PINTURA DEL RENACIMIENTO EN ESPAÑA (SIGLO XVI).ppt
Tecnicas de laboratorio
1. HEMATOCRITO (Hto) O VOLUMEN CELULAR COMPACTO (VCC) O VOLUMEN DEL PAQUETE
CELULAR (VPC)
FUNDAMENTO se base en la centrifugación de la sangre total para medir el espacio que los
eritrocitos ocupan, es decir que El hematocrito de una muestra de sangre es la
relación del volumen de eritrocitos con el de sangre total. indica la masa total de
rojos
MUESTRA Sangre total (EDTA) o sangre capilar
MICROMETODO
MATERIALES
Cámara de recuento de Neubauer o Burker
Cubreobjetos
Pipetas especiales para dilución de la sangre
Solución diluyente para la sangre
Microscopio
PROCEDIMIENTO
1. homogeneizar la muestra
2. llenar el capilar (3/4 partes de las capacidad del capilar). El extremo vacío se sella con plástico moldeable. Los
tubos llenos se colocan en los canales o surcos radiales del aparato de centrifugación con el extremo cerrado
dirigido hacia afuera.
3. limpiar con gasa o papel
4. tapar los extremos con plastilina
5. centrifugar a 12.000 r.p.m por 5 minutos, a menos que el hematocrito exceda del 50%, en este caso se
centrifuga durante 5 min adicionales, con objeto de asegurar que se ha reducido al mínimo la cantidad de plasma
atrapado
6. leer inmediatamente, Los tubos capilares no están graduados. La longitud de toda la columna, que incluye el
plasma, y de la columna de eritrocitos solo debe medirse en cada caso con una regla milimetrada y una lupa o
con aparatos automáticos o semiautomáticos disponibles comercialmente.
7. el resultado se expresa en %
A
B
C
A. plasma
B. costra flogística (leucocitos y plaquetas)
C. eritrocitos
nota: para realizar la lectura se coloca el extremo inferior de la columna de sangre en la línea correspondiente al
100 y el plasma a 0, obviando la capa de blancos
2. MACROMÉTODO DE WINTROBE
PROCEDIMIENTO
1. se homogeneiza la muestra
2. se llena el tubo de wintrobe, como se observa en la grafica
3. a medida que se va llenando el tubo, eleve la punta de la pipeta, pero manténgala por debajo del
menisco de sangre con el objeto de evitar la formación de espuma
4. se centrifuga 30 minutos a 3000 r.p.m
5. y luego se mide en la escala de la derecha
6. se multiplica por 12
INTERPRETACION RESULTADOS
AUMENTADO DISMINUIDO
anemia, que puede ser originada por disminución de la
hematopoyesis medular, destrucción celular, pérdidas directas,
cirrosis, insuficiencias cardíacas
policitemia o poliglobulia. Puede estar causada
por un aumento en la producción medular en
forma primaria (Policitemia vera), o secundaria a
enfermedades sistémicas (altura, enfermedades
pulmonares, enfermedad cardiovascular), o en
forma ficticia (deshidratación), Quemaduras,
insuficiencia respiratoria crónica.
CAUSAS DE ERROR
El tiempo y la velocidad alteran los resultados
Fugas al no tapar bien (disminuido falsamente)
Exceso de anticoagulante (disminuido falsamente)
Hemoconcentración de la muestra por extracción dificultosa, compresión excesiva, deshidratación y/o
perdida de líquidos (aumentado falsamente)
La lectura no inmediata provoca que el sedimento de rojos tome forma de bisel y la lectura es errónea
Hemólisis de la muestra
Inclusión en la lectura de la capa de blancos
No homogeneización de la muestra
CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA
FUNDAMENTO Determinación de la cantidad del pigmento presente en los eritrocitos, El ferricianuro hace
pasar el hierro de la hemoglobina del estado ferroso (Fe++) al férrico (Fe+++) para formar
metahemoglobina, la cual se combina con cianuro potásico y da un pigmento estable, la
cianmetahemoglobina.
MUESTRA Sangre total (EDTA) o sangre capilar
METODO DE LA CIANMETAHEMOGLOBINA
PROCEDIMIENTO
1. Prender el fotocolorímetro o el espectofotómetro y esperar a que alcance la temperatura adecuada para
su funcionamiento.
2. Homogeneizar la muestra.
3. Dispensar exactamente 5ml de reactivo de Drabkin (El reactivo de Drabkin contiene cianuro potásico y
3. ferricianuro potásico)
4. Medir exactamente 20 µL (0.02 ml) de la sangre
5. Tapar el tubo y mezclar varias veces por inversión.
6. Dejar reposar por 10 minutos para que se produzca la hemólisis total de las células rojas y se complete la
reacción.
7. Transferir la solución a las cubetas del fotocolorímetro.
8. Leer la solución obtenida, usar como blanco el reactivo de Drabkin.
9. Calcular la concentración de hemoglobina, utilizando la curva de calibración o multiplicando por una
constante que resulta de la calibración del método.
CAUSAS DE ERROR
Errores en la obtención de la sangre. La estasis prolongada causada por usar más de un minuto el torniquete
en el brazo del paciente, origina resultados falsamente elevados de hemoglobina en las muestras de sangre
venosa. En sangre capilar ocurre lo contrario cuando se ejerce una presión excesiva en el sitio de punción y
aumenta el flujo de los líquidos tisulares diluyendo la muestra de sangre.
La muestra no se mezcla bien. Para evitarlo, invertir el tubo varias veces o, de preferencia, usar un mezclador
mecánico.
Errores de pipeteo o de dilución.
Muestra de sangre con coagulo.
Sangre lipémica.
Instrumento incorrectamente calibrado.
METODO CALCULADO
PROCEDIMIENTO
Determinar el valor del hematocrito y dividirlo entre 3
INTERPRETACION RESULTADOS
AUMENTADO DISMINUIDO
hemoconcentración, en estados de shock, quemaduras,y
poliglobulina primaria.
anemia
CAUSAS DE ERROR
igual a las del hematocrito
Errores en la obtención de la sangre. La estasis prolongada causada por usar más de un minuto el torniquete
en el brazo del paciente, origina resultados falsamente elevados de hemoglobina en las muestras de sangre
venosa. En sangre capilar ocurre lo contrario cuando se ejerce una presión excesiva en el sitio de punción y
aumenta el flujo de los líquidos tisulares diluyendo la muestra de sangre.
La muestra no se mezcla bien. Para evitarlo, invertir el tubo varias veces o, de preferencia, usar un mezclador
mecánico.
Errores de pipeteo o de dilución.
Muestra de sangre con coagulo.
Sangre lipémica.
Instrumento incorrectamente calibrado.
4. RECUENTO DE GLÓBULOS ROJOS
FUNDAMENTO Determinación del número de glóbulos rojos por unidad de volumen (mm3, µL o litro).
MUESTRA Sangre total (EDTA) o sangre capilar
PROCEDIMIENTO
1. homogeneizar la muestra (no agitar)
2. Usando la pipeta de glóbulos rojos, llenar con la sangre hasta la marca 0,5, limpiar con papel absorbente.
3. se diluye hasta la marca 101 con solución salina (1:200)
4. se mezclan las pipetas durante 3 minutos
5. se desechan las primeras 4 gotas y se monta la 5 en la cámara La cámara de recuento (de Neubauer o Burker)
consiste en una gruesa capa de vidrio con unas plataformas centrales que son exactamente 0'1 mm más bajas que
las laterales.
El líquido penetrará por capilaridad. Debe llenar justamente el espacio plano situado bajo el cubreobjetos, puesto
que un exceso de líquido tiende a elevarlo, con el consiguiente aumento en el volumen y en el número de células
contadas. Si existe un pequeño exceso de líquido, puede eliminarse tocando ligeramente la gota con el dedo.
6. Se sitúa la cámara en el microscopio, después de unos minutos para que las células sedimenten, y se procede al
recuento con el objetivo de 10x
En las plataformas centrales existe una cuadrícula (diferente dependiendo de una u otra cámara, como muestra la
Fig.3).
5. 7. se cuentan los glóbulos rojos de las esquinas y centro.
8. se calcula : Numero de glóbulos rojos x 10000 = millones / mm3
INTERPRETACION DE RESULTADOS
AUMENTADO DISMINUIDO
hemoconcentración, en estados de shock, quemaduras,y
poliglobulina primaria
anemia
CAUSAS DE ERROR
igual a las del hematocrito
INDICES ERITROCITARIOS
FUNDAMENTO
Sirven para definir el tamaño y contenido de hemoglobina de los glóbulos rojos. Ellos nos
revelan el volumen corpuscular medio (VCM), concentración de hemoglobina
corpuscular media ( CHCM ) y hemoglobina corpuscular media (HCM)
MUESTRA Sangre total (EDTA) o sangre capilar
PROCEDIMIENTO
Se calculan con base a los valores de hemoglobina, hematocrito y recuento de glóbulos rojos.
VCM indica el volumen promedio de los
glóbulos rojos
VCM = Hematocrito x 10 = fentolitros (Fl)
Recuento glóbulos rojos
INTERPRETACION
AUMENTADO NORMAL DISMINUIDO
nos indica si los glóbulos rojos (g.r)
son macrociticos.
los g.r son normociticos los g.r son microciticos,
CHCM indica la concentración promedio de
hemoglobina en 100 ml de glóbulos rojos
CHCM = Hemoglobina (gr/dl) x 100 = gr /dl
Hematocrito
INTERPRETACION
AUMENTADO NORMAL DISMINUIDO
Los gr son hipercromicos. no tiene
valor diagnostico.
glóbulos rojos (g.r) son
normocromicos
los g.r son hipocromicos
HCM indica peso promedio de hemoglobina en
un glóbulo rojo
HCM = Hemoglobina x 10 = Mmg
Recuento de glóbulos rojos
6. AUMENTADO NORMAL DISMINUIDO
Los gr son hipercromicos. no tiene
valor diagnostico.
glóbulos rojos (g.r) son
normocromicos
los g.r son hipocromicos
NOTA: la exactitud de los índices eritrocitarios dependes de la exactitud de la determinación de Hemoglobina,
Hematocrito y el Recuento de Rojos que son la base para los cálculos y correlacionarlos con el extendido de
sangre.
RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS
FUNDAMENTO permite determinar el número de leucocitos totales por unidad de volumen (mm3,
µL o litro)
MUESTRA Sangre total (EDTA) o sangre capilar
PROCEDIMIENTO
1. homogeneizar la muestra (no agitar )
2. usando la pipeta de glóbulos blancos, llenar con la sangre hasta la marca 0,5, limpiar con papel
absorbente.
3. se diluye hasta la marca 11 con LIQUIDO DE TURK ( 1:20)
LIQUIDO DE TURK: hemolisa los glóbulos rojos para poder observar los glóbulos blancos y hace mas visible los
núcleos de los leucocitos
- Acido Acético al 3% + 30 ml Acido Acético + Agua Destilada 1000 ml + 1 o 2 gotas de azul de metileno.
4. se mezclan las pipetas durante 3 minutos (manual o mecánica)
5. se desechan las primeras 4 gotas y se monta la 5 en la cámara
6. se lee con objetivo 10x, se enfoca sobre el cuadro grande en el centro de la cámara
7. se cuentan los glóbulos blancos de los cuadrantes de las esquinas
8. se calcula : Numero de glóbulos blancos x 50 = mm3
INTERPRETACION DE RESULTADOS
AUMENTADO DISMINUIDO
Un recuento por encima del valor normal
(LEUCOCITOSIS)
FISIOLOGICO
Ejercicio vigoroso
Crisis convulsivas
Excitación, temor, aprensión o dolor (gatos y caballos)
Digestión (bovinos)
Gestación
Recién nacidos
PATOLOGICO
Infecciones de localización generalizada (neumonía,
meningitis...)
Intoxicaciones: metabólicas (uremia, acidosis, eclampsia),
Química, Veneno de insectos
Necrosis tisular (infarto, quemaduras, gangrena,
neoplasia)
Hemorragia aguda
Hemólisis
Neoplasias (incluyendo leucemias)
Corticosteroides
Un recuento por debajo del valor normal
(LEUCOPENIA)
1. infección
1.1 viral
Panleucopenia felina
Moquillo canino
Cólera porcino
Fiebre catarral maligna
Hepatitis infecciosa canina
Linfosarcoma en gatos
Arteritis viral en caballos
Peritonitis infecciosa felina
Lengua azul en ganado ovino y bovino
Peste epizootica
1.2 bacteriana: En estadios iniciales y finales de las
infecciones
1.3 Rickettsia: Ehrlichia en perros y gatos
1.4 Protozoarios: Toxoplasma
2. secuestro de neutrofilos en los capilares de
pulmones, hígado y bazo:
7. Choque endotoxico, séptico, o anafiláctico
Retención en reservas normales
3. anormalidades en la medula ósea:
3.1 Disminución en la producción y vida media normal
(hipoplasia) debido a:
- trastornos metabólicos, agentes químicos, radiaciones
3.2 Producción anormal (leucemias, trastornos
mieloproliferativos)
3.3 Producción normal y maduración defectuosa
4. agentes químicos
4.1 Medicamentos: Antibióticos, Analgésicos,
Anticonvulsivos, Arsenicales, Antimicóticos,
Antihistamínicos, Antitiroideos, entre otros
4.2 Intoxicación por metales: Plomo, Talio, Mercurio,
Arsénico
CAUSAS DE ERROR
Coagulación parcial de la muestra
No mezclar bien la sangre antes de llenar la pipeta
No llenar bien la pipeta
Usar pipetas húmedas
No llenar completamente la cámara
Inundación de la cámara
Pipeta mal calibrada o sucia
No desechar las 4 primeras gotas
RECUENTO DE PLAQUETAS
FUNDAMENTO permite determinar el número de plaquetas totales por unidad de volumen (mm3, µL o
litro) de sangre circulante.
MUESTRA Sangre total (EDTA) o sangre capilar
METODO INDIRECTO
PROCEDIMIENTO
1. homogeneizar la muestra (no agitar)
2. usando la pipeta de glóbulos rojos, llenar con la sangre hasta la marca 0,5, limpiar con papel absorbente.
3. se diluye hasta la marca 101 con reactivo (1:200)
Reactivo: LIQUIDO DE REES – ECKER (3.8 gr citrato de sodio + 0.1 gr azul cresil brillante + 0.2 ml formaldehído
40% + 100 ml agua destilad). Se almacena en nevera y se filtra antes de usar
4. se mezclan las pipetas en agitador durante 5 minutos
5. se desechan las primeras 4 gotas y se monta la 5 en la cámara
6. se deja reposar la cámara por 10 minutos para que se asienten las células (en cámara húmeda)
7. se lee con objetivo 40x, se enfoca sobre el cuadro grande en el centro de la cámara
8. se cuentan las plaquetas que se ven como cuerpos refringentes de color verde de las esquinas y centro de la
cámara
9. se calcula : Número de Plaquetas x 2000 = mm3
CAUSAS DE ERROR
Coagulación parcial de la muestra
8. No mezclar bien la sangre antes de llenar la pipeta
No llenar bien la pipeta
Usar pipetas húmedas
No llenar completamente la cámara
Inundación de la cámara
Pipeta mal calibrada o sucia
No desechar las 4 primeras gotas
METODO INDIRECTO
PROCEDIMIENTO
1. se realiza el frotis de sangre
2. se colorea con wright
3. se observa con objetivo de inmersión
4. se cuentan el número de plaquetas por campo, en mínimo 10 campos.
5. se obtiene el promedio del numero de plaquetas por campo y se multiplica por 21.000
INTERPRETACION DE RESULTADOS
AUMENTADO DISMINUIDO
(TROMBICITOSIS) (TROMBOCITOPENIA)
Enfermedades infecciosas
Esplenectomia
Policitemia
Trombocitemia idiopatica
Leucemia megacariocitica o mielogena
Tumores malignos (enfermedad de hodgkin)
Enfermedades inflamatorias crónicas
Fármacos
Hemorragias graves
Defectos en la producción en Medula ósea (fármacos,
irradiación, hipoplasia, aplasia, falla
medular,fibrosis,infiltración medular)
Invasión de la Medula Ósea (carcinomas, leucemias,
fibrosis)
Secuestro de Plaquetas debido a una esplenomegalia
Destrucción acelerada (fármacos, destrucción
autoinmune, purpuras trombocitopenica idiopatica,
no inmunes: cid,vasculitis,síndrome hemolitico)
CAUSAS DE ERROR
- Procesar muestras coaguladas (pueden dar falsos disminuidos ya que las plaquetas queda atrapadas en el
coagulo)
- uso anticoagulantes inadecuados
- tiempo de montaje y lectura después de 2 horas ya que las Plaquetas se destruyen.
- Reactivo mal almacenado o no filtrado
RECUENTO DIFERENCIAL O FORMULA LEUCOCITARIA
FUNDAMENTO permite conocer en términos de distribución relativa (respecto a un recuento total igual al
100%) cuál es la cantidad de cada una de las células que componen la línea blanca.
MUESTRA Sangre total (EDTA) O sangra capilar
PROCEDIMIENTO
1. depositar una gota de sangre en un extremo de un portaobjetos a unos 2 cm del mismo.
2.colocar otro portaobjetos sobre el porta anterior con la gota de sangre, con una inclinación de 45o ,
inicialmente por la parte anterior de la gota, para posteriormente desplazarlos hacia atrás hasta entrar en
contacto con la gota y permitir que por capilaridad se extienda uniformemente por el borde del portaobjetos
3. deslizar el segundo portaobjetos inclinado sobre el primero de manera suave y rápida para permitir que la gota
de sangre quede extendida. Según la inclinación, el grosor de la extensión variara (mas inclinación mas gruesa y
9. viceversa)
4. dejar secar a temperatura ambiente
5. Teñir el frotis con wright
- añadir el colorante por 4 minutos
- adicionar 2 o 3 gotas de agua destilada
- mezclar con el diluyente y esperar 3 minutos
- lavar bien con abundante agua y secar bien al aire
Tener en cuenta que cada vez que se empiece un colorante nuevo se debe standarizar los tiempo de coloración, y
filtrar los colorantes cada vez que sea necesario.
Una buena extensión presenta 3 zonas:
Zona inicial (cabeza): Se halla en la región inmediata al punto de partida del frotis, es una zona gruesa donde se
aprecian un número aumentado de linfocitos.
Zona intermedia (cuerpo): Corresponde a la zona ideal para hacer el recuento diferencial leucocitario por que
existe una adecuada proporción de blancos.
Zona final (cola): Es el final del frotis donde las células adoptan una disposición acordonada, se ven granulocitos
y monocitos en exceso
CRITERIOS DE UNA PLACA BIEN TEÑIDA:
frotis ni excesivamente grueso ni delgado
una buena distribución de leucocitos
tipos y características idóneas del colorante
calidad y garantía del colorante
no se debe observar colorante precipitado
INTERPRETACION DE RESULTADOS
AUMENTADO DISMINUIDO
Valores de neutrófilos por encima del valor normal
(NEUTROFILIA)
Valores de neutrófilos por debajo del valor normal
(NEUTROPENIA)
10. Fisiológicas
Ejercicio físico, Convulsiones,
Ansiedad,
Infecciones Bacteriana, Micóticas, Parasitosis
Inflamaciones Quemadura, reacciones alérgicas
Enfermedades
metabólicas
Intoxicaciones agudas,
cetoacidosis
Síndromes
mieloproliferativos
Leucemia mieloide crónica
Tratamientos Glucocorticoides, litio, etc
Hematológicas
Anemia aplasica
Fármacos Agranulocitosis
Deficiencia en la
nutrición
Vitamina B12, ácido fólico
Infecciones bacterianas
y víricas
Valores de linfocitos por encima del valor normal
(LINFOCITOSIS)
Valores de linfocitos por debajo del valor normal
(LINFOPENIA)
Fisiológicas Infancia
Estimulación
antigénica
Vacunación - hipersensibiliad
enfermedad autoinmune
Hematológicas Leucemias linfoides
(agudas y crónicas)
Endocrinas Hipertiroidismo,
hipoadrenocorticismo
Infecciones Parasitosis en sangre, hepatitis,
linfocitosis infecciosa y
linfangitis (inflamación de los
ganglios linfáticos)
Lisis de linfocitos Moquillo canino,
cólera porcino
Disminución de
mitosis en ganglios
linfáticos
radiación y fármacos
inmunodepresivos
Extravasación de
Linf.
Enfermedades
hepáticas crónicas
Enteritis
Otras causas Corticosteroides y estrés
Valores de eosinofilos por encima del valor normal
(EOSINOFILIA)
Alergias Medicamentos
Hematológicas Síndromes mieloproliferativos
Infecciones Parasitosis
Otras causas Síndrome hipereosinofilico
Valores de basofilos por encima del valor normal
(BASOFILIA)
Endocrinas Hipotiroidismo
Hematológicas Leucemia basofilica
Otras causas Enfemedad respiratoria crónica
Valores de monocitos por encima del valor normal
(MONOCITOSIS)
Infecciones Tuberculosis, brucelosis,
I. micotica sistémica
I. por protozoarios
Hematológicas Leucemias monociticas
Anemia hemolítica o hemorragias
Otras causas Corticosteroides, stress
11. (perros, gatos y bovinos)
Procesos
supurativos
Destrucción de trombocitos
Exudado cavidad pleural y peritoneal
Piometra, retención de placenta
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR (VSG)
El principio básico de la velocidad de sedimentación eritrocitica es que la sangre en
esencia es una suspensión de elementos formes en el plasma; por lo tanto cuando se
coloca en un tubo perpendicular, los hematíes descienden por que son mas pesados que el
plasma, después de un cierto tiempo se forma un paquete de hematíes en el fondo.
UTILIDAD
Su determinación es útil para llevar el curso de enfermedades reumatoides, tuberculosis o
para evaluar la respuesta al tratamiento; por eso se considera una prueba inespecífica y no
diagnostica, solo indica que hay alteración, pero no nos permite conocer su origen, ni en
general su gravedad
FASES DE LA VSG
Agregación
Sedimentación
Concentración
MUESTRA: Sangre total (EDTA) O sangra capilar
PROCEDIMIENTO
1. Mezcle bien la sangre
2. se llena tubo de wintrobe hasta la señal usando una jeringa
3. se coloca el tubo en el soporte en posición vertical
4. se deja una hora
5. se lee en el tubo los mm que los eritrocitos han descendido
6. el resultado se da en mm por hora
INTERPRETACION DE RESULTADOS
AUMENTADO DISMINUIDO
Fisiológicas: embarazo, vejez y crecimiento
Patológicas: Anemias intensas - Hipotiroidismo
Procesos inflamatorios (artritis,
tuberculosis)
Infarto al miocardio - Infecciones
Insuficiencia renal - Infección
inflamatoria
Neoplasia o neuropatía maligna
Alteraciones congénitas eritrocitaria
Insuficiencia cardiaca congénita
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VSG
- Tendencia de los eritrocitos a formar pilas de monedas
- Tamaño y formas de las células
- Hipercolesterolemia ( directamente proporcional)
- Alteración en la proteínas plasmáticas:
Fibrinogeno y Globulinas (directamente proporcional)
Albúminas (inversamente proporcional)
- Limpieza e inclinación del tubo
- Burbujas de aire
- Vibraciones
12. - Diámetro del tubo (2ml)
- Hemólisis
- Temperatura ( la viscosidad aumenta VSG)
- Concentración y tipo de anticoagulante: citrato de sodio encoge las células aumenta la VSG (perros y
humanos)
- Tiempo: 6 horas (to ambiente) y 24 horas (refrigeración) -EDTA
EVALUACION MORFOLOGICA DE LAS CELULAS SANGUINEAS
Es un procedimiento diagnostico de gran valor por que suministra información
sobre:
El estado de las células sanguíneas
Presencia de células inmaduras
Anomalías morfológicas de los mismas
MUESTRA: Sangre total (EDTA) O sangra capilar
PROCEDIMIENTO
1. realizar el extendido de sangre
2. teñir con wright
3. observar al microscopio con objetivo de inmersión (100x): hacer un barrido por la placa para evaluar la
morfología, tamaño y coloración de los tres grupos de células
CELULAS OBSERVADAS NORMALMENTE EN EXTENDIDOS DE SANGRE