O documento discute os conceitos e técnicas de criopreservação do sêmen animal, incluindo resfriamento e congelação. A criopreservação visa suspender o metabolismo espermático e manter as características do sêmen por longos períodos. A congelação é o método mais recomendado, envolvendo diluição, resfriamento controlado e armazenamento em nitrogênio líquido. Crioprotetores como glicerol ajudam a minimizar danos causados pelo choque térmico durante o processo.

1. UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ
FACULDADE DE VETERINÁRIA
BIOTECNOLOGIADAREPRODUÇÃOANIMAL
Criopreservação
do sêmen
Vicente José de F. Freitas
Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução
www.uece.br/lfcr

2. Plano de Aula
• Apresentar os conceitos e importância da realização da
técnica.
• Apresentar os diferentes tipos de conservação do sêmen
com manipulação da temperatura.
• Apresentar considerações finais sobre o tema

3. Conceitos
• A criopreservação do sêmen busca a suspensão do
metabolismo espermático e a manutenção de suas
características por um período de tempo prolongado.
• O sucesso da criopreservação do sêmen depende da
m a n u t e n ç ã o d o p o t e n c i a l f e c u n d a n t e d o s
espermatozoides, os quais devem apresentar integridade
e funcionalidade das diferentes estruturas celulares.

4. Conceitos
A p ó s a c r i o p r e s e r v a ç ã o , o s
espermatozoides devem manter a
integridade...
a) do flagelo: garantir produção de ATP e
motilidade,
b) do núcleo: manter estável o
armazenamento de DNA.
c) do acrossomo: manter o poder
fecundante e
d) da superfície do segmento equatorial:
ocorrer a ligação com o oócito.

5. Tipos de criopreservação do sêmen
• Resfriamento:
• Temperaturas entre 4 a 15º C
• Tempo de conservação curto: cerca de 48 h.
• Congelação:
• Realizar curva de descida da temperatura.
• Temperatura de -35º C.
• Conservação em nitrogênio líquido: -196º C.
• Tempo de conservação: indefinido.

6. Resfriamento do sêmen
• Etapas:
• Colheita,
• Avaliação,
• Diluição/Extensão,
• Resfriamento,
• Conservação.
• Desvantagens:
• Curto período de manutenção da viabilidade do sêmen.
• Perda das principais características da criopreservação:
• Vencer tempo e espaço.

7. Congelação do sêmen
• Etapas:
• Colheita,
• Avaliação,
• 1ª Diluição/Extensão,
• Resfriamento,
• 2ª Diluição/Extensão (uso de crioprotetores eficientes).
• Congelação.
• Conservação.
• Observações:
• Uso de crioprotetores visando minimizar os danos causados pelo
choque frio, formação de cristais de gelo e desidratação celular.

8. Crioprotetores
• Classificação:
• Penetrantes e não penetrantes.
• De acordo com a capacidade em atravessar a membrana
plasmática.
• Penetrantes:
• Moléculas pequenas.
• Glicerol, etilenoglicol, propilenoglicol, propanodiol, dimetilsulfóxido
(DMSO).
• Não penetrantes:
• Proteínas (gema de ovo, leite desnatado).
• Açucares (frutose, glicose).
• Polímeros sintéticos (polivinilpirrolidona).

9. Diferenças entre espécies
• De acordo com a espécie utilizada serão encontradas
diferenças na composição dos diluidores/extensores e
tipo de crioprotetor.

10. Considerações
• O método de criopreservação escolhido dependerá do
uso do sêmen (manutenção curta ou longa).
• A congelação, devido suas vantagens é de longe o
método mais recomendado.
• Diferenças entre a fisiologia seminal das espécies podem
interferir no tipo de crioprotetor utilizado.