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Curso: Histotecnología
Docente : Oblitas Guerrero Angelica
Aula : LC4N2
Ciclo: IV- 2022
Alumna: Flor Nolasco Pantoja
TECNOLOGÍA MEDICA EN
LABORATORIO CLÍNICO Y
ANATOMÍA PATOLÓGICA
COLORACIÓN PAS
DIASTASA
 La tinción de ácido peryódico de Schiff-diastasa ( PAS-D ,
PAS diastasa ) es una tinción de ácido periódico de Schiff
(PAS) que se usa en combinación con la diastasa , una
enzima que descompone el glucógeno . PAS-D es una
tinción utilizada a menudo por los patólogos como un estudio
auxiliar para hacer un diagnóstico histológico en muestras de
tejido incluidas en parafina . La tinción PAS típicamente da
un color magenta.color en presencia de glucógeno. Cuando
PAS y diastasa se usan juntos, un color rosa claro reemplaza
al magenta profundo. Las diferencias en las intensidades de
las dos tinciones (PAS y PAS-D) se pueden atribuir a
diferentes concentraciones de glucógeno y se pueden usar
para semicuantificar el glucógeno en las muestras. En la
práctica, el tejido se desparafina, la diastasa se incuba y
luego se aplica la tinción PAS
DESARROLLO LA TÉCNICA ROJO
SIRIO PARA AMILOIDE
PROCEDIMIENTO :
1. Desparafinizar e hidratar las laminas hasta llegar al
agua destilada.
2. Lavar con agua corriente por 5 minutos.
3. Colocar en solución de formalina neutra estabilizada
debiendo permanecer durante la noche.
4. Lavar con agua corriente por 15 minutos.
5. Colocar en la solución de Rojo Sirio precalentado a
60°C,en un horno a 60°C por 90 minutos.
6. Enjuagar rápidamente con solución estabilizadora de
borato , 2 cambios.
7. Lavar con agua corriente durante 5 minutos.
8. Lavar corriente durante 15 minuto.
DESARROLLO DE LA TÉCNICA DEL
CRISTAL VIOLETA DE LIEB PARA
AMILOIDE
 El método Cristal Violeta de Lieb o Metil Violeta, es una
coloración metacromàtica con colorante básico, también
considerada con fuerte afinidad para demostrar
depósitos de amiloide, en la cual también sus
procedimientos consisten en realizar, procesos previos
tras la coloración; desparafinar la lámina .
PROCEDIMIENTO:
1. Desparafinizar e hidratar hasta llegar al agua destila.
2. Teñir con la solución diaria de cristal violeta dirante 5
horas.
3. Lavar con agua corriente durante 15 minutos.
4. Montar con un medio acuoso tal como el medio de
Apathy o bien secar las secciones a temperatura
ambiente durante 5 minutos o mas, sumergir la lamina
en xileno y montar con un medio resinoso.
5. Examinar sin demorar pues la tinción tiende a descolorar.
FUNDAMENTOS DE LA
COLORACIÓN PAS
El fundamento de la reacción consiste en
oxidar los tejidos mediante el ácido
peryódico para incrementar el número de
grupos carbonilos (aldehídos o cetonas)
presentes en ellos.
Posteriormente, se trata la muestra con el
reactivo de Schiff que reacciona con dos
grupos aldehídicos contiguos dando lugar a
una coloración rojo-púrpura característica.
El Kit de PAS se compone de todos los
reactivos que intervienen en esta tinción.
¡ MUCHAS GRACIAS !
INTEGRIDAD – INNOVACION - SERVICIO

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  • 2. COLORACIÓN PAS DIASTASA  La tinción de ácido peryódico de Schiff-diastasa ( PAS-D , PAS diastasa ) es una tinción de ácido periódico de Schiff (PAS) que se usa en combinación con la diastasa , una enzima que descompone el glucógeno . PAS-D es una tinción utilizada a menudo por los patólogos como un estudio auxiliar para hacer un diagnóstico histológico en muestras de tejido incluidas en parafina . La tinción PAS típicamente da un color magenta.color en presencia de glucógeno. Cuando PAS y diastasa se usan juntos, un color rosa claro reemplaza al magenta profundo. Las diferencias en las intensidades de las dos tinciones (PAS y PAS-D) se pueden atribuir a diferentes concentraciones de glucógeno y se pueden usar para semicuantificar el glucógeno en las muestras. En la práctica, el tejido se desparafina, la diastasa se incuba y luego se aplica la tinción PAS
  • 3. DESARROLLO LA TÉCNICA ROJO SIRIO PARA AMILOIDE PROCEDIMIENTO : 1. Desparafinizar e hidratar las laminas hasta llegar al agua destilada. 2. Lavar con agua corriente por 5 minutos. 3. Colocar en solución de formalina neutra estabilizada debiendo permanecer durante la noche. 4. Lavar con agua corriente por 15 minutos. 5. Colocar en la solución de Rojo Sirio precalentado a 60°C,en un horno a 60°C por 90 minutos. 6. Enjuagar rápidamente con solución estabilizadora de borato , 2 cambios. 7. Lavar con agua corriente durante 5 minutos. 8. Lavar corriente durante 15 minuto.
  • 4. DESARROLLO DE LA TÉCNICA DEL CRISTAL VIOLETA DE LIEB PARA AMILOIDE  El método Cristal Violeta de Lieb o Metil Violeta, es una coloración metacromàtica con colorante básico, también considerada con fuerte afinidad para demostrar depósitos de amiloide, en la cual también sus procedimientos consisten en realizar, procesos previos tras la coloración; desparafinar la lámina . PROCEDIMIENTO: 1. Desparafinizar e hidratar hasta llegar al agua destila. 2. Teñir con la solución diaria de cristal violeta dirante 5 horas. 3. Lavar con agua corriente durante 15 minutos. 4. Montar con un medio acuoso tal como el medio de Apathy o bien secar las secciones a temperatura ambiente durante 5 minutos o mas, sumergir la lamina en xileno y montar con un medio resinoso. 5. Examinar sin demorar pues la tinción tiende a descolorar.
  • 5. FUNDAMENTOS DE LA COLORACIÓN PAS El fundamento de la reacción consiste en oxidar los tejidos mediante el ácido peryódico para incrementar el número de grupos carbonilos (aldehídos o cetonas) presentes en ellos. Posteriormente, se trata la muestra con el reactivo de Schiff que reacciona con dos grupos aldehídicos contiguos dando lugar a una coloración rojo-púrpura característica. El Kit de PAS se compone de todos los reactivos que intervienen en esta tinción.
  • 6. ¡ MUCHAS GRACIAS ! INTEGRIDAD – INNOVACION - SERVICIO