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PRODUCCIÓN DE POLIHIDROXIALCANOATOS
POR BACTERIAS HALÓFILAS NATIVAS
UTILIZANDO ALMIDÓN DE CÁSCARAS DE
SOLANUM TUBEROSUM L.
ALUMNO: Apaza Quispe Luis Enrique
DOCENTE: Dr. Soto Gonzales, Hebert Hernan
CURSO: Biotecnología
César Guzmán1;Alberto Hurtado2,*;Carmen Carreño1;Indira Casos1) (June16, 2017)
Producción de polihidroxialcanoatos por bacterias halófilas nativas
utilizando almidón de cáscaras de Solanum tuberosum L.
OBJETIVO
determinar la concentración de
almidón de cáscaras de Solanum
tuberosumL. “papa” para la
producción de
polihidroxialcanoatos, PHA, por
bacterias halófilas nativas, como
una alternativa para disminuir
los costos de producción de
estos biopolímeros, posibles
reemplazantes de los plásticos
provenientes del petróleo.
MUESTREO
Para aislar bacterias halófilas
productoras de PHA se
recolectaron aleatoriamente 35
muestras de agua en ocho salinas de
los distritos de San José y Santa
Rosa, región Lambayeque. Las salinas
de San José están ubicadas a
6°46’8.26’’ latitud sur y 79°56’56.78’’
longitud oeste (Fuentes et al,2013) y
las salinas de Santa Rosa están a
6°53’34.87’’ latitud sur y 79°54’33.08’’
longitud oeste (Fuentes et al.,2013).
AISLAMIENTO DE
BACTERIAS HALÓFILAS
PRO-DUCTORAS DE PHA
La población de bacterias
halófilas de las muestras de
agua fue enriquecida
(Guzmány Guz, 2008)
depositando 1 mL de cada
muestra en 10 mL de
medio HM1con glucosa (1
gL-1)como fuente de carbono
y diferentes concentraciones
de NaCl (5, 10, 15, 20, 25 y
30g 100 mL-1) e incubando
a 30°C por tiempo
suficiente para observar
crecimiento bacteriano
denotado por una turbidez.
Materiales y métodos
El trabajo de investigación se ejecutó en
dos fases. En la primera, se realizó el
aislamiento, detección y selección de
bacterias halófilas nativas productoras de
PHA, utilizando un diseño no experimental
transeccional (Hernández et al., 2010)
Los tratamientos correspondieron a la
concentración de almidón con cuatro
niveles 5, 10, 15 y 20 gL-1. También se
consideró un testigo con glucosa (10 gL-1).
DETECCIÓN Y SELECCIÓN DE
BACTERIAS PRODUCTORAS DE
PHA
Para la detección de PHA cada
aislado de bacteria halófila se
sembró en 5 mL de caldo HM2con
glucosa (10 g.L-1)como fuente de
carbono (Guzmán y Guz, 2008) y se
incubó en estufa (marca Blue
Pard, modelo DHG) a 30°C, en
agitación constante (125 rpm)
hasta observar crecimiento.
Rendimiento de PHA en
glucosa
Las bacterias halófilas
seleccionadas se
cultivaron en 6 mL de
caldo HM2con glucosa
como fuente de carbono
(Guzmán y Guz, 2008), a
30°C por tiempo suficien-te
hasta alcanzar 107 cel
mL-1(tubo 3 del
nefelómetro de
McFarland).
Rendimiento de PHA en
almidón
Los tres aislados
bacterianos que
alcanzaron los mayores
Y (p/x) se seleccionaron
para la producción de
PHA en almidón
contenido en cáscaras de
papa como fuente de
carbono.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En las muestras de agua de las
salinas, la concentración de NaCl
alcanzó hasta 25 g/100 mL,
coincidiendo con López (2010) y
Fuentes et al. (2013), quienes
determinaron que estos ambientes
son considerados hipersalinos
debido a que presentan una
elevada concentración de sal. El 100
% de estas muestras fue posi-tivo
para el enriquecimiento y aislamiento
de bacterias en un tiempo que osciló
entre 1 día (5 g/100 mL NaCl) hasta 18
días (30 g/100 mL NaCl).
CONCLUSIONES
La producción de PHA por Halomonassp.
M4C1 se demostró en cuatro concentra-
ciones de almidón de cáscaras de papa,
alcanzando un Y (p/x) de 0,143 g.g-1. La
disponibilidad y bajo costo de las cáscaras de
papa posibilitan la producción de PHA por
Halomonassp M4C1; no obstante, se sugiere
un tratamiento previo al sustrato para
incrementar el Y (p/x) a 0,863 g.g-
1obtenido con glucosa como fuente de
carbono.

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Producción de polihidroxialcanoatos por bacterias halófilas nativas utilizando almidón de cáscaras de Solanum tuberosum L

  • 1. PRODUCCIÓN DE POLIHIDROXIALCANOATOS POR BACTERIAS HALÓFILAS NATIVAS UTILIZANDO ALMIDÓN DE CÁSCARAS DE SOLANUM TUBEROSUM L. ALUMNO: Apaza Quispe Luis Enrique DOCENTE: Dr. Soto Gonzales, Hebert Hernan CURSO: Biotecnología César Guzmán1;Alberto Hurtado2,*;Carmen Carreño1;Indira Casos1) (June16, 2017)
  • 2. Producción de polihidroxialcanoatos por bacterias halófilas nativas utilizando almidón de cáscaras de Solanum tuberosum L. OBJETIVO determinar la concentración de almidón de cáscaras de Solanum tuberosumL. “papa” para la producción de polihidroxialcanoatos, PHA, por bacterias halófilas nativas, como una alternativa para disminuir los costos de producción de estos biopolímeros, posibles reemplazantes de los plásticos provenientes del petróleo. MUESTREO Para aislar bacterias halófilas productoras de PHA se recolectaron aleatoriamente 35 muestras de agua en ocho salinas de los distritos de San José y Santa Rosa, región Lambayeque. Las salinas de San José están ubicadas a 6°46’8.26’’ latitud sur y 79°56’56.78’’ longitud oeste (Fuentes et al,2013) y las salinas de Santa Rosa están a 6°53’34.87’’ latitud sur y 79°54’33.08’’ longitud oeste (Fuentes et al.,2013). AISLAMIENTO DE BACTERIAS HALÓFILAS PRO-DUCTORAS DE PHA La población de bacterias halófilas de las muestras de agua fue enriquecida (Guzmány Guz, 2008) depositando 1 mL de cada muestra en 10 mL de medio HM1con glucosa (1 gL-1)como fuente de carbono y diferentes concentraciones de NaCl (5, 10, 15, 20, 25 y 30g 100 mL-1) e incubando a 30°C por tiempo suficiente para observar crecimiento bacteriano denotado por una turbidez. Materiales y métodos El trabajo de investigación se ejecutó en dos fases. En la primera, se realizó el aislamiento, detección y selección de bacterias halófilas nativas productoras de PHA, utilizando un diseño no experimental transeccional (Hernández et al., 2010) Los tratamientos correspondieron a la concentración de almidón con cuatro niveles 5, 10, 15 y 20 gL-1. También se consideró un testigo con glucosa (10 gL-1).
  • 3. DETECCIÓN Y SELECCIÓN DE BACTERIAS PRODUCTORAS DE PHA Para la detección de PHA cada aislado de bacteria halófila se sembró en 5 mL de caldo HM2con glucosa (10 g.L-1)como fuente de carbono (Guzmán y Guz, 2008) y se incubó en estufa (marca Blue Pard, modelo DHG) a 30°C, en agitación constante (125 rpm) hasta observar crecimiento. Rendimiento de PHA en glucosa Las bacterias halófilas seleccionadas se cultivaron en 6 mL de caldo HM2con glucosa como fuente de carbono (Guzmán y Guz, 2008), a 30°C por tiempo suficien-te hasta alcanzar 107 cel mL-1(tubo 3 del nefelómetro de McFarland). Rendimiento de PHA en almidón Los tres aislados bacterianos que alcanzaron los mayores Y (p/x) se seleccionaron para la producción de PHA en almidón contenido en cáscaras de papa como fuente de carbono. RESULTADOS Y DISCUSIÓN En las muestras de agua de las salinas, la concentración de NaCl alcanzó hasta 25 g/100 mL, coincidiendo con López (2010) y Fuentes et al. (2013), quienes determinaron que estos ambientes son considerados hipersalinos debido a que presentan una elevada concentración de sal. El 100 % de estas muestras fue posi-tivo para el enriquecimiento y aislamiento de bacterias en un tiempo que osciló entre 1 día (5 g/100 mL NaCl) hasta 18 días (30 g/100 mL NaCl). CONCLUSIONES La producción de PHA por Halomonassp. M4C1 se demostró en cuatro concentra- ciones de almidón de cáscaras de papa, alcanzando un Y (p/x) de 0,143 g.g-1. La disponibilidad y bajo costo de las cáscaras de papa posibilitan la producción de PHA por Halomonassp M4C1; no obstante, se sugiere un tratamiento previo al sustrato para incrementar el Y (p/x) a 0,863 g.g- 1obtenido con glucosa como fuente de carbono.