1. Virus del Síndrome Reproductivo y
Respiratorio del cerdo PRRS
Interpretación de pruebas diagnósticas
Diplomado en Medicina y Producción
Porcina. FMVZ-UNAM 2013-2014
Juan Manuel Palacios Mc

2. Definición
• Infección viral de los porcinos causada por un
Arterivirus de dos orígenes; Europeo ( Cepa
Lelystad) y Americana ( Cepa VR-2332) la cual
provoca signos reproductivos en pie de cría y
signos respiratorios en cerdos de la línea de
producción. La cepas virales pueden tener
diversos grados de virulencia y son altamente
susceptibles a variaciones genéticas.

3. Circulación del virus en granja
REEMPLAZOS
PIE DE CRIA
DESTETES
ENGORDAS

4. Interpretación de prueba diagnósticas
• Las pruebas diagnósticas se utilizan para
determinar la circulación viral y o la respuesta
de anticuerpos al virus sin embargo se deberá
identificar la situación de la granja con base a
su categoría de infección.

5. Clasificación estándar de
hatos con infecciones por virus PRRS
• Categoria 1. Positivo Inestable. Pie de cría con
eliminación viral y respuesta a anticuerpos.
Línea de producción con eliminación y
anticuerpos.
• Categoria 2. Positivo Estable. Pie de cría con
anticuerpos sin signologia clínica. Sin viremia
en lechones y cerdos de engorda sin signos,
viremia ó anticuerpos por 90 días.

6. Clasificación.
• Categoría 3. Negativo provisional. Pie de cría
sin excreción pero con anticuerpos.
Introducción de reemplazos negativos y
permanencia por lo menos de 60 días en ese
estado.
• Categoria 4. Negativo. Pie de cría negativo a
excreción y anticuerpos. Línea de producción
negativa a anticuerpos
Holtkamp D. 2010

7. Para determinar que elemento de la infección será
identificado por las pruebas diagnósticas es necesario
conocer su dinámica.

8. Pruebas serológicas para la detección
del virus de PRRS
• Prueba de ELISA. HerdCheck IDDEX. Punto de corte sp:
≥0.4, Sensibilidad 100%, Especificidad 99.5%, detecta
anticuerpos contra cepas Europeas y Americanas.
• IFA. Inmunofluorescencia; alta especificidad pero la
sensibilidad puede variar de acuerdo a la técnica de
laboratorio utilizada.
• Prueba de Seroneutralización. Menos sensible que las
anteriores y hay que tener precaución en su
interpretación ya que no existe una completa
correlación entre títulos seroneutralizantes, inmunidad
y protección.

9. Conclusiones
• La interpretación de pruebas diagnósticas para la
infección con virus de PRRS.
• 1.- Determina la categoría infecciosa de la granja.
• 2.- Determina el grado de riesgo en la
introducción de reemplazos.
• 3.- Diagnostica infecciones que pueden estar
asociadas con otros agentes.
• 4.- Determina la introducción de nuevas cepas
aparte de la vacunal.

10. Utilización de la serología
• Determinación del estatus de infección de los
reemplazos.
• Determinar la dinámica de infección en la línea
de producción.
• En los sementales.

11. Serología a PRRS en cerdas de reemplazo desde su
selección hasta su entrada al hato reproductivo.
Respuesta PRRS
Respuesta a vacunación
1.4
Probable exposición
a virus de campo.
1.2
Ingreso negativo
sp
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
7dias
42dias
70dias
105dias
Edad en días
154dias
203dias

12. Interpretación reemplazos
• Determinar el estatus de la fuente, ya sea
interna (auto-reemplazo) ó externa.
• Respuesta a vacunaciónes o aplicación de
inóculos homólogos.
• Enfriamiento; determina si las hembras
ingresan negativas o aún con un proceso de
infección.

13. La serología en la línea de producción
permite conocer los puntos de infección.
Serología a PRRS
1.8
1.6
1.4
Infección en las
áreas de crecimiento
y engorda.
Inmunidad pasiva
1.2
1
0.8
PRRS
0.6
0.4
0.2
Destetes negativos
20SEM
20SEM
20SEM
20SEM
20SEM
15SEM
15SEM
15SEM
15SEM
15SEM
10SEM
10SEM
10SEM
10SEM
10SEM
7SEM
7SEM
7SEM
7SEM
7SEM
3SEM
3SEM
3SEM
3SEM
3SEM
0

14. Los sementales siempre deben ser
NEGATIVOS, el virus se excreta por
semen y puede ser la causa de
diseminación.

15. Limitaciones de las pruebas
serológicas
• 1.- Una muestra no es suficiente elemento
para dar un diagnóstico.
• 2.- No diferencia vacunación de infección.
• 3.- LA variación antigénica del virus de campo
puede afectar el resultado, en especial para
las pruebas de IFA y seroneutralización.
• 4.- No predicen la excreción o grado de
portador en el hato.

16. Pruebas de PCR.
•
•
•
•
Son utilizadas para:
a) Confirmar el diagnóstico.
b) Determinar puntos y grados de viremia
c) Correlacionar con signos sugerentes de
infección

17. Permite conocer la frecuencia de
infección en cada caseta.
rtPCR-PRRS cuantitativo por caseta
1E+09
10000000
10000000
1000000
100000
10000
1000
100
10
1
Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta Caseta
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16

18. Se puede utilizar en diversos tejidos
Fetos
Ganglios y pulmón
Suero

19. Limitaciones
• Los falsos negativos, básicamente por las
variaciones genéticas en los segmentos
amplificados.
• Usualmente se utilizan los ORF´s (Open
Reading Frames) 6 y 7 en donde el genoma
está más conservado. Algunos laboratorios
también utilizan el ORF5

20. Interpretando las pruebas de PCR
• 1.- Puede haber diferencias entre diferentes
laboratorios por cuestiones de técnica y
reactivos.
• 2.- Las pruebas positivas no necesariamente
representan virus con capacidad infectante.
• 3.- Se utiliza en combinación con serología
para determinar la categoría de cada hato.

21. Prueba de RFLP
( Restriccion Fragment lenght of Polymorphism)
• Técnica que digiere el ORF 5 en diversos
fragmentos mediante el uso de tres enzimas
de restricción denominadas; MluI, HincII y
SacII generando un código de tres dígitos.

22. El código para la cepa vacunal* por
está técnica es el 2-5-2
2
* Ingelvac . PRRS Boheringer-Ingelheim
5
2

23. Uso de la técnica RFLP
• Diferencia la cepa vacunal de otra de campo y
registra la introducción de nuevas cepas en un
hato.
• Existe otra vacuna ( Ingelvac PRRS ATP) con un
patrón diferente, 1-4-2

24. Interpretación de las pruebas de RFLP
• Utilizada como un producto del PCR para
monitorear nuevas introducciones virales.
• Diferencias cepas en hatos vacunados.
• No determina virulencia de las cepas.
• No correlaciona con protección ó eficacia de la
vacuna.
• El ORF5 solo representa el 4% del genoma
completo por lo cual su corte no es
concluyente de variaciones genéticas.

25. Secuenciación

26. Usos de la secuenciación
• No es un método diagnóstico
• Se utiliza para monitorear cepas en una hato o
en una región.
• Método para diferenciar cepas vacunales de
virus de campo en granjas con alta presión
infecciosa.
• No es predictor de virulencia o eficacia
vacunal.

27. Conclusiones
• El diagnóstico de PRRS se enfoca a detectar el cambio
de status de una granja de estable o negativa hacia
inestable.
• La detección de anticuerpos nos indica por donde se
dio el ingreso del virus ( reemplazos, sementales, línea
de producción)
• La detección de antígeno confirma el diagnóstico.
• La prueba de RFLP descarta la presencia de un virus
vacunal.
• La s pruebas de secuenciación y el uso de
dendrogramas son herramientas utilizadas en la
epidemiología de la enfermedad en una región.