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Profesor: Dr. Juan Carlos Munévar N



ERUPCIÓN DENTAL
      Postgrados Odontología

     María Fernanda Briceño
       María Isabel Trujillo
DEFINICIÓN

Proceso de migración del diente desde su sitio del desarrollo dentro
del hueso alveolar hasta su posición funcional en la cavidad oral.
(Massler y Schour 1941)


La erupción dental es el único proceso de desarrollo, en donde un
tejido semi-duro, el diente, debe escapar de su cripta, que es el
hueso alveolar donde está encerrado.
G. E. Wise The Biology of Tooth Eruption, J.Dent Res 77 (8) 1998

La erupción dental es un proceso complejo y regulado que invo

G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and genetic Determinants of tooth eru
TEORIAS DE LA
                                                                 ERUPCIÓN
                                                                  DENTAL


•     Teoría de la pulpa                             Presiones pulpares y crecimiento de la
                                                     dentina



    Herzberg y Schour (1941) removieron la pulpa en ratas y LA ERUPCIÓN NO
    FUE AFECTADA
    Herzbergs F. and Shour, I(1941) Effects of the removal of pulp and Hertwigs
    sheath on the euption of incisors in the albino rat. J. Dent. Res 20,264.




    Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 1-7 1988 EBSCO
    Media, Birmingham, AL 35233
TEORIAS DE LA
                                                                                         ERUPCIÓN
                                                                                          DENTAL

    •   Teoría de la elongación radicular                                                        Empujada por el crecimiento de
                                                                                                 las raíces
         Gowgiel en dientes de monos que fueron irradiados y eliminadas sus
         raíces, los dientes erupcionaron.
         Gowgiel, J.M. (1961) Eruption of irradiation-produced rootless teeth in monkeys. J.Dent. Res. 40, 538-547.




         Massler, Schour reportaron que ratas con deficiencia en su formación
         radicular, no afectaba la erupción.
         Massler, M and Shour, I. (1941) Studies in tooth development: Theories of eruption. Amer.J.Orthodont.,Oral Surg. 27,
         552-576.




Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 1-7 1988 EBSCO Media,
Birmingham, AL 35233
TEORIAS DE LA
                                                                       ERUPCIÓN
                                                                        DENTAL
                                                                         Nuevo hueso formado debajo de los
                                                                         dientes en erupción (sólo refleja
• Crecimiento del Hueso Alveolar
                                                                         movimiento no causa la erupción).
      Meyer, W. (1935) Meyer´s Normal Histology and Histogenesis of the Human Teeth and Associated Parts. Chap 14, pp
      237-248.
                                                                         Fuerzas contráctiles de los fibroblastos
• Teoría del Ligamento Periodontal                                       del L.P (fibras colágenas). Poca
                                                                         evidencia
      Berkovitz, B.K.B and Moxham, B.J and Newman, H.N. (1982). The periodontal ligament and physiological tooth
      movements.In: The Periodontal Ligament in Health and Disease. Chap. 10, pp 215-247.

                                                                      Canal gubernacular, los osteoclastos
• Teoría del Folículo Dental (F.D)
                                                                      generan una vía ensanchando el canal,
                                                                      existe evidencia que el F.D es requerido
                                                                      para la resorción ósea. Es la ACEPTADA
Wise, G.E, Marks, S.C. Jr. And Cahill, D.R (1985). Ultrastructural features of the dental follicle associated with formation of the
tooth eruption pathway in the dog. J.Oral Pathol. 14, 15-26.
Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 1-7 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL
TOOTH ERUPTION
A SYNTHESIS OF EXPERIMENTAL
       OBSERVATIONS
Sandy C. Marks, Jr 1
Jeffrey P. Gorski 2
Donald R. Cahill 3
Gary E Wise 4
The biological mechanisms of tooth eruption and root resorption
Edited by Z. Davidovitch, Pag 161-169
1988

- Department of Anatomy U of Massachusetts
- Department of Biochemistry and Molecular Biology. U of Missouri. Kansas City
- Mayo Medical School, Rochester, MN
- Texas College of Osteopathic medicine, Ft. Worth
ETAPAS DE LA
                                                            ERUPCIÓN
                                                             DENTAL

                                                            Fase Intraósea

      Erupción Prefuncional
                                                            Fase Supraósea




     Erupción Postfuncional


Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media,
Birmingham, AL 35233
ERUPCIÓN
                                                            PREFUNCIONAL
                                                              INTRAÓSEA




                                                                Resorción ósea y formación de
El diente emerge de su cripta ósea
                                                                hueso en lados opuestos.




Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO
Media, Birmingham, AL 35233
Estudios han demostrado que justo antes de la erupción dental de
premolares en los perros, una población de células mononucleares
aparece en la parte coronal del folículo dental.


                                            Preosteoclastos



                                             Resorción Ósea

Se ha demostrado que el Factor de Crecimiento Epidérmico (EFG), se une
a las células del Folículo Dental basal y acelera la proliferación celular
alrededor de los dientes
Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media,
Birmingham, AL 35233
ERUPCIÓN
                                                         PREFUNCIONAL
                                                          SUPRAÓSEA
                                                 Punta de la corona sobre el margen del Hueso
 Período de movimiento
                                                 Alveolar a su posición funcional

 Características:
 - Resorción continua
 - Fusión del Folículo Dental con el Epitelio Oral subyacente.
 - Crecimiento radicular continuo
 - Formación ósea debajo del diente en erupción




Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media,
Birmingham, AL 35233
ERUPCIÓN
                    POSTFUNCIONAL



- Proceso lento
- Continuo a través de la vida
- Consiste de componentes verticales y
horizontales del movimiento.
Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media,
Birmingham, AL 35233
THE BIOLOGY OF TOOTH
      ERUPTION

           G. E. Wise
           J.Dent Res 77 (8) 1998
INTRODUCCIÓN


   •   Folículo dental esencial para la erupción porque era el sitio de
       influjo de células mononucleares.

   •   Moléculas que potencian la erupción: TGF – B1, PTHrP (Hormona
       Partiroidea).

   •   Retículo estrellado se comunica con el folículo dental para iniciar la
       erupción.

   •   Los eventos celulares de la erupción en el molar de ratas coincidían
       con los del perro. Wise GE, Fan W(1989). J Dent Res 68:150-156.


G. E. Wise. J Dent Res 77(8) 1998.
•    EGF y su receptor se ubican temprano posnatalmente
     en el folículo y disminuía con el tiempo.

•    CSF – 1 se produjo por el foliculo y se aumenta
     posnatalmente y al final declina.


•    Erupción: Controlada por FD y SR.

•    C –Fos: dirige diferenciacion de las células
     mononucleares necesarias para una via de erupción.


    G. E. Wise. J Dent Res 77(8) 1998.
CONCLUSIONES


      •    Visión de la erupción dental como un proceso biológico no
           mecánico.

      •    El crecimiento celular, el movimiento celular, la apoptósis, la
           quimiotaxis también se deben considerar en erupción dental.




G. E. Wise. J Dent Res 77(8) 1998.
CELL TRACTION: IMPLICATION FOR
THE MECHANISM OF TOOTH ERUPTION
           A.K. Harris and J.J. Dmytryk
       Deparment of Biology and Periodontics
                School of Dentistry
                U of North Carolina


        Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
INTRODUCCIÓN

     • Partículas de plástico vidrio y otros materiales fueron
       puestos en cultivos celulares

     • Las células parecen ejercer fuerzas en estas partículas
       móviles

     • Silicona como substrato porque es inerte, esto elimina la
       objeción de que la distorsión se produce por fenómenos
       ajenos a las células (deshidratación, cambios
       bioquímicos, etc...)

Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
INTRODUCCIÓN

  • Los cultivos en superficies de silicona mostraron
     que las células acompañaban su movimiento
    con la generación de unas fuerzas que se
    transmiten al sustrato.

  • La fuerza de tracción de los fibroblastos.



Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
INTRODUCCIÓN


 • Alineando materiales de la matriz en
   estructuras anatómicas como cápsulas de
   órganos, tendones y ligamentos. Harris, A.K.
     Stopak,D. and Wuild, P.W. (1981) .

 • La tracción ejercida funciona como una
   banda rodante y mueve los elementos
   relacionados con la célula
 • Relación con la erupción
Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
MATERIALES Y
                                      METODOS

  •   Fibroblastos gingivales de rata
  •   Substrato de silicona en platos de Petri
  •   Tinción de fibroblastos
  •   Observados directamente en el cultivo
  •   Fotografías
  •   Filmaciones

Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
RESULTADOS


 • Se necesitaron 24 horas para que los fibroblastos se
   aplanaran y se extendieran en la superficie de cultivo

 • El grado de extendimiento de las células aumentó por
   los tres días siguientes y se vieron más aplanados

 • A los 4 o 5 días se vió un arrugamiento de la superficie
   del substrato semejante al visto en otros estudios

 • El arrugamiento se incrementó en los 20 días del
   experimento y varió entre células.
Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
RESULTADOS


      • Se grabaron las conductas de las células
        por periodos de 24 a 48 horas a la vez

      • Los fibroblastos de rata son más estáticos
        que otros vistos



Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
DISCUSIÓN


• Las células pueden ejercer tracción relativamente fuerte

• Con estas fuerzas las células pueden desplazar material
  extracelular

• Estas fuerzas actúan en la erupción del diente.



Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
DISCUSIÓN

 • Los fibroblastos pueden ejercer las fuerzas en las fibras
   colágenas que están unidas al diente

 • Control de la dirección




Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
RESULTADOS


    • Con la tinción se observaron complejas redes
      citoplasmáticas de contenido de actina

    • Fibras tensionadas y concentraciones de actina
      a lo largo de los márgenes de la célula

    • Las fibras tensionadas se orientaban paralelas
      al eje mayor de la célula
Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
Cellular, Molecular, and
      Genetic Determinants of
          Tooth Eruption.

G. E. Wise, S. Frazier-Bowers, R.N. D’Souza.

Crit. Rev. Oral Biol. Med. 13(4): 323-334   2002
RESORCIÓN
                                                                      ÓSEA

     La vía de erupción dental es un evento localizado en un tiempo dado y
     genéticamente programado, que no requiere presión del diente en erupción.
     Dado que el diente no erupcionado está encerrado en el hueso, la resorción
     ósea es la vía de erupción.
                                                       Resorción ósea, ensancha
                                                       este canal y permite que la
     Por el canal gubernacular de cada diente
                                                       corona se mueva a través
                                                       de éste y erupcione




G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, Molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption.
Cri.t Rev Oral Biol Med 13(4) 2002
ESTUDIO COTTON Y
                                                         GAINES
                                                                                      Los dientes se forman
 Roedores Osteopetróticos                             Tinción
                                                                                      pero no erupcionan
                                                      Fosfatasa Ácida Tartrato-Resistente




                                                              Nº reducidos de
                                                               osteoclastos


                                                       Cotton WR, Gaines JF (1974). Unerupted
                                                       dentition secondary to
                                                       congenital osteopetrosis in the Osborne-
                                                       Mendel rat. Proc Soc
                                                       Exp Biol Med 146:554-561.

G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, Molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption.
Crit Rev. Oral Biol Med 13(4) 2002
FOLICULO
                                                                         DENTAL
     ORIGEN MESENQUIMATOSO
       Es un saco de tejido conectivo libre que rodea el órgano del esmalte de cada
       diente
       Estudios demostraron que una de las funciones del FD en la erupción dental



              Servir como tejido blanco para atraer células mononucleares


                   Sitio de depósito en donde estas células se fusionan y forman
                                osteoclastos y así generar la resorción
                         El folículo dental es determinante en la erupción
G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption.
Crit Rev Oral Biol Med 13(4) 2002
ETAPAS DEL
                                              DESARROLLO




www.ucsg.edu.ec/.../datos/embriologia19.htm
VÍAS DE SEÑALIZACIÓN
MOLÉCULAS
                                                           INVOLUCRADAS
                                                           EN LA ERUPCIÓN
  Por ser un evento programado, está dado por moléculas que regulan el proceso.




   Factores de Crecimiento Epidérmicos ( EGF ) Descrito por Cohen 1962
                                                                  Cohen S (1962). Isolation of a mouse submaxillary gland protein
                                                                  accelerating incisor eruption and eyelid opening in the newborn
                                                                  animal. J Biol Chem 237:1555-1562.


        Efectos EFG Y CSF-1 diferentes acciones sobre la erupción dental


     Acelera erupción             Acelera erupción
     incisivos                    molares

G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and genetic Determinants of tooth eruption.
Crit rev Oral Biol Med 13(4) 2002
MOLÉCULAS
                                                         INVOLUCRADAS
                                                         EN LA ERUPCIÓN

  La señalización paracrina de las moléculas en el retículo estrellado (SR)
  Afecta la expresión del gen de las moléculas en el folículo dental (FD).



Receptor para IL- alfa en el (DF)                      TGF-BETA1 (SR) / EGF (DF).


                                         Mejorar expresión de los genes CSF-1 , MCP-1


        El retículo estrellado (SR)                 En el órgano del esmalte tiene un papel
                                                    Regulador en la erupción.

G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, Molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption.
Crit rev Oral Biol Med 13(4) 2002
PAPEL DEL
                                                            OSTEOCLASTO EN LA
                                                             ERUPCIÓN DENTAL

   El Osteoclasto                       Deriva de la célula madre hematopoyética

                                                                                  Monocitos




                                                                               Pre-osteoclastos


                                                   Fusión y                         Proliferación y
              RESORCIÓN
                                                  agregación                        diferenciación

G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and genetic Determinants of tooth eruption.
Crit rev Oral Biol Med 13(4) 2002
MOLÉCULAS
                                                      INVOLUCRADAS
                                                      EN LA ERUPCIÓN
      PAPEL DE LOS OSTEOCLASTOS EN LA ERUPCION DENTAL
   CSF-1 y MCP-1
  Son moléculas secretadas que actúan como quimioquinas para reclutar
  células mononucleares en el folículo dental.

   Las células del folículo dental las secretan

Diferentes moléculas pueden aumentar la expresión tanto de CSF-1 como de MCP-1



                                         Favorece la erupción
Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol
Med. 13(4):323-334 (2002)
MOLÉCULAS
                                                 INVOLUCRADAS
                                                 EN LA ERUPCIÓN

                        La erupción requiere progenitores



                          Osteoclásticos       Osteoblásticos


                            Para formar una vía de erupción


                                  El diente erupciona


Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION
. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
FORMACIÓN OSTEOCLÁSTICA DURANTE LA
                                                   ERUPCIÓN
                                     RANKL
                                                 OPG
               HUESO
               ALVEOLAR                 OB




             FOLICULO           EGF
              DENTAL
                                                            C-Fos



                                                            CSF-1

              RETICULO
              ESTRELLADO                                     PTHrP        IL-1α        TGF-β1
Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTIO
N. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
PAPEL DEL
                                 OSTEOBLASTO EN
                                   LA ERUPCIÓN
                                     DENTAL
El Osteoblasto   deriva de las células mesenquimales pluripotenciales de
                 la médula ósea.




                             La presencia de osteoblastos es requerida
                            para la activación de osteoclastos por medio
                                        de la vía RANKL/OPG
MOLÉCULAS
                                      INVOLUCRADAS
                                      EN LA ERUPCIÓN
PAPEL DEL OSTEOBLASTO EN LA ERUPCION DENTAL


                        Cbfa1 ( Core Binding Factor)




           In vitro mostró que factores de crecimiento con capacidad
  osteoinductiva como las BMPs regulan la expresión de Cbfa1 en osteoblastos
                                                   Ducy P, Zhang R, Geoffroy V, Ridall AL, Karsenty G (1997)
                                Ducy y col 1997    Osf2/Cbfa1: a transcriptional activator of osteoblast
                                                   differentiation.
                                                   Cell 89:747-754.


     Rol del Cbfa1: Es un regulador transcripcional clave para la diferenciación
     osteoblástica durante la formación ósea
MOLÉCULAS
                                                   INVOLUCRADAS
                                                   EN LA ERUPCIÓN
PAPEL DEL OSTEOBLASTO EN LA ERUPCION DENTAL
                                                                        Otto y col 1997
                                              En ratones
                                                                        D´Souza 1999



                                          Carecen de Cbfa1


                            Ausencia completa de osteoblastos y hueso


                                             Mueren al nacer


Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol
Med. 13(4):323-334 (2002)
MOLÉCULAS
                                                INVOLUCRADAS
                                                EN LA ERUPCIÓN

CONDICIONES HUMANAS QUE AFECTAN LA ERUPCION
DENTAL
 - Dientes supernumerarios.
 - Apiñamiento.
 - Tumores.
 - Anquilosis ?????


Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral
Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
MOLÉCULAS
                                                 INVOLUCRADAS
                                                 EN LA ERUPCIÓN
                                      ANQUILOSIS

                  Fusión del cemento con el hueso alveolar debido a cambios
                      celulares en el LP causado por trauma o patologías


                     Erupción parcial ( sumergido en relación a los demás)


El retardo o la falla en la erupción son condiciones que no involucran naturalmente
anquilosis, están asociadas a síndromes.

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    Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
MOLÉCULAS
                                                 INVOLUCRADAS
                                                 EN LA ERUPCIÓN
           FRACASO PRIMARIO DE ERUPCION (PFE)
     - Localizado en dientes permanentes posteriores.
     - Completa formación ósea pero no alcanzan plano
     oclusal debido a un defecto primario eruptivo .
     - No impactados con otra estructura
     - No anquilosados
     - No hay desorden sistémico asociado


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    Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
MOLÉCULAS
                                                           INVOLUCRADAS
                                                           EN LA ERUPCIÓN




Los genes del Fracaso Primario de Erupción pueden ser moléculas que funcionan
únicamente en la fase pre-funcional intraósea.
Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION.
    Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
CHRONOLOGICAL GENE EXPRESSION OF
PARATHYROID HORMONE-RELATED PROTEIN
(PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE
  RAT. IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION


         Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise

       Archives of Oral Biology 52; 2007 pag.228-232
INTRODUCCIÓN

   - La Erupción dental requiere resorción ósea alveolar, así como también
   posible crecimiento óseo en la base del diente. La osteoclastogénesis es vista
   en el día 3 postnatal con un estallido secundario en el 10, erupcionando el 18.
   - La osteoclastogénesis es regulada por el folículo dental, donde actúa en su
   máxima expresión el Factor Estimulador de Colonias-1 (CSF-1), seguido del
   Factor de Crecimiento Endotelial Vascular (VEGF)
   - Se determinó que el folículo dental puede diferencialmente expresar genes
   tales como activadores del receptor BMP-2 para regular la formación ósea.
   - El Péptido relacionado con el gen de la Paratohormona (PTHrP) puede
   estimular la resorción ósea. Los receptores para la PTHrP residen sobre
   las células del folículo dental logrando efecto sobre él, no sobre las
   células del retículo estrellado.
Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE-RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN
THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
INTRODUCCIÓN

- La microdisección de captura láser (LCM) y la técnica RT-
PCR fueron usadas para analizar la expresión de genes
PTHrP en el SR del primer molar mandibular de ratas
postnatales.
- En adición, el efecto del PTHrP sobre la expresión del gen
de VEGF y BMP-2 en las células del folículo dental fue
estudiada para ayudar a determinar el papel de la PTHrP en
la osteoclastogénesis y la formación ósea para la erupción
dental.
Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE-
RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
MATERIALES Y
                                                   MÉTODOS

- Ratas Harlan Sprague-Dawley fueron albergadas en la Universidad del Estado de
Louisiana.

- Las mandíbulas fueron quirúrgicamente removidas de las ratas postnatales en el
día 1, 3, 5, 7, 9 y 11

- Las mandíbulas fueron congeladas en nitrógeno líquido, seccionadas a 20
micrómetros

- El SR del primer molar fue capturado usando un sistema de Microdisección de
Captura Láser PALM y el RNA fue extraído del SR

- La microdisección de captura láser y el Rt-PCR fueron usados para determinar la
expresión cronológica de PTHrP in vivo. In vitro, las células del folículo dental fueron
incubadas con PTHrP y el RT-PCR fue dirigido para determinar su efecto sobre la
expresión del gen VEGF y BMP-2.
EFECTO IN VITRO DEL
                                               PTHrP SOBRE LA
                                            EXPRESIÓN DEL GEN DE
                                                    VEGF

Células del folículo dental              reproducidas en un medio MEM 10 % suero de
                                         Becerro


                                Medio libre de suero por 5 horas.
         PTHrP
                                Las células fueron incubadas a 25 ng/ml de PTHrP por
                                0,1,2,4,6 y 8 horas.
       Factor de
      Crecimiento
     Vascular VEGF
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RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
EFECTO IN VITRO DEL
                                             PTHrP SOBRE LA
                                          EXPRESIÓN DEL GEN DE
                                                 BMP-2

Células del folículo dental             reproducidas en un medio MEM 10 % suero de
                                        Becerro

                              Las células incubadas 0, 10, 25, 50 ng/ml de PTHrP.
                              (estudio de cursos de concentración) por 2 horas.
         PTHrP


                              Las células fueron incubadas a 25 ng/ml de PTHrP por
          BMP-2               1,2,4 y 6 horas. (estudio curso del tiempo)


                              Los cultivos sin agregar PTHrP fueron usados como
                              controles en cada punto de tiempo.
EFECTO IN VITRO DEL
                                               PTHrP SOBRE LA
                                            EXPRESIÓN DEL GEN DE
                                                      VEGF y BMP-2




La expresión de genes de VEGF120, VEGF164 y
BMP-2 fue determinada usando RT-PCR.




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RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
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ANÁLISIS
                                                  ESTADÍSTICO


ANALISIS ESTADÍSTICO
Todos los experimentos fueron repetidos al menos tres veces
ordenados como un diseño de bloque aleatorizado completo.
El análisis de varianza y la diferencia menos significante
fueron usados para el análisis estadístico.
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RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
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La expresión de PTHrP en el SR del primer molar mandibular en ratas
       postnatalmente fue determinado por la RT-PCR. Nótese que el incremento de la
       expresión fue visto en el día 7 y 9.
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PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral
Biology 52 (2007) 228-232.
In vitro el tratamiento con PTHrP
incrementó la expresión de
VEGF120 y de VEGF164 después
de 4 horas de incubación con 25
ng/ml de PTHrP el incremento máx.
6 horas




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 RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
A) Es el estudio en curso
   de concentración por
   2 horas. El PTHrP
   mejoró la expresión
   del gen BMP-2 a una
   concentración de 10
   ng/ml.
B) Es el estudio en curso
   del tiempo a 25ng/ml
   del PTHrP. 2 horas
   máx. expresión.
    Los cultivos sin
   agregar PTHrP fueron
   usados como controles
   en cada punto de
   tiempo.
RESULTADOS

- El PTHrP fue máximamente expresada en el día 7 postnatal en el SR con
el nivel de expresión aún alto en el día 9 pero declinando.
- In vitro, el PTHrP regulaba la expresión de VEGF120 y VEGF164
después de 4 horas de incubación con un efecto máximo a las 6 horas y
declinando a las 8 horas.
- El PTHrP regulaba la expresión del gen BMP-2 con un efecto máximo de
2 horas en una concentración de 10 ng/ml en el estudio en curso de
concentración.
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RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
RESULTADOS


  - Los resultados de este estudio sugieren que el PTHrP puede regular la
  expresión del gen BMP-2 en las células del Folículo Dental.

  - El BMP-2 es máximamente expresado en el folículo dental en el día 9
  postnatal y es expresado a nivel más alto en la porción basal del folículo
  dental que en la región coronal del folículo.


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RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
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DISCUSIÓN


   - La expresión de genes máxima de PTHrP en los días 7-9 se
   correlaciona con el estallido secundario de la osteoclastogénesis
   vista en el día 10 postnatalmente.
   - El crecimiento óseo está ocurriendo en la base del molar. El
   PTHrP ha sido mostrado para estimular la resorción ósea.




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( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
- El VEGF incrementado puede contribuir al estallido secundario de
osteoclastogénesis vista en el día 10.


- El estallido secundario de osteoclastogénesis ocurre en el día 10
postnatal y los niveles altos de PTHrP en los días 7 y 9.




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RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232 .
CONCLUSIONES

  • Debido al estallido secundario de osteoclastogénesis necesario
  para que la erupción ocurra alrededor del día 10, es posible que el
  PTHrP esté simulando esta osteoclastogénesis mediante la
  regulación del VEGF en la parte coronal del F.D.
  • Actualmente, la regulación del BMP-2 mediante el PTHrP puede
  estimular el crecimiento óseo en la base de la cripta ósea para
  promover la erupción.

Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE-
RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION.
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  • 1. Profesor: Dr. Juan Carlos Munévar N ERUPCIÓN DENTAL Postgrados Odontología María Fernanda Briceño María Isabel Trujillo
  • 2. DEFINICIÓN Proceso de migración del diente desde su sitio del desarrollo dentro del hueso alveolar hasta su posición funcional en la cavidad oral. (Massler y Schour 1941) La erupción dental es el único proceso de desarrollo, en donde un tejido semi-duro, el diente, debe escapar de su cripta, que es el hueso alveolar donde está encerrado. G. E. Wise The Biology of Tooth Eruption, J.Dent Res 77 (8) 1998 La erupción dental es un proceso complejo y regulado que invo G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and genetic Determinants of tooth eru
  • 3. TEORIAS DE LA ERUPCIÓN DENTAL • Teoría de la pulpa Presiones pulpares y crecimiento de la dentina Herzberg y Schour (1941) removieron la pulpa en ratas y LA ERUPCIÓN NO FUE AFECTADA Herzbergs F. and Shour, I(1941) Effects of the removal of pulp and Hertwigs sheath on the euption of incisors in the albino rat. J. Dent. Res 20,264. Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 1-7 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL 35233
  • 4. TEORIAS DE LA ERUPCIÓN DENTAL • Teoría de la elongación radicular Empujada por el crecimiento de las raíces Gowgiel en dientes de monos que fueron irradiados y eliminadas sus raíces, los dientes erupcionaron. Gowgiel, J.M. (1961) Eruption of irradiation-produced rootless teeth in monkeys. J.Dent. Res. 40, 538-547. Massler, Schour reportaron que ratas con deficiencia en su formación radicular, no afectaba la erupción. Massler, M and Shour, I. (1941) Studies in tooth development: Theories of eruption. Amer.J.Orthodont.,Oral Surg. 27, 552-576. Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 1-7 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL 35233
  • 5. TEORIAS DE LA ERUPCIÓN DENTAL Nuevo hueso formado debajo de los dientes en erupción (sólo refleja • Crecimiento del Hueso Alveolar movimiento no causa la erupción). Meyer, W. (1935) Meyer´s Normal Histology and Histogenesis of the Human Teeth and Associated Parts. Chap 14, pp 237-248. Fuerzas contráctiles de los fibroblastos • Teoría del Ligamento Periodontal del L.P (fibras colágenas). Poca evidencia Berkovitz, B.K.B and Moxham, B.J and Newman, H.N. (1982). The periodontal ligament and physiological tooth movements.In: The Periodontal Ligament in Health and Disease. Chap. 10, pp 215-247. Canal gubernacular, los osteoclastos • Teoría del Folículo Dental (F.D) generan una vía ensanchando el canal, existe evidencia que el F.D es requerido para la resorción ósea. Es la ACEPTADA Wise, G.E, Marks, S.C. Jr. And Cahill, D.R (1985). Ultrastructural features of the dental follicle associated with formation of the tooth eruption pathway in the dog. J.Oral Pathol. 14, 15-26. Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 1-7 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL
  • 6. TOOTH ERUPTION A SYNTHESIS OF EXPERIMENTAL OBSERVATIONS Sandy C. Marks, Jr 1 Jeffrey P. Gorski 2 Donald R. Cahill 3 Gary E Wise 4 The biological mechanisms of tooth eruption and root resorption Edited by Z. Davidovitch, Pag 161-169 1988 - Department of Anatomy U of Massachusetts - Department of Biochemistry and Molecular Biology. U of Missouri. Kansas City - Mayo Medical School, Rochester, MN - Texas College of Osteopathic medicine, Ft. Worth
  • 7. ETAPAS DE LA ERUPCIÓN DENTAL Fase Intraósea Erupción Prefuncional Fase Supraósea Erupción Postfuncional Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL 35233
  • 8. ERUPCIÓN PREFUNCIONAL INTRAÓSEA Resorción ósea y formación de El diente emerge de su cripta ósea hueso en lados opuestos. Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL 35233
  • 9. Estudios han demostrado que justo antes de la erupción dental de premolares en los perros, una población de células mononucleares aparece en la parte coronal del folículo dental. Preosteoclastos Resorción Ósea Se ha demostrado que el Factor de Crecimiento Epidérmico (EFG), se une a las células del Folículo Dental basal y acelera la proliferación celular alrededor de los dientes Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL 35233
  • 10. ERUPCIÓN PREFUNCIONAL SUPRAÓSEA Punta de la corona sobre el margen del Hueso Período de movimiento Alveolar a su posición funcional Características: - Resorción continua - Fusión del Folículo Dental con el Epitelio Oral subyacente. - Crecimiento radicular continuo - Formación ósea debajo del diente en erupción Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL 35233
  • 11. ERUPCIÓN POSTFUNCIONAL - Proceso lento - Continuo a través de la vida - Consiste de componentes verticales y horizontales del movimiento.
  • 12. Davidovitch. The Biological Mechanisms of Tooth Eruption and Root Resorption. Pages 161-169 1988 EBSCO Media, Birmingham, AL 35233
  • 13. THE BIOLOGY OF TOOTH ERUPTION G. E. Wise J.Dent Res 77 (8) 1998
  • 14. INTRODUCCIÓN • Folículo dental esencial para la erupción porque era el sitio de influjo de células mononucleares. • Moléculas que potencian la erupción: TGF – B1, PTHrP (Hormona Partiroidea). • Retículo estrellado se comunica con el folículo dental para iniciar la erupción. • Los eventos celulares de la erupción en el molar de ratas coincidían con los del perro. Wise GE, Fan W(1989). J Dent Res 68:150-156. G. E. Wise. J Dent Res 77(8) 1998.
  • 15. EGF y su receptor se ubican temprano posnatalmente en el folículo y disminuía con el tiempo. • CSF – 1 se produjo por el foliculo y se aumenta posnatalmente y al final declina. • Erupción: Controlada por FD y SR. • C –Fos: dirige diferenciacion de las células mononucleares necesarias para una via de erupción. G. E. Wise. J Dent Res 77(8) 1998.
  • 16. CONCLUSIONES • Visión de la erupción dental como un proceso biológico no mecánico. • El crecimiento celular, el movimiento celular, la apoptósis, la quimiotaxis también se deben considerar en erupción dental. G. E. Wise. J Dent Res 77(8) 1998.
  • 17. CELL TRACTION: IMPLICATION FOR THE MECHANISM OF TOOTH ERUPTION A.K. Harris and J.J. Dmytryk Deparment of Biology and Periodontics School of Dentistry U of North Carolina Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 18. INTRODUCCIÓN • Partículas de plástico vidrio y otros materiales fueron puestos en cultivos celulares • Las células parecen ejercer fuerzas en estas partículas móviles • Silicona como substrato porque es inerte, esto elimina la objeción de que la distorsión se produce por fenómenos ajenos a las células (deshidratación, cambios bioquímicos, etc...) Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 19. INTRODUCCIÓN • Los cultivos en superficies de silicona mostraron que las células acompañaban su movimiento con la generación de unas fuerzas que se transmiten al sustrato. • La fuerza de tracción de los fibroblastos. Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 20. INTRODUCCIÓN • Alineando materiales de la matriz en estructuras anatómicas como cápsulas de órganos, tendones y ligamentos. Harris, A.K. Stopak,D. and Wuild, P.W. (1981) . • La tracción ejercida funciona como una banda rodante y mueve los elementos relacionados con la célula • Relación con la erupción Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 21. MATERIALES Y METODOS • Fibroblastos gingivales de rata • Substrato de silicona en platos de Petri • Tinción de fibroblastos • Observados directamente en el cultivo • Fotografías • Filmaciones Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 22. RESULTADOS • Se necesitaron 24 horas para que los fibroblastos se aplanaran y se extendieran en la superficie de cultivo • El grado de extendimiento de las células aumentó por los tres días siguientes y se vieron más aplanados • A los 4 o 5 días se vió un arrugamiento de la superficie del substrato semejante al visto en otros estudios • El arrugamiento se incrementó en los 20 días del experimento y varió entre células. Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 23. RESULTADOS • Se grabaron las conductas de las células por periodos de 24 a 48 horas a la vez • Los fibroblastos de rata son más estáticos que otros vistos Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 24. DISCUSIÓN • Las células pueden ejercer tracción relativamente fuerte • Con estas fuerzas las células pueden desplazar material extracelular • Estas fuerzas actúan en la erupción del diente. Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 25. DISCUSIÓN • Los fibroblastos pueden ejercer las fuerzas en las fibras colágenas que están unidas al diente • Control de la dirección Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 26. RESULTADOS • Con la tinción se observaron complejas redes citoplasmáticas de contenido de actina • Fibras tensionadas y concentraciones de actina a lo largo de los márgenes de la célula • Las fibras tensionadas se orientaban paralelas al eje mayor de la célula Z. Davidovitch. Pag 181-186, 1988
  • 27. Cellular, Molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption. G. E. Wise, S. Frazier-Bowers, R.N. D’Souza. Crit. Rev. Oral Biol. Med. 13(4): 323-334 2002
  • 28. RESORCIÓN ÓSEA La vía de erupción dental es un evento localizado en un tiempo dado y genéticamente programado, que no requiere presión del diente en erupción. Dado que el diente no erupcionado está encerrado en el hueso, la resorción ósea es la vía de erupción. Resorción ósea, ensancha este canal y permite que la Por el canal gubernacular de cada diente corona se mueva a través de éste y erupcione G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, Molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption. Cri.t Rev Oral Biol Med 13(4) 2002
  • 29. ESTUDIO COTTON Y GAINES Los dientes se forman Roedores Osteopetróticos Tinción pero no erupcionan Fosfatasa Ácida Tartrato-Resistente Nº reducidos de osteoclastos Cotton WR, Gaines JF (1974). Unerupted dentition secondary to congenital osteopetrosis in the Osborne- Mendel rat. Proc Soc Exp Biol Med 146:554-561. G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, Molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption. Crit Rev. Oral Biol Med 13(4) 2002
  • 30. FOLICULO DENTAL ORIGEN MESENQUIMATOSO Es un saco de tejido conectivo libre que rodea el órgano del esmalte de cada diente Estudios demostraron que una de las funciones del FD en la erupción dental Servir como tejido blanco para atraer células mononucleares Sitio de depósito en donde estas células se fusionan y forman osteoclastos y así generar la resorción El folículo dental es determinante en la erupción G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption. Crit Rev Oral Biol Med 13(4) 2002
  • 31. ETAPAS DEL DESARROLLO www.ucsg.edu.ec/.../datos/embriologia19.htm
  • 33. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN Por ser un evento programado, está dado por moléculas que regulan el proceso. Factores de Crecimiento Epidérmicos ( EGF ) Descrito por Cohen 1962 Cohen S (1962). Isolation of a mouse submaxillary gland protein accelerating incisor eruption and eyelid opening in the newborn animal. J Biol Chem 237:1555-1562. Efectos EFG Y CSF-1 diferentes acciones sobre la erupción dental Acelera erupción Acelera erupción incisivos molares G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and genetic Determinants of tooth eruption. Crit rev Oral Biol Med 13(4) 2002
  • 34. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN La señalización paracrina de las moléculas en el retículo estrellado (SR) Afecta la expresión del gen de las moléculas en el folículo dental (FD). Receptor para IL- alfa en el (DF) TGF-BETA1 (SR) / EGF (DF). Mejorar expresión de los genes CSF-1 , MCP-1 El retículo estrellado (SR) En el órgano del esmalte tiene un papel Regulador en la erupción. G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, Molecular, and Genetic Determinants of Tooth Eruption. Crit rev Oral Biol Med 13(4) 2002
  • 35. PAPEL DEL OSTEOCLASTO EN LA ERUPCIÓN DENTAL El Osteoclasto Deriva de la célula madre hematopoyética Monocitos Pre-osteoclastos Fusión y Proliferación y RESORCIÓN agregación diferenciación G. Wise, S. Frazier, N. D’Souza. Cellular, molecular, and genetic Determinants of tooth eruption. Crit rev Oral Biol Med 13(4) 2002
  • 36. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN PAPEL DE LOS OSTEOCLASTOS EN LA ERUPCION DENTAL CSF-1 y MCP-1 Son moléculas secretadas que actúan como quimioquinas para reclutar células mononucleares en el folículo dental. Las células del folículo dental las secretan Diferentes moléculas pueden aumentar la expresión tanto de CSF-1 como de MCP-1 Favorece la erupción Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 37. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN La erupción requiere progenitores Osteoclásticos Osteoblásticos Para formar una vía de erupción El diente erupciona Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION . Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 38. FORMACIÓN OSTEOCLÁSTICA DURANTE LA ERUPCIÓN RANKL OPG HUESO ALVEOLAR OB FOLICULO EGF DENTAL C-Fos CSF-1 RETICULO ESTRELLADO PTHrP IL-1α TGF-β1 Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTIO N. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 39. PAPEL DEL OSTEOBLASTO EN LA ERUPCIÓN DENTAL El Osteoblasto deriva de las células mesenquimales pluripotenciales de la médula ósea. La presencia de osteoblastos es requerida para la activación de osteoclastos por medio de la vía RANKL/OPG
  • 40. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN PAPEL DEL OSTEOBLASTO EN LA ERUPCION DENTAL Cbfa1 ( Core Binding Factor) In vitro mostró que factores de crecimiento con capacidad osteoinductiva como las BMPs regulan la expresión de Cbfa1 en osteoblastos Ducy P, Zhang R, Geoffroy V, Ridall AL, Karsenty G (1997) Ducy y col 1997 Osf2/Cbfa1: a transcriptional activator of osteoblast differentiation. Cell 89:747-754. Rol del Cbfa1: Es un regulador transcripcional clave para la diferenciación osteoblástica durante la formación ósea
  • 41. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN PAPEL DEL OSTEOBLASTO EN LA ERUPCION DENTAL Otto y col 1997 En ratones D´Souza 1999 Carecen de Cbfa1 Ausencia completa de osteoblastos y hueso Mueren al nacer Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 42. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN CONDICIONES HUMANAS QUE AFECTAN LA ERUPCION DENTAL - Dientes supernumerarios. - Apiñamiento. - Tumores. - Anquilosis ????? Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 43. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN ANQUILOSIS Fusión del cemento con el hueso alveolar debido a cambios celulares en el LP causado por trauma o patologías Erupción parcial ( sumergido en relación a los demás) El retardo o la falla en la erupción son condiciones que no involucran naturalmente anquilosis, están asociadas a síndromes. Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 44. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN FRACASO PRIMARIO DE ERUPCION (PFE) - Localizado en dientes permanentes posteriores. - Completa formación ósea pero no alcanzan plano oclusal debido a un defecto primario eruptivo . - No impactados con otra estructura - No anquilosados - No hay desorden sistémico asociado Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 45. MOLÉCULAS INVOLUCRADAS EN LA ERUPCIÓN Los genes del Fracaso Primario de Erupción pueden ser moléculas que funcionan únicamente en la fase pre-funcional intraósea. Wise, Frazier-Bowers. CELLULAR, MOLECULAR, AND GENETIC DETERMINANTS OF TOOTH ERUPTION. Crit Rev Oral Biol Med. 13(4):323-334 (2002)
  • 46. CHRONOLOGICAL GENE EXPRESSION OF PARATHYROID HORMONE-RELATED PROTEIN (PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT. IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise Archives of Oral Biology 52; 2007 pag.228-232
  • 47. INTRODUCCIÓN - La Erupción dental requiere resorción ósea alveolar, así como también posible crecimiento óseo en la base del diente. La osteoclastogénesis es vista en el día 3 postnatal con un estallido secundario en el 10, erupcionando el 18. - La osteoclastogénesis es regulada por el folículo dental, donde actúa en su máxima expresión el Factor Estimulador de Colonias-1 (CSF-1), seguido del Factor de Crecimiento Endotelial Vascular (VEGF) - Se determinó que el folículo dental puede diferencialmente expresar genes tales como activadores del receptor BMP-2 para regular la formación ósea. - El Péptido relacionado con el gen de la Paratohormona (PTHrP) puede estimular la resorción ósea. Los receptores para la PTHrP residen sobre las células del folículo dental logrando efecto sobre él, no sobre las células del retículo estrellado. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE-RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 48. INTRODUCCIÓN - La microdisección de captura láser (LCM) y la técnica RT- PCR fueron usadas para analizar la expresión de genes PTHrP en el SR del primer molar mandibular de ratas postnatales. - En adición, el efecto del PTHrP sobre la expresión del gen de VEGF y BMP-2 en las células del folículo dental fue estudiada para ayudar a determinar el papel de la PTHrP en la osteoclastogénesis y la formación ósea para la erupción dental. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 49. MATERIALES Y MÉTODOS - Ratas Harlan Sprague-Dawley fueron albergadas en la Universidad del Estado de Louisiana. - Las mandíbulas fueron quirúrgicamente removidas de las ratas postnatales en el día 1, 3, 5, 7, 9 y 11 - Las mandíbulas fueron congeladas en nitrógeno líquido, seccionadas a 20 micrómetros - El SR del primer molar fue capturado usando un sistema de Microdisección de Captura Láser PALM y el RNA fue extraído del SR - La microdisección de captura láser y el Rt-PCR fueron usados para determinar la expresión cronológica de PTHrP in vivo. In vitro, las células del folículo dental fueron incubadas con PTHrP y el RT-PCR fue dirigido para determinar su efecto sobre la expresión del gen VEGF y BMP-2.
  • 50. EFECTO IN VITRO DEL PTHrP SOBRE LA EXPRESIÓN DEL GEN DE VEGF Células del folículo dental reproducidas en un medio MEM 10 % suero de Becerro Medio libre de suero por 5 horas. PTHrP Las células fueron incubadas a 25 ng/ml de PTHrP por 0,1,2,4,6 y 8 horas. Factor de Crecimiento Vascular VEGF Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 51. EFECTO IN VITRO DEL PTHrP SOBRE LA EXPRESIÓN DEL GEN DE BMP-2 Células del folículo dental reproducidas en un medio MEM 10 % suero de Becerro Las células incubadas 0, 10, 25, 50 ng/ml de PTHrP. (estudio de cursos de concentración) por 2 horas. PTHrP Las células fueron incubadas a 25 ng/ml de PTHrP por BMP-2 1,2,4 y 6 horas. (estudio curso del tiempo) Los cultivos sin agregar PTHrP fueron usados como controles en cada punto de tiempo.
  • 52. EFECTO IN VITRO DEL PTHrP SOBRE LA EXPRESIÓN DEL GEN DE VEGF y BMP-2 La expresión de genes de VEGF120, VEGF164 y BMP-2 fue determinada usando RT-PCR. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 53. ANÁLISIS ESTADÍSTICO ANALISIS ESTADÍSTICO Todos los experimentos fueron repetidos al menos tres veces ordenados como un diseño de bloque aleatorizado completo. El análisis de varianza y la diferencia menos significante fueron usados para el análisis estadístico. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 54. La expresión de PTHrP en el SR del primer molar mandibular en ratas postnatalmente fue determinado por la RT-PCR. Nótese que el incremento de la expresión fue visto en el día 7 y 9. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE-RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 55. In vitro el tratamiento con PTHrP incrementó la expresión de VEGF120 y de VEGF164 después de 4 horas de incubación con 25 ng/ml de PTHrP el incremento máx. 6 horas Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE-RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 56. A) Es el estudio en curso de concentración por 2 horas. El PTHrP mejoró la expresión del gen BMP-2 a una concentración de 10 ng/ml. B) Es el estudio en curso del tiempo a 25ng/ml del PTHrP. 2 horas máx. expresión. Los cultivos sin agregar PTHrP fueron usados como controles en cada punto de tiempo.
  • 57. RESULTADOS - El PTHrP fue máximamente expresada en el día 7 postnatal en el SR con el nivel de expresión aún alto en el día 9 pero declinando. - In vitro, el PTHrP regulaba la expresión de VEGF120 y VEGF164 después de 4 horas de incubación con un efecto máximo a las 6 horas y declinando a las 8 horas. - El PTHrP regulaba la expresión del gen BMP-2 con un efecto máximo de 2 horas en una concentración de 10 ng/ml en el estudio en curso de concentración. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 58. RESULTADOS - Los resultados de este estudio sugieren que el PTHrP puede regular la expresión del gen BMP-2 en las células del Folículo Dental. - El BMP-2 es máximamente expresado en el folículo dental en el día 9 postnatal y es expresado a nivel más alto en la porción basal del folículo dental que en la región coronal del folículo. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 59. DISCUSIÓN - La expresión de genes máxima de PTHrP en los días 7-9 se correlaciona con el estallido secundario de la osteoclastogénesis vista en el día 10 postnatalmente. - El crecimiento óseo está ocurriendo en la base del molar. El PTHrP ha sido mostrado para estimular la resorción ósea. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE-RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.
  • 60. - El VEGF incrementado puede contribuir al estallido secundario de osteoclastogénesis vista en el día 10. - El estallido secundario de osteoclastogénesis ocurre en el día 10 postnatal y los niveles altos de PTHrP en los días 7 y 9. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232 .
  • 61. CONCLUSIONES • Debido al estallido secundario de osteoclastogénesis necesario para que la erupción ocurra alrededor del día 10, es posible que el PTHrP esté simulando esta osteoclastogénesis mediante la regulación del VEGF en la parte coronal del F.D. • Actualmente, la regulación del BMP-2 mediante el PTHrP puede estimular el crecimiento óseo en la base de la cripta ósea para promover la erupción. Shaomian Yao, Fenghui Pan, Gary E. Wise. CHRONOLOGIC GENE EXPRESSION OG PARATHYROID HORMONE- RELATED PROTEIN ( PTHrP) IN THE STELLATE RETICULUM OF THE RAT- IMPLICATIONS FOR TOOTH ERUPTION. Archives of Oral Biology 52 (2007) 228-232.