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PRUEBAS
BIOQUIMICAS
TSI
TSI: Triple Azúcar Hierro
Glucosa 1%
Lactosa 10%
Sacarosa 10%
Pico de Flauta:
Fermentación aerobia y anaerobia
1. Anaerobia:
Glucosa Acido Piruvico
1. Aerobia:
Acido Piruvico CO2 + H2O + Energía
Capa Profunda:
Anaerobiosis:
Glucosa Acido Piruvico + ATP
Ácidos orgánicos, Aldehídos, Alcoholes,
CO2, H2, Energía
Embden Meyerhof
Ciclo de Krebs
Embden Meyerhof
TSI
REACCIONES
1. Fermentación de los tres Azucares
2. Fermentación de glucosa
3. No fermentación de azucares.
4. Producción de H2S
5. Producción de gas: aerogenicas/
anaerogenicas.
Lecturas:
A/A, GAS (+), H2S(-)
K/A, Gas (-), H2S(-)
K/A, Gas (-), H2S(+)
K/K
LIA
 LISINA HIERRO AGAR
Descarboxilación de la Lisina
Desaminación de la lisina
Descarboxilación:
Glucosa: fermentación → amarillo (fondo)
Lisina: descarboxilada → aminas (amarilo → violeta, pH basico)
Desaminación:
Lisina: desaminada → acido carboxilico + NH3 (superficie: rojo)
Producción de H2S
CITRATO
 Citrato: fuente de carbono
 Alcalinización del medio
 Indicador: Azul de Bromotimol → Azul.
UREASA
 UREA + H2O E:ureasa
CO2+ H2O+ 2 NH3
 NH3: Forma Carbonato de Amonio → pH
básico: Viraje a Rosado.
SIM
 Sulfuro Indol Movilidad
 Indol: producto de la degradación del Triptofano.
Triptofano Indol+Acido piruvico+ NH3
Indol+ p aminobenzaldehido Anillo rojo
E: Triptofanasa
MR- VP
 Rojo de Metilo
 Voges Proskauer
1. Rojo de Metilo:
Producción de Acido a partir de la fermentación de la glucosa
Producción de Acido: estable → Medio rojo (Rojo de Metilo)
Si no hay Producción de Acido: RM (-)
2. Voges Proskauer:
Productos de la fermentación de la glucosa → Acetoína → Diacetilo + Naftol
→ color rojo fucsia
CATALASA
 Bacterias aerobias obligadas y anaerobias
facultativas: catalasa positivas.
 Contienen flavoproteínas que reducen el O2
produciéndose H2O2 o O2
-
(compuestos tóxicos).
 Compuestos tóxicos: matan a las bacterias.
 Enzimas: superoxido bismutasa y catalasa, destruyen
compuestos tóxicos.
COAGULASA
 Enzima que coagula el plasma.
 Indicador del potencial patógeno del
Staphylococcus aureus.
Estafilocoagulasa + protrombina → estafilotrombina
Fibrinógeno Fibrina (coagulo)
OXIDASA
 Habilidad de producción de citocromo
oxidasa.
 Bacterias que utilizan O2 como aceptor de
electrones: oxidasa positiva.
 La presencia de oxidasa es determinada por el
reactivo tetrametil fenilendiamina
dihidrocloruro. Producción de color purpura
oscuro.
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Pruebas bioquimicas

  • 2. TSI TSI: Triple Azúcar Hierro Glucosa 1% Lactosa 10% Sacarosa 10%
  • 3. Pico de Flauta: Fermentación aerobia y anaerobia 1. Anaerobia: Glucosa Acido Piruvico 1. Aerobia: Acido Piruvico CO2 + H2O + Energía Capa Profunda: Anaerobiosis: Glucosa Acido Piruvico + ATP Ácidos orgánicos, Aldehídos, Alcoholes, CO2, H2, Energía Embden Meyerhof Ciclo de Krebs Embden Meyerhof TSI
  • 4. REACCIONES 1. Fermentación de los tres Azucares 2. Fermentación de glucosa 3. No fermentación de azucares. 4. Producción de H2S 5. Producción de gas: aerogenicas/ anaerogenicas.
  • 5. Lecturas: A/A, GAS (+), H2S(-) K/A, Gas (-), H2S(-) K/A, Gas (-), H2S(+) K/K
  • 6. LIA  LISINA HIERRO AGAR Descarboxilación de la Lisina Desaminación de la lisina Descarboxilación: Glucosa: fermentación → amarillo (fondo) Lisina: descarboxilada → aminas (amarilo → violeta, pH basico) Desaminación: Lisina: desaminada → acido carboxilico + NH3 (superficie: rojo) Producción de H2S
  • 7.
  • 8. CITRATO  Citrato: fuente de carbono  Alcalinización del medio  Indicador: Azul de Bromotimol → Azul.
  • 9.
  • 10.
  • 11. UREASA  UREA + H2O E:ureasa CO2+ H2O+ 2 NH3  NH3: Forma Carbonato de Amonio → pH básico: Viraje a Rosado.
  • 12.
  • 13. SIM  Sulfuro Indol Movilidad  Indol: producto de la degradación del Triptofano. Triptofano Indol+Acido piruvico+ NH3 Indol+ p aminobenzaldehido Anillo rojo E: Triptofanasa
  • 14.
  • 15.
  • 16. MR- VP  Rojo de Metilo  Voges Proskauer 1. Rojo de Metilo: Producción de Acido a partir de la fermentación de la glucosa Producción de Acido: estable → Medio rojo (Rojo de Metilo) Si no hay Producción de Acido: RM (-) 2. Voges Proskauer: Productos de la fermentación de la glucosa → Acetoína → Diacetilo + Naftol → color rojo fucsia
  • 17.
  • 18.
  • 19.
  • 20. CATALASA  Bacterias aerobias obligadas y anaerobias facultativas: catalasa positivas.  Contienen flavoproteínas que reducen el O2 produciéndose H2O2 o O2 - (compuestos tóxicos).  Compuestos tóxicos: matan a las bacterias.  Enzimas: superoxido bismutasa y catalasa, destruyen compuestos tóxicos.
  • 21.
  • 22.
  • 23. COAGULASA  Enzima que coagula el plasma.  Indicador del potencial patógeno del Staphylococcus aureus. Estafilocoagulasa + protrombina → estafilotrombina Fibrinógeno Fibrina (coagulo)
  • 24.
  • 25. OXIDASA  Habilidad de producción de citocromo oxidasa.  Bacterias que utilizan O2 como aceptor de electrones: oxidasa positiva.  La presencia de oxidasa es determinada por el reactivo tetrametil fenilendiamina dihidrocloruro. Producción de color purpura oscuro.