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Universidad Nacional Autónoma de México

         Escuela Nacional Preparatoria N° 2 “Erasmo Castellanos Quinto”

                                   Práctica N° 2

             Determinación de la Velocidad de Reacción de la Catalasa.




Materia: Biología V

Profesor: Pablo González Yoval

Grupo: 604

Integrantes:

      Olivera López Ramses
      Reyna González Emmanuel
      Sánchez García Nancy Donají
      Torres Ramírez Laura Maricela
      Vargas López Fernanda Amairani
      Zavala Baca Diana Ildegar




               Fecha de entrega: miércoles 23 de Noviembre de 2011

                              Ciclo escolar: 2011-2012




                                                                          1
Practica No. 2 Determinación de la Velocidad de Reacción de la Catalasa

Introducción

La mayoría de las veces, las enzimas pasan inadvertidas cuando se estudia los
procesos metabólicos del organismo, por eso es que, nosotros nos tomamos la
tarea de demostrar la importancia de las enzimas en el organismo, en este caso
de la catalasa, y profundizar un poco las reacciones que se llevan a cabo
mediante cálculos matemáticos.

Primero definiremos que es la catalasa y su función. “La catalasa es una enzima
que se encienta en las células de los tejidos animales y vegetales. La función de la
catalasa en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se
forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H 2O2. La catalasa
aumenta la velocidad de la descomposición del peróxido de hidrógeno
aproximadamente 1000 millones de veces.” (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 105).

Pero, ¿qué es el peróxido de hidrógeno? “Es un líquido transparente e incoloro; es
agua con una molécula extra de oxígeno: H2O2.El peróxido de hidrógeno, también
llamado, agua oxigenada, es uno de los productos del metabolismo celular en
diversos organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida
en agua y oxígeno por la enzima catalasa.” (Devlin, 1999, p. 140).

Ahora, sabiendo esto, la descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y
oxígeno queda como se muestra en la Figura 1.



 Figura 1: Reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno. Melo, V.
 Cuamatzi, O. (2004).


“Todas las enzimas son proteínas, por lo tanto, todas las enzimas sufren una
desnaturalización, que son cambios ambientales o los tratamientos químicos que
pueden causar una desorganización en la conformación nativa de la proteína, con
la pérdida concomitante de la actividad biológica. Como la conformación nativa
sólo es estable de manera marginal. La energía necesaria para causar la
desnaturalización es con frecuencia pequeña.” (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 98).

“La catalasa tiene una Km (Son unidades de concentración que representan la
cantidad de sustrato necesaria para fijarse a la mitad de la enzima disponible y
producir la mitad de la velocidad máxima. El subíndice “m” se refiere a Michaeli-
Menteln como reconocimiento a sus esfuerzos de investigación. Como una
aproximación puede considerarse que el valor de Km representa la concentración

                                                                                  2
del sustrato en una célula viva) alta para el H2O2, por tanto, su efecto es limitado y
sólo puede ejercer su función bajo condiciones donde los niveles de H 2O2 están
particularmente elevados.” (Mamposo, 1998).

“La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por
enzimas. Estos estudios proporcionan información directa acerca del mecanismo
de la reacción catalítica y de la especificidad del enzima. La velocidad de una
reacción catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, ya que en
muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima. La velocidad puede
determinarse bien midiendo la aparición de los productos o la desaparición de los
reactivos.” (Devlin, 1999, p. 160)

“La relación entre la velocidad y la concentración de los reactivos puede
expresarse mediante una ecuación muy simple. Para escribir estas reacciones se
utilizan constantes de velocidad (simbolizadas por k).Un valor exponencial de 1
significa que la velocidad de reacción incrementa en forma lineal con la
concentración del reactivo, doblándose con cada duplicación en la concentración
del reactivo. Esta situación se denomina cinética de primer orden” (Bohinsk, 1991,
p. 181).



Objetivos

Diseño y elaboración de un dispositivo que nos permita calcular la velocidad de
reacción de la catalasa con agua oxigenada (H2O2).

Determinar la velocidad de reacción de la catalasa con agua oxigenada (H2O2).



Metodología.

Para realizar esta práctica necesitaremos conocer dos procedimientos.

1. Elaboración del dispositivo.

2. Procedimientos de la reacción química entre el hígado de pollo y el peróxido de
hidrógeno.

   Comenzaremos con el desarrollo y elaboración del dispositivo:

   1. Primero se requiere una manguera de aproximadamente 54 cm. que
      graduaremos con ayuda de una jeringa, agregando poco a poco un mililitro



                                                                                    3
de agua. Dejaremos 3 cm de manguera sin graduar. A partir del tercer
      centímetro se hace la marca de 0 ml, graduar del cero en adelante.

   2. Necesitaremos un recipiente con tapa (recipiente 1), esta última con 2
      perforaciones del tamaño de la manguera, en uno de los hoyos se insertara
      la manguera graduada sólo dejando adentro del recipiente los 3 cm que no
      se graduaron, dejando la marca de 0 ml a la misma altura de la tapa del
      contenedor. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor de la
      manguera con plastilina o silicón. Para sostener el peso de la manguera, se
      pegará un palito de bandera a la superficie de la tapa del contenedor y con
      cinta adhesiva transparente pegar el palito a la manguera.

   3. En la segunda perforación se insertará una manguera más corta de 12 cm
      aproximadamente sin graduar, sólo se dejaran dentro del contenedor 1ó 2
      cm de la manguera. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor
      de la manguera con plastilina o silicón.

   4. A través de la manguera corta, se introducirá al recipiente, agua con
      colorante (cualquier color, en este caso rosa) con ayuda de una jeringa,
      puede ser la misma que se empleó para graduar la manguera de 54 cm. Se
      debe llenar el contenedor hasta el tope, para que el agua coloreada llegue a
      la altura de la marca de 0 ml de la otra manguera.

   5. Necesitaremos otro recipiente (recipiente 2), igual al primero, con tapa y
      ésta a su vez con dos perforaciones, una del tamaño de la manguera de 12
      cm y otra del tamaño de una tapa de goma de tubo de ensayo. El extremo
      libre de la manguera corta sin graduar ya conectada al primer contenedor,
      se conectara a la perforación de la tapa del segundo recipiente, sellando de
      igual modo, para evitar fugas, con plastilina. El la perforación restante de la
      tapa del segundo recipiente, se colocara un tapón de goma de tubo de
      ensayo, sellando con plastilina las posibles salidas de aire.

   6. En el segundo recipiente se colocara en su interior el hígado de pollo, y con
      una jeringa (con aguja), se inyectara el agua oxigenada a través del tapón
      de goma.


    Ahora se describirá el proceso a realizar para efectuar la reacción química, por
medio de la cual se obtendrá el volumen de oxígeno que desplazara el mismo
volumen de agua, para que pueda ser medido.


                                                                                   4
1. Primero se necesita un hígado de pollo macerado. Con ayuda de una
      báscula se pesaran 10 gramos de hígado de pollo macerado.
   2. Ahora se depositaran los 10 gramos de hígado de pollo macerado en el
      recipiente 2, (aquel que en su tapa tiene el tapón de goma) y para hacer
      que los resultados no se vean afectados, se inyectara con una jeringa 10 ml
      de agua oxigenada, en proporción a los 10 gramos de hígado de pollo.
   3. Una vez iniciada la reacción, se comenzara a elevar un volumen de agua
      en el otro contenedor, subirá por la manguera graduada, este volumen de
      agua será proporcional al volumen de oxigeno que se desprende de la
      reacción que se efectuó en el recipiente 2. Una vez que se note la elevación
      de agua a través de la manguera graduada, es decir, el cambio de volumen,
      se comenzara a registrar cada dos segundos el volumen que se desplazó
      de agua a causa del volumen de oxígeno.
   4. Anota en una Tabla la cantidad de mililitros que se registraron a los 2,4, 6 u
      8 segundos que se inició la reacción.
   5. Repite los cuatro pasos anteriores unas 3 veces más, para hacer la prueba
      de que tus resultados son precisos.




                                                                           Manguera que
                                                                           transporta el
                                                                           O2 liberado


Manguera




            Frasco con 2
            orificios, con                           Frasco donde se
            agua                                     coloca el hígado
                                                     con H2O2


                                                                                  5
Resultados

Durante el desarrollo de la práctica se llevaron a cabo 4 muestras para así analizar
los resultados y obtener un promedio de las 4 pruebas.

A continuación se presentan los resultados de nuestra primera prueba (Véase
Tabla 1 y Figura 1). Los cuales de acuerdo a la medición de nuestro tiempo son
constantes.

                         Tabla 1.-Resultados de la primera prueba.

                              X                      Y
                              Tiempo (s)             [O2] (ml)
                                             2                    3
                                             4                    5
                                             6                    7
                                             8                    9

                     Nota: En esta Tabla se muestra la relación entre
                           los valores independientes (tiempo)
                                   y dependientes (mL).



       O2 (mL)                            Y [O2] (ml)
          10                                                                 y=x+1
                                                                              R² = 1
           9                                                  9
                                                                             Pendiente= X
           8
           7                                     7
           6
           5                          5
                                                                              Y [O2] (ml)
           4
                                                                              Linear (Y [O2] (ml))
           3             3
           2
           1
           0
               0     2            4          6            8           10   Tiempo (s)



                             Figura 1.- Gráfica de la prueba 1




                                                                                                     6
Como se muestra en la Figura 1, la ecuación de la recta es la siguiente:

                                          y= x+1

Y el valor del coeficiente de determinación es:

                                          R2= 1

  Como R2= 1 podemos concluir que nuestros resultados no tienen ningún error,
puesto que son precisos.

  Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta primera
prueba es:

                          Velocidad de reacción= 1 mL/s

Posteriormente se presentaran de igual forma los resultados obtenidos, pero ahora
en nuestra segunda prueba (véase Tabla 2 y Figura 2). En este caso como
podemos observar, los resultados expuestos tienen una diferencia mínima, en
cuanto a la concentración de O2.
                              Tabla 2.- Prueba 2 resultados

                             X                 Y
                             Tiempo (s)        [O2] (ml)
                                           2                3
                                           4                5
                                           6                8
                                           8               10
                        Nota: Se presentan los datos de la prueba 2
                de igual forma viendo relación entre tiempo y concentración.




                                                                                7
O2 (mL)                       Y [O2] (ml)
       12                                                           y = 1.2x + 0.5
                                                                      R² = 0.993
       10                                              10

        8                                    8

        6                                                                Y [O2] (ml)
                                  5
                                                                         Linear (Y [O2] (ml))
        4
                      3
        2

        0                                                        Tiempo (s)
            0     2           4          6         8        10


                          Figura 2.- Gráfica de los datos en prueba 2


Como podemos ver en la Figura 2 la línea no pasa por el centro de todos los
datos, en este caso nuestra precisión no fue tan exacta, pero al realizar nuestra
regresión nos pudimos dar cuenta de esto, también se observa en la ecuación de
la recta, puesto que si la comparamos con la ecuación de la Figura 1 podemos
darnos cuenta que es muy distinta.

Para obtener la ecuación debemos observar lo datos de en la Figura 2 con esto
llegando a:

                                        y= 1.2x+0.5

Y analizamos que: R2= 0.9931, (véase Figura 2) de igual modo el valor es cercano
a 1 por lo tanto no existió una gran diferencia entre la prueba 1.

Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en la segunda prueba
es:

                          Velocidad de reacción= 1.2 mL/s



A continuación se presentan los resultados de la prueba 3.




                                                                                                8
Tabla 3.- Presentación de datos en la prueba 3

                                   X          Y
                                   Tiempo (s) [O2] (ml)
                                            2             3
                                            4             5
                                            6             7
                                            8             9
                             Nota: Datos de la prueba 3 analizando
                           los segundos y los mL de concentración.


         O2 (mL)                      Y [O2] (ml)                 y=x+1
         10                                                        R² = 1
          9
          8
          7
          6
          5                                                          Y [O2] (ml)
          4
                                                                     Linear (Y [O2] (ml))
          3
          2
          1
          0
                                                                Tiempo (s)
              0     2          4        6       8         10


                     Figura 3.- Representación grafica de la prueba 3

Mediante el análisis correspondiente vemos que los datos de esta prueba en
general son iguales a los de la prueba uno, por lo consiguiente el razonamiento es
el mismo que en el primer caso.

                                    Ecuación: y= x+1

Y determinamos que R2= 1

  Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta tercera
prueba es:

                           Velocidad de reacción= 1 mL/s

  Con esto visualizando que es igual a la velocidad de la prueba 1.

Para finalizar se presentan los datos de la ultima prueba.



                                                                                            9
Tabla 4.- Datos de la última prueba

                                    X          Y
                                    Tiempo (s) [O2] (ml)
                                             2           3
                                             4           5
                                             6           7
                                             8          10
                   Nota: Datos correspondientes para la creación de la grafica
                               Concentración (mL) vs Tiempo (s)




         O2 (mL)                        Y [O2] (ml)                  y = 1.15x + 0.5
         12                                                            R² = 0.988

         10                                           10

          8
                                             7
          6                                                             Y [O2] (ml)
                                    5
          4                                                             Linear (Y [O2] (ml))
                           3
          2

          0
                                                                 Tiempo (s)
              0        2        4        6        8        10


                       Figura 4.- Representación grafica de la 4ª prueba.



   Al finalizar esta prueba observamos que de igual forma los datos observados en
la Figura 4 no son muy precisos, puesto que la recta de regresión no pasa por el
centro, vemos que R2= 0.988, concluyendo que no fue una gran variación puesto
que el valor se acerca a 1.

 Con el análisis de los datos (véase Figura 4) llegamos a la siguiente ecuación:

                                        y= 1.15x+0.5

  Siendo esta la ecuación de nuestra recta.

  Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta última
prueba es:


                                                                                               10
Velocidad de reacción= 1.15 mL/s

                Tabla 5.-Promedio de los datos de la concentración en las 4 pruebas

                    Prueba 1           Prueba 2           Prueba 3          Prueba 4        Promedio
Tiempo 2 seg.                      3                  3                3                3                  3
Tiempo 4 seg.                      5                  5                5                5                  5
Tiempo 6 seg.                      7                  8                7                7                7.25
Tiempo 8 seg.                      9              10                   9               10                 9.5
       Nota: Se muestra el promedio de los datos obtenidos durante nuestro experimento.

A continuación se muestra la grafica promedio del experimento:

            O2 (mL)                            Y [O2] (ml)
                                                                                  y = 1.087x + 0.75
           10                                                                         R² = 0.999
                                                                 9.5
            9
            8
            7                                         7.25
            6
            5                              5                                      Y [O2] (ml)
            4
                                                                                  Linear (Y [O2] (ml))
            3                  3
            2
            1
            0                                                                   Tiempo (s)
                0         2            4          6          8         10


                     Figura 5.- Representación grafica del promedio de los datos



  Con esto se puede concluir que el promedio de la velocidad de reacción es de:

                     Velocidad de reacción promedio = 1.0875 mL/s

  Obtenida de la ecuación presentada en la Figura5. Y Obteniendo una dispersión
de los datos (R2) cercana a 1, es decir, 0.9992 por lo tanto nuestros datos son
precisos en cuanto a nuestro experimento. Y observando que la línea de regresión
pasa por el centro en la mayoría de los puntos.
                              Tabla 6: Velocidad de Reacción en las pruebas

                                           Velocidad de Reacción
Prueba 1              Prueba 2                 Prueba 3       Prueba 4                          Promedio
1 mL/s                1.15 mL/s                1 mL/s         1.15 mL/s                         1.0875 mL/s

                                                                                                                11
Considerando la velocidad de reacción en las cuatro pruebas (véase Tabla 6),
nos damos cuenta que hay semejanza entre ellas, y el promedio es cercano a
todas las anteriores.

       Cálculo del valor teórico y comparación con el valor observado:

En la prueba 1 se obtuvo la siguiente ecuación:

                                              y= x+1

Donde:

1 es la pendiente de nuestra recta
x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,
1 es nuestro punto de intersección en la ordenada

Sustituyendo valores obtenemos:
                                Tabla 7.-Calculo de valor teórico

                            X             Y             valor
                                                        teórico
                            Tiempo (s) [O2] (ml)        y=x+1
                                     2              3               3
                                     4              5               5
                                     6              7               7
                                     8              9               9
 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta.

   Con el análisis de los resultados (véase Tabla 7) nos damos cuenta que
nuestros valores observados son exactos en relación con nuestros valores
teóricos.

  En la prueba 2 se obtuvo la siguiente ecuación:

                                         y= 1.2x+0.5

Donde:

1.2 es la pendiente de nuestra recta
x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,
0.5 es nuestro punto de intersección en la ordenada

Sustituyendo los valores obtenemos:




                                                                                             12
Tabla 8.-Prueba 2 (valor teórico)

                            X             Y             Valor
                                                        teórico
                            Tiempo (s) [O2] (ml)        y=1.2x+0.5
                                     2           3               2.9
                                     4           5               5.3
                                     6           8               7.7
                                     8         10               10.1
 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta.

   Mediante el análisis de la Tabla 8, nos dimos cuenta que existe una pequeña
diferencia entre los datos observados y los valores teóricos, pero sin caer en una
exageración puesto que solo son decimas las que varían.

En la prueba 3 se obtuvo la siguiente ecuación:

                                              y= x+1

Donde:

1 es la pendiente de nuestra recta
x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,
1 es nuestro punto de intersección en la ordenada



Sustituyendo valores obtenemos:
                          Tabla 9.-Prueba 3 calculo de valor teórico

                            X             Y             valor
                                                        teórico
                            Tiempo (s) [O2] (ml)        y=x+1
                                     2              3               3
                                     4              5               5
                                     6              7               7
                                     8              9               9
 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta.

  Con el análisis de la ecuación y el valor teórico (véase Tabla 9) nos damos
cuenta que nuestros valores observados son exactos en relación con nuestros
valores teóricos. Como lo analizamos en la prueba 1.

En la prueba 4 se obtuvo la siguiente ecuación:

                                        y= 1.15x+0.5

                                                                                             13
Donde:

1.15 es la pendiente de nuestra recta
x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica,
0.5 es nuestro punto de intersección en la ordenada.

Sustituyendo valores obtenemos:



                       Tabla 10.-Calculo de valor teórico ultima prueba

                            X            Y            Valor
                                                      teórico
                            Tiempo (s)   [O2] (ml)    y=
                                                      1.15x+0.5
                                     2            3           2.8
                                     4            5           5.1
                                     6            7           7.4
                                     8           10           9.7
 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta.

  Mediante los datos presentados en la Tabla 10, nos dimos cuenta que existe
una pequeña diferencia entre los datos observados y los valores teóricos, pero sin
caer en una exageración puesto que solo son decimas las que varían.

   Con la presentación de los datos y las graficas se finalizan los resultados.



Discusiones

En el caso de lo mencionado por Melo y Cuamatzi (2004, p. 105) estamos de
acuerdo ya que pudimos comprobar que el peróxido de hidrógeno efectivamente
es descompuesto por la catalasa liberando oxígeno ya que al hacer nuestro
experimento con nuestro catalímetro pudimos observar la reacción por medio de
burbujas (demostrándonos el oxígeno liberado).

De acuerdo con Devlin (1999, p.140) él nos dice que la enzima catalasa
transforma rápidamente el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Estamos de
acuerdo en lo que él nos menciona ya que al momento de macerar el hígado e
introducirlo a nuestro catalímetro y al suministrarle el agua oxigenada (H2O2)
pudimos observar en cuestión de segundos que esto es efectivamente verídico ya
que, como habíamos mencionado anteriormente, se observan burbujas
indicándonos la presencia de agua y la liberación de oxígeno.


                                                                                             14
Lo que mencionaremos posteriormente habla de lo que hicimos previamente a
nuestra práctica (hecha en casa), todo esto con el fin de explicar la
desnaturalización de las proteínas. De acuerdo a Melo y Cuamatzi (2004, p.98)
nos hablan de la desnaturalización de las proteínas que no es otra cosa que
quitarle las propiedades a las enzimas, en este caso siendo proteínas del hígado,
esta desnaturalización se lleva a cabo por cambios ambientales, en este caso, al
momento de la cocción del hígado dando lugar a la descomposición de las
enzimas. Esto lo pudimos comprobar al momento de poner el pedazo de hígado
en el recipiente con agua oxigenada ya que no observamos ningún cambio en éste
porque no había presencia de enzimas. Por lo tanto estamos de acuerdo con ellos
por lo ya mencionado.

  Todo lo anterior lo podemos explicar más amenamente de esta manera, con
nuestras palabras:

   1. De descomposición: 2H2O2      2H2O + O2 Esto es porque el peróxido de
      hidrógeno da lugar a la formación de agua y la liberación de oxígeno en
      estado gaseoso. La liberación del Oxígeno, es notable a la vista cuando se
      comienza a producir un burbujeo al contacto del agua oxigenada con el
      hígado de pollo.
   2. Irreversible: 2H2O2    2H2O + O2 La reacción es irreversible porque los
      productos que se obtienen, al pertenecer a las reacciones del metabolismo,
      son utilizadas prácticamente al instante, como productos de nuevas
      reacciones. En nuestro dispositivo, el oxígeno liberado, se desplazaba por
      completo hacia el otro recipiente, evitando así que volviera a formarse
      peróxido de hidrógeno una vez más.

  De acuerdo a Mamposo (1998) él nos dice que Km son unidades de
concentración que representan la cantidad de sustrato de una célula viva,
tomando al peróxido de hidrógeno como el sustrato y la enzima catalasa que se
encuentra en el hígado. La enzima catalasa entonces produce una velocidad
máxima con el peróxido de hidrógeno haciendo que la reacción se acelere.
Estamos de acuerdo con él ya que las condiciones del hígado fueron favorables
por la reacción que se hizo en cuestión de segundos, comprobando que fue una
reacción rápida y viendo de esta forma que Km fue alta.

     Según Devlin (1999. P. 160) la cinética enzimática estudia la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios proporcionan información
directa acerca del mecanismo de la reacción catalítica y de la especificidad del
enzima; estamos de acuerdo con esta idea ya que la enzima catalasa tiene una
especificidad que actúa sólo en la descomposición del peróxido de hidrógeno en


                                                                                15
agua y oxígeno, es decir, la enzima solamente tiene esa función. La velocidad de
una reacción catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, ya
que en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima; esto lo pudimos
verificar ya que el hígado a pesar de tener microorganismos u otras sustancias
más la enzima catalasa actuó para la descomposición de peróxido de hidrógeno.
La velocidad puede determinarse bien midiendo la aparición de los productos o la
desaparición de los reactivos; los observamos al momento de introducir el agua
oxigenada en el hígado de pollo ya que aparecieron los productos (el agua y el
oxígeno) y gracias al oxígeno liberado pudimos ver el desplazamiento del agua
con nuestro dispositivo como ayuda para medir la velocidad de la reacción de la
catalasa presente en el hígado.

   De acuerdo a Bohinsk (1991. P.181) el valor exponencial de 1 significa que la
velocidad de la reacción incrementa en forma lineal con la concentración del
reactivo; esto es verídico ya que en la primera Tabla de resultados podemos
comprobar que el valor de R es exactitud de los resultados (esto viene explicado
detalladamente en la parte de los “resultados”) por lo tanto el incremento es en
forma lineal con la concentración del reactivo. Esto lo pusimos a prueba con la
concentración de reactivo (peróxido de hidrógeno) con una proporcionalidad de
10ml de peróxido de hidrógeno a 10gr de hígado de pollo, pudiendo tener como
resultado valores exactos y precisos como se pudo verificar en la Tabla 1,
teniendo un resultado de una línea recta.

    Al finalizar nuestro trabajo y obteniendo los resultados ya mostrados, nos dimos
cuenta que el funcionamiento del dispositivo fue el correcto, puesto que los datos
tienen un rango de diferencia muy pequeño.

    Los datos en las 4 pruebas se mantienen de cierto modo constantes, ya que
inician en los primeros segundos con la misma liberación de oxigeno, poco a poco
mientras el tiempo avanza, en algunas de las pruebas hay una diferencia, pero no
tan grande para encontrar un problema en el dispositivo.

    Retomando los datos de las pruebas que realizamos tenemos que: En las
pruebas 1 y 2 se obtuvieron resultados semejantes (véanse Tablas 1 y 3), los
cuales son: En el segundo (tiempo) 2 la concentración de oxigeno fue de 3 ml,
conforme fue avanzando el tiempo la concentración lo hizo de manera
proporcional, ya que, en el segundo 4 la concentración fue de 5 ml, en cuanto al
segundo 6 la concentración fue de 7 ml, y por último en el segundo 8 fue de 9 ml.
Con esto nos damos cuenta que el funcionamiento del dispositivo hecho en casa y
el trabajo del equipo están siendo efectivos.




                                                                                 16
En las otras 2 pruebas que de igual forma son alternadas, se obtuvieron entre
ellas resultados semejantes (véanse Tablas 2 y 4), los cuales son: En el segundo
(tiempo) 2 la concentración de oxigeno es de 3 ml, en este caso la concentración
también aumento, aunque no directamente proporcional, pero tampoco tan
distante, ya que, en el segundo 4 la concentración fue de 5 ml, en el segundo 6 la
concentración fue de 8 y en la ultima medición que fue de 8 segundos fue de 10
ml.

   Como podemos ver en los resultados existe una constante en los primeros 4
segundos en todas las pruebas realizadas, puesto que, los 2 datos son iguales, en
cuanto a la diferencia de los dos restantes nos damos cuenta que existe una
pequeña separación entre ellos, quizá esto sea por error humano, es decir,
durante la observación de la reacción, el equipo puedo tomar mal un dato en
cuanto al tiempo, ya que, se llevaba acabo rápidamente.

   Los resultados obtenidos creemos que fueron los correctos en cuanto al uso y
objetivos del equipo, ya que quizá al hacer una comparación con otros equipos
exista una diferencia entre los resultados, pero esto implicara analizar diferentes
cosas, como puede ser, la cantidad usada de los reactivos, el funcionamiento de
su dispositivo, el tiempo medido, entre otras cosas.

   El uso y funcionamiento del dispositivo fue el correcto, así como los resultados
obtenidos, el equipo se siente satisfecho con los datos generados al finalizar la
practica, y por lo tanto se concluye que los datos son correctos en cuanto a los
factores utilizados. Podemos decir que el dispositivo casero se puede mejorar,
quizá para obtener resultados más exactos, pero realizando un serio análisis de lo
obtenido, estamos conformes con el funcionamiento.

    Además analizando las velocidades de reacción en las pruebas, la numero 2 y
la numero 4 son más rápidas pues como vemos en la Tabla 6, la comparación de
los resultados solo se da en dos casos, dándonos cuenta que la velocidad es
mayor en los casos donde el tiempo y la concentración no son tan proporcionales.

Conclusiones

En la unidad número 2: “Metabolismo” del curso de Biología V, el principal objetivo
es analizar todas aquellas reacciones químicas que el cuerpo necesita realizar
para poder funcionar correctamente y evitar el aumento en su grado de entropía.

El Metabolismo puede dividirse en anabolismo y catabolismo, y la reacción que se
llevó a cabo en esta práctica, es un claro ejemplo del catabolismo ya que se
descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Esta reacción es
exergónica pues libera más energía de la que se absorbe. En el experimento

                                                                                17
puede comprobarse porque, en el frasco donde se pone el hígado y el agua
oxigenada puede percibirse un aumento de temperatura.

Finalmente, gracias a este experimento, podemos comprobar que, de acuerdo a lo
que hemos tratado en clase sobre las enzimas, según lo que nos dice Bohinski,
C., 1991, son éstas las que se encargan de acelerar vertiginosamente la velocidad
de una reacción y además tienen la característica de poseer una estricta
especificidad, pues la catalasa reacciona exclusivamente con el peróxido de
hidrógeno.

Bibliografías:

Bohinsk, C. (1991) a. Bioquímica. México: Addison Wesley. pp. 174-181.

Bohinsk, C (1991) b. “Capitulo 5: Enzimas” en Bioquímica (5ta, ed.)
      México: Addison Wesley Longman

Devlin, T. (1999). Bioquímica. España: Reverté. pp. 140-160.

Mamposo, M. (1998). Centro de Investigaciones y Evaluaciones Biológicas (CIEB)
    en sitios Web. bvs.sld.cu. Recuperado el 18 de Noviembre de 2011, de
    http://bvs.sld.cu/revistas/end/vol10_1_99/end02199.htm

Melo, V., Cuamatzi, O. (2004), Bioquímica de los procesos Metabólicos.
      México: Reverté. pp. 98-105.




                                                                              18

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Velocidad de Reacción de la Catalasa

  • 1. Universidad Nacional Autónoma de México Escuela Nacional Preparatoria N° 2 “Erasmo Castellanos Quinto” Práctica N° 2 Determinación de la Velocidad de Reacción de la Catalasa. Materia: Biología V Profesor: Pablo González Yoval Grupo: 604 Integrantes:  Olivera López Ramses  Reyna González Emmanuel  Sánchez García Nancy Donají  Torres Ramírez Laura Maricela  Vargas López Fernanda Amairani  Zavala Baca Diana Ildegar Fecha de entrega: miércoles 23 de Noviembre de 2011 Ciclo escolar: 2011-2012 1
  • 2. Practica No. 2 Determinación de la Velocidad de Reacción de la Catalasa Introducción La mayoría de las veces, las enzimas pasan inadvertidas cuando se estudia los procesos metabólicos del organismo, por eso es que, nosotros nos tomamos la tarea de demostrar la importancia de las enzimas en el organismo, en este caso de la catalasa, y profundizar un poco las reacciones que se llevan a cabo mediante cálculos matemáticos. Primero definiremos que es la catalasa y su función. “La catalasa es una enzima que se encienta en las células de los tejidos animales y vegetales. La función de la catalasa en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H 2O2. La catalasa aumenta la velocidad de la descomposición del peróxido de hidrógeno aproximadamente 1000 millones de veces.” (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 105). Pero, ¿qué es el peróxido de hidrógeno? “Es un líquido transparente e incoloro; es agua con una molécula extra de oxígeno: H2O2.El peróxido de hidrógeno, también llamado, agua oxigenada, es uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida en agua y oxígeno por la enzima catalasa.” (Devlin, 1999, p. 140). Ahora, sabiendo esto, la descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno queda como se muestra en la Figura 1. Figura 1: Reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno. Melo, V. Cuamatzi, O. (2004). “Todas las enzimas son proteínas, por lo tanto, todas las enzimas sufren una desnaturalización, que son cambios ambientales o los tratamientos químicos que pueden causar una desorganización en la conformación nativa de la proteína, con la pérdida concomitante de la actividad biológica. Como la conformación nativa sólo es estable de manera marginal. La energía necesaria para causar la desnaturalización es con frecuencia pequeña.” (Melo, Cuamatzi, 2004, p. 98). “La catalasa tiene una Km (Son unidades de concentración que representan la cantidad de sustrato necesaria para fijarse a la mitad de la enzima disponible y producir la mitad de la velocidad máxima. El subíndice “m” se refiere a Michaeli- Menteln como reconocimiento a sus esfuerzos de investigación. Como una aproximación puede considerarse que el valor de Km representa la concentración 2
  • 3. del sustrato en una célula viva) alta para el H2O2, por tanto, su efecto es limitado y sólo puede ejercer su función bajo condiciones donde los niveles de H 2O2 están particularmente elevados.” (Mamposo, 1998). “La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios proporcionan información directa acerca del mecanismo de la reacción catalítica y de la especificidad del enzima. La velocidad de una reacción catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, ya que en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima. La velocidad puede determinarse bien midiendo la aparición de los productos o la desaparición de los reactivos.” (Devlin, 1999, p. 160) “La relación entre la velocidad y la concentración de los reactivos puede expresarse mediante una ecuación muy simple. Para escribir estas reacciones se utilizan constantes de velocidad (simbolizadas por k).Un valor exponencial de 1 significa que la velocidad de reacción incrementa en forma lineal con la concentración del reactivo, doblándose con cada duplicación en la concentración del reactivo. Esta situación se denomina cinética de primer orden” (Bohinsk, 1991, p. 181). Objetivos Diseño y elaboración de un dispositivo que nos permita calcular la velocidad de reacción de la catalasa con agua oxigenada (H2O2). Determinar la velocidad de reacción de la catalasa con agua oxigenada (H2O2). Metodología. Para realizar esta práctica necesitaremos conocer dos procedimientos. 1. Elaboración del dispositivo. 2. Procedimientos de la reacción química entre el hígado de pollo y el peróxido de hidrógeno. Comenzaremos con el desarrollo y elaboración del dispositivo: 1. Primero se requiere una manguera de aproximadamente 54 cm. que graduaremos con ayuda de una jeringa, agregando poco a poco un mililitro 3
  • 4. de agua. Dejaremos 3 cm de manguera sin graduar. A partir del tercer centímetro se hace la marca de 0 ml, graduar del cero en adelante. 2. Necesitaremos un recipiente con tapa (recipiente 1), esta última con 2 perforaciones del tamaño de la manguera, en uno de los hoyos se insertara la manguera graduada sólo dejando adentro del recipiente los 3 cm que no se graduaron, dejando la marca de 0 ml a la misma altura de la tapa del contenedor. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor de la manguera con plastilina o silicón. Para sostener el peso de la manguera, se pegará un palito de bandera a la superficie de la tapa del contenedor y con cinta adhesiva transparente pegar el palito a la manguera. 3. En la segunda perforación se insertará una manguera más corta de 12 cm aproximadamente sin graduar, sólo se dejaran dentro del contenedor 1ó 2 cm de la manguera. Sella las posibles fugas que puedan existir alrededor de la manguera con plastilina o silicón. 4. A través de la manguera corta, se introducirá al recipiente, agua con colorante (cualquier color, en este caso rosa) con ayuda de una jeringa, puede ser la misma que se empleó para graduar la manguera de 54 cm. Se debe llenar el contenedor hasta el tope, para que el agua coloreada llegue a la altura de la marca de 0 ml de la otra manguera. 5. Necesitaremos otro recipiente (recipiente 2), igual al primero, con tapa y ésta a su vez con dos perforaciones, una del tamaño de la manguera de 12 cm y otra del tamaño de una tapa de goma de tubo de ensayo. El extremo libre de la manguera corta sin graduar ya conectada al primer contenedor, se conectara a la perforación de la tapa del segundo recipiente, sellando de igual modo, para evitar fugas, con plastilina. El la perforación restante de la tapa del segundo recipiente, se colocara un tapón de goma de tubo de ensayo, sellando con plastilina las posibles salidas de aire. 6. En el segundo recipiente se colocara en su interior el hígado de pollo, y con una jeringa (con aguja), se inyectara el agua oxigenada a través del tapón de goma. Ahora se describirá el proceso a realizar para efectuar la reacción química, por medio de la cual se obtendrá el volumen de oxígeno que desplazara el mismo volumen de agua, para que pueda ser medido. 4
  • 5. 1. Primero se necesita un hígado de pollo macerado. Con ayuda de una báscula se pesaran 10 gramos de hígado de pollo macerado. 2. Ahora se depositaran los 10 gramos de hígado de pollo macerado en el recipiente 2, (aquel que en su tapa tiene el tapón de goma) y para hacer que los resultados no se vean afectados, se inyectara con una jeringa 10 ml de agua oxigenada, en proporción a los 10 gramos de hígado de pollo. 3. Una vez iniciada la reacción, se comenzara a elevar un volumen de agua en el otro contenedor, subirá por la manguera graduada, este volumen de agua será proporcional al volumen de oxigeno que se desprende de la reacción que se efectuó en el recipiente 2. Una vez que se note la elevación de agua a través de la manguera graduada, es decir, el cambio de volumen, se comenzara a registrar cada dos segundos el volumen que se desplazó de agua a causa del volumen de oxígeno. 4. Anota en una Tabla la cantidad de mililitros que se registraron a los 2,4, 6 u 8 segundos que se inició la reacción. 5. Repite los cuatro pasos anteriores unas 3 veces más, para hacer la prueba de que tus resultados son precisos. Manguera que transporta el O2 liberado Manguera Frasco con 2 orificios, con Frasco donde se agua coloca el hígado con H2O2 5
  • 6. Resultados Durante el desarrollo de la práctica se llevaron a cabo 4 muestras para así analizar los resultados y obtener un promedio de las 4 pruebas. A continuación se presentan los resultados de nuestra primera prueba (Véase Tabla 1 y Figura 1). Los cuales de acuerdo a la medición de nuestro tiempo son constantes. Tabla 1.-Resultados de la primera prueba. X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 4 5 6 7 8 9 Nota: En esta Tabla se muestra la relación entre los valores independientes (tiempo) y dependientes (mL). O2 (mL) Y [O2] (ml) 10 y=x+1 R² = 1 9 9 Pendiente= X 8 7 7 6 5 5 Y [O2] (ml) 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 3 2 1 0 0 2 4 6 8 10 Tiempo (s) Figura 1.- Gráfica de la prueba 1 6
  • 7. Como se muestra en la Figura 1, la ecuación de la recta es la siguiente: y= x+1 Y el valor del coeficiente de determinación es: R2= 1 Como R2= 1 podemos concluir que nuestros resultados no tienen ningún error, puesto que son precisos. Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta primera prueba es: Velocidad de reacción= 1 mL/s Posteriormente se presentaran de igual forma los resultados obtenidos, pero ahora en nuestra segunda prueba (véase Tabla 2 y Figura 2). En este caso como podemos observar, los resultados expuestos tienen una diferencia mínima, en cuanto a la concentración de O2. Tabla 2.- Prueba 2 resultados X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 4 5 6 8 8 10 Nota: Se presentan los datos de la prueba 2 de igual forma viendo relación entre tiempo y concentración. 7
  • 8. O2 (mL) Y [O2] (ml) 12 y = 1.2x + 0.5 R² = 0.993 10 10 8 8 6 Y [O2] (ml) 5 Linear (Y [O2] (ml)) 4 3 2 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura 2.- Gráfica de los datos en prueba 2 Como podemos ver en la Figura 2 la línea no pasa por el centro de todos los datos, en este caso nuestra precisión no fue tan exacta, pero al realizar nuestra regresión nos pudimos dar cuenta de esto, también se observa en la ecuación de la recta, puesto que si la comparamos con la ecuación de la Figura 1 podemos darnos cuenta que es muy distinta. Para obtener la ecuación debemos observar lo datos de en la Figura 2 con esto llegando a: y= 1.2x+0.5 Y analizamos que: R2= 0.9931, (véase Figura 2) de igual modo el valor es cercano a 1 por lo tanto no existió una gran diferencia entre la prueba 1. Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en la segunda prueba es: Velocidad de reacción= 1.2 mL/s A continuación se presentan los resultados de la prueba 3. 8
  • 9. Tabla 3.- Presentación de datos en la prueba 3 X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 4 5 6 7 8 9 Nota: Datos de la prueba 3 analizando los segundos y los mL de concentración. O2 (mL) Y [O2] (ml) y=x+1 10 R² = 1 9 8 7 6 5 Y [O2] (ml) 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 2 1 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura 3.- Representación grafica de la prueba 3 Mediante el análisis correspondiente vemos que los datos de esta prueba en general son iguales a los de la prueba uno, por lo consiguiente el razonamiento es el mismo que en el primer caso. Ecuación: y= x+1 Y determinamos que R2= 1 Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta tercera prueba es: Velocidad de reacción= 1 mL/s Con esto visualizando que es igual a la velocidad de la prueba 1. Para finalizar se presentan los datos de la ultima prueba. 9
  • 10. Tabla 4.- Datos de la última prueba X Y Tiempo (s) [O2] (ml) 2 3 4 5 6 7 8 10 Nota: Datos correspondientes para la creación de la grafica Concentración (mL) vs Tiempo (s) O2 (mL) Y [O2] (ml) y = 1.15x + 0.5 12 R² = 0.988 10 10 8 7 6 Y [O2] (ml) 5 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 2 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura 4.- Representación grafica de la 4ª prueba. Al finalizar esta prueba observamos que de igual forma los datos observados en la Figura 4 no son muy precisos, puesto que la recta de regresión no pasa por el centro, vemos que R2= 0.988, concluyendo que no fue una gran variación puesto que el valor se acerca a 1. Con el análisis de los datos (véase Figura 4) llegamos a la siguiente ecuación: y= 1.15x+0.5 Siendo esta la ecuación de nuestra recta. Con esto podemos determinar que la velocidad de reacción en esta última prueba es: 10
  • 11. Velocidad de reacción= 1.15 mL/s Tabla 5.-Promedio de los datos de la concentración en las 4 pruebas Prueba 1 Prueba 2 Prueba 3 Prueba 4 Promedio Tiempo 2 seg. 3 3 3 3 3 Tiempo 4 seg. 5 5 5 5 5 Tiempo 6 seg. 7 8 7 7 7.25 Tiempo 8 seg. 9 10 9 10 9.5 Nota: Se muestra el promedio de los datos obtenidos durante nuestro experimento. A continuación se muestra la grafica promedio del experimento: O2 (mL) Y [O2] (ml) y = 1.087x + 0.75 10 R² = 0.999 9.5 9 8 7 7.25 6 5 5 Y [O2] (ml) 4 Linear (Y [O2] (ml)) 3 3 2 1 0 Tiempo (s) 0 2 4 6 8 10 Figura 5.- Representación grafica del promedio de los datos Con esto se puede concluir que el promedio de la velocidad de reacción es de: Velocidad de reacción promedio = 1.0875 mL/s Obtenida de la ecuación presentada en la Figura5. Y Obteniendo una dispersión de los datos (R2) cercana a 1, es decir, 0.9992 por lo tanto nuestros datos son precisos en cuanto a nuestro experimento. Y observando que la línea de regresión pasa por el centro en la mayoría de los puntos. Tabla 6: Velocidad de Reacción en las pruebas Velocidad de Reacción Prueba 1 Prueba 2 Prueba 3 Prueba 4 Promedio 1 mL/s 1.15 mL/s 1 mL/s 1.15 mL/s 1.0875 mL/s 11
  • 12. Considerando la velocidad de reacción en las cuatro pruebas (véase Tabla 6), nos damos cuenta que hay semejanza entre ellas, y el promedio es cercano a todas las anteriores. Cálculo del valor teórico y comparación con el valor observado: En la prueba 1 se obtuvo la siguiente ecuación: y= x+1 Donde: 1 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 1 es nuestro punto de intersección en la ordenada Sustituyendo valores obtenemos: Tabla 7.-Calculo de valor teórico X Y valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y=x+1 2 3 3 4 5 5 6 7 7 8 9 9 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. Con el análisis de los resultados (véase Tabla 7) nos damos cuenta que nuestros valores observados son exactos en relación con nuestros valores teóricos. En la prueba 2 se obtuvo la siguiente ecuación: y= 1.2x+0.5 Donde: 1.2 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 0.5 es nuestro punto de intersección en la ordenada Sustituyendo los valores obtenemos: 12
  • 13. Tabla 8.-Prueba 2 (valor teórico) X Y Valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y=1.2x+0.5 2 3 2.9 4 5 5.3 6 8 7.7 8 10 10.1 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. Mediante el análisis de la Tabla 8, nos dimos cuenta que existe una pequeña diferencia entre los datos observados y los valores teóricos, pero sin caer en una exageración puesto que solo son decimas las que varían. En la prueba 3 se obtuvo la siguiente ecuación: y= x+1 Donde: 1 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 1 es nuestro punto de intersección en la ordenada Sustituyendo valores obtenemos: Tabla 9.-Prueba 3 calculo de valor teórico X Y valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y=x+1 2 3 3 4 5 5 6 7 7 8 9 9 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. Con el análisis de la ecuación y el valor teórico (véase Tabla 9) nos damos cuenta que nuestros valores observados son exactos en relación con nuestros valores teóricos. Como lo analizamos en la prueba 1. En la prueba 4 se obtuvo la siguiente ecuación: y= 1.15x+0.5 13
  • 14. Donde: 1.15 es la pendiente de nuestra recta x es el tiempo o la abscisa de nuestra grafica, 0.5 es nuestro punto de intersección en la ordenada. Sustituyendo valores obtenemos: Tabla 10.-Calculo de valor teórico ultima prueba X Y Valor teórico Tiempo (s) [O2] (ml) y= 1.15x+0.5 2 3 2.8 4 5 5.1 6 7 7.4 8 10 9.7 Nota: Comparación de los datos observados y los datos teóricos según la ecuación de la recta. Mediante los datos presentados en la Tabla 10, nos dimos cuenta que existe una pequeña diferencia entre los datos observados y los valores teóricos, pero sin caer en una exageración puesto que solo son decimas las que varían. Con la presentación de los datos y las graficas se finalizan los resultados. Discusiones En el caso de lo mencionado por Melo y Cuamatzi (2004, p. 105) estamos de acuerdo ya que pudimos comprobar que el peróxido de hidrógeno efectivamente es descompuesto por la catalasa liberando oxígeno ya que al hacer nuestro experimento con nuestro catalímetro pudimos observar la reacción por medio de burbujas (demostrándonos el oxígeno liberado). De acuerdo con Devlin (1999, p.140) él nos dice que la enzima catalasa transforma rápidamente el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Estamos de acuerdo en lo que él nos menciona ya que al momento de macerar el hígado e introducirlo a nuestro catalímetro y al suministrarle el agua oxigenada (H2O2) pudimos observar en cuestión de segundos que esto es efectivamente verídico ya que, como habíamos mencionado anteriormente, se observan burbujas indicándonos la presencia de agua y la liberación de oxígeno. 14
  • 15. Lo que mencionaremos posteriormente habla de lo que hicimos previamente a nuestra práctica (hecha en casa), todo esto con el fin de explicar la desnaturalización de las proteínas. De acuerdo a Melo y Cuamatzi (2004, p.98) nos hablan de la desnaturalización de las proteínas que no es otra cosa que quitarle las propiedades a las enzimas, en este caso siendo proteínas del hígado, esta desnaturalización se lleva a cabo por cambios ambientales, en este caso, al momento de la cocción del hígado dando lugar a la descomposición de las enzimas. Esto lo pudimos comprobar al momento de poner el pedazo de hígado en el recipiente con agua oxigenada ya que no observamos ningún cambio en éste porque no había presencia de enzimas. Por lo tanto estamos de acuerdo con ellos por lo ya mencionado. Todo lo anterior lo podemos explicar más amenamente de esta manera, con nuestras palabras: 1. De descomposición: 2H2O2 2H2O + O2 Esto es porque el peróxido de hidrógeno da lugar a la formación de agua y la liberación de oxígeno en estado gaseoso. La liberación del Oxígeno, es notable a la vista cuando se comienza a producir un burbujeo al contacto del agua oxigenada con el hígado de pollo. 2. Irreversible: 2H2O2 2H2O + O2 La reacción es irreversible porque los productos que se obtienen, al pertenecer a las reacciones del metabolismo, son utilizadas prácticamente al instante, como productos de nuevas reacciones. En nuestro dispositivo, el oxígeno liberado, se desplazaba por completo hacia el otro recipiente, evitando así que volviera a formarse peróxido de hidrógeno una vez más. De acuerdo a Mamposo (1998) él nos dice que Km son unidades de concentración que representan la cantidad de sustrato de una célula viva, tomando al peróxido de hidrógeno como el sustrato y la enzima catalasa que se encuentra en el hígado. La enzima catalasa entonces produce una velocidad máxima con el peróxido de hidrógeno haciendo que la reacción se acelere. Estamos de acuerdo con él ya que las condiciones del hígado fueron favorables por la reacción que se hizo en cuestión de segundos, comprobando que fue una reacción rápida y viendo de esta forma que Km fue alta. Según Devlin (1999. P. 160) la cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios proporcionan información directa acerca del mecanismo de la reacción catalítica y de la especificidad del enzima; estamos de acuerdo con esta idea ya que la enzima catalasa tiene una especificidad que actúa sólo en la descomposición del peróxido de hidrógeno en 15
  • 16. agua y oxígeno, es decir, la enzima solamente tiene esa función. La velocidad de una reacción catalizada por un enzima puede medirse con relativa facilidad, ya que en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima; esto lo pudimos verificar ya que el hígado a pesar de tener microorganismos u otras sustancias más la enzima catalasa actuó para la descomposición de peróxido de hidrógeno. La velocidad puede determinarse bien midiendo la aparición de los productos o la desaparición de los reactivos; los observamos al momento de introducir el agua oxigenada en el hígado de pollo ya que aparecieron los productos (el agua y el oxígeno) y gracias al oxígeno liberado pudimos ver el desplazamiento del agua con nuestro dispositivo como ayuda para medir la velocidad de la reacción de la catalasa presente en el hígado. De acuerdo a Bohinsk (1991. P.181) el valor exponencial de 1 significa que la velocidad de la reacción incrementa en forma lineal con la concentración del reactivo; esto es verídico ya que en la primera Tabla de resultados podemos comprobar que el valor de R es exactitud de los resultados (esto viene explicado detalladamente en la parte de los “resultados”) por lo tanto el incremento es en forma lineal con la concentración del reactivo. Esto lo pusimos a prueba con la concentración de reactivo (peróxido de hidrógeno) con una proporcionalidad de 10ml de peróxido de hidrógeno a 10gr de hígado de pollo, pudiendo tener como resultado valores exactos y precisos como se pudo verificar en la Tabla 1, teniendo un resultado de una línea recta. Al finalizar nuestro trabajo y obteniendo los resultados ya mostrados, nos dimos cuenta que el funcionamiento del dispositivo fue el correcto, puesto que los datos tienen un rango de diferencia muy pequeño. Los datos en las 4 pruebas se mantienen de cierto modo constantes, ya que inician en los primeros segundos con la misma liberación de oxigeno, poco a poco mientras el tiempo avanza, en algunas de las pruebas hay una diferencia, pero no tan grande para encontrar un problema en el dispositivo. Retomando los datos de las pruebas que realizamos tenemos que: En las pruebas 1 y 2 se obtuvieron resultados semejantes (véanse Tablas 1 y 3), los cuales son: En el segundo (tiempo) 2 la concentración de oxigeno fue de 3 ml, conforme fue avanzando el tiempo la concentración lo hizo de manera proporcional, ya que, en el segundo 4 la concentración fue de 5 ml, en cuanto al segundo 6 la concentración fue de 7 ml, y por último en el segundo 8 fue de 9 ml. Con esto nos damos cuenta que el funcionamiento del dispositivo hecho en casa y el trabajo del equipo están siendo efectivos. 16
  • 17. En las otras 2 pruebas que de igual forma son alternadas, se obtuvieron entre ellas resultados semejantes (véanse Tablas 2 y 4), los cuales son: En el segundo (tiempo) 2 la concentración de oxigeno es de 3 ml, en este caso la concentración también aumento, aunque no directamente proporcional, pero tampoco tan distante, ya que, en el segundo 4 la concentración fue de 5 ml, en el segundo 6 la concentración fue de 8 y en la ultima medición que fue de 8 segundos fue de 10 ml. Como podemos ver en los resultados existe una constante en los primeros 4 segundos en todas las pruebas realizadas, puesto que, los 2 datos son iguales, en cuanto a la diferencia de los dos restantes nos damos cuenta que existe una pequeña separación entre ellos, quizá esto sea por error humano, es decir, durante la observación de la reacción, el equipo puedo tomar mal un dato en cuanto al tiempo, ya que, se llevaba acabo rápidamente. Los resultados obtenidos creemos que fueron los correctos en cuanto al uso y objetivos del equipo, ya que quizá al hacer una comparación con otros equipos exista una diferencia entre los resultados, pero esto implicara analizar diferentes cosas, como puede ser, la cantidad usada de los reactivos, el funcionamiento de su dispositivo, el tiempo medido, entre otras cosas. El uso y funcionamiento del dispositivo fue el correcto, así como los resultados obtenidos, el equipo se siente satisfecho con los datos generados al finalizar la practica, y por lo tanto se concluye que los datos son correctos en cuanto a los factores utilizados. Podemos decir que el dispositivo casero se puede mejorar, quizá para obtener resultados más exactos, pero realizando un serio análisis de lo obtenido, estamos conformes con el funcionamiento. Además analizando las velocidades de reacción en las pruebas, la numero 2 y la numero 4 son más rápidas pues como vemos en la Tabla 6, la comparación de los resultados solo se da en dos casos, dándonos cuenta que la velocidad es mayor en los casos donde el tiempo y la concentración no son tan proporcionales. Conclusiones En la unidad número 2: “Metabolismo” del curso de Biología V, el principal objetivo es analizar todas aquellas reacciones químicas que el cuerpo necesita realizar para poder funcionar correctamente y evitar el aumento en su grado de entropía. El Metabolismo puede dividirse en anabolismo y catabolismo, y la reacción que se llevó a cabo en esta práctica, es un claro ejemplo del catabolismo ya que se descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Esta reacción es exergónica pues libera más energía de la que se absorbe. En el experimento 17
  • 18. puede comprobarse porque, en el frasco donde se pone el hígado y el agua oxigenada puede percibirse un aumento de temperatura. Finalmente, gracias a este experimento, podemos comprobar que, de acuerdo a lo que hemos tratado en clase sobre las enzimas, según lo que nos dice Bohinski, C., 1991, son éstas las que se encargan de acelerar vertiginosamente la velocidad de una reacción y además tienen la característica de poseer una estricta especificidad, pues la catalasa reacciona exclusivamente con el peróxido de hidrógeno. Bibliografías: Bohinsk, C. (1991) a. Bioquímica. México: Addison Wesley. pp. 174-181. Bohinsk, C (1991) b. “Capitulo 5: Enzimas” en Bioquímica (5ta, ed.) México: Addison Wesley Longman Devlin, T. (1999). Bioquímica. España: Reverté. pp. 140-160. Mamposo, M. (1998). Centro de Investigaciones y Evaluaciones Biológicas (CIEB) en sitios Web. bvs.sld.cu. Recuperado el 18 de Noviembre de 2011, de http://bvs.sld.cu/revistas/end/vol10_1_99/end02199.htm Melo, V., Cuamatzi, O. (2004), Bioquímica de los procesos Metabólicos. México: Reverté. pp. 98-105. 18