Exposición acerca del metabolismo de fármacos en el organismo humana, se presenta interacción a nivel enzimático, asi como explicaciones sobre el ciclo enterohepático, y el efecto del primer paso.

2. INTRODUCCIÓN:
El primer estudio fue llevado a cabo por Alexander
Cure en 1841.
En 1950 se descubrió diversas enzimas y los
mecanismos implicados en la biotransformación de
fármacos.
En los años 60 se relaciono diferencias metabólicas
con diferentes efectos farmacológicos.
En los años 70 se desarrollaron los modelos de
eliminación hepática, se apresio la importancia del
polimorfismo genético, aumentó el conocimiento sobre
isoformas especificas de enzimas y se introdujo el
concepto de medicamento marcadores del
funcionalismo hepático.

3. Conceptos y
características generales
El metabolismo o
biotransformación es una
alteración en la estructura
química del fármaco que
ocurre en virtud de la
permanencia de el mismo
en un sistema biológico.
*Una única enzima puede
metabolizar una gran
variedad de compuestos
químicamente diferentes.
*Multidisciplinaridad
enzimática: distintas
enzimas pueden participar
en la biotrasformación de
un fármaco único.
*Polifuncionalidad del
sustrato y un fármaco
determinado pueden sufrir
diferentes tipos de
reacciones.
El proceso de
biotransformación no solo
facilita la excreción y
minimiza la carga
xenobiótica total del
organismo, mediante su
transformación en
múltiples productos, sino
que además supone un
descenso en las
concentraciones.

4. Importancia farmacocinética
y farmacodinámica
Condiciona el perfil farmacocinética al ser el
determinante de la biodisponibilidad y el
aclaramiento.
La biotransformación condiciona la actividad
farmacológica por diversos mecanismos que
implican inactivación, activación,
potenciación o bien modificaciones en el
perfil de toxicidad.
El impacto PK-PD es tan significativo que la
caracterización precoz del perfil metabólico,
de la velocidad y grado de biotransformación,
de las rutas metabólicas implicadas, de las
enzimas responsables de las mismas e incluso
de sus posibles efectos sobre determinadas
enzimas es hoy en día, no solo necesario sino
también exigible desde las fases iniciales del
desarrollo de los nuevos medicamentos.

5. Tipos de
metabolitos
Los metabolitos
importantes son aquellos
cuyas concentraciones
son similares o
superiores a las del
fármaco precursor o que
representan
individualmente más del
30% de su eliminación
global.
Los metabolitos
dependiendo de la
similitud estructural y
como la conformación
bioactiva del precursor se
mantenga o mejore
durante el proceso de
biotrasformación pueden
ser inactivos o activos e
incluso antagónica a la
del fármaco original.

6. Metabolismo de capacidad
limitada
푣푒푙푐푖푑푎푑 푑푒푙 푚푒푡푎푏표푙푖푠푚표 =
푉푀퐶
퐾푀 + 퐶
푣푒푙푐푖푑푎푑 푑푒푙 푚푒푡푎푏표푙푖푠푚표 =
푉푀
퐾푀
C = 퐾′푀C

7. 1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas
3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación

8. METABOLISMO HEPÁTICO Se localiza entre el tracto
1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones
metabólicas
3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
gastrointestinal y el bazo y la vena cava
La sangre accede al hígado por la vena
porta y arteria hepática, pasa por los
sinusoides y sale del hígado por la
vena hepática
Hepatocitos dispuestos
tridimensionalmente están en
contacto con espacio de Disse y
canalículos de la bilis
Facilita el intercambio rápido de
fármaco y metabolitos entre el plasma y
hepatocitos, y entre hepatocitos y bilis.

9. METABOLISMO HEPÁTICO
 En la actualidad se conoce transportadores que
intervienen en la captación y excreción de fármacos
T. Captación y salida por la
membrana sinusoidal
T. En la salida de fármacos y metabolitos
a la bilis por la membrana canalicular
biliar
OATP (poli péptido transportador
de aniones orgánicos)= ácidos
biliares (bilirrubina), hormonas
(tiroideas y esteroideas), fármacos
anti-cáncer, antibióticos, anti-diabéticos,
toxinas y venenos.
OAT(transportador de aniones
orgánicos)
OCT(Transportador de cationes
orgánicos)
NTCP (Transportador poli catiónico
de sodio y potasio)
MDR1
MDR3
MRP2
BCRP
BSEP

10. 1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas
3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
FASE I FASE II
FUNCIONALIZACIÓN O
PRESINTÉTICAS
Reacciones de oxidación, reducción e
hidrólisis
Mediadas por enzimas del citocromo P-
450, flavinmonooxigenasas, estearasas
y amidasas
DERIVATIZACIÓN O SNTÉTICAS
Reacciones de conjugación
Mediadas por enzimas TRANSFERASAS
que en función del grupo incorporado a
la molécula son-. UGT,ST y NAT

12. 1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas
3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
La oxidación es la RX. Metabólica
mas importante la que se produce
por el sistema CYP-450
Se encuentra en la fracción
microsomial del hígado (mb.
del Retículo endoplasmático
liso)
Consta de dos enzimas:
Citocromo p-450
NADPH-citocromoP-450
reductasa
NADPH + H+ + 02 + SH NAPD+ H20 + S-OH
Traspaso de electrones desde el NADPH al
citocromo P450, catalizado por la enzima de
membrana NADPH citocromo P450 reductasa.

13. Mecanismo de acción del
citocromo P450.
En él, el Fe3+ representa al
hierro del grupo heme del CYP
oxidado, RH y ROH a los
sustratos y productos
respectivamente. En este ciclo
de óxido-reducción se liberan
anión superóxido (O2•-) y
peróxido de hidrógeno (H2O2).

14. Nomenclatura actual de las
isoenzimas del CYP
CYP- 3A 4/5 RAÍZ
FAMILIAS
SUBFAMILIA
ISOENZIMAS O
ENZIMAS
INDIVIDUALES
La familia 1,2 y 3 contribuyen en la biotransformación de
los medicamentos
Las 3A4 y 3A5 son las mas importantes porque predominan
en hígado e intestino

15.  Interacciones en el proceso de biotransformación por la isoforma 3A4
del citocromo P450.
 A)La enzima es responsable de la formación de metabolitos.
 B)Cuando actúa un inhibidor disminuye la formación de metabolitos,
se incrementan las concentraciones del fármaco y puede aparecer
aumento del efecto farmacológico y del riesgo de reacciones
adversas. RAM: reacciones adversas medicamentosas.

16. ENZIMAS DEL CITOCROMO P450
CYP 1A2 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 CYP3A4
Sustratos
Imipramina1
Amitriptilina1
Clozapina3
Cafeína
Fenacetina
Tacrina
Tamoxifen
Teofilina
Fenitoina
Diclofenac
Hexobarbital
Ibuprofen
Losartan
Tolbutamida
Warfarina
Citalopram1
Clomipramin
a1
Diacepam2
Imipramina1
Mefenitoína
Moclobemid
a1
Omeprazol
Propanolol2
Neobarbital
Amitriptilina
1
Codeína
Clomipramin
a1
Debrisoquina
Desipramina
1
Dextrometor
fan
Encainida
Flecainida
Haloperidol3
Imipramina1
Metoprolol
Mianserina1
Nicotina
Nortriptilina
1
Paroxetina1
Perfenacina3
Propafenona
Tioridacina3
Tropisetron
Zuclopentixo
l3
Carbamacepin
a4
Codeína
Ciclosporina
Diacepam3
Dapsona
Diltiazem
Eritromicina
Estradiol
Imipramina1
Lidocaína
Midazolam2
Nifedipina
Omeprazol
Quinidina
Tamoxifen
Terfenadina
Triazolam2
Verapamil
Inhibidores
Fluvoxamina1
Fluoroquinolon
as
Cimetidina
Eritromicina
Flucoconazol
Ketoconazol
Fenitoína
Tranilciprom
ina
Ketoconazol
Fluoxetina1
Cimetidina
Quinidina
Cimetidina
Eritromicina
Estradiol
Ketoconazol
Progestágenos
Inductores
Tabaco
Omeprazol
Carne a la
brasa
Rifampicina
Barbitúricos
Rifampicina
Rifampicina -----
Dexametasona
Fenitoína
Fenobarbital
Rifampicina
(1): Antidepresivos, (2): Ansiolíticos, (3): Antipsicóticos, (4): Estabilizadores del ánimo
Fuente: Avery, 1997 (2)

17. El tamoxifeno (TAM) es un anti estrógeno no esteroidal cuyo uso de
prevención de recidiva para pacientes pre y post menopáusicas tratadas por cáncer
(ca) de mama con receptores estrogénicos (RE) positivos. Ha sido el anti
cancerígeno de mayor uso en ca de mama en los últimos 30 años. El endoxifeno es
considerado hoy como el metabolito más activo del TAM y existe una gran
controversia en relación a las interacciones farmacológicas que puedan existir a
nivel de la CYP 2D6, principal enzima responsable de su activación.

18. INHIBIDOR
Antiarritmico calse I
Rifampicina, que es el inductor del CYP3A4
más potente fármacos que activan al
receptor nuclear PXR y estimulan el
metabolismo ddel tamoxifeno por lo que si
se asocian provocan una disminución de la
eficacia del tamoxifeno.
la rifampicina junto con la doxiciclina es el
tratamiento de elección para la brucelosis. En
este caso también pudiera ser sustituida
por estreptomicina más doxiciclina

19. 1. Fisiología del hígado
2. Tipos de reacciones metabólicas
3. Sistema CYP-450
4. Reacciones de conjugación
Son mediadas por transferasas, formando glucorónicos.
La glucoronización implica rx. Del ácido uridindifosfato glucorónico (UDP-GA)
y fármacos con grupo amino, hidroxilo o carboxilo, las enzimas se
encuentran en el retículo endoplasmático y en la membrana nuclear.
HIDROFÍLICOS E INACTIVOS
ALTA CAPACIDAD Y BAJA AFINIDAD
Regulada por la expresión de las enzimas UGT se clasifican en dos
familias: 1y2
3 subfamilias (UGT1A, UGT2A y UGT2B.
REACCIONES DE ACETILACIÓN : incorporación de un radical acilo o acetilo
a los radicales de carboxilo o amino de los fármacos. INFLUENCIADOS POR
aciltranferasas

23. Metabolismo extrahepático

24. Metabolismo extrahepático
 MI es capaz de llevar a cabo reacciones metabólicas de
Fase I y II.
 Para fármacos como midazolam, ciclosporina, nifedipina
o inmunosupresores constituye la principal vía
metabólica y una barrera para la captación y
transporte hacia la circulación sistémica.
 Los procesos de biotransformación están mediados por
enzimas asociadas a la flora intestinal o por sistemas
enzimáticos localizados en células epiteliales de la
mucosa intestinal.

25. Oxidasas de
función mixta
dependientes del
CYP
Estearasas
Sistemas de
conjugación
Acetilación
Sulfatación
Metilación
Glucuronidación
El metabolismo GI en la mayoría
de l0s casos es aparente tras la
administración oral o rectal, y
ocurre durante el proceso de
absorción transcelular, cuando el
fármaco entra en contacto con
las enzimas.

26. Familias del CYP Humano
Familia Función Miembros Nombres.
CYP1
Metabolismo de drogas y esteroides (especialmente
estrógenos)
3 subfamilias, 3 genes, 1
pseudogen
CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1
CYP2 Metabolismo de drogas y esteroides
13 subfamilias, 16 genes, 16
pseudogenes
CYP2A6, CYP2A7, CYP2A13,
CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9,
CYP2C18, CYP2C19, CYP2D6,
CYP2E1, CYP2F1, CYP2J2, CYP2R1,
CYP2S1, CYP2U1, CYP2W1
CYP3
Metabolismo de drogas y esteroides (incluyendo
testosterona)
1 subfamilia, 4 genes, 2
pseudogenes
CYP3A4, CYP3A5, CYP3A7,
CYP3A43
CYP4 Metabolismo del ácido araquidónico
6 subfamilias, 11 genes, 10
pseudogenes
CYP4A11, CYP4A22, CYP4B1,
CYP4F2, CYP4F3, CYP4F8,
CYP4F11, CYP4F12, CYP4F22,
CYP4V2, CYP4X1, CYP4Z1
CYP5 Tromboxano A2 sintetasa 1 subfamilia, 1 gen CYP5A1
CYP7
Biosíntesis de las sales biliares (7-alpha hidroxilasa del
núcleo esteroideo)
2 subfamilias, 2 genes CYP7A1, CYP7B1
CYP8 Variada 2 subfamilias, 2 genes
CYP8A1 (prostaciclin sintetasa),
CYP8B1 (biosíntesis de sales
biliares)
CYP11 Biosíntesis de esteroides 2 subfamilias, 3 genes CYP11A1, CYP11B1, CYP11B2
CYP17 Biosíntesis de esteroides 17-alfa hidroxilasa 1 subfamilia, 1 gen CYP17A1
CYP19 Biosíntesis de esteroides 1 subfamilia, 1 gen CYP19A1
CYP20 Desconocida 1 subfamilia, 1 gen CYP20A1
CYP21 Biosíntesis de esteroides
2 subfamilias, 2 genes, 1
pseudogen
CYP21A2
CYP24 Degradación de la vitamina D 1 subfamilia, 1 gen CYP24A1
CYP26 Hidroxilasa del ácido retinóico 3 subfamilias, 3 genes CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1
CYP27 Variada 3 subfamilias, 3 genes
CYP27A1 (biosíntesis de sales
biliares), CYP27B1 (vitamina D3 1-
alfa hydroxylase), CYP27C1
(función desconocida)
CYP39 7-alfa hidroxilación del 24-hidroxicolesterol 1 subfamilia, 1 gen CYP39A1

28. Isoenzimas CYP
en mucosa GI
CYP3A
2
• Las actividades en intestino
e hígado no están
correlacionadas.
• El jugo de pomelo es capaz
de inactivar con
especificidad y de manera
cuasi irreversible su
actividad a nivel intestinal
• Localizada estratégicamente
• La actividad de este
transportador puede
condicionar la velocidad y
magnitud del metabolismo
Intestinal.
CYP3A
4

29. P-glicoproteína
Fármaco absorbido
Vía oral
TGI
Fármaco
Heces
Vena Porta
Enterocito
CYP 3A4
Al hígado

30. Consideraciones
 La actividad de Fase I es relativamente baja pero la actividad de
conjugación es comparable con la realizada en el hígado.
 La sulfatación de terbutalina es mayor en ID que en Hígado y la
actividad de tiopurina metiltransferasa (TPMT) es comparable
 Las rx metabólicas generalmente implicadas son degradativas,
reductivas o hidrolíticas. (Digoxina, acenocumarol )
 La actividad de B-glucoronidasas (alta) puede contribuir a la
duración de efectos farmacológicos que sufren secreción biliar en
forma de glucorónidos. Estos conjugados pueden sufrir hidrolisis
por dichas enzimas y en consecuencia, producirse reabsorción y
circulación enterohepática del farmaco.

32. Epidermis
Oxidasas de
función mixta
glucoronosiltrans
ferasas
estearasas reductasas
Testost
erona
Progest
erona
Hidroc
ortizon
a
Vidara
bina
La principal consecuencia de
disminución de la POTENCIA así
como de la DURACIÓN de los
fármacos aplicados a este nivel.
Los queratinocitos expresan de
forma constitutiva el CYP3A5,
mientras que no lo hace la
isoenzima CYP4A11, pero puede
ser inducido por la radiación
ultravileta A.
CYP2B19

33. Pulmón
 La actividad metabolizadora
puede influir en el acceso del
fármaco a circulación arterial
y a nivel de receptores para
fármacos
administrados IV.(propanolol).
 Además la formación local de
ciertos metabolitos puede ser
un mecanismo de toxicidad.
CYP2A13 es CYP1A1 CYP3A5
en la mucosa
nasal

34. Riñon
 Alta expresión de CYP como UGT
 “Para diflunisal y ácido micofenólico la glucorondación renal
es compatible con la producida en el hígado”(Fissher 2001)
CYP3A5-(Acetazolamida)

35.  Un fármaco puede sufrir uno
o varios efectos de primer
paso o bien acceder
inalterado a CS.
 En vía intravenosa el
fármaco puede sufrir un
efecto del primer paso
pulmonar.
 La sangre que perfunde en el
tracto gastrointestinal a
excepción de la cavidad
bucal y el recto inferior,
drena en el hígado vía vena
porta.
Metabolismo
Presistémico
Perdida del
fármaco
antes de su
acceso a la
circulación
Debido a la
primera
exposición del
sistema
responsable de
su
biotransformaci
ón.
Efecto del primer paso

36. Significación clínica del efecto del primer paso
 A nivel GI las enzimas constituyen
una barrera enzimática difícil de
sortear para medicamentos por vía
oral.
 Los mecanismos mediados por CYP y
CYP3A son los más frecuentes.
Cuadro 4.9. Fármacos con significativo metabolismo
presistémico y enzimas implicadas (Fuente: G.R.
Wilkinson. Drug motabolism and variability among
patients in drug response N Engl J Med 2005; 352; 21)
Cuadro 4.10. Contribución intestinal al
metabolismo presistémico de algunos
fármacos
Fármaco F media % Porcentaje
de
extracción
intestinal
Porcentaje
de
extracción
hepática
Ciclosporina 27 59 24
Midazolam 30 43±24 44±14
Verapamilo 16 58 62

37.  Mayor variabilidad interindividual de la BD del fármaco con un elevado
efecto del primer paso.
Alprenolol
Diferencia de
concentraciones
medias
Alcanzadas en
equilibrio tras la
administración de la
misma dosis en
voluntarios sanos es
14 veces VO frente 4
vía IV.
• Principal implicación clínica =
EPP(>50%)
Pentazocina
3omg IV
Pentazocina
100mg VO

38.  El metabolismopresistémico supone
diferencias en el perfil de la curva
de concentraciones- tiempo de
metabolitos dependientes de la vía
de administración.
 Ej: Nortriptilina, Co de 10-OH-Nortriptilina
(VO) > (IV)
Aunque el perfil de curva sea diferente
en función de la vía , la fracción de
dosis convertida al metabolito, no
debe ser muy distinta siempre que la
absorción sea completa, el
metabolismo sea la única vía de
eliminación y se trate de una cinética
lineal.
Vía oral
Lidocaina
Naloxona
Nitroglicerina
Dihidroergotamina

39. Genéticos y
Fisiopatológicos
Endógenos
Ambientales
Exógenos
Factores Genéticos
Polimorfismo
genético
(variaciones
en la
secuencia de
DNA entre
individuos)
Variaciones
significativas
Cambios en
la actividad
de la enzima,
a la ausencia
de la enzima
Numerosas isoenzimas de estas
familias presentan una gran
variabilidad interindividual en su
actividad catalítica, debida
principalmente a influencias genético-ambientales
(CYP1A1, 1A2, 2A6, 2C9,
2C19, 2D6, 2E1, 3A4 y 3A5)

40. Base molecular del polimorfismo genético para
enzimas implicadas en la biotransformación de
fármacos

41. Polimorfismo genéticos en enzimas que intervienen en la
Enzima Frecuencia Fármacos Efectos
asociados
CYP2D6 5-10 % (deficientes
metabolizadores)
1-10 % (metabolizadores
ultrarrapidos)
Antiarritmic
os
Antidepresiv
os
Antipsicótic
os
Proarritmogénico
Toxicidad e
ineficacia
Discinesia
biotransformación de fármacos
(CYP2D6) es probablemente el polimorfismo genético mejor caracterizado entre las
enzimas citocromo, y representa la primera enzima metabolizadora de drogas
humana en ser clonada y caracterizada a nivel molecular

42. Isoniacida (tratamiento de la
tuberculosis) puede causar
efectos neurotóxicos en los
acetiladores lentos, pero
daños hepáticos en los
acetiladores rápidos
Acetiladores rápidos
La población europea (40%), Asia (80%)
Acetiladores lentos
Caucasianos y Africanos (50%)

43. Factores
Fisiológicos
EDAD
Fármacos en la infancia
 después del primer año de vida, los procesos
metabólicos están maduros, pero debido a
que el volumen hepático en proporción al
peso es mayor que en el adulto, la capacidad
metabólica es superior
 El cloranfenicol es tóxico en recién nacidos
debido a la baja glucuronidación
Fetos
 solo tienen subfamilia CYP 3A (pobre
metabolismo total)
Mayor
 Metabolismo y excreción disminuidos
 Capacidad enzimática disminuida
GÉNERO
Diferencias basada en ciclo menstrual
N-demetilación de eritromicina F>M
Oxidación de propanolol M>F
EMBARAZO
-Embarazo = concierne al feto (edad)
Placenta de fumadoras es alta en familia CYP1A
Consecuencias para el feto o neonato:
teratogénesis, carcinogénesis, hepatotoxicidad.

45. Factores Ambientales
Dietas bajas en proteínas pueden producir:
 Disminución de los niveles plasmáticos de albúmina,
lo que implica un aumento de la fracción libre de
tóxico no ligado a proteínas y por consiguiente una
toxicidad aumentada.
 Disminución del nivel de enzimas microsomales
hepáticas y una consiguiente alteración en el
metabolismo de los tóxicos.
 El alimento rico en grasa, aumenta la absorción de la
Griseofulvina; también de ciertos Plaguicidas y
organoclorados.
La dieta hiperproteica tiende a aumentar el metabolismo
oxidativo de ciertos fármacos (ej: teofilina), el aumento de
carbohidratos tiende a reducirlo

46. Inducción del
Metabolismo
Incremento en la capacidad
de biotransformación como
consecuencia de una
estimulación especifica de
la síntesis de ciertos
sistemas enzimáticos o del
flujo hepático

47. Base fundamental del conocimiento del perfil de un nuevo
fármaco.
Estudios in
vitro
Estudios in
vivo

48. ESTUDIOS IN VITRO
Identificar
las
principales
vías
metabólicas
que afectan
al fármaco
Anticipar los
efectos del
fármaco
Indican si un fármaco es o no
inductor o inhibidor de las vías
metabólicas de otro.
Considera al
hígado como
órgano
principal de
biotransform
ación
Se usan:
Supersomas
Fracciones
subcelulares
(microsomas
, citosol,
fracción S9)
Líneas
celulares
Líneas
celulares
transgénicas
Hepatocito
s
Corte de
hígado

49. ESTUDIOS IN VITRO
Supersomas UGT y
CYP humanas
• Células de insectos
carecen de
actividad
endógena del CYP
y UGT
• Estudia la
isoenzima
específica de la
biotransformación
• Relación fármaco-fármaco
• Limitación S.UGT
centro activo
protegido por una
barrera
hidrofóbica
Fracciones
subcelulares
• Caracterizar el
perfil metabólico,
las enzimas
responsables del
CL de los fármacos
• Los cofactores
necesarios para la
biotransformación.
• Inconveniente:
obtención de las
fracciones
subcelulares, por
centrifugación
diferencial de
homogenados
celulares
Microsomas
hepáticos humanos
• Vesículas del retículo
endoplasmático, a
partir de
homogeneados de
hígado, contienen
UGT y CYP
• Mantienen su
actividad durante año
a bajas °T (-70°C)
• Estudia la influencia
de determinadas
isoenzimas en
presencia de
inhibidores
específicos
• Limitación: no
aportan estimaciones
cuantitativas de
biotransformación in
vivo

50. ESTUDIOS IN VITRO

51. Fracciones citosólicas
del hígado humano
• Contiene enzimas
solubles responsables
de reacciones de fase
II
• Estudia la capacidad
de biotransformación
de NAT, ST, CST en
función de los
cofactores añadidos .
Fracciones hepáticas S9
• Contienen fracciones
microsomales y
citosólicas
• Predice la
mutagenicidad de un
compuesto
• Sistema de activavión
metabólica para
provar la
genotoxicidad del
fármaco.
• Caracterización más
completa de los
perfiles metabólicos
Líneas celulares hepáticas
• Expresión incompleta
de las enzimas
• Las células se aíslan de
tumores primarios del
parénquima hepático
• Mantiene la estabilidad
de la expresión
fenotípica en cultivos
• La línea celular más
frecuente es la Hep
G2, mantiene
funciones metabólicas
hepáticas específicas.
ESTUDIOS IN VITRO

52. •Expresión recombinante de enzimas
•Mayor expresión de isoenzimas CYP
y UGT
•Evaluar las diferencias en la
citoxicidad de los metabolitos
•Genera metabolitos para estudiar
su estructura e interacciones
Líneas celulares
transgénicas
Hepatocitos
•Comportamiento similar al hígado
humano in vivo
•Se aíslan con la técnica de
digestión con colagenasa
•Modelo para estudios toxicológicos
•Mantiene la actividad enzimática
fase I y II

53. Corte de
hígado
Hígado
perfundido
• No requiere proteasa
• Estudio de los a.a en
varios órganos de
diferentes especies
• Señalan
biotransformación cuali-cuantitativa
• Limitación: daño celular
en bordes del corte
• Método de obtención
complejo,
reproducibilidad pobre y
la integridad funcional se
limita a 3h
• Se puede recoger y
analizar la bilis
• Limitación: hígado
humano no disponible

54. El estudio en animales de acuerdo a
la especie es decisivo para esclarecer
las rutas metabólicas y los factores
que influyen en la biotransformación
Inconveniente: la extrapolación al
hombre de los resultados
ESTUDIOS IN VIVO
El estudio de los metabolitos in vivo
dependen del metabolismo
extrahepático, tiempos de toma de
muestras y la síntesis de los
metabolitos
Se realiza por V.I, molécula marcada
con un radioisótopo adecuado a una
determinada posición
El muestreo en diferentes fluidos,
tejidos mediante técnicas apropiadas