1. Le Virus de l’Hépatite Delta: Virus et Marqueurs Dr. Elyanne Gault Laboratoire de Microbiologie Hôpital Ambroise Paré Boulogne-Billancourt [email_address]
2. Virus satellite du Virus de l’Hépatite B Maladies graves du foie, aiguës ou chroniques Diagnostic difficile Traitement par l’Interféron- partiellement efficace Le Virus de l’Hépatite Delta
3. Le virus de l’Hépatite Delta HDV Virus défectif Satellite d’HBV 1977: Mario Rizzetto (Bonino, J Virol, 1986; Wang, Nature, 1986; Ryu, J Virol 1993) Ag HBs (Virus de l’hépatite B) sHD LHD
4. 1-1679 sens génomique ARN 1679 nt circulaire - polarité négative Le génome viral Homologie 70%
6. Les protéines du VHD LHD sHD aa 30 51 site de polymérisation torsadé 88 66 signal de localisation nucléaire riche en aa basiques 146 97 site de fixation à l’ARN riche en arginines 214 195 signal d’assemblage site d’isoprénylation DOMAINES FONCTIONS
7. NOYAU R CYTOPLASME Le cycle de réplication HDV AgHBs Hépatocyte AgHBs Transcription Réplication ADN ccc HBV GOLGI/RE
8. Le cycle de réplication HDV Récepteur hépatocyte non identifié (idem HBV…) HBV (AgHBs) est indispensable à la réplication de HDV MAIS la réplication de HBV est inhibée par la réplication de HDV In vivo - modèles animaux et patients) In vitro - sHD et LHD répriment les gènes des promoteurs Enh1 et Enh2 de HBV - LHD active le gène de d’inhibition de réplication de HBV MxA Rôle différencié des protéines delta sHD active la réplication virale LHD inhibe la réplication virale mais permet la maturation des virions et la production de particules infectieuses
9. Le cycle de réplication HDV Réplication via enzymes cellulaires (RNA pol) Pas d’action des inhibiteurs d’enzymes virales Inhibition de la réplication de HBV (LHD) Pas d’action des inhibiteurs du HBV (Lamivudine) Nécessité d’un niveau suffisant d’AgHBs R ôle potentiel des inhibiteurs de l’ADN ccc de HBV (Toxicité mitochondriale de la Clévudine) Etape finale clé (isoprénylation, interaction Ag HBs) R ôle potentiel des inhibiteurs de l’isoprénylation Intérêt du Ténofovir à définir
14. 100% des isolats HDV-5, -6, -7 et -8 correspondent à des patients nés en Afrique Variabilité génétique de HDV NIGERIA NIGER CHAD CENTRAL AFRICAN REPUBLIC S U D A N CAMEROON SÃO TOMÉ GABON C O N G O Z A I R E BURKINA FASO BENIN TOGO GHANA IVORY COAST LIBERIA SIERRA LEONE GUINEA GUINEA- BISSAU MAURITANIA SENEGAL GAMBIA M A L I WESTERN SAHARA MOROCCO A L G E R I A TUNISIA L I B Y A EGYPT ETHIOPIA S O M A L I A KENYA UGANDA MALAWI M O Z A M B I Q U E M A D A G A S C A R ZIMBABWE BOTSWANA SWAZILAND LESOTHO SOUTH AFRICA NAMIBIA ANGOLA Z A M B I A EQU. GUINEA RWANDA TANZANIA COMOROS DJIBOUTI MAOTTE MAURITIUS RÉUNION NORTH ATLANTIC OCEAN MEDITERRANEAN SEA GULF OF ADEN BURUNDI INDIAN OCEAN dFr48 dFr45 dFr1986 dFr2066 dFr910 dFr489 dFr2180 dFr73 dFr2055 dFr2204 dFr2301 dFr2154 dFr47 dFr2317 dFr1843 dFr2458 dFr2005 dFr2401 dFr1972 dFr69 dFr1953 dFr1594 SOUTH ATLANTIC OCEAN dFr48 dFr2020 dFr2502 dFr2072 dFr644 HDV-5 HDV-7 HDV-6 HDV-8
15. Variabilité génétique de HDV Makuwa et al, J Clin Microbiol 2008 16% femmes enceintes AgHBs+ sont infectées par HDV HDV-8 plus fréquent que HDV-1 NIGERIA NIGER CHAD CENTRAL AFRICAN REPUBLIC S U D A N CAMEROON GABON C O N G O Z A I R E BURKINA FASO BENIN TOGO GHANA IVORY COAST LIBERIA SIERRA LEONE GUINEA GUINEA- BISSAU MAURITANIA SENEGAL GAMBIA M A L I WESTERN SAHARA MOROCCO A L G E R I A TUNISIA L I B Y A EGYPT ETHIOPIA S O M A L I A KENYA UGANDA MALAWI M O Z A M B I Q U E M A D A G A S C A R ZIMBABWE BOTSWANA SWAZILAND LESOTHO SOUTH AFRICA NAMIBIA ANGOLA Z A M B I A RWANDA TANZANIA COMOROS DJIBOUTI MAOTTE MAURITIUS RÉUNION NORTH ATLANTIC OCEAN MEDITERRANEAN SEA GULF OF ADEN BURUNDI INDIAN OCEAN SOUTH ATLANTIC OCEAN GABON EQU. GUINEA
21. Epidémiologie de HDV en France Circulation de virus d’origine africaine Emergence de nouveaux génotypes en France Pouvoir pathogène des variants par rapport aux virus HDV-1 Diagnostic moléculaire des variants Association des variants HDV avec certains génotypes HBV (co-spéciations?) Origine géographique de HDV?
28. Marqueurs du suivi thérapeutique Suivi quantitatif de l’Ag HBs Zachou et al, Liver Int, 2009; Manesis et al, Antiviral Therapy, 2007 Recherche de l’ARN viral intra-hépatique PCR Qualitative (à Avicenne) : Technique maison « consensus » pour tous les génotypes connus Seuil de sensibilité 100 copies/mL PCR Quantitative: Technique maison « consensus » pour tous les génotypes connus Seuil de sensibilité 100 copies/mL - Linéarité: 10 3 à 10 9 copies/mL Apport essentiel des techniques moléculaires Intérêt secondaire des IgM Moins sensible que la PCR (faux négatifs) et moins spécifique de la réplication virale (faux positifs) Kits ELISA commerciaux
32. Protocoles thérapeutiques Efficacy of Peginterferon alpha-2b in Chronic Hepatitis delta: Relevance of Quantitative RT-PCR for Follow-Up C. Castelnau, F. Le Gal, M.P. Ripault, E. Gordien, M. Martinot, N. Boyer, B. Pham , P. Bedossa, P. Dény, P. Marcellin, E. Gault Hepatology, 2006, 4: 728-735 Service d’Hépatologie Inserm U481 Hôpital Beaujon P. Marcellin, C. Castelnau
33. OBJECTIFS - Evaluer l’efficacité et la tolérance d’un traitement de 12 mois par Interferon-PEG -2b chez 14 patients porteurs d’une hépatite chronique B-D. - Evaluer l’intérêt de la quantification de l’ARN-VHD dans le suivi et la réponse virologique
34.
35. Profils de réponse au traitement: REPONDEURS Charge virale (log 10 copies/mL sérum) Seuil de sensibilité: 2 log 10 copies/mL ALT (xN) 5 M41 T0 M6 M18 M12 M24 2 3 4 1 7 2 3 4 5 6 8
40. Treatment of chronic delta hepatitis with lamivudine vs lamivudine+interferon vs interferon C. Yurdaydin, et al J Viral Hep, 2008, 15: 314-321 Etude multicentrique (Turquie) C. Yurdaydin Protocoles thérapeutiques 39 patients (17 LAM, 14 LAM-IFN, 8 IFN) Suivi par PCR semi-quantitative (seuil de détection 100000copies/mL) Aucun intérêt à utiliser la lamivudine, même en association avec IFN
41. Resolution of chronic hepatitis delta after 1 year of combined therapy with PEG-IFN, tenofovir and emtricitabine Mansour W, Ducancelle A, Le Gal F, Le Guillou-Guillemette H, Abgueguen P, Pivert A, Calès P, Gordien E, Lunel F J Clin Virol 2009 Case report Protocoles thérapeutiques Homme 47 ans Dagestan CV HBV >9 log UI/mL CV HDV 5.6 log copies/mL Association PEG-IFN + tenofovir + emcitrabine (Viread) Clairance virale + séroconversion HBs après 10 mois de traitement
44. Conclusions Hépatite delta n’est pas une maladie en voie de disparition Attention aux populations migrantes : Afrique, Asie centrale, Europe de l’Est Utiliser le diagnostic moléculaire Pour détecter les infections actives (tests qualitatifs) Pour suivre l’efficacité d’un traitement (Test quantitatif) Variabilité génétique de HDV 20% des patients suivis en France ont génotype 5 à 8 Les tests moléculaires qui ne tiennent pas compte de la variabilité génétique risquent de rendre des « faux négatifs » Traitement de l’hépatite delta IFN-alfa Place du Ténofovir si réplication de HBV