1. BIOTECNOLOGÍA DE LOS
PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES
“EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO
TRUJILLO-2012
(AMILÁSICO)”
PROFESOR: ING. SÁNCHEZ GONZALES, JESÚS ALEXANDER
ALUMNA: MARTÍNEZ SALDAÑA, YURICO ELIZABETH
CICLO: IX
HORARIO: JUEVES 11-1PM
TRUJILLO-2012

2. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
LABORATORIO N°05
EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
I. INTRODUCCIÓN
Es muy relevante tener conocimientos de las propiedades de productos enzimáticos para mejorar la
selección de las propiedades de los productos. Se debe lograr un adecuado control en sus
aplicaciones tecnológicas, así como para facilitar el diseño de un apropiado proceso de modo que
pueda aplicarse a los al campo de ingeniería agroindustrial.
Las enzimas que catalizan la hidrólisis de los enlaces peptídicos de las proteínas son las Proteasas,
que están presentes en todos los organismos vivos, las cuales se agrupan según los residuos de
aminoácidos del centro activo y los mecanismos de acción en cinco grupos: serino, cisteíno,
aspártico, metalo proteasas y peptidasas de mecanismo catalítico desconocido. La Papaína es uno
de los miembros que pertenecen a las familias de cisteínopeptidasas , las cuales son las más
conocidas.
Dichas biomoléculas se han utilizado tradicionalmente como ablandadoras de carnes. Además, se
utilizan como complemento alimenticio.Se ha descrito que muestran varias acciones
farmacológicas: aumentan la absorción de otros medicamentos, se han utilizado en tratamientos de
desórdenes digestivos, en enfermedades virales y en la formulación de vacunas. Tienen
potencialidades como antiedematosas, antiinflamatorias, antitrombóticas y fibrinolíticas. Se
demostró recientemente, la posible actividad antitumoral de cisteíno-proteasas como la bromelina.
Sin embargo, el número de proteasas vegetales que se han aislado y caracterizado es aún muy
bajo y existen muchas fuentes naturales por explorar, se han estudiado menos del 1 % de las
especies vegetales conocidas, de ahí el interés en la búsqueda de nuevas fuentes naturales de
obtención de proteasas vegetales.
II. OBJETIVOS
Identificar cualitativamente del Preparado Enzimático Crudo, la actividad enzimática de la
amilasa
III. FUNDAMENTO TEÓRICO
Muchas investigaciones encaminadas a explicar los mecanismos de activación de las cisteíno
proteasas in vivo han demostrado claramente que la activación de estas enzimas depende del pH.
Los autores sugieren un predominio de moléculas de enzima activa a pH ácido y está claro que las
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3. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
variaciones de pH neutro a pH ácido en las vacuolas provocan cambios en la conformación nativa
de la enzima inactiva, lo que permite el procesamiento y plegamiento de la enzima activa.
Pocas enzimas intracelulares son producidas a gran escala y las ventas de estas enzimas
representan solo un pequeño porcentaje del total de ventas. Sin embargo, la producción de
enzimas intracelulares es de gran interés por varias razones. Con los avances en las técnicas de
inmovilización, el uso de enzimas y células inmovilizadas está en aumento. Por ejemplo, se han
establecido procesos comerciales para la producción de jarabes de fructosa usando glucosa
isomerasa.
ENZIMAS
Son proteínas especializadas en la función catalítica y las sustancias sobre las cuales actúan se
denomina sustratos.Lo que distingue a las enzimas de las demás proteínas es precisamente que,
una vez producido el reconocimiento molecular del sustrato, se realiza la transformación de la
sustancia reconocida, como consecuencia de diferentes interacciones entre la proteína enzimática y
su sustrato este experimenta un reordenamiento de sus elementos constituyentes debido a la
ruptura y formación de algunos enlaces químicos. La que resulta de la acción de la enzima sobre el
sustrato recibe el nombre de producto.
La existencia del complejo enzima-sustrato y la característica de que la mayoría de los sustratos
presentan un tamaño varias veces menor que la estructura de la enzima, implica que la enzima solo
entra en contacto con el sustrato en una pequeña zona específica de su voluminosa estructura.
Las proteínas enzimáticas presentan dos regiones o sitios importantes, uno de ellos reconoce y liga
al sustrato (sitio de reconocimiento) y el otro cataliza la reacción (sitio catalítico) toda vez que el
sustrato se ha unido. Estos dos sitios están adyacentes uno al otro en la forma activa de la enzima
y en ocasiones, el sitio catalítico es parte del de reconocimiento, estas dos regiones en conjunto
reciben el nombre de centro activo.
Su función es de ser “Catalizador Óptimo”.
Las enzimas poseen dos propiedades fundamentales, derivándose estas de las características del
centro activo:
Gran eficiencia catalítica.
Elevada especificidad.
Siendo la Elevada Especificidad, la que sirve de fundamento para establecer la clasificación y
nomenclatura de las enzimas.
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Se han establecido 6 grupos principales:
Oxidoreductasas: Enzimas que catalizan reacciones de oxidoreducción.
Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo químico entre un donante y un aceptor,
se excluyen aquellas que transfieren electrones o sus equivalentes, pues pertenecen a la
clase anterior y aquellas en que el aceptor del grupo es el agua y pertenece a la clase
siguiente.
Hidrolasas: Catalizan la ruptura de enlaces químicos con la participación de las moléculas
de agua.
Liasas: Catalizan reacciones en las cuales se produce la adición o sustracción de grupos
químicos a dobles enlaces.
Isomerasas: Catalizan la interconversión de dos isómeros.
Ligasas: Catalizan la unión covalente de dos sustratos mediante la energía de hidrólisis de
nucleósidostrifosfatados, generalmente el ATP.
A) Estabilidad de las Enzimas
La frágil naturaleza proteica de las enzimas, que conlleva a una estabilidad limitada de su
estructura y funcionalidad, constituye un aspecto importante en un contexto tecnológico. Se
considera que una enzima es apropiada para una aplicación comercial, si su estabilidad es
suficiente para dicha aplicación.
Diagrama de flujo para la producción de enzimas a partirde tejidos animales o vegetales
“Diagrama de Enzyme´sBiotechnology”. (Figura 1).
Las enzimas se obtienen por fermentación en cultivos semisólidos, sumergidos, extracción de
tejidos ya sea en plantas o animales bajo condiciones controladas.
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Figura 1. “Diagrama de Enzyme´sBiotechnology”.
B) Fuentes de enzimas
Es obvio que hay tres fuentes de enzimas: células animales, vegetales y microbianas. En años
pasados, las plantas y los animales fueron las fu entes tradicionales de enzimas, pero dados los
avances recientes de la biotecnología, probablemente el futuro está en los sistemas microbianos.
1. Enzimas de origen animal
Obtenidas a partir de tejidos animales, por lo general, se preparan de animales recién sacrificados.
Inmediatamente después del sacrificio, se quitan los tejidos y se congelan para evitar la
degradación bioquímica y de sulfuración. Se remueven los tejidos extraños, particularmente los
cuerpos grasosos, y a continuación el tejido es cortado en rebanadas o se pasa a través de un
molino de martillos. En algunos casos la preparación resultante se pasa también por un mezclador
para obtener un puré fino.
Varios tejidos animales se usan como fuente de enzimas, incluyendo el páncreas, bazo, hígado y
varias porciones del intestino. Por supuesto, la extracción de la enzima va acompañada por varios
pasos de purificación, los cuales serán tratados con enzimas microbianas (Scragg, 1996).
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6. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
Tabla 1. Enzimas que se obtienen de tejidos animales
Enzima Fuente
α-amilasa Páncreas
Lipasa/estearasa de ácidos grasos Páncreas bovino/porcino
LIsozima Albúmina de huevo de bovino
Fosfolipasa A Páncreas porcino
Tripsina Páncreas bovino/porcino
Quimo tripsina Páncreas bovino/porcino
Pepsina Mucosa porcina
Renina Bovino
Fuente, Scragg, 1996.
2. Células y tejidos vegetales
Por muchos años se han hecho preparaciones alimentarias de enzimas vegetales (Tabla 2). Sin
embargo, la extracción de enzimas a partir de plantas es a menudo difícil y requiere equipo pesado
para macerar y moler el material típicamente fibroso. Los sistemas de molienda comunes por lo
general son insuficientes, excepto en los casos donde la fuente de materia es tejido de las hojas y
es posible usar molinos de martillos de uso rudo modificado.
Tabla 2. Enzimas derivadas de tejidos vegetales
Enzima Fuente
Β-amilasa Grano de cebada
Peroxidasa Raíz de rábano
Papaína Látex del árbol de papaya
Bromelina Bromas sp.
Ficina Higuera
Fuente: Scragg, 1996
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3. Células microbianas
Se acepta generalmente que la fuente principal de enzimas a escala industrial serán, en el futuro,
los microorganismos (Tabla 3). Las razones son:
Los sistemas de producción microbianos pueden mantenerse bajo estrecho control.
Las concentraciones de enzimas y, por lo tanto, la productividad, se pueden manipular en
forma genética y ambiental.
El aumento progresivo y la alimentación del sistema no presentan el mismo problema
logístico que una fuente derivada de la agricultura.
Hay un grado inherente de flexibilidad en el proceso a través de la elección de varias
enzimas.
Los métodos de tamizado para sistemas microbianos son comparativamente simples.
Tabla 3. Enzimas microbianas y sus aplicaciones
Enzima Fuente Aplicación
Bacillus subtilis
Asperyllusoryzae Deprestado de textiles, licuefacción de
Amilasa
Penicilliumroquefort almidón, producción de glucosa.
AspergillusNíger
Penicilinasa Bacillussubtilis Degradación de la penicilina.
Aspergillus Níger
Invertasa Industria de la confitería
Saccharomyecescerevisiae
Aspergillus Níger Disminución de la viscosidad, auxiliares
Celulasa
Trichodermasp. de digestión
Pectinasa Aspergillus niger Clarificación de vinos y jugos de fruta
Proteasa Clostridiumsp Suavizante, auxiliar en la digestión
Fuente, Scragg, 1996
La mayoría de las enzimas microbianas usadas comercialmente son extracelulares, esto es, se
producen en el interiro de las células y luego se excretan o difunden en el medio de cultivo, del cual
pueden ser operados. Esto reduce el problema que se presentan a menudo con plantas y, algunas
veces con tejidos animales, de tener que romper las células individuales (Scragg, 1996).
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8. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
C) Almidón
Se encuentra en los cereales, tubérculos y en algunas frutas como polisacárido de reserva
energética y su concentración varía con el estado de madurez; el caso del plátano es muy indicativo
en este sentido; en estado verde o inmaduro, el almidón constituye la mayor fracción de los hidratos
de carbono, ya que los azúcares son muy escasos; a medida que la fruta madura, el polisacárido se
hidroliza por la acción de las amilasas, y mediante otros sistemas enzimáticos se sintetiza
sacarosa y fructosa que se encuentran cuando llega la maduración.Químicamente el almidón es
una mezcla de dos polisacáridos muy similares, la amilasa y la amilo pectina; el primero es el
producto de la condensación de D-glucopiranosas por medio de enlaces α (1-4), que establece
cadenas lineales con 200-2500 unidades y pesos moleculares hasta de un millón; es decir, la
amilasa es una α-D-(1-4)-glucana cuya unidad repetitiva es la α-maltosa. Tiene la facilidad de
adquirir una conformación tridimensional helicoidal, en la que cada vuelta de la hélice consta de
seis moléculas de glucosa.
Por su parte la amilopectina se diferencia de la amilasa en que contiene ramificaciones que le dan
una forma molecular similar a la de un árbol; las ramas están unidas al tronco central (semejante a
la amilosa) por enlaces α-D-(1-6), localizadas cada 15-25 unidades lineales de glucosa. Su peso
molecular es muy alto ya que algunas fracciones llegan a alcanzar hasta 200 millones de saltones.
En términos generales, los almidones contienen aproximadamente 17-27% de amilasa y el resto de
amilopectina (Badui, 1996).
Identificación de almidones
Se hace de manera cualitativa se realiza de una manera muy sencilla. Esta prueba se basa en que
el yodo reacciona con la amilasa y genera un fuerte color azul característico debido al complejo que
se establece entre una molécula de éste con cada 7-8 glucosas; como para desarrollar
perfectamente la coloración se requiere un mínimo de 40 residuos de monosacáridos, las cadenas
muy cortas de amilasa, en lugar de azul, producen un color rojo. Aparentemente, el complejo
amilasa-Yodo se establece por la inclusión del I2en hélice, mecanismo semejante al que se observa
en los mono glicéridos que se usan en la elaboración del pan. Por otra parte, la amilo pectina sólo
acompleja una pequeña cantidad de I2 y desarrolla una coloración roja (Badui, 1996).
D) Carbohidrasas
Enzimas comercialmente disponibles, las carbohidrasas son las más abundantes y tal vez las más
empleadas principalmente de fuentes microbianas que pueden ser hongos, levaduras, bacterias
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9. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
i. Amilasas: En esta categoría se encuentran la α y la β-amilasa, cuyos mecanismos de
actividad se detallarán más adelante. El uso más importante de estas amilasas es en la
industria de la panificación, ya que hidrolizan el almidón y producen los azúcares (glucosa y
maltosa) que a su vez, facilitan las reacciones de oscurecimiento no enzimático que dan
origen al color en el horneado; también favorecen la generación del anhídrido carbónico,
pues son sustratos fáciles para las levaduras, lo cual provoca el esponjamiento, y por último
mejoran la textura del pan (Badui, 1996).
La α-amilasa es una endohidrolasa que actúa de manera aleatoria sobre los enlaces
internos α(1,4) de la amilasa y de la amilopectina, con lo cual se producen dextrinas; se le
da el nombre de enzima licuante debido a que su presencia provoca la rápida reducción de
la viscosidad de las soluciones de almidón. Es capaz de romper las uniones glucosídicas
adyacentes a ambos lados del enlace α(1,6) de la amilopectina, aunque no ataca
específicamente este enlace.
Por su parte la β-amilasa hidroliza los enlaces α(1,4) a partir de los extremos no reductores
de la amilasa y de la amilopectina, y produce moléculas de maltosa; esta actividad la
clasifica consecuentemente como una exoenzima. Su acción se detiene al llegar a las
uniones α(1,6) de la amilopectina, y su nombre se refiere a que ocasiona una inversión del
enlace α a β y genera moléculas de β-maltosa.
Durante la maduración de cereales, como el trigo, la actividad de α-amilasa se incrementa
considerablemente, se concentra en las capas más externas y disminuye cuando alcanza la
madurez; la β-amilasa también aumenta su actividad pero la mantiene cuando alcanza la
madurez.
ii. Amiloglucosidasa: Esta enzima, también llamada glucoamilasa, tiene la capacidad de
hidrolizar tanto los enlaces α(1,4) como los α(1,6) de las glucanas; su acción prolongada
puede causar la ruptura total del almidón, por lo que se emplea en la fabricación de los
jarabes de glucosa.
iii. Dextranasa:Las dextranas son polímeros de glucosa sintetizados a partir de la sacarosa por
acción del Leuconostocmesenteroides en el jugo de la caña; por sus características de
hidrocoloide, estos polisacáridos incrementan la viscosidad y dificultan la manipulación de
los líquidos. La adición de la dextranasa se hace para hidrolizar estos carbohidratos y
facilitar así la manipulación de los líquidos en la elaboración de la sacarosa.
iv. Lactasa: La β-galactosidasa o lactasa desdobla la lactosa en sus correspondientes
monosacáridos y se puede emplear en diversos productos lácteos, sobre todo en los que se
elaboran para las poblaciones que no toleran este disacárido. En algunos países existe
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10. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
incluso una prelación a base de la enzima, que se le añade a la leche antes de consumirla
para reducir la cantidad de lactosa (Badui, 1996).
v. β-glucanasa: La acción hidrolítica de esta enzima se ejerce sobre los enlaces β(1,3) y
β(1,4) de diversos polisacáridos, como algunas gomas; s eemplea para mejorar la extracción
del mosto de cervecería.
vi. Celulasa: La celulasa es en realidad un sistema complejo de enzimas que hidrolizan las
uniones β(1,4) de las glucanas, como la celulosa, produciendo celulodextrinas; se ha usado
en forma limitada para mejorar la extracción de aceites esenciales, así como para ablandar
los tejidos celulósicos de verduras y frutas y para ayudar la rehidratación de diversos
productos.
vii. Pululanasa: La pululanasahidroloza los enlaces α (1,6) de la maltotriosa (pululano), por lo
que tiene la capacidad de actuar sobre la amilopectina y las dextrinas límites.
viii. Invertasa: La β-fructofuranosidasa o invertasa hidroliza la sacarosa en sus dos monómeros
constituyentes: su mayor aplicación es en la elaboración del azúcar invertido.
ix. Hemicelulosa: Esta enzima actúa sobre los enlaces β(1,4) de gomas como la guar y la de
algarrobo, por lo que ayuda a descascarar los granos de café y en la producción del mosto
para la cervecería.
x. Pectinasa: Las preparaciones comerciales de esta enzima son en realidad mezclas de la
pectinmetilestearasa, la poligalacturonasa y la pectinliasa: la forma de acción de cada una
de ellas fue descrita en los ítems anteriores. Se usa en la extracción, clarificación y filtración
de diversos jugos de frutas y de vinos, así como en la elaboración de purés y concentrados
frutícolas.
Figura 2. Polímero de Almidón
Formada por 1000 o más unidades de alfa-glucosa unidas por enlaces glicosídicos.
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11. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
Figura 3. Enlaces y disposición del almidón
El polímero de almidón existe en forma de espiral. La forma de espiral es mantenida por los enlaces
de hidrógeno.
IV. MATERIALES Y MÉTODOS
A. Materiales y Equipos
Materiales
2 muestras de papaya
1 muestra de hígado de pollo de nuestro horario y la otra muestra del hígado del
laboratorio de la mañana
Solución de Almidón
Agua destilada
HCl 0.1M
KCl 0.154M
Solución de I2 0.01N
Equipos
Tubos de ensayo
Centrifuga
Mortero
Embudo de Vidrio
Gasa
Pipetas
Mortero
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12. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
B. Metodología
Tomar nuestras muestras de papaya e hígado de pollo (para este caso hacer varios
lavados, para eliminar la sangre y luego triturarlo) 20g de cada uno.
Hacemos el lavado de las muestras con solución de KCl al 0.154M.
Homogeneizamos en un Mortero con soluciones de KCl 20 mL, para el caso de las
muestras de papaya e hígado. El KCl permite una diferente presión y llega a establecer
un desprendimiento de la enzima. El KCl se agrega durante la Trituración.
Hacemos un filtrado, con la ayuda de una gasa la cual esta debe estar humedecida con
KCl(se pone en el embudo). Disolver bien el triturado y filtramos.
Centrifugamos los tubos preparados a 4000 RPM por 10 minutos.
Nos quedamos con el líquido sobrenadante de cada tubo (PEC , porque no sabemos si
el preparado tiene enzimas.
En los tubos de ensayo ingreso el Sustrato la “Solución Almidón Soluble”: 400ppm a 0.4g
almidón en un litro de agua destilada.
A continuación en Cuadro1, la cual se muestra en Resultados; procedemos a realizar
para la Identificación del Preparado enzimático Crudo.
De este modo preparamos los tubos blanco, problema y testigo.
Cuadro 1. Agregados para los tubos testigos, problemas y Blanco en PEC
Soluciones Testigo Problema Blanco
Solución almidón 400 rpm 2.5 mL 2.5mL -------
Agua destilada 0.4mL 0.4mL 2.9mL
PEC ------ 0.1mL 0.1mL
Incubar a 35°C por 15 minutos
Agregar HCl 0.1N 2.5 mL 2.5mL 2.5mL
PEC 0.1mL ------ ------
Solución de Iodo 0.1mL 0.1mL 0.1mL
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13. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
TESTIGO PROBLEMA BLANCO EXTRACTO DE
PAPAYA
Figura 4.Papaya preparada en el primer turno de la mañana asignada a nuestro horario
PAPAYA
Figura 5. Papaya del primer turno
Según Crueger (1993), la Piña (Bromelina); su temperatura óptimaesta entre 45 y 60ºC; el
incremento muy grande puede provocar desnaturalización e inactivación. Su actividad enzimática
dependerá del color que tome a un mayor color indicará que no hay actividad enzimática. De la
figura 4, vemos que la papaya preparada la de color transparente la tercera “Tubo Blanco”, tiene
mayor actividad enzimática y la que de color azul tubo “Testigo”; como la de color morado “Tubo
Problema”; a mayor color menos actividad enzimática tendrá y el tubo color azul hay presencia de
almidón pero no hay actividad enzimática.
Según Hernández, et al (1999); las enzimas son más susceptibles a la desnaturalización e
inactivación a altos contenidos de humedad. Esto se comprueba en la Figura 5 donde vemos que el
tubo es de color marrón, por lo que interpretamos que no hubo reacción. Porque a mayor color no
hay reacción enzimática. Pero no olvidemos que este tuvo corresponde al primer turno que por lo
que diríamos que el tiempo fue un factor en la actividad enzimática.
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14. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
TESTIGO PROBLEMA BLANCO EXTRACTO DE
HIGADO
Figura 6.Hígado de pollo preparado en el primer turno
TESTIGO PROBLEMA BLANCO EXTRACTO DE
HIGADO
Figura 7. Hígado de pollo preparado en mi turno 11-1pm
SegúnBadui (1996), la catalasa es una enzima común encontrada en los organismos vivos, donde
funcionan como catalizadores en las reacciones de descomposición del peróxido de
hidrógeno(H2O2) en agua y oxígeno; esto se puede encontrar en el hígado.De la figura 6, vemos
que el hígado tiene presencia de catalasas en el tubo Blanco, vemos que con el hígado de la
mañana no hubo reacción. En el tubo primero “Tubo Testigo”, color azul fuerte es la que menos
actividad enzimática tiene, de igual modo en el segundo tubo “Tubo Problema”; la que es más
amarillenta “Tubo Blanco”, es la que más actividad enzimática.Tiene entonces a más transparente
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15. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
que sea el tubo más actividad enzimática tendrá y la menos transparente es la que menos actividad
enzimática tiene de igual modo a mas color menos actividad enzimática tendrá. De igual modo
observamos en la Figura 7 que el color azul representa la presencia de almidón.
SegúnWiseman (1996), la identificación de almidones presentes en un compuesto, se hace de
manera cualitativa se realiza de manera muy sencilla. Esta prueba se basa en que el yodo
reacciona con la amilasa y genera un fuerte color azul característico debido al complejo que se
establece entre una molécula de éste con cada 7-8 glucosas; como para desarrollar perfectamente
la coloración se requiere un mínimo de 40 residuos de monosacáridos, las cadenas muy cortas de
amilasa, en lugar de azul, producen un color rojo. Aparentemente, el complejo amilasa-Yodo se
establece por la inclusión del I2en hélice, mecanismo semejante al que se observa en los mono
glicéridos que se usan en la elaboración del pan. Por otra parte, el amilo pectina sólo acompleja
una pequeña cantidad de I2 y desarrolla una coloración roja. Esto se pudo comprobar en las figuras
4, 6 y 7 donde vemos que la presencia de almidón se darácuando haya menos coloración la cual se
hace con la ayuda de la reacción del yodo y el color azul que se genera en estas muestras indican
presencia de almidón. De la figura 7, vemos que si hay presencia de almidón en el tubo Azul”Tubo
Testigo” es la de mayor presencia de almidón y la que tiene menor presencia de almidón es el tubo
color transparente“Tubo blanco” ya que u color azul refleja la presencia de almidón.
Según Frazier (1981), en los tubos testigos hay presencia de sustrato y no reacciona, en los tubos
problemas aquí solo hay reacción y tiene sustrato y enzima. En el tubo Blanco no hay sustrato si
enzima, por lo que no hay reacción. Esto se comprobó en las figuras 4 donde en el tubo testigo no
hay reacción por la presencia del sustrato y no de la enzima, en la Figura 6 vemos que en el hígado
de pollo el tubo testigo no hay reacción pero si actividad enzimática.
VI. CONCLUSIONES
Se llegó a identificar cualitativamente un preparado enzimático crudo con papaya e hígado
de pollo en lo cual vemos que si el tubo de ensayo se torna de color azul indicará la
presencia del almidón. se identificó cualitativamente la actividad enzimática de las mismas
muestras donde los tubos testigos no había reacción porque a mayor color no hay reacción y
en los tubos blancos al tener un color más claro si hará reacción.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BADUI, S. (1996). Química de los Alimentos. Editorial Pearson Education. México
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16. “EXTRACCIÓN DE UN PREPARADO ENZIMÁTICO CRUDO (AMILÁSICO)”
CRUEGER, W. (1993). Biotecnología - Manual de Microbiología Industrial. Edit. Acribia, S.A Zaragoza. España
FRAZIER, C. (1981). Microbilogía de los Alimentos, 2ª Ed. Edit. Acribia, S.A. Zaragoza. España.
HERNÁNDEZ M, CARVAJAL C, SANTOS R, MÁRQUEZ M, BLANCO M, GONZÁLEZ J,( 1999). Purification
alternatives of obtained bromelain from different sources.Pineapple News.1999; 6:5.
WISEMAN, A.(1986). “Principios de Biotecnología”. Editorial ACRIBIA S.A. ZARAGOSA (España).
SCRAGG (1996). Biotecnología para Ingenieros. Sistemas Biológicos en procesos tecnológicos. Editorial
Limusa Editores. México D.F.
ANEXOS
Figura 8. Figura 9. Centrifugación Figura 10. Materiales a
Extraccióndesolucion desolución de papaya usar en laboratorio
de papaya
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