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Chlamydia trachomatis   O DESAFIO DO DIAGNÓSTICO  LABORATORIAL Claudete Farina Seadi
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Introdu çã o
Mulheres :  corrimento, disúria, aumento da freqüência urinária,  dor pélvica,  sangramento após relações sexuais impacto no sistema reprodutivo feminino : 25% infecções não tratadas causam DIP 20% casos das DIP causam infertilidade 18% dor pélvica persistente 9%  gravidez ectópica facilitadora da carcinogênese cervical na gravidez:  parto prematuro, baixo peso, morte neonatal Introdu çã o *MMWR 2002, 51(RR15)
RN : afetados em  ~65 % quando a mãe é positiva (conjuntivite  ~40%  e pneumonia  ~25%) Homens:   1% das uretrites não tratadas  causam síndrome de Reiter  (uretrite, conjuntivite, artrite recorrente). Tracoma 150 milhões de pessoas / 6 milhões cegas (OMS) ,[object Object],Introdu çã o
Características da  C.trachomatis ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
 
Características da  C.trachomatis ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Epidemiologia *OMS , 2005  **NEJM,  vol. 349:2424-2430,2003
Epidemiologia ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Rev. Bras. Ginecol. Obstet. vol.30 no.12 Rio de Janeiro, 2008   Rev.Bras.Reumatol.vol.54/n5 São Paulo.2005
Epidemiologia ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],http://portal.saude.gov.br/portal/saude/profissional/visualizar_texto
Epidemiologia Weinmann Laboratório   Levantamento de dados de out / 2007 a out. /2008:  Biologia Molecular Total (n): 4128    Negativos: 3942 (95,4%)    Positivos: 186 (4,6%)
Epidemiologia   Sorologia    IgM:  n 13181  não reagentes :  13114 (99,5%)      reagentes :  67 (0,5%)    IgG:  n 18924  não reagentes :  10073 (53,3%)    reagentes :  8851 (46,7%)    IgA:  n 1399  não reagentes :  1096 (78,4%)    reagentes :  303 (21,6%)
Epidemiologia ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
NEJM,  vol. 349:2424-2430,2003 ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Epidemiologia
" Conhecimentos, Atitudes e Práticas na População Brasileira “ jovens  de  15 - 24 anos declararam: sexualmente ativos -  70%  iniciação sexual com menos de 15 anos - 36%  mais de 10 parcerias sexuais - 16% mais de 5 parcerias sexuais no último ano- 7%  PN-DST/Aids,  2004 Magnitude do problema
Magnitude do problema ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],PN-DST/Aids,  2004
Magnitude do problema ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],http://www.aids.gov.br/main.asp
Magnitude do problema ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],http://www.aids.gov.br/main.asp
Magnitude do problema ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Human Reproduction ,  Vol. 17, No. 6, 1431-1432, 2002
Magnitude do problema ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Human Reproduction , Vol. 17, No. 6, 1431-1432, 2002
Quando realizar testes de triagem ? ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Quando realizar testes de triagem? ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],NEJM,   vol. 349:2424-2430,2003 *Ann.Intern.Med 2007:147:128
Idade inferior ou igual à 25 anos, sexualmente ativas Acima de 25 anos, sexualmente ativas / fatores de risco* Vítimas de abuso sexual Reteste 3 a 4 meses após tratamento (reinfecções) *fatores de risco:  irregularidade no uso preservativos   troca de parceiro nos últimos 90 dias CDC &  Testes de Triagem   MMWR 2006, 55(RR1)
O que se espera de um teste de triagem? ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
  Principais métodos diagnóstico   ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Sensibilidade dos métodos de detecção direta Número de EB log ( Clin Microbiol Rev  199, 10:160-184)
Cultura Celular   ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
PCR ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
PCR ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
PCR ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Imunofluorescência  direta ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Anticorpo monoclonal (LPS) Célula infectada Anticorpo monoclonal (MOMP)
Pesquisa de anticorpos   ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Sexually Transmitted Infections  2008;84:79-80
Pesquisa de anticorpos ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Pesquisa de anticorpos ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Pesquisa de anticorpos ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],*Thomas, 2000 (HumanReproduction)
Imunofluorescência  indireta ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Black, 97 (Clin.microbiol.Review)
 
 
Controle de Qualidade -  titulação do conjugado (ajustar a quantidade fluorocromo à  potência da lâmpada) - concentração do conjugado permite equiparar sistemas  ópticos diferentes - soro de refêrencia que acompanha o Kit  - adequação do titulo do conjugado: uso de controles de  reatividade mínima  - padronização sistemática da leitura Imunofluorescência  indireta
Imunofluorescência  indireta ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],* Bas 98 (J.Clin.Microbiol)
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Enzimaimunoensaio
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Enzimaimunoensaio
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Enzimaimunoensaio
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Enzimaimunoensaio
Enzimaimunoensaio ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],J Clin Microbiol.  2002 February; 40(2): 584–587
Enzimaimunoensaio ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Clinical and Vaccine Immunology, June 2009, p. 835-843, Vol. 16, No. 6
Conclusões ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
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A clamídia e o desafio do diagnóstico laboratorial

  • 1. Chlamydia trachomatis O DESAFIO DO DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Claudete Farina Seadi
  • 2.
  • 3. Mulheres : corrimento, disúria, aumento da freqüência urinária, dor pélvica, sangramento após relações sexuais impacto no sistema reprodutivo feminino : 25% infecções não tratadas causam DIP 20% casos das DIP causam infertilidade 18% dor pélvica persistente 9% gravidez ectópica facilitadora da carcinogênese cervical na gravidez: parto prematuro, baixo peso, morte neonatal Introdu çã o *MMWR 2002, 51(RR15)
  • 4.
  • 5.
  • 6.  
  • 7.
  • 8.
  • 9.
  • 10.
  • 11. Epidemiologia Weinmann Laboratório Levantamento de dados de out / 2007 a out. /2008: Biologia Molecular Total (n): 4128 Negativos: 3942 (95,4%) Positivos: 186 (4,6%)
  • 12. Epidemiologia Sorologia IgM: n 13181 não reagentes : 13114 (99,5%) reagentes : 67 (0,5%) IgG: n 18924 não reagentes : 10073 (53,3%) reagentes : 8851 (46,7%) IgA: n 1399 não reagentes : 1096 (78,4%) reagentes : 303 (21,6%)
  • 13.
  • 14.
  • 15. " Conhecimentos, Atitudes e Práticas na População Brasileira “ jovens de 15 - 24 anos declararam: sexualmente ativos - 70% iniciação sexual com menos de 15 anos - 36% mais de 10 parcerias sexuais - 16% mais de 5 parcerias sexuais no último ano- 7% PN-DST/Aids, 2004 Magnitude do problema
  • 16.
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  • 20.
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  • 23. Idade inferior ou igual à 25 anos, sexualmente ativas Acima de 25 anos, sexualmente ativas / fatores de risco* Vítimas de abuso sexual Reteste 3 a 4 meses após tratamento (reinfecções) *fatores de risco: irregularidade no uso preservativos troca de parceiro nos últimos 90 dias CDC & Testes de Triagem MMWR 2006, 55(RR1)
  • 24.
  • 25.
  • 26. Sensibilidade dos métodos de detecção direta Número de EB log ( Clin Microbiol Rev 199, 10:160-184)
  • 27.
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  • 29.
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  • 35.
  • 36.
  • 37.  
  • 38.  
  • 39. Controle de Qualidade - titulação do conjugado (ajustar a quantidade fluorocromo à potência da lâmpada) - concentração do conjugado permite equiparar sistemas ópticos diferentes - soro de refêrencia que acompanha o Kit - adequação do titulo do conjugado: uso de controles de reatividade mínima - padronização sistemática da leitura Imunofluorescência indireta
  • 40.
  • 41.
  • 42.
  • 45.
  • 46.
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  • 48.
  • 49.