SlideShare ist ein Scribd-Unternehmen logo
1 von 7
Downloaden Sie, um offline zu lesen
N
a
n
a
j
i
D
e
s
h
mu
k
hV
e
t
e
r
i
n
a
r
y
S
c
i
e
n
c
e
U
n
i
v
e
r
s
i
t
y
,
J
a
b
a
l
p
u
r
(
M.
P
.
)
C
O
L
L
E
G
EO
FF
I
S
H
E
R
YS
C
I
E
N
C
E
J
A
B
A
L
P
U
R(
M.
P
.
)
S
u
b
j
e
c
t
-
Mi
c
r
o
b
i
a
l
a
n
dP
a
r
a
s
i
t
i
c
D
i
s
e
a
s
e
s
o
f
F
i
s
h
a
n
dS
h
e
l
l
f
i
s
h(
A
A
H
M)
T
o
p
i
c
-
E
L
I
S
A-
P
R
I
N
C
I
P
L
EA
N
DT
Y
P
E
S
(
A
c
a
d
e
mi
c
Y
e
a
r
2
0
1
9
-
2
0
2
0
)
 I
N
T
R
O
D
U
C
T
I
O
N
 E
L
I
S
A
,
s
h
o
r
t
f
o
r
e
n
z
y
me
-
l
i
n
k
e
di
mmu
n
o
s
o
r
b
e
n
t
a
s
s
a
y
,
 E
L
I
S
Ai
s
a
na
n
t
i
g
e
n
a
n
t
i
b
o
d
y
r
e
a
c
t
i
o
n
.
 I
n1
9
7
1
,
E
L
I
S
Aw
a
si
n
t
r
o
d
u
c
e
db
y
P
e
t
e
r
P
e
r
l
ma
n
na
n
dE
v
aE
n
g
v
a
l
l
a
t
S
t
o
c
k
h
o
l
m
U
n
i
v
e
r
s
i
t
y
i
nS
w
e
d
e
n
.
 I
ti
sac
o
mmo
nl
a
b
o
r
a
t
o
r
yt
e
c
h
n
i
q
u
ew
h
i
c
hi
su
s
u
a
l
l
yu
s
e
dt
ome
a
s
u
r
et
h
e
c
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
o
f
a
n
t
i
b
o
d
i
e
s
o
r
a
n
t
i
g
e
n
s
i
n
b
l
o
o
d
.
 E
L
I
S
A i
s a p
l
a
t
e b
a
s
e
d a
s
s
a
yt
e
c
h
n
i
q
u
e w
h
i
c
h i
s u
s
e
d f
o
rd
e
t
e
c
t
i
n
g a
n
d
q
u
a
n
t
i
f
y
i
n
gs
u
b
s
t
a
n
c
e
s
s
u
c
h
a
s
p
e
p
t
i
d
e
s
,
p
r
o
t
e
i
n
s
,
a
n
t
i
b
o
d
i
e
s
a
n
dh
o
r
mo
n
e
s
.
 A
si
t
sn
a
mei
mp
l
i
e
s
,
E
L
I
S
Ai
n
v
o
l
v
e
st
h
eu
s
eo
f
e
n
z
y
me
sa
n
dt
h
es
p
e
c
i
f
i
cb
i
n
d
i
n
g
o
f
a
n
t
i
b
o
d
y
a
n
da
n
t
i
g
e
n
.
 A
ne
n
z
y
mec
o
n
j
u
g
a
t
e
dw
i
t
ha
na
n
t
i
b
o
d
yr
e
a
c
t
sw
i
t
hc
o
l
o
r
l
e
s
ss
u
b
s
t
r
a
t
et
o
g
e
n
e
r
a
t
e
a
c
o
l
o
r
e
dp
r
o
d
u
c
t
.
S
u
c
hs
u
b
s
t
r
a
t
e
i
s
c
a
l
l
e
dc
h
r
o
mo
g
e
n
i
c
s
u
b
s
t
r
a
t
e
.
 An
u
mb
e
r
o
f
e
n
z
y
me
sh
a
v
eb
e
e
nu
s
e
df
o
r
E
L
I
S
As
u
c
ha
sa
l
k
a
l
i
n
ep
h
o
s
p
h
a
t
a
s
e
,
h
o
r
s
e
r
a
d
i
s
hp
e
r
o
x
i
d
a
s
e
a
n
db
e
t
a
g
a
l
a
c
t
o
s
i
d
a
s
e
.
 S
p
e
c
i
f
i
cs
u
b
s
t
r
a
t
es
u
c
ha
so
r
t
h
o
-
p
h
e
n
y
l
d
i
a
mi
n
ed
i
h
y
d
r
o
c
h
l
o
r
i
d
e(
f
o
r
p
e
r
o
x
i
d
a
s
e
)
,
p
a
r
a
n
i
t
r
o
p
h
e
n
y
lp
h
o
s
p
h
a
t
e (
f
o
ra
l
k
a
l
i
n
e p
h
o
s
p
h
a
t
a
s
e
)a
r
e u
s
e
d w
h
i
c
h a
r
e
h
y
d
r
o
l
y
s
e
db
y
a
b
o
v
e
e
n
z
y
me
s
t
og
i
v
e
c
o
l
o
r
e
de
n
dp
r
o
d
u
c
t
.
 I
t
i
s
a
v
e
r
y
ma
t
u
r
e
me
t
h
o
df
o
r
t
h
e
d
e
t
e
c
t
i
o
no
f
v
a
r
i
o
u
s
t
a
r
g
e
t
s
.
 A
d
v
a
n
t
a
g
eo
f
E
L
I
S
Ai
st
h
a
t
i
t
'
sq
u
i
c
ka
n
ds
i
mp
l
et
oc
a
r
r
yo
u
t
,
s
oi
t
i
so
f
t
e
nu
s
e
d
f
o
r
b
o
t
h
d
i
a
g
n
o
s
t
i
c
a
n
dr
e
s
e
a
r
c
hp
u
r
p
o
s
e
s
.
 P
R
I
N
C
I
P
L
E
 E
L
I
S
A
sa
r
et
y
p
i
c
a
l
l
yp
e
r
f
o
r
me
d i
n9
6
-
w
e
l
lp
o
l
y
s
t
y
r
e
n
ep
l
a
t
e
s
.T
h
es
e
r
u
m i
s
i
n
c
u
b
a
t
e
di
naw
e
l
l
,
a
n
de
a
c
hw
e
l
l
c
o
n
t
a
i
n
sad
i
f
f
e
r
e
n
t
s
e
r
u
m.
Ap
o
s
i
t
i
v
ec
o
n
t
r
o
l
s
e
r
u
m a
n
dan
e
g
a
t
i
v
ec
o
n
t
r
o
l
s
e
r
u
m w
o
u
l
db
ei
n
c
l
u
d
e
da
mo
n
gt
h
e9
6s
a
mp
l
e
s
b
e
i
n
g t
e
s
t
e
d
.A
n
t
i
b
o
d
i
e
s o
ra
n
t
i
g
e
n
s p
r
e
s
e
n
ti
n s
e
r
u
m a
r
e c
a
p
t
u
r
e
d b
y
c
o
r
r
e
s
p
o
n
d
i
n
ga
n
t
i
g
e
no
r
a
n
t
i
b
o
d
yc
o
a
t
e
do
nt
ot
h
es
o
l
i
ds
u
r
f
a
c
e
.
A
f
t
e
r
s
o
me
t
i
me
,
t
h
ep
l
a
t
ei
sw
a
s
h
e
dt
or
e
mo
v
es
e
r
u
m a
n
du
n
b
o
u
n
da
n
t
i
b
o
d
i
e
so
r
a
n
t
i
g
e
n
s
w
i
t
h
a
s
e
r
i
e
s
o
f
w
a
s
h
b
u
f
f
e
r
.
 T
od
e
t
e
c
tt
h
eb
o
u
n
da
n
t
i
b
o
d
i
e
so
ra
n
t
i
g
e
n
s
,
as
e
c
o
n
d
a
r
ya
n
t
i
b
o
d
i
e
st
h
a
ta
r
e
a
t
t
a
c
h
e
dt
oa
ne
n
z
y
mes
u
c
ha
sp
e
r
o
x
i
d
a
s
eo
r
a
l
k
a
l
i
n
ep
h
o
s
p
h
a
t
a
s
ea
r
ea
d
d
e
dt
o
e
a
c
hw
e
l
l
.
A
f
t
e
ra
ni
n
c
u
b
a
t
i
o
np
e
r
i
o
d
,
t
h
eu
n
b
o
u
n
ds
e
c
o
n
d
a
r
ya
n
t
i
b
o
d
i
e
sa
r
e
w
a
s
h
e
do
f
f
.
Wh
e
nas
u
i
t
a
b
l
es
u
b
s
t
r
a
t
ei
sa
d
d
e
d
,
t
h
ee
n
z
y
mer
e
a
c
t
sw
i
t
hi
t
t
o
p
r
o
d
u
c
eac
o
l
o
r
.
T
h
i
sc
o
l
o
r
p
r
o
d
u
c
e
di
sme
a
s
u
r
a
b
l
ea
saf
u
n
c
t
i
o
no
r
q
u
a
n
t
i
t
yo
f
a
n
t
i
g
e
n
s
o
r
a
n
t
i
b
o
d
i
e
s
p
r
e
s
e
n
t
i
nt
h
e
g
i
v
e
ns
a
mp
l
e
.
T
h
ei
n
t
e
n
s
i
t
y
o
f
c
o
l
o
r
/
o
p
t
i
c
a
l
d
e
n
s
i
t
yi
sme
a
s
u
r
e
da
t
4
5
0
n
m.
T
h
ei
n
t
e
n
s
i
t
yo
f
t
h
ec
o
l
o
r
g
i
v
e
sa
ni
n
d
i
c
a
t
i
o
no
f
t
h
e
a
mo
u
n
t
o
f
a
n
t
i
g
e
n
o
r
a
n
t
i
b
o
d
y
.
 T
Y
P
E
SO
FE
L
I
S
A
A
c
c
o
r
d
i
n
gt
oh
o
wi
t
w
o
r
k
s
,
E
L
I
S
Ac
a
n
b
e
d
i
v
i
d
e
di
n
t
of
o
u
r
ma
j
o
r
t
y
p
e
s
:
 D
I
R
E
C
T
,
 I
N
D
I
R
E
C
T
,
 S
A
N
D
WI
C
H
,
A
N
D
 C
O
MP
E
T
I
T
I
V
E
.
 D
I
R
E
C
TE
L
I
S
A
I
n d
i
r
e
c
tE
L
I
S
A
,o
n
l
ya
n e
n
z
y
me
-
l
a
b
e
l
e
d p
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
yi
s u
s
e
d
,me
a
n
i
n
g t
h
a
t
s
e
c
o
n
d
a
r
ya
n
t
i
b
o
d
i
e
sa
r
en
o
t
n
e
e
d
e
d
.
T
h
ee
n
z
y
me
-
l
a
b
e
l
e
dp
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
y"
d
i
r
e
c
t
l
y
"
b
i
n
d
st
ot
h
et
a
r
g
e
t
(
a
n
t
i
g
e
n
)
t
h
a
t
i
si
mmo
b
i
l
i
z
e
dt
ot
h
ep
l
a
t
e(
s
o
l
i
ds
u
r
f
a
c
e
)
.
N
e
x
t
,
t
h
e
e
n
z
y
mel
i
n
k
e
dt
ot
h
ep
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
yr
e
a
c
t
sw
i
t
hi
t
ss
u
b
s
t
r
a
t
et
op
r
o
d
u
c
eav
i
s
i
b
l
e
s
i
g
n
a
l
t
h
a
t
c
a
nb
e
me
a
s
u
r
e
d
.
I
nt
h
i
s
w
a
y
,
t
h
e
a
n
t
i
g
e
no
f
i
n
t
e
r
e
s
t
i
s
d
e
t
e
c
t
e
d
.
 A
d
v
a
n
t
a
g
e
 S
i
mp
l
e
p
r
o
t
o
c
o
l
,
t
i
me
-
s
a
v
i
n
g
,
a
n
dr
e
a
g
e
n
t
s
-
s
a
v
i
n
g
.
 N
oc
r
o
s
s
-
r
e
a
c
t
i
v
i
t
y
f
r
o
ms
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
.
 D
i
s
a
d
v
a
n
t
a
g
e
-
 H
i
g
h
b
a
c
k
g
r
o
u
n
d
.
 N
os
i
g
n
a
l
a
mp
l
i
f
i
c
a
t
i
o
n
,
s
i
n
c
eo
n
l
yap
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
yi
su
s
e
da
n
das
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
i
s
n
o
t
n
e
e
d
e
d
.
 L
o
wf
l
e
x
i
b
i
l
i
t
y
,
s
i
n
c
e
t
h
e
p
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
mu
s
t
b
e
l
a
b
e
l
e
d
.
 I
N
D
I
R
E
C
TE
L
I
S
A
I
ni
n
d
i
r
e
c
t
E
L
I
S
A
,
b
o
t
hap
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
a
n
das
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
a
r
eu
s
e
d
.
B
u
t
i
nt
h
i
s
c
a
s
e
,
t
h
ep
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
yi
sn
o
tl
a
b
e
l
e
dw
i
t
ha
ne
n
z
y
me
.I
n
s
t
e
a
d
,
t
h
es
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
i
s
l
a
b
e
l
e
dw
i
t
h
a
n
e
n
z
y
me
.
T
h
ep
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
yb
i
n
d
st
ot
h
ea
n
t
i
g
e
ni
mmo
b
i
l
i
z
e
dt
ot
h
ep
l
a
t
e
,
a
n
dt
h
e
nt
h
e
e
n
z
y
me
-
l
a
b
e
l
e
ds
e
c
o
n
d
a
r
ya
n
t
i
b
o
d
yb
i
n
d
st
ot
h
ep
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
y
.
F
i
n
a
l
l
y
,
t
h
ee
n
z
y
me
l
i
n
k
e
dt
ot
h
es
e
c
o
n
d
a
r
ya
n
t
i
b
o
d
yr
e
a
c
t
sw
i
t
hi
t
ss
u
b
s
t
r
a
t
et
op
r
o
d
u
c
eav
i
s
i
b
l
es
i
g
n
a
l
t
h
a
t
c
a
nb
e
me
a
s
u
r
e
d
 A
d
v
a
n
t
a
g
e
s
 I
n
c
r
e
a
s
e
ds
e
n
s
i
t
i
v
i
t
y
,
s
i
n
c
emo
r
et
h
a
no
n
el
a
b
e
l
e
da
n
t
i
b
o
d
y
i
sb
o
u
n
dp
e
r
p
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
.
 Aw
i
d
e
v
a
r
i
e
t
y
o
f
l
a
b
e
l
e
ds
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
i
e
s
a
r
e
a
v
a
i
l
a
b
l
e
c
o
mme
r
c
i
a
l
l
y
.
 Ma
x
i
mu
m i
mmu
n
o
r
e
a
c
t
i
v
i
t
y
o
f
t
h
ep
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
i
sr
e
t
a
i
n
e
db
e
c
a
u
s
ei
t
i
sn
o
t
l
a
b
e
l
e
d
.
 V
e
r
s
a
t
i
l
eb
e
c
a
u
s
ema
n
y
p
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
i
e
sc
a
nb
ema
d
ei
no
n
es
p
e
c
i
e
sa
n
dt
h
e
s
a
me
l
a
b
e
l
e
ds
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
c
a
n
b
e
u
s
e
df
o
r
d
e
t
e
c
t
i
o
n
.
 F
l
e
x
i
b
i
l
i
t
y
,
s
i
n
c
ed
i
f
f
e
r
e
n
t
p
r
i
ma
r
y
d
e
t
e
c
t
i
o
na
n
t
i
b
o
d
i
e
sc
a
nb
eu
s
e
dw
i
t
has
i
n
g
l
e
l
a
b
e
l
e
ds
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
.
 C
o
s
t
s
a
v
i
n
g
s
,
s
i
n
c
e
f
e
w
e
r
l
a
b
e
l
e
da
n
t
i
b
o
d
i
e
s
a
r
e
r
e
q
u
i
r
e
d
.
 D
i
f
f
e
r
e
n
t
v
i
s
u
a
l
i
z
a
t
i
o
nma
r
k
e
r
s
c
a
nb
e
u
s
e
dw
i
t
h
t
h
e
s
a
me
p
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
.
 D
i
s
a
d
v
a
n
t
a
g
e
s
 C
r
o
s
s
-
r
e
a
c
t
i
v
i
t
y
mi
g
h
t
o
c
c
u
r
w
i
t
ht
h
e
s
e
c
o
n
d
a
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
,
r
e
s
u
l
t
i
n
gi
nn
o
n
s
p
e
c
i
f
i
c
s
i
g
n
a
l
.
 A
n
e
x
t
r
a
i
n
c
u
b
a
t
i
o
n
s
t
e
pi
s
r
e
q
u
i
r
e
di
n
t
h
e
p
r
o
c
e
d
u
r
e
.
 S
A
N
D
WI
C
HE
L
I
S
A
 I
ns
a
n
d
w
i
c
hE
L
I
S
A
,
i
t
i
st
h
ea
n
t
i
b
o
d
y
t
h
a
t
i
si
mmo
b
i
l
i
z
e
dt
ot
h
ep
l
a
t
eu
n
l
i
k
ed
i
r
e
c
t
a
n
di
n
d
i
r
e
c
t
E
L
I
S
A,
a
n
dt
h
i
s
a
n
t
i
b
o
d
y
i
s
c
a
l
l
e
dc
a
p
t
u
r
e
a
n
t
i
b
o
d
y
.
 I
n a
d
d
i
t
i
o
n t
o c
a
p
t
u
r
e a
n
t
i
b
o
d
y
,s
a
n
d
w
i
c
h E
L
I
S
A a
l
s
o i
n
v
o
l
v
e
s t
h
e u
s
e o
f
d
e
t
e
c
t
i
o
na
n
t
i
b
o
d
i
e
s
,
w
h
i
c
hg
e
n
e
r
a
l
l
yi
n
c
l
u
d
et
h
eu
n
l
a
b
e
l
e
dp
r
i
ma
r
yd
e
t
e
c
t
i
o
n
a
n
t
i
b
o
d
y
a
n
dt
h
e
e
n
z
y
me
-
l
a
b
e
l
e
ds
e
c
o
n
d
a
r
y
d
e
t
e
c
t
i
o
n
a
n
t
i
b
o
d
y
.
 F
i
r
s
t
l
y
,
t
h
ea
n
t
i
g
e
no
f
i
n
t
e
r
e
s
t
b
i
n
d
st
ot
h
ec
a
p
t
u
r
ea
n
t
i
b
o
d
yi
mmo
b
i
l
i
z
e
dt
ot
h
e
p
l
a
t
e
.
S
e
c
o
n
d
l
y
,
t
h
ep
r
i
ma
r
yd
e
t
e
c
t
i
o
na
n
t
i
b
o
d
yb
i
n
d
st
ot
h
ea
n
t
i
g
e
n
.
T
h
i
r
d
l
y
,
t
h
e
s
e
c
o
n
d
a
r
yd
e
t
e
c
t
i
o
na
n
t
i
b
o
d
yb
i
n
d
st
ot
h
ep
r
i
ma
r
yd
e
t
e
c
t
i
o
na
n
t
i
b
o
d
y
,
a
n
dt
h
e
n
t
h
ee
n
z
y
mer
e
a
c
t
sw
i
t
hi
t
ss
u
b
s
t
r
a
t
et
op
r
o
d
u
c
eav
i
s
i
b
l
es
i
g
n
a
l
t
h
a
tc
a
nb
e
me
a
s
u
r
e
d
.
 A
d
v
a
n
t
a
g
e
s
 H
i
g
hs
p
e
c
i
f
i
c
i
t
y
,
s
i
n
c
e
t
w
oa
n
t
i
b
o
d
i
e
s
a
r
e
u
s
e
dt
h
e
a
n
t
i
g
e
ni
s
s
p
e
c
i
f
i
c
a
l
l
y
c
a
p
t
u
r
e
d
a
n
dd
e
t
e
c
t
e
d
.
 S
u
i
t
a
b
l
ef
o
r
c
o
mp
l
e
xs
a
mp
l
e
s
,
s
i
n
c
et
h
ea
n
t
i
g
e
nd
o
e
sn
o
t
r
e
q
u
i
r
ep
u
r
i
f
i
c
a
t
i
o
n
p
r
i
o
r
t
ome
a
s
u
r
e
me
n
t
.
 F
l
e
x
i
b
i
l
i
t
ya
n
ds
e
n
s
i
t
i
v
i
t
y
,
s
i
n
c
eb
o
t
hd
i
r
e
c
t
a
n
di
n
d
i
r
e
c
t
d
e
t
e
c
t
i
o
nme
t
h
o
d
sc
a
n
b
e
u
s
e
d
.
 D
i
s
a
d
v
a
n
t
a
g
e
s
 T
h
e
a
n
t
i
g
e
no
f
i
n
t
e
r
e
s
t
mu
s
t
b
e
l
a
r
g
e
e
n
o
u
g
hs
ot
h
a
t
t
w
od
i
f
f
e
r
e
n
t
a
n
t
i
b
o
d
i
e
s
c
a
n
b
i
n
dt
oi
t
a
t
d
i
f
f
e
r
e
n
t
e
p
i
t
o
p
e
s
.
 I
t
'
ss
o
me
t
i
me
sd
i
f
f
i
c
u
l
t
t
of
i
n
dt
w
od
i
f
f
e
r
e
n
t
a
n
t
i
b
o
d
i
e
st
h
a
t
r
e
c
o
g
n
i
z
ed
i
f
f
e
r
e
n
t
e
p
i
t
o
p
e
s
o
n
t
h
e
a
n
t
i
g
e
no
f
i
n
t
e
r
e
s
t
a
n
dc
o
o
p
e
r
a
t
e
w
e
l
l
i
na
s
a
n
d
w
i
c
h
f
o
r
ma
t
.
 C
O
MP
E
T
I
T
I
V
EE
L
I
S
A
 C
o
mp
a
r
e
dw
i
t
ht
h
et
h
r
e
eE
L
I
S
A t
y
p
e
sa
b
o
v
e
,
c
o
mp
e
t
i
t
i
v
eE
L
I
S
A i
sr
e
l
a
t
i
v
e
l
y
c
o
mp
l
e
x
b
e
c
a
u
s
ei
t
i
n
v
o
l
v
e
s
t
h
eu
s
eo
f
i
n
h
i
b
i
t
o
r
a
n
t
i
g
e
n
,
s
oc
o
mp
e
t
i
t
i
v
eE
L
I
S
Ai
s
a
l
s
ok
n
o
w
na
s
i
n
h
i
b
i
t
i
o
nE
L
I
S
A
.
 C
o
mp
e
t
i
t
i
v
eE
L
I
S
Ad
e
s
c
r
i
b
e
dh
e
r
ei
sb
a
s
e
do
na
n
t
i
b
o
d
yc
a
p
t
u
r
e
,
i
nw
h
i
c
ht
h
e
p
l
a
t
ei
sc
o
a
t
e
dw
i
t
ha
n
t
i
g
e
n
.
T
h
e
r
ei
sa
n
o
t
h
e
r
t
y
p
eo
f
c
o
mp
e
t
i
t
i
v
eE
L
I
S
At
h
a
t
i
s
b
a
s
e
do
n
a
n
t
i
g
e
n
c
a
p
t
u
r
e
,
i
n
w
h
i
c
ht
h
e
p
l
a
t
e
i
s
c
o
a
t
e
dw
i
t
hu
n
l
a
b
e
l
e
da
n
t
i
b
o
d
y
 F
u
r
t
h
e
r
mo
r
e
,
c
o
mp
e
t
i
t
i
v
eE
L
I
S
Ag
e
n
e
r
a
l
l
yu
s
e
sal
a
b
e
l
e
da
n
t
i
b
o
d
yf
o
r
d
e
t
e
c
t
i
o
n
,
b
u
t
s
o
me
t
i
me
s
i
t
u
s
e
s
l
a
b
e
l
e
da
n
t
i
g
e
ni
n
s
t
e
a
do
f
a
l
a
b
e
l
e
da
n
t
i
b
o
d
y
.
 T
h
i
s
t
e
s
t
i
s
u
s
e
dt
ome
a
s
u
r
e
t
h
e
c
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
no
f
a
n
a
n
t
i
g
e
ni
n
a
s
a
mp
l
e
.
 I
nt
h
i
st
e
s
t
,
a
n
t
i
b
o
d
yi
sf
i
r
s
ti
n
c
u
b
a
t
e
di
ns
o
l
u
t
i
o
nw
i
t
has
a
mp
l
ec
o
n
t
a
i
n
i
n
g
a
n
t
i
g
e
n
.
T
h
ea
n
t
i
g
e
n
-
a
n
t
i
b
o
d
y
mi
x
t
u
r
ei
st
h
e
na
d
d
e
dt
ot
h
emi
c
r
o
t
i
t
r
ew
e
l
l
w
h
i
c
h
i
sc
o
a
t
e
dw
i
t
ha
n
t
i
g
e
n
.
T
h
emo
r
et
h
ea
n
t
i
g
e
np
r
e
s
e
n
t
i
nt
h
es
a
mp
l
e
,
t
h
el
e
s
sf
r
e
e
a
n
t
i
b
o
d
yw
i
l
l
b
ea
v
a
i
l
a
b
l
et
ob
i
n
dt
ot
h
ea
n
t
i
g
e
n
-
c
o
a
t
e
dw
e
l
l
.
A
f
t
e
r
t
h
ew
e
l
l
i
s
w
a
s
h
e
d
,
e
n
z
y
mec
o
n
j
u
g
a
t
e
ds
e
c
o
n
d
a
r
ya
n
t
i
b
o
d
ys
p
e
c
i
f
i
cf
o
ri
s
o
t
y
p
eo
ft
h
e
p
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
i
s
a
d
d
e
dt
od
e
t
e
r
mi
n
et
h
ea
mo
u
n
t
o
f
p
r
i
ma
r
y
a
n
t
i
b
o
d
y
b
o
u
n
dt
o
t
h
ew
e
l
l
.
T
h
eh
i
g
h
e
r
t
h
ec
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
no
f
a
n
t
i
g
e
ni
nt
h
es
a
mp
l
e
,
t
h
el
o
w
e
r
t
h
e
a
b
s
o
r
b
a
n
c
e
.
P
r
o
c
e
d
u
r
e
A
n
t
i
b
o
d
yi
si
n
c
u
b
a
t
e
dw
i
t
hs
a
mp
l
ec
o
n
t
a
i
n
i
n
ga
n
t
i
g
e
n
.
A
n
t
i
g
e
n
-
a
n
t
i
b
o
d
yc
o
mp
l
e
xa
r
e
a
d
d
e
dt
ot
h
emi
c
r
o
t
i
t
r
ew
e
l
l
w
h
i
c
ha
r
ep
r
e
-
c
o
a
t
e
dw
i
t
ht
h
ea
n
t
i
g
e
n
.
Wa
s
ht
h
ep
l
a
t
et
o
r
e
mo
v
eu
n
b
o
u
n
da
n
t
i
b
o
d
y
.
E
n
z
y
mel
i
n
k
e
ds
e
c
o
n
d
a
r
ya
n
t
i
b
o
d
yw
h
i
c
hi
ss
p
e
c
i
f
i
ct
ot
h
e
p
r
i
ma
r
ya
n
t
i
b
o
d
yi
sa
d
d
e
d
.
Wa
s
ht
h
ep
l
a
t
e
,
s
ot
h
a
t
u
n
b
o
u
n
de
n
z
y
me
-
l
i
n
k
e
da
n
t
i
b
o
d
i
e
s
a
r
e
r
e
mo
v
e
d
.
A
d
ds
u
b
s
t
r
a
t
e
w
h
i
c
hi
s
c
o
n
v
e
r
t
e
db
y
t
h
e
e
n
z
y
me
i
n
t
oa
f
l
u
o
r
e
s
c
e
n
t
s
i
g
n
a
l
.
 A
d
v
a
n
t
a
g
e
s
 H
i
g
h
s
p
e
c
i
f
i
c
i
t
y
,
s
i
n
c
e
t
w
oa
n
t
i
b
o
d
i
e
s
a
r
e
u
s
e
d
.
 H
i
g
h
s
e
n
s
i
t
i
v
i
t
y
,
s
i
n
c
e
b
o
t
hd
i
r
e
c
t
a
n
di
n
d
i
r
e
c
t
d
e
t
e
c
t
i
o
nme
t
h
o
d
s
c
a
n
b
e
u
s
e
d
.
 S
u
i
t
a
b
l
ef
o
r
c
o
mp
l
e
xs
a
mp
l
e
s
,
s
i
n
c
et
h
ea
n
t
i
g
e
nd
o
e
sn
o
t
r
e
q
u
i
r
ep
u
r
i
f
i
c
a
t
i
o
n
p
r
i
o
r
t
ome
a
s
u
r
e
me
n
t
.
 D
i
s
a
d
v
a
n
t
a
g
e
s
 R
e
l
a
t
i
v
e
l
y
c
o
mp
l
e
x
p
r
o
t
o
c
o
l
.
 N
e
e
d
s
t
h
e
u
s
e
o
f
i
n
h
i
b
i
t
o
r
a
n
t
i
g
e
n
 A
P
P
L
I
C
A
T
I
O
NO
FE
L
I
S
A
o P
r
e
s
e
n
c
e
o
f
a
n
t
i
g
e
n
o
r
t
h
e
p
r
e
s
e
n
c
e
o
f
a
n
t
i
b
o
d
y
i
na
s
a
mp
l
e
c
a
nb
e
e
v
a
l
u
a
t
e
d
.
o D
e
t
e
r
mi
n
a
t
i
o
n
o
f
s
e
r
u
ma
n
t
i
b
o
d
y
c
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s
i
na
v
i
r
u
s
t
e
s
t
.
o U
s
e
di
nf
o
o
di
n
d
u
s
t
r
y
w
h
e
n
d
e
t
e
c
t
i
n
gp
o
t
e
n
t
i
a
l
f
o
o
da
l
l
e
r
g
e
n
s
.
o A
p
p
l
i
e
di
nd
i
s
e
a
s
eo
u
t
b
r
e
a
k
s
-
t
r
a
c
k
i
n
gt
h
es
p
r
e
a
do
f
d
i
s
e
a
s
ee
.
g
.
H
I
V
,
b
i
r
df
l
u
,
c
o
mmo
n
,
c
o
l
d
s
,
c
h
o
l
e
r
a
,
S
T
De
t
c
.

Weitere ähnliche Inhalte

Mehr von SHUBHAM PATIDAR FISHERIES ADDAA

Fisheries मछली पालन - क्यों और कैसे CIFE Mumbai
Fisheries मछली पालन  - क्यों और कैसे CIFE MumbaiFisheries मछली पालन  - क्यों और कैसे CIFE Mumbai
Fisheries मछली पालन - क्यों और कैसे CIFE MumbaiSHUBHAM PATIDAR FISHERIES ADDAA
 
ORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERS
ORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERSORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERS
ORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERSSHUBHAM PATIDAR FISHERIES ADDAA
 

Mehr von SHUBHAM PATIDAR FISHERIES ADDAA (20)

WETLANDS
WETLANDSWETLANDS
WETLANDS
 
Supplementary-Fish-Feed
Supplementary-Fish-FeedSupplementary-Fish-Feed
Supplementary-Fish-Feed
 
BIOFERTILIZERS (AZOLLA FARMING)
BIOFERTILIZERS (AZOLLA FARMING)BIOFERTILIZERS (AZOLLA FARMING)
BIOFERTILIZERS (AZOLLA FARMING)
 
Fisheries मछली पालन - क्यों और कैसे CIFE Mumbai
Fisheries मछली पालन  - क्यों और कैसे CIFE MumbaiFisheries मछली पालन  - क्यों और कैसे CIFE Mumbai
Fisheries मछली पालन - क्यों और कैसे CIFE Mumbai
 
FISH HEALTH MANAGEMENT (ALL FISH DISEASE)
FISH HEALTH MANAGEMENT (ALL FISH DISEASE)FISH HEALTH MANAGEMENT (ALL FISH DISEASE)
FISH HEALTH MANAGEMENT (ALL FISH DISEASE)
 
AQUACULTURE FEED BY Dr. R.PAULRAJ
AQUACULTURE FEED BY Dr. R.PAULRAJAQUACULTURE FEED BY Dr. R.PAULRAJ
AQUACULTURE FEED BY Dr. R.PAULRAJ
 
SUSTAINABLE FISHERIES AND RESPONSIBLE AQUACULTURE
SUSTAINABLE FISHERIES AND RESPONSIBLE AQUACULTURESUSTAINABLE FISHERIES AND RESPONSIBLE AQUACULTURE
SUSTAINABLE FISHERIES AND RESPONSIBLE AQUACULTURE
 
ORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERS
ORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERSORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERS
ORNAMENTAL FISH TRADING, OPPORTUNITIES, ACCESSORIES,WATER PARAMETERS
 
ORNAMENTAL FISHERIES A TO Z INFORMATION.
ORNAMENTAL FISHERIES A TO Z INFORMATION.ORNAMENTAL FISHERIES A TO Z INFORMATION.
ORNAMENTAL FISHERIES A TO Z INFORMATION.
 
ORNAMENTAL FISH DISEASE AND AERATOR, FILTERS, HEATERS.
ORNAMENTAL FISH DISEASE AND AERATOR, FILTERS, HEATERS.ORNAMENTAL FISH DISEASE AND AERATOR, FILTERS, HEATERS.
ORNAMENTAL FISH DISEASE AND AERATOR, FILTERS, HEATERS.
 
ORNAMENTAL FISH BREEDING
ORNAMENTAL FISH BREEDINGORNAMENTAL FISH BREEDING
ORNAMENTAL FISH BREEDING
 
ORNAMENTAL FISH FARM MANAGEMENT
ORNAMENTAL FISH FARM MANAGEMENTORNAMENTAL FISH FARM MANAGEMENT
ORNAMENTAL FISH FARM MANAGEMENT
 
LIVE BEARING FISH BREEDING
LIVE BEARING FISH BREEDINGLIVE BEARING FISH BREEDING
LIVE BEARING FISH BREEDING
 
ORNAMENTAL FISH BREEDING OF EGG LAYING
ORNAMENTAL FISH BREEDING OF EGG LAYINGORNAMENTAL FISH BREEDING OF EGG LAYING
ORNAMENTAL FISH BREEDING OF EGG LAYING
 
FINFISH BREEDING & HATCHERY MANAGEMENT
FINFISH BREEDING & HATCHERY MANAGEMENTFINFISH BREEDING & HATCHERY MANAGEMENT
FINFISH BREEDING & HATCHERY MANAGEMENT
 
INSTANT INDIAN FISHERIES
INSTANT INDIAN FISHERIESINSTANT INDIAN FISHERIES
INSTANT INDIAN FISHERIES
 
STATE FISHES OF INDIA
STATE FISHES OF INDIASTATE FISHES OF INDIA
STATE FISHES OF INDIA
 
BIOFLOC TECHNOLOGY BASED AQUACULTURE
BIOFLOC TECHNOLOGY BASED AQUACULTUREBIOFLOC TECHNOLOGY BASED AQUACULTURE
BIOFLOC TECHNOLOGY BASED AQUACULTURE
 
FISH AND FISHERIES OF INDIA
FISH AND FISHERIES OF INDIAFISH AND FISHERIES OF INDIA
FISH AND FISHERIES OF INDIA
 
FISH MARKETING CHANNELS
FISH MARKETING CHANNELSFISH MARKETING CHANNELS
FISH MARKETING CHANNELS
 

ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay)

  • 2.  E L I S A , s h o r t f o r e n z y me - l i n k e di mmu n o s o r b e n t a s s a y ,  E L I S Ai s a na n t i g e n a n t i b o d y r e a c t i o n .  I n1 9 7 1 , E L I S Aw a si n t r o d u c e db y P e t e r P e r l ma n na n dE v aE n g v a l l a t S t o c k h o l m U n i v e r s i t y i nS w e d e n .  I ti sac o mmo nl a b o r a t o r yt e c h n i q u ew h i c hi su s u a l l yu s e dt ome a s u r et h e c o n c e n t r a t i o n o f a n t i b o d i e s o r a n t i g e n s i n b l o o d .  E L I S A i s a p l a t e b a s e d a s s a yt e c h n i q u e w h i c h i s u s e d f o rd e t e c t i n g a n d q u a n t i f y i n gs u b s t a n c e s s u c h a s p e p t i d e s , p r o t e i n s , a n t i b o d i e s a n dh o r mo n e s .  A si t sn a mei mp l i e s , E L I S Ai n v o l v e st h eu s eo f e n z y me sa n dt h es p e c i f i cb i n d i n g o f a n t i b o d y a n da n t i g e n .  A ne n z y mec o n j u g a t e dw i t ha na n t i b o d yr e a c t sw i t hc o l o r l e s ss u b s t r a t et o g e n e r a t e a c o l o r e dp r o d u c t . S u c hs u b s t r a t e i s c a l l e dc h r o mo g e n i c s u b s t r a t e .  An u mb e r o f e n z y me sh a v eb e e nu s e df o r E L I S As u c ha sa l k a l i n ep h o s p h a t a s e , h o r s e r a d i s hp e r o x i d a s e a n db e t a g a l a c t o s i d a s e .  S p e c i f i cs u b s t r a t es u c ha so r t h o - p h e n y l d i a mi n ed i h y d r o c h l o r i d e( f o r p e r o x i d a s e ) , p a r a n i t r o p h e n y lp h o s p h a t e ( f o ra l k a l i n e p h o s p h a t a s e )a r e u s e d w h i c h a r e h y d r o l y s e db y a b o v e e n z y me s t og i v e c o l o r e de n dp r o d u c t .  I t i s a v e r y ma t u r e me t h o df o r t h e d e t e c t i o no f v a r i o u s t a r g e t s .  A d v a n t a g eo f E L I S Ai st h a t i t ' sq u i c ka n ds i mp l et oc a r r yo u t , s oi t i so f t e nu s e d f o r b o t h d i a g n o s t i c a n dr e s e a r c hp u r p o s e s .  P R I N C I P L E  E L I S A sa r et y p i c a l l yp e r f o r me d i n9 6 - w e l lp o l y s t y r e n ep l a t e s .T h es e r u m i s i n c u b a t e di naw e l l , a n de a c hw e l l c o n t a i n sad i f f e r e n t s e r u m. Ap o s i t i v ec o n t r o l s e r u m a n dan e g a t i v ec o n t r o l s e r u m w o u l db ei n c l u d e da mo n gt h e9 6s a mp l e s b e i n g t e s t e d .A n t i b o d i e s o ra n t i g e n s p r e s e n ti n s e r u m a r e c a p t u r e d b y c o r r e s p o n d i n ga n t i g e no r a n t i b o d yc o a t e do nt ot h es o l i ds u r f a c e . A f t e r s o me t i me , t h ep l a t ei sw a s h e dt or e mo v es e r u m a n du n b o u n da n t i b o d i e so r a n t i g e n s w i t h a s e r i e s o f w a s h b u f f e r .  T od e t e c tt h eb o u n da n t i b o d i e so ra n t i g e n s , as e c o n d a r ya n t i b o d i e st h a ta r e a t t a c h e dt oa ne n z y mes u c ha sp e r o x i d a s eo r a l k a l i n ep h o s p h a t a s ea r ea d d e dt o e a c hw e l l . A f t e ra ni n c u b a t i o np e r i o d , t h eu n b o u n ds e c o n d a r ya n t i b o d i e sa r e
  • 3. w a s h e do f f . Wh e nas u i t a b l es u b s t r a t ei sa d d e d , t h ee n z y mer e a c t sw i t hi t t o p r o d u c eac o l o r . T h i sc o l o r p r o d u c e di sme a s u r a b l ea saf u n c t i o no r q u a n t i t yo f a n t i g e n s o r a n t i b o d i e s p r e s e n t i nt h e g i v e ns a mp l e . T h ei n t e n s i t y o f c o l o r / o p t i c a l d e n s i t yi sme a s u r e da t 4 5 0 n m. T h ei n t e n s i t yo f t h ec o l o r g i v e sa ni n d i c a t i o no f t h e a mo u n t o f a n t i g e n o r a n t i b o d y .  T Y P E SO FE L I S A A c c o r d i n gt oh o wi t w o r k s , E L I S Ac a n b e d i v i d e di n t of o u r ma j o r t y p e s :  D I R E C T ,  I N D I R E C T ,  S A N D WI C H , A N D  C O MP E T I T I V E .  D I R E C TE L I S A I n d i r e c tE L I S A ,o n l ya n e n z y me - l a b e l e d p r i ma r ya n t i b o d yi s u s e d ,me a n i n g t h a t s e c o n d a r ya n t i b o d i e sa r en o t n e e d e d . T h ee n z y me - l a b e l e dp r i ma r ya n t i b o d y" d i r e c t l y " b i n d st ot h et a r g e t ( a n t i g e n ) t h a t i si mmo b i l i z e dt ot h ep l a t e( s o l i ds u r f a c e ) . N e x t , t h e e n z y mel i n k e dt ot h ep r i ma r ya n t i b o d yr e a c t sw i t hi t ss u b s t r a t et op r o d u c eav i s i b l e s i g n a l t h a t c a nb e me a s u r e d . I nt h i s w a y , t h e a n t i g e no f i n t e r e s t i s d e t e c t e d .  A d v a n t a g e  S i mp l e p r o t o c o l , t i me - s a v i n g , a n dr e a g e n t s - s a v i n g .  N oc r o s s - r e a c t i v i t y f r o ms e c o n d a r y a n t i b o d y .  D i s a d v a n t a g e -
  • 4.  H i g h b a c k g r o u n d .  N os i g n a l a mp l i f i c a t i o n , s i n c eo n l yap r i ma r ya n t i b o d yi su s e da n das e c o n d a r y a n t i b o d y i s n o t n e e d e d .  L o wf l e x i b i l i t y , s i n c e t h e p r i ma r y a n t i b o d y mu s t b e l a b e l e d .  I N D I R E C TE L I S A I ni n d i r e c t E L I S A , b o t hap r i ma r y a n t i b o d y a n das e c o n d a r y a n t i b o d y a r eu s e d . B u t i nt h i s c a s e , t h ep r i ma r ya n t i b o d yi sn o tl a b e l e dw i t ha ne n z y me .I n s t e a d , t h es e c o n d a r y a n t i b o d y i s l a b e l e dw i t h a n e n z y me . T h ep r i ma r ya n t i b o d yb i n d st ot h ea n t i g e ni mmo b i l i z e dt ot h ep l a t e , a n dt h e nt h e e n z y me - l a b e l e ds e c o n d a r ya n t i b o d yb i n d st ot h ep r i ma r ya n t i b o d y . F i n a l l y , t h ee n z y me l i n k e dt ot h es e c o n d a r ya n t i b o d yr e a c t sw i t hi t ss u b s t r a t et op r o d u c eav i s i b l es i g n a l t h a t c a nb e me a s u r e d  A d v a n t a g e s  I n c r e a s e ds e n s i t i v i t y , s i n c emo r et h a no n el a b e l e da n t i b o d y i sb o u n dp e r p r i ma r y a n t i b o d y .  Aw i d e v a r i e t y o f l a b e l e ds e c o n d a r y a n t i b o d i e s a r e a v a i l a b l e c o mme r c i a l l y .  Ma x i mu m i mmu n o r e a c t i v i t y o f t h ep r i ma r y a n t i b o d y i sr e t a i n e db e c a u s ei t i sn o t l a b e l e d .  V e r s a t i l eb e c a u s ema n y p r i ma r y a n t i b o d i e sc a nb ema d ei no n es p e c i e sa n dt h e s a me l a b e l e ds e c o n d a r y a n t i b o d y c a n b e u s e df o r d e t e c t i o n .  F l e x i b i l i t y , s i n c ed i f f e r e n t p r i ma r y d e t e c t i o na n t i b o d i e sc a nb eu s e dw i t has i n g l e l a b e l e ds e c o n d a r y a n t i b o d y .  C o s t s a v i n g s , s i n c e f e w e r l a b e l e da n t i b o d i e s a r e r e q u i r e d .  D i f f e r e n t v i s u a l i z a t i o nma r k e r s c a nb e u s e dw i t h t h e s a me p r i ma r y a n t i b o d y .
  • 5.  D i s a d v a n t a g e s  C r o s s - r e a c t i v i t y mi g h t o c c u r w i t ht h e s e c o n d a r y a n t i b o d y , r e s u l t i n gi nn o n s p e c i f i c s i g n a l .  A n e x t r a i n c u b a t i o n s t e pi s r e q u i r e di n t h e p r o c e d u r e .  S A N D WI C HE L I S A  I ns a n d w i c hE L I S A , i t i st h ea n t i b o d y t h a t i si mmo b i l i z e dt ot h ep l a t eu n l i k ed i r e c t a n di n d i r e c t E L I S A, a n dt h i s a n t i b o d y i s c a l l e dc a p t u r e a n t i b o d y .  I n a d d i t i o n t o c a p t u r e a n t i b o d y ,s a n d w i c h E L I S A a l s o i n v o l v e s t h e u s e o f d e t e c t i o na n t i b o d i e s , w h i c hg e n e r a l l yi n c l u d et h eu n l a b e l e dp r i ma r yd e t e c t i o n a n t i b o d y a n dt h e e n z y me - l a b e l e ds e c o n d a r y d e t e c t i o n a n t i b o d y .  F i r s t l y , t h ea n t i g e no f i n t e r e s t b i n d st ot h ec a p t u r ea n t i b o d yi mmo b i l i z e dt ot h e p l a t e . S e c o n d l y , t h ep r i ma r yd e t e c t i o na n t i b o d yb i n d st ot h ea n t i g e n . T h i r d l y , t h e s e c o n d a r yd e t e c t i o na n t i b o d yb i n d st ot h ep r i ma r yd e t e c t i o na n t i b o d y , a n dt h e n t h ee n z y mer e a c t sw i t hi t ss u b s t r a t et op r o d u c eav i s i b l es i g n a l t h a tc a nb e me a s u r e d .  A d v a n t a g e s  H i g hs p e c i f i c i t y , s i n c e t w oa n t i b o d i e s a r e u s e dt h e a n t i g e ni s s p e c i f i c a l l y c a p t u r e d a n dd e t e c t e d .  S u i t a b l ef o r c o mp l e xs a mp l e s , s i n c et h ea n t i g e nd o e sn o t r e q u i r ep u r i f i c a t i o n p r i o r t ome a s u r e me n t .  F l e x i b i l i t ya n ds e n s i t i v i t y , s i n c eb o t hd i r e c t a n di n d i r e c t d e t e c t i o nme t h o d sc a n b e u s e d .  D i s a d v a n t a g e s  T h e a n t i g e no f i n t e r e s t mu s t b e l a r g e e n o u g hs ot h a t t w od i f f e r e n t a n t i b o d i e s c a n b i n dt oi t a t d i f f e r e n t e p i t o p e s .
  • 6.  I t ' ss o me t i me sd i f f i c u l t t of i n dt w od i f f e r e n t a n t i b o d i e st h a t r e c o g n i z ed i f f e r e n t e p i t o p e s o n t h e a n t i g e no f i n t e r e s t a n dc o o p e r a t e w e l l i na s a n d w i c h f o r ma t .  C O MP E T I T I V EE L I S A  C o mp a r e dw i t ht h et h r e eE L I S A t y p e sa b o v e , c o mp e t i t i v eE L I S A i sr e l a t i v e l y c o mp l e x b e c a u s ei t i n v o l v e s t h eu s eo f i n h i b i t o r a n t i g e n , s oc o mp e t i t i v eE L I S Ai s a l s ok n o w na s i n h i b i t i o nE L I S A .  C o mp e t i t i v eE L I S Ad e s c r i b e dh e r ei sb a s e do na n t i b o d yc a p t u r e , i nw h i c ht h e p l a t ei sc o a t e dw i t ha n t i g e n . T h e r ei sa n o t h e r t y p eo f c o mp e t i t i v eE L I S At h a t i s b a s e do n a n t i g e n c a p t u r e , i n w h i c ht h e p l a t e i s c o a t e dw i t hu n l a b e l e da n t i b o d y  F u r t h e r mo r e , c o mp e t i t i v eE L I S Ag e n e r a l l yu s e sal a b e l e da n t i b o d yf o r d e t e c t i o n , b u t s o me t i me s i t u s e s l a b e l e da n t i g e ni n s t e a do f a l a b e l e da n t i b o d y .  T h i s t e s t i s u s e dt ome a s u r e t h e c o n c e n t r a t i o no f a n a n t i g e ni n a s a mp l e .  I nt h i st e s t , a n t i b o d yi sf i r s ti n c u b a t e di ns o l u t i o nw i t has a mp l ec o n t a i n i n g a n t i g e n . T h ea n t i g e n - a n t i b o d y mi x t u r ei st h e na d d e dt ot h emi c r o t i t r ew e l l w h i c h i sc o a t e dw i t ha n t i g e n . T h emo r et h ea n t i g e np r e s e n t i nt h es a mp l e , t h el e s sf r e e a n t i b o d yw i l l b ea v a i l a b l et ob i n dt ot h ea n t i g e n - c o a t e dw e l l . A f t e r t h ew e l l i s w a s h e d , e n z y mec o n j u g a t e ds e c o n d a r ya n t i b o d ys p e c i f i cf o ri s o t y p eo ft h e p r i ma r y a n t i b o d y i s a d d e dt od e t e r mi n et h ea mo u n t o f p r i ma r y a n t i b o d y b o u n dt o t h ew e l l . T h eh i g h e r t h ec o n c e n t r a t i o no f a n t i g e ni nt h es a mp l e , t h el o w e r t h e a b s o r b a n c e . P r o c e d u r e A n t i b o d yi si n c u b a t e dw i t hs a mp l ec o n t a i n i n ga n t i g e n . A n t i g e n - a n t i b o d yc o mp l e xa r e a d d e dt ot h emi c r o t i t r ew e l l w h i c ha r ep r e - c o a t e dw i t ht h ea n t i g e n . Wa s ht h ep l a t et o r e mo v eu n b o u n da n t i b o d y . E n z y mel i n k e ds e c o n d a r ya n t i b o d yw h i c hi ss p e c i f i ct ot h e p r i ma r ya n t i b o d yi sa d d e d . Wa s ht h ep l a t e , s ot h a t u n b o u n de n z y me - l i n k e da n t i b o d i e s a r e r e mo v e d . A d ds u b s t r a t e w h i c hi s c o n v e r t e db y t h e e n z y me i n t oa f l u o r e s c e n t s i g n a l .  A d v a n t a g e s  H i g h s p e c i f i c i t y , s i n c e t w oa n t i b o d i e s a r e u s e d .
  • 7.  H i g h s e n s i t i v i t y , s i n c e b o t hd i r e c t a n di n d i r e c t d e t e c t i o nme t h o d s c a n b e u s e d .  S u i t a b l ef o r c o mp l e xs a mp l e s , s i n c et h ea n t i g e nd o e sn o t r e q u i r ep u r i f i c a t i o n p r i o r t ome a s u r e me n t .  D i s a d v a n t a g e s  R e l a t i v e l y c o mp l e x p r o t o c o l .  N e e d s t h e u s e o f i n h i b i t o r a n t i g e n  A P P L I C A T I O NO FE L I S A o P r e s e n c e o f a n t i g e n o r t h e p r e s e n c e o f a n t i b o d y i na s a mp l e c a nb e e v a l u a t e d . o D e t e r mi n a t i o n o f s e r u ma n t i b o d y c o n c e n t r a t i o n s i na v i r u s t e s t . o U s e di nf o o di n d u s t r y w h e n d e t e c t i n gp o t e n t i a l f o o da l l e r g e n s . o A p p l i e di nd i s e a s eo u t b r e a k s - t r a c k i n gt h es p r e a do f d i s e a s ee . g . H I V , b i r df l u , c o mmo n , c o l d s , c h o l e r a , S T De t c .