Este documento describe el uso de hongos entomopatógenos nativos para el control de plagas agrícolas. Se han identificado 21 especies fúngicas que infectan varios insectos y ácaros plaga en cultivos. Estos hongos se están estudiando para desarrollar un bioinsecticida que sea específico para las plagas, no tóxico para otros organismos y que pueda mantenerse de forma natural en el ambiente.
1. BIOINSECTICIDAS FUNGICOS PARA
CONTROL DE PLAGAS AGRÍCOLAS
Dra. Claudia C. López Lastra (Centro de Estudios
Parasitológicos y de Vectores, CONICET-UNLP)
La Plata, Argentina
2. Relevamiento de hongos en
insectos plagas
La prospección de los hongos patógenos se realizó mediante las
técnicas específicas para cada grupo de insectos y otros artrópodos.
El relevamiento fue realizado en distintos hospedadores en cultivos
hortícolas bajo cubierta y a campo tanto en orgánicos como en
convencionales del Gran La Plata.
Se obtuvieron aislamientos en medios de cultivo (SDYA, ESMYA).
En los casos en que no se pudo obtener cultivos, el material fue
depositado como material de herbario (seco o preparados
microscópicos) en las colecciones de referencia (CEPAVE e Instituto
Spegazzini en Argentina y ARSEF en EEUU).
3. Hongos entomopatógenos (CEPAVE)
• Aislamiento, identificación y preservación de nuevos patógenos.
Establecimiento de colección de cultivos micológicos.
•Estudios de los ciclos biológicos de los hongos identificados y de su
modo de acción.
• Epizootiología: prevalencia y estacionalidad.
• Evaluación de la patogenicidad y virulencia, a través de bioensayos en
laboratorio.
• Evaluación del espectro hospedador y susceptibilidad de la fauna
asociada y enemigos naturales de los insectos blanco.
• Producción masiva a pequeña escala de los patógenos seleccionados.
• Ensayos a campo en pequeña escala bajo condiciones controladas.
4. Ciclo de infección de un hongo
entomopatógeno (generalizado)
Adhesión de la espora.
Germinación / formación de apresorios.
Penetración de las hifas (intervienen enzimas)
Multiplicación del hongo en el hemocele del insecto
(cuerpos hifales/ blastosporas).
Liberación de toxinas /otros metabolitos/ antimicrobianos
Invasión de tejidos, lisis y muerte del insecto.
Esporulación externa del hongo a través de la cutícula del
insecto hospedante.
5. Resultados
Se han identificado 21 especies fúngicas
entomopatogénicas a partir de distintos ordenes de
artrópodos hospedantes (principalmente insectos y
ácaros) en cultivos agrícolas.
Las especies de hongos corresponden
mayoritariamente al Phylum Ascomycota y al
SubPhylum Entomophthoromycotina.
6. Colección de hongos entomopatógenos
(cultivos) del Cepave
Aislamientos de
a Zoophthora
Cultivos
fúngicos en
radicans,
gradilla de
Nomuraea rileyi e
colección
b c Isaria sp
d
Insectos infectados con hongos
patógenos: a: larva de Aedes
aegypti infectada con Leptolegnia Repique de
chapmanii ; b: hembra adulta de aislamientos bajo
Sonesimia grossa infectada con cámara de flujo
Clonostachys rosea; c: Áfido laminar.
infectado con Zoophthora radicans;
d: Larva de Anticarsia gemmatalis
infectada con Nomuraea rileyi.
7. Objetivos Argentina Laboratorio de hongos
entomopatógenos CEPAVE (UNLP/ CONICET)
Profundizar en el relevamiento, identificación, caracterización y estudio
de nuevas especies y aislamientos fúngicos nativos.
Estudios moleculares para contribuir al conocimiento de la
biodiversidad y filogenia.
Establecer a través de bioensayos y caracterización morfológica cuales
podrían ser las especies (y aislamientos) de hongos entomopatógenos
con mayor potencial para la preparación de un insecticida microbiano.
Estudio de las esporas de resistencia de hongos Entomophtorales en
campo y laboratorio. Profundizar el estudio de la diversidad de hongos
Entomophthorales en pulgones y su posible aplicación mediante
control microbiano conservativo.
Estudio de toxinas y antimicrobianos de hongos entomopatógenos
Estudio de la interacción de hongos entomopatógenos con enemigos
naturales y con agroquímicos.
Trabajos de extensión con productores hortícolas de la región del gran
La Plata a través de proyectos de la UNLP .
8. Insectos plaga de cultivos hortícolas en
pulgones, mosca blanca, polilla del tomate y
otros.
16. Hongos
entomopatógenos
Control microbiano de insectos
Ventajas:
Presentan especificidad y no afectan organismos “no
blanco”, en general.
Tienen posibilidad de mantener un efecto de “reciclaje”
en condiciones naturales.
Una gran diversidad de especies son cultivables In vitro
en medios artificiales y naturales -
Se puede preservar su viabilidad y virulencia de
acuerdo a sus características específicas con
metodologías de alta tecnología así como con bajos
insumos.
Se pueden formular en medios sólidos o líquidos , como
granulados, polvos mojables etc.
17. Etapas del control
microbiano
Rango hospedador .
Evaluación de la acción sobre organismos “no blanco”
(fauna asociada, enemigos naturales, insectos benéficos,
vertebrados también mamíferos. Importante detección de
posibles toxinas o metabolitos.
Producción masiva de esporos
Control de calidad.
Elaboración de formulados (estimación y selección de
coadyuvantes, pruebas con los coadyuvantes usados).
Bioensayos con los formulados obtenidos.
Presentación de los resultados y bibliografía pertinentes
junto con solicitud de permisos a SENASA
18. Etapas de transferencia tecnológica
Producción masiva
Formulación
Estandarización
Control de calidad . Evaluación de toxinas
Ensayos a pequeña y mediana escala. Permisos de
Senasa - Cosave
Elaboración del producto /patentes
Venta aplicación
Extensión
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30. Adulto de T. vaporariorum infectado con Isaria fumosorosea en plantaciones de
chaucha ubicadas en Colonia Urquiza, partido de La Plata, Buenos Aires (sitio 4).
A: Cultivo de chaucha bajo cubierta con manejo convencional. B : Adultos infectados sobre su planta
hospedera. C : Adulto de T. vaporariorum sano. D : Adulto de T. vaporariorum infectado. E y F:
Preparados microscópicos de las estructuras fúngicas de I. fumosorosea en azul de algodón-
lactofenol Amann (0,01 p/v). Conidioforos ( cf ), fiálides (f ) y conidios (c ).
A B
C D
E F
32. Relevamiento de Mosca Blanca en cultivos orgánicas y convencionales
Tipo de Sitio de Ubicación Fecha del Temperatura Humedad Cultivos Especie de "Mosca Hongos
producción Muestreo muestreo media* relativa* hortícolas+ blanca" patógeno
Orgánica Sitio 3 Abasto, 04/06/200 10,7°C 60% Apio Trialeurodes Isaria fumosorosea
Partido de 7 vaporariorum
La Plata,
Buenos
Aires
Convencional Sitio 4 Colonia 22/05/200 10,1°C 77% Chaucha Trialeurodes Isaria fumosorosea
Urquiza, 7 10,7°C 60% vaporariorum
Partido de 04/06/200 10,9°C 89%
La Plata, 7
Buenos 13/06/200
Aires 7
06/06/200 8,6°C 79% Acelga Trialeurodes Isaria fumosorosea
7 10,9°C 89% Berenjena vaporariorum Isaria fumosorosea
13/06/200 Trialeurodes
7 vaporariorum
03/10/200 18,2°C 86% Tomate Trialeurodes Isaria fumosorosea
7 14,4°C 83% vaporariorum
10/10/200 17,7°C 82%
7
16/10/200
7
33. Colección Colección Colección Insecto Planta Fecha de
Hongo identificado Localidad/Provincia
CEPAVEa ARSEFb EMBRAPAc Hospedador Sustrato muestreo
CEP 302 8716 CNPSo-585 I. fumosorosea T. vaporarium Chaucha Colonia Urquiza, 22/05/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 303 8717 CNPSo-563 I. fumosorosea T. vaporarium Apio Abasto, Partido de La 04/06/2007
Plata, Buenos
Aires (Sitio 3)
CEP 304 8718 CNPSo-570 I. fumosorosea T. vaporarium Tomate Colonia Urquiza, 03/10/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 305 8719 CNPSo-564 I. fumosorosea T. vaporarium Tomate Colonia Urquiza, 03/10/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 306 8720 CNPSo-580 I. fumosorosea T. vaporarium Tomate Colonia Urquiza, 10/10/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 307 8721 CNPSo-567 I. fumosorosea T. vaporarium Tomate Colonia Urquiza, 16/10/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 308 8723 CNPSo-568 I. fumosorosea T. vaporarium Chaucha Colonia Urquiza, 04/06/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 309 8724 CNPSo-581 I. fumosorosea T. vaporarium Acelga Colonia Urquiza, 06/06/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 310 8725 CNPSo-566 I. fumosorosea T. vaporarium Acelga Colonia Urquiza, 06/06/2007
Partido de La
Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
34. CEP 311 8726 CNPSo-571 I. fumosorosea T. vaporarium Acelga Colonia Urquiza, Partido 06/06/2007
de La Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 312 8727 CNPSo-574 I. fumosorosea T. vaporarium Chaucha Colonia Urquiza, Partido 13/06/2007
de La Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 313 8728 CNPSo-569 I. fumosorosea T. vaporarium Berenjena Colonia Urquiza, Partido 13/06/2007
de La Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 314 8729 CNPSo-573 I. fumosorosea T. vaporarium Chaucha Colonia Urquiza, Partido 22/05/2007
de La Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 315 8730 CNPSo-584 I. fumosorosea T. vaporarium Chaucha Colonia Urquiza, Partido 22/05/2007
de La Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
CEP 316 8928 CNPSo-562 I. fumosorosea T. vaporarium Chaucha Colonia Urquiza, Partido 22/05/2007
de La Plata, Buenos
Aires (Sitio 4)
a Número de referencia para la colección del Centro de Estudios Parasitológicos y de
Vectores (CEPAVE) (CCT-La Plata-UNLP), La Plata, Argentina.
b Número de acceso de la colección de USDA-ARS, Plant Protection Research Unit, US
Plant, Soil & Nutrition Laboratory (ARSEF), Ithaca, Nueva York., EE.UU.
c Número de acceso de la colección de Empresa Brasilera de Pesquisa Agropecuaria,
Centro Nacional de Pesquisa Soja (EMBRAPA Soja), Londrina, Brasil.
35. Evaluación del uso de hongos
entomopatógenos en cultivos hortícolas
Se realizó la producción artesanal en granos
de arroz parvolizado a partirdel hongo Isaria
fumosorosea bajo condiciones de laboratorio.
La aplicación se efectúo “a campo” en
cultivos de berenjena y bajo invernáculo en
cultivos de chaucha en la quinta de un
productor de Villa Elisa, Pdo La Plata. El
efecto del hongo sobre individuos de “mosca
blanca” se evaluó con monitoreos semanales
y los resultados obtenidos fueron expuestos
en una reunión final con los productores.
38. Figura 50: Porcentaje de individuos infectados de “mosca blanca” en plantaciones de tomate y berenjena bajo cubierta.
El día 14/05/09 se pulverizó dos concentraciones de S.C.P.M de I. fumosorosea (1x107 o 1x108 conidios/ml) en
plantaciones de tomate y berejena. En los días subsiguientes, se cuantificó el número total de adultos y ninfas
infectadas en cada parcela y se estimó el porcentaje de individuos con infección de I. fumosorosea. A: Plantaciones de
tomate variedad Elphida. B: Plantaciones de berenjena variedad Barcelona. 10*7: concentración de 1x107 conidios/ml
A de la S.C.P.M. 10*8: concentración de 1x108 conidios/ml de la susp,
10%
Porcentaje de infección
8%
6%
4%
2%
0%
18/05/2009 20/05/2009 22/05/2009 27/05/2009 29/05/2009
10*7 Adultos 10*7 Ninfas 10*8 Adultos 10*8 Ninfas
B
14%
Porcentaje de infección
12%
10%
8%
6%
4%
2%
0%
18/05/2009 20/05/2009 22/05/2009 27/05/2009 29/05/2009
10*7 Adultos 10*7 Ninfas 10*8 Adultos 10*8 Ninfas
39. Figure 2: Effect of fungicides on growth rate of CEP 315 strain of Isaria
fumosorosea .
Columns show mean + standard error growth rate of CEP 315 strain. The letters above
treatments indicates significant differences among means after Tukey’s test (p<0.05). C :
control. Prop : Propamocarb (0.15%). Fen : Fenarimol (0.05%). Tria : Triadimefon
(0.05%). Proc : Procimidone (0.1%). Azo : Azoxystrobin (0.04%). Carb : Carbendazim
(0.15%). C.O : Cooper oxychloride (0.15%). T.har : Trichoderma harzianum (0.5%).
Interaction of fungicides with the entomopathogenic fungus isaria fumosorosea
Bioc, Sci, and technol. 2011
D’Alessandro1 C.P., Padin2 S., Urrutia3 M.I, López Lastra1 C.C.
5 a a ab a a a ab
Growth Rate (mm/day)
b
4
3
2
c
1
0
C Prop Fen Tria Proc Azo Carb C.O T. har
45. Aplicación del hongo entomopatógeno Isaria fumosorosea en
la quinta de Osvaldo Petronari
46. Aplicación del hongo entomopatógeno en cultivos hortícolas
a campo y bajo cubierta
47.
48. Porcentaje de individuos infectados en BERENJENA y CHAUCHA
100%
90%
Porcentaje de infectados
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
31/03/2010 07/04/2010 19/04/2010
BEREJENA CHAUCHA
49. Resultados esperados
Transferencia de tecnología a empresas nacionales para la
producción y registro de un formulado biológico en base a
hongos entomopatógenos, esto está aun en proceso.
En el área de extensión:
Desarrollar talleres de producción artesanal de hongos
entomopatógenos.
Establecer quintas de referencia con la participación de los
productores y sus familias.
Demostración con aplicaciones a campo en esas quintas de
referencia y elaboración de nuevas cartillas con la
explicación de este proceso para la incorporación del uso de
estrategias de control biológico.
50. Líneas actuales de investigación
Relevamiento y aislamiento de Hongos patógenos de
mosca blanca en cultivos hortícolas.
Diversidad de hongos entomopatógenos de insectos plaga
de la yerba mate.
Hongos patógenos de mosca de la fruta en la región del
NOA.
Entomophthorales de pulgones de cereales y cultivos
hortícolas de Santa Fé. Prevalencia variación estacional ,
dispersión y distribución.
Relevamiento y caracterización de compuestos
antimicrobianos y toxinas a partir de hongos
entomopatógenos.
Estudios de producción de oosporas de L. chapmanii y
posibles producción in vitro para la elaboración de futuros
formulados y aplicación a campo contra mosquitos .
51. Avances y Perspectivas futuras
Continuar con la realización de Estudios
moleculares para contribuir al conocimiento de la
biodiversidad y filogenia de hongos
entomopatógenos
Caracterización morfológica y molecular de los
aislamientos de hongos entomopatógenos con
mayor potencial para la preparación de un
insecticida microbiano.
Producción masiva de esporas fúngicas para la
produccion de un formulado en combinación con
empresas para el escalado comercial. Registro .
Realizar ensayos en parcelas controladas, a
campo a pequeña y mediana escala.
52. Dr Richard Humber
Agradecimientos
Dr.Miguel Angel Delfino
Dr. Justin Hatting
Grupo de hongos entomopatogenos -agricolas :
Dra. Ana C. Scorsetti
Dra. Andrea Toledo
Dra. Vanesa Dikgolz Productores del PPIraola y otros productores
Lic. Alejandra Gutiérrez horticolas del Gran la Plata
Srta. María Belén Cabrera
Srta. Silvana Tongiani Grupo de trabajo de extension FCNyM-UNLP_
Sra Marisol Martinez Borda IPAF
Lic. Maria Elena Schapovaloff . Tito G., Cap G., Glenza F., Padín S.B.,
Lic. Alejandra Gutiérrez Dalbello G., Ungaro P., Gutiérrez A.C., Martínez
Dra Celeste DÁlessandro Borda A.M., Maltese N., Tongiani S., Urrutia M.I.
Lic. Romina Manfrino UNLP-CONICET. ANPCyT, CONICET, MINCyT
Sr. Nicolas Maltese
Lic. Juan Aguilera
Lic. Patricia Albornoz Medina
Srta . Marcela Hipperdinger
Srta. Julieta Tornesello
53.
54. Grupo de Hongos Entomopatógenos
Andrea Ana
Toledo Scorsetti Claudia
Augusto Vanesa
López Lastra Dikgolz
Siri
Celeste
Alejandra D’Alessandro
Gutierrez
Belén Cabrera
Sebastian Pelizza Patricia Albornoz