2. El diagnostico microscópico de Parásitos está
basado en la identificación de los parásitos
coloreados libres (gota gruesa) o intracelulares en
el eritrocito (extendido fino). Los parásitos se
identifican por su forma y por la coloración
diferencial de sus componentes, es decir,
citoplasma, cromatina y pigmento, y se deben
distinguir de los elementos de la sangre, de otros
microorganismos sanguíneos y de
microorganismos o artefactos que puedan estar
presentes en la lámina o en el colorante.
3. Las coloraciones de Giemsa y de
Wright tienen colorantes ácidos
(eosina) y básicos (azul de
metileno) que colorean los
componentes celulares acidofilicos
y basofilicos, respectivamente. Así
tenemos, que la gota gruesa es
más sensible y el extendido fino es
más específico. En el laboratorio
clínico se recomienda la utilización
de ambas muestras en una sola
lámina.
4. Gradilla de Tinción
4 Portaobjetos de 25x75 mm
Lancetas
Aceite de Inmersión
Colorante Wright
Colorante Giemsa
Muestra Biológica con EDTA
(opcional).
5. Realizar la punción capilar (se puede
realizar también venosa, aunque no
se requiere de mucha sangre).
Colocar una gota en un portaobjetos
y con el ancho de otro hacer el
extendido de sangre.
En otro portaobjetos, colocar una gota
gruesa y hacer un cuadrado de 1.5 mm.
Dejar secar las 2 muestras
6. Colocamos la gota gruesa en la gradilla
de tinción, en posición horizontal.
Para fijar la muestra cubrimos el
porta con metanol durante 3 minutos.
Escurrimos y lo dejamos secar al aire.
Se cubre el portaobjetos con el
colorante Giemsa, dejándolo
actuar de 10-15 minutos.
Escurrimos y lavamos con agua
destilada y se deja secar. Posteriormente
se le coloca una gota de aceite de
inmersión y se observa al microscopio.
7. Teñir el frotis con 2.5 ml de
colorante Wright por 5 minutos
Sin tirar el colorante, añadir
2ml de Solución de Buffer con
pH de 6.8 y dejarlo reposar
por 6 minutos
Homogeneizar soplando con
una pipeta en forma de zigzag
Enjuagar con abundante
agua destilada y observar
al microscopio.
8. Es identificar parásitos sanguíneos. Principalmente
podemos encontrar Plasmodium spp, Leishmania
spp, Tripanozoma cruzi, Toxoplasma Gondii y las
Micro filarias.
El resultado debería ser negativo. Cuando no
lo es, se vuelve a realizar la prueba y/o realizar
otro tipo de examen para comprobar si es
positivo o fue un error del técnico.