible Präparate (evtl. Kreuzprobe)
Thrombozyten-Transfusion