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南京农业大学学报 2002 , 25 (1) : 31～34
Journal of Nanjing Agricultural University
赤眼蜂寄生后亚洲玉米螟卵内保幼激素酯酶活力
与蜕皮激素滴度的变化
戴华国1 , 姜金林1 , 李元喜1 , 符文俊2
(11 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室 , 江苏 南京 210095 ;
21 中国科学院上海植物生理生态研究所 , 上海 200025)
摘要 : 采用放射化学法 ( RC) 与放射免疫法 ( RIA) 分别测定了被玉米螟赤眼蜂 ( Trichogramma ostriniae) 寄生的亚洲玉米
螟 ( Ostrinia f urnacalis) 卵内保幼激素酯酶活力与蜕皮激素滴度的变化 。结果发现 , 被寄生的卵内 , 保幼激素酯酶活力和
蜕皮激素滴度的变化在很大程度上反映了玉米螟赤眼蜂从卵到蛹的个体发育过程中体内激素的动态变化 , 与玉米螟卵内
激素变化显著不同 。说明早期被寄生的玉米螟卵内进行的是玉米螟赤眼蜂的个体发育 , 而亚洲玉米螟的胚胎发育受到了
抑制 。
关键词 : 玉米螟赤眼蜂 ; 亚洲玉米螟 ; 寄生 ; 保幼激素酯酶 ; 蜕皮激素
中图分类号 : S476 + 13 文献标识码 : A 文章编号 : 1000Ο2030 (2002) 01Ο Ο
0031 04
Changes of J HE activity and M H titer in Ostrinia f urnacalis
eggs parasitized by Trichogramma ostriniae
DAI Hua2guo1 , J IANGJin2lin1 , LI Yuan2xi1 , FU Wen2jun2
( 11 Key Laboratory of Monitoring and Management of Plant Disease and Insects , Ministry of
Agriculture , Nanjing Agric Univ , Nanjing 210095 , China ; 21Shanghai Institute of Plant
Physiology and Ecology , Chinese Academy of Sciences , Shanghai 200025 , China)
Abstract : The juvenile hormone esterase activity and molting hormone titer in Ostrinia f urnacalis eggs parasitized by Trichogramma
2
ostriniae were measured by RC and RIA method , respectively. The change patterns of juvenile hormone esterase activity and molting hor
mone titer of the parasitized eggs reflected the change of the developing process of Trichogramma ostriniae from egg to pupa. They were
significantly different from the change pattern of hormone titer in O. f urnacalis egg. They were significantly different from the change pat2
tern of hormone titer in O. f urnacalis egg. It was indicated that the ontogeny of Trichogramma ostriniae was actually going on at Ostrinia
f urnacalis egg parasitized in early stage , and embryonic development of Ostrinia f urnacalis was suppressed.
Key words : Trichogramma ostriniae ; Ostrinia f urnacalis ; parasitization ; juvenile hormone esterase ; molting hormone
寄生蜂与寄主关系的研究已有悠久的历史 。近年来 , 为了探讨寄生蜂寄生后对寄主的调控作用及寄
生蜂自身的生长发育特性 , 一些研究者对寄生蜂寄生后 , 寄主体内保幼激素 ( juvenile hormone , J H) 滴
度 、保幼激素酯酶 ( juvenile hormone esterase , J HE) 活力及蜕皮激素 ( molting hormone , MH) 滴度的变化
着手进行研究 , 并已获得一定研究成果 [1～3 ] 。但研究对象多为幼虫与卵 —幼虫 —蛹跨期寄生蜂 , 迄今为
止尚未见到赤眼蜂这类卵寄生蜂的研究报道 。本研究对玉米螟赤眼蜂 ( Trichogramma ostriniae Pang et
Chen) 寄生与未寄生的亚洲玉米螟 ( Ostrinia f urnacalis Guenee) 卵内保幼激素酯酶活力 ( 以此反映保幼
激素滴度) 和蜕皮激素滴度的变化进行了测定 , 以期通过测定结果说明赤眼蜂寄生后对寄主卵发育的调
控作用 。
收稿日期 : 2001Ο Ο
09 01
基金项目 : 国家自然科学基金重点项目资助 (39930030)
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作者简介 : 戴华国 (1944) , 教授 , 从事昆虫生理与化学生态研究 。E2mail : daihg @njau. edu. cn

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・32 ・ 25 卷
南 京 农 业 大 学 学 报 第
1 材料与方法
111 材料
玉米螟赤眼蜂 ( T. ostriniae) 引自华南农业大学 , 用米蛾 ( Corcyra cephalonia Stainton) 卵繁殖 , 置于
15L∶ 、 ( 25 ± ) ℃、RH 为 80 %左右的光照培养箱中饲养 。试验中所用的赤眼蜂为一日龄雌蜂 。亚洲
9D 1
玉米螟 ( O. f urnacalis ) 引自中国农业科学院植物保护研究所 , 参照周大荣等 [4 ] 的方法 , 在室内用人工饲
料饲养 。试验中所用的卵块为产后当日的卵块 。
112 试验方法
11211 取样方法 取当日的卵块大量接蜂 。3 h 后去除赤眼蜂 , 被寄生的卵块分别在 0 , 12 , 24 , 36 ,
48 , 60 , 72 , 84 , 96 , 108 , 120 , 144 , 168 h 取样 ; 所设对照 ( 未寄生卵 ) 同时取样 。因 96 h 后亚洲玉
米螟卵已孵化 , 故仅在 0 至 96 h 取样 。所取样品卵与对照卵立即置于液氮罐中保存 。
11212 保幼激素酯酶活力测定 HE 活力测定采用放射化学法 ( RC) [5 ] 。按每 mL 缓冲液 60 mg 卵块的
J
比例 , 用 011 mol ・ - 1的磷酸缓冲液 (pH 710) 进行卵块的冰浴匀浆 , 超声波破碎 5 min 后静置过夜 , 离
L
心制备待测液 。将待测液加入稀释后的3 HΟ H Ⅰ J 标样溶液中 。经 ( 29 ± ) ℃
1 温浴 30 min 后用碱性甲醇溶
液中止反应 。涡旋振荡后加入异辛烷振荡萃取 10 min , 4 000 r・ - 1 离心 15 min 。取上清液和下层液各
min
50 μ 置于闪烁瓶中 , 加入 5 mL 亲水型闪烁液 , 用 Beckman LSΟ
L 9800 型液体闪烁计数器以 H 数法校准测
定放射性活度 (Bq) 。所用试剂 : HΟ H Ⅰ ( C) 由美国杜邦原子能研究所合成 ( 中国科学院动物研究所
3
J 10
提供) , 放射性比活度为 44410 G ・
Bq mmol - 1 , 用异辛烷稀释后使用 。异辛烷为国产分析纯试剂 ; 磷酸缓
冲液 , 碱性甲醇 , 亲水型闪烁液 ( PPO 5 g , POPOP 015 g , 二甲苯 665 mL , Triton XΟ100 335 mL ) 中除
Triton XΟ 为 Amresco 进口分装外 , 其余均由国产分析纯试剂配制 。测定重复 3 次 。
100
11213 蜕皮激素滴度测定 滴度测定采用放射免疫法 ( RIA) [6 ] 。将 20 mg 卵块放入 115 mL 70 %
MH
( 体积分数) 的甲醇溶液中匀浆 , 匀浆液 4 000 r ・ - 1 离心 10 min 。吸取上清液后 , 沉淀物用一定量的
min
70 %甲醇溶液再抽提一次 。合并两次抽提液 , 70 ℃水浴 , N2 流下蒸干 。加一定量 GPBS 溶解蒸干物 , 供
RIA 用 。RIA 的测定与计算参照曹梅讯 [6 ] 的方法 。用北京核仪器厂生产的 FTΟ 自动计算125 I 放免测量
613
仪测定放射性强度 。所用试剂 : RIA 测定用 20Ο羟基蜕皮酮免疫盒由中国科学院上海昆虫研究所 ( 现植
物生理生态研究所) 提供 ; GPBS 等均由国产分析纯试剂配制 。测定重复 2 次 。
2 结果与分析
211 寄生卵内保幼激素酯酶活力的变化
从图 1 可以看出 , 寄生卵与未寄生卵内 J HE 活力 ( 以 J H 降解率表示) 呈现不同的变化 。寄生卵初
期 J HE 活力即出现高峰 , 其活力为对照的 3 倍左右 。以后逐渐下降 , 至 36～48 h 活力至最 低 点 , 随 后
图1 未被寄生和被玉米螟赤眼蜂寄生的亚洲玉米螟卵内保幼激素酯酶活性的变化
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Fig. 1 Changes of J HE activity of unparasitized eggs and T. ostriniae parasitized eggs in O . f urnacalis

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第 1 期 戴华国等 : 赤眼蜂寄生后亚洲玉米螟卵内保幼激素酯酶活力与蜕皮激素滴度的变化 ・33 ・
60 h 又出现 1 个高峰 , 72 h 为 1 个低谷 , 84 h 后寄生卵内 J HE 的活力变化较缓 , 至 120 h 再次出现高峰 ,
后又缓慢下降 , 直至玉米螟赤眼蜂羽化 。3 个 J HE 活力高峰中 , 以寄生初期为最高 。因保幼激素酯酶活
力变化与保幼激素滴度变化呈现较明显的负相关关系 [5 ] , 由此可以推断寄生卵内 J H 滴度的变化为 : 36
～48 h 左右 J H 滴度出现 1 个高峰 ; 72 h 后又出现 1 个高峰 ; 以后逐渐下降 , 至 120 h 后略有回升 , 保持
较低的 J H 滴度至赤眼蜂羽化 。
212 寄生卵内蜕皮激素滴度的变化
图 2 的结果显示 , 寄生卵与未寄生卵内 MH 的滴度也呈现不同的变化 , 初期 , 两者 MH 滴度接近 ,
6 h 后寄生卵内 MH 滴度出现低谷 , 以后渐渐上升 , 至 18 h 出现 1 个高峰 ; 此后缓慢下降 , 至 36 h 出现
低谷 ; 60 h 后又迅速攀升 , 至 72 h 达一更高峰 ; 72 h 后 MH 滴度不断下降 , 至 96 h 再次降至低谷 。96 h
至 120 h 是 MH 滴度逐渐上升的过程 。120 h 时又出现 1 个 MH 小峰 ,以后缓慢下降至玉米螟赤眼蜂羽化 。
图2 未被寄生和被玉米螟赤眼蜂寄生的玉米螟卵内蜕皮激素含量变化
Fig. 2 Changes of molting hormone titer in unparasitized eggs and T. ostriniate parasitized eggs in O . f urnacalis
3
讨 论
利翠英曾以蓖麻蚕卵为寄主 , 对赤眼蜂的个体发育过程进行了研究 。结果指出 , 在 26 ～ 28 ℃ , 下
赤眼蜂的全发育期约为 6～8 d , 其中胚胎发育约为 1 d 左右 , 幼虫期 1～115 d , 前蛹期 2～3 d , 蛹期 2～
3 d 。这 4 个时期之间 , 没有明显的分界 , 从卵裂开始连续发育到成虫 。研究中还发现 , 如果在胚胎发
育早期 ( 即胚胎反转期之前 ) 被寄生 , 则正在发育的蓖麻蚕胚胎停止发育 , 而赤眼蜂卵得到正常发
育 [7 ] 。本文结果证实了这一结论 。本试验中玉米螟赤眼蜂为早期寄生 , 寄生初期的 J HE 高活力可能是
寄主胚胎发育受抑制的重要原因 。鉴于各种赤眼蜂的个体发育过程基本相似 [8 ] , 故寄生卵中 J HE 活力
及 MH 滴度的变化过程体现了赤眼蜂个体发育 4 个时期中体内 J H 与 MH 滴度的变化 , 即 : 18 h 的 MH 高
峰与赤眼蜂完成胚胎发育孵化进入幼虫期有关 ; 36 h 的 MH 低谷与同时的 J H 滴度高峰充分体现了赤眼
蜂幼虫发育中期 J H 与 MH 变化的特点 , 此时 J H 滴度处于最高值 ; 72 h MH 的峰值与赤眼蜂幼虫期向预
蛹期转化有一定关系 ; 72 h 的 J H 滴度峰则可能与抑制赤眼蜂成虫性状过早出现 , 促使向蛹的状态转化
有关 ; 84 h 至赤眼蜂羽化 , J HE 活力一直保持较高水平 , 故此时保持低量的 J H 滴度 ; 84 h 后 MH 滴度
也随之下降 , 这与蛹期体内 J H 与 MH 的特点相吻合 ; 120 h 后 J H 与 MH 的峰可能与赤眼蜂蛹期的组织
分化及羽化有关 。值得注意的是 , 未寄生卵在 96 h 后已大部分孵化 , 而寄生卵则延迟至 8 d 左右 , 玉米
螟赤眼蜂才陆续羽化出来 , 这充分显示赤眼蜂寄生后对寄生卵的发育进行了调控 , 以使自身完成从卵到
成虫的个体发育过程 。寄生蜂的寄生通常分为 “抑性寄生”与 “容性寄生”两类 [1 ] , 上述结果表明 , 玉
米螟赤眼蜂对亚洲玉米螟卵的早期寄生属 “抑性寄生” 。
Bernhard 与 Strand 等 [1 ,3 ] zycnzj.com/http://www.zycnzj.com/
的研究结果表明 , J H Ⅰ、 H Ⅱ、 H Ⅲ
J J 在寄主卵胚胎发育各阶段与各龄期分

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・34 ・ 25 卷
南 京 农 业 大 学 学 报 第
别或同时出现 , 与 MH 一起调节寄主与寄生蜂的发育 。因试剂的限制 , 本研究仅进行了 J HE 对 J H Ⅰ的
降解试验 , 虽然试验结果在一定程度上能反映寄主卵中赤眼蜂的发育状况 , 但为了获得更全面的研究结
果 , 尚须进行 J H Ⅱ J H Ⅲ
和 的测定 。
利翠英的研究指出 , 如果蓖麻蚕在胚胎反转期前被寄生 , 则蓖麻蚕胚胎终止发育 , 主要进行赤眼蜂
的发育 , 而如果在胚胎反转期后被寄生 , 则蓖麻蚕可完成胚胎发育 , 赤眼蜂幼虫死于蓖麻蚕卵中 [7 ] 。本
研究主要着眼于早期寄生 ( 即胚胎反转期前) 的亚洲玉米螟卵 。为了更完整地反映玉米螟赤眼蜂寄生亚
洲玉米螟卵后对寄主发育的调控作用 , 需对被赤眼蜂寄生的不同发育期的亚洲玉米螟卵内激素的变化进
行有关测定 , 并结合解剖进行观察研究 。此外 , 尚需对亚洲玉米螟卵的胚胎发育与玉米螟赤眼蜂的个体
发育史做进一步研究 。
根据 Bernhard 等的研究 , 进行被寄生蜂寄生后寄主体内 J HE 活性与 MH 滴度的测定 , 样本的寄生率
宜在 80 %以上 [1 ] 。本研究通过大量接蜂确保玉米螟赤眼蜂对寄主卵的寄生率达到 85 %以上 , 比较符合
上述测定标准 。
参考文献 :
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moult and their modification by the egg2larval parasitoid Chelonus inanitus (Braconidae) [J ] . J Insect Physiol , 1999 , 45 : 401Ο413.
[2] Balgopal M M , Dover B A , Goodman W G, et al . Parasitism by Microplitis demolitor induces alterations in the juvenile hormone esterase activity of
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[3 ] Strand M R , Dover B A , Johnson J A. Alterations in the ecdysteroid and juvenile hormone esterase profiles of Trichoplusia ni parasitized by the
polyembryonic wasp Copidosoma f loridanum [J ] . Archives of Insect Biochem and Physiol , 1990 , 13 : 41Ο51.
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122.
[5] 戴华国 , 程薇 , 吴晓毅 , 等 1 稻褐飞虱保幼激素酯酶活力的测定 [J ] . 南京农业大学学报 , 1997 , 20 (4) : 108Ο110.
[6] 曹梅讯 120Ο羟基蜕皮酮放射免疫分析法 [J ] . 昆虫知识 , 1986 , 23 (2) : 87Ο90.
[7] 利翠英 1 赤眼蜂 Trichogramma evanescens Westw. 的个体发育及其对于寄主蓖麻蚕 ( Attacus cynthia ricini Boisd) 胚胎发育的影响 [ A] .
见 : 邱式邦主编 1 中国赤眼蜂研究论文集 [ C] . 北京 : 农业出版社 , 1985. 51Ο63.
[8] 福建农学院主编 1 害虫生物防治 [M] . 北京 : 农业出版社 , 1982. 174Ο176.
责任编辑 : 夏爱红
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