L'analisi del genoma del virus del Nilo dell'Ovest (West Nile virus) isolato da un paziente Veneto spiega il meccanismo attraverso il quale il virus è riemerso in Italia diffondendosi rapidamente in diverse Regioni.

1. Padova, 19 Ottobre 2009
Infezione da West Nile virus
nella Regione Veneto

2. Struttura di West Nile virus
 Famiglia: Flaviviridae
 Genoma: ssRNA+; 10.800-11.000 nt
 Diamentro 50 nm, simmetria icosaedrica
 Envelope
 Glicoproteina E (dimero): determinante antigenico
maggiore, media il legame e la fusione con la
cellula ospite.
 Proteina M: prodotta durante la maturazione.
Proteina E (dimero)
Proteina M
Proteina C
Membrana

3. Genoma di WNV

4. Ciclo replicativo di WNV
Receptor binding and Transport, maturation, and
endocytosis release
Acid-catalyzed fusion
and uncoating
+
Intracellular
budding
Mukhopadhyay et al. Nat Rev Microbiol 2005

5. Ciclo di trasmissione
e ospiti naturali di WNV

6. Infezione da WNV nell’uomo: “Iceberg”
~10% mortale
(<0.1% dei casi di infezione)
1 caso di infezione del SNC
ogni ~150 casi di infezione <1%
Encefalite
~20%
“Febbre West Nile”
~80%
Infezione asintomatica

7. Prima segnalazione di WNV in Italia
Focolaio di infezione nei cavalli
presso la Padule di Fucecchio,
Toscana, 1998.
Nessun caso umano.
Autorino et al. Emerg Infect Dis 2002

8. Piano di sorveglianza veterinaria, dal 2002
ABRUZZO: Foce del fiume Vomano
BASILICATA : Lago di San Giuliano
CALABRIA: Foce del Fiume Neto
CAMPANIA: Serre Persano
EMILIA-ROMAGNA : Valli di Comacchio
FRIULI VENEZIA GIULIA: Laguna di
Grado e Marano
LAZIO: Lago di Sabaudia
MARCHE: Sentina
MOLISE: Foce del Biferno
PUGLIA : Manfredonia
SARDEGNA: Stagno di S ' Ena Arrubia
SICILIA : Stagni costieri di Vendicari
TOSCANA: Padule di Fucecchio
UMBRIA: Lago di Trasimeno
VENETO: Valle Averto - Laguna Sud di
Venezia

9. Piano di sorveglianza veterinaria in Italia
Presenza di WNV nei cavalli
2003 2004 2007
2005 2006

10. Primi casi di infezione sintomatica nei cavalli, 2008
Venezia
Padova
24 sett 2008
Rovigo
8 sett 2008
Ferrara
Ravenna

11. Sorveglianza dell’infezione da WNV
nella Regione Veneto, 2008
– Sorveglianza passiva: nei pazienti con sospetta infezione da WNV.
– Sorveglianza attiva: nei soggetti a rischio di infezione.
Barzon et al. Euro Surveill. 2009

12. Casi di infezione sintomatica da WNV
nella Regione Veneto
10 km
casi del 2008
casi del 2009

13. Casi di infezione sintomatica da WNV in Italia, 2009
Rizzo et al. Euro Surveill. 2009

14. Casi di infezione sintomatica da WNV in Italia
2008
2009
Rizzo et al. Euro Surveill. 2009

15. Sieroprevalenza di WNV nei donatori di sangue
della provicia di Rovigo, 2009
- 1.245 donatori di sangue (dal 23 luglio al 19 settembre 2009):
 20 (1,6%) IgM-/IgG+
 1 (0,08%) IgM+/IgG-
 3 (0,2%) IgM+/IgG+
Totale: 24/1245 (1,9%)

16. Isolamento di WNV da un donatore di sangue
residente in provincia di Rovigo, 2009
Isolamento in cellule Vero E6

17. Isolamento di WNV da un donatore di sangue
residente in provincia di Rovigo, 2009
Sequenziamento del genoma virale

18. Isolamento di WNV da un
donatore di sangue
residente in provincia di
Rovigo, 2009
Albero filogenetico

19. Isolamento di WNV da un donatore di sangue
residente in provincia di Rovigo, 2009
Ricerca di mutazioni nel genoma virale
AA position in AA position in Italy-98 Italy-08 Italy-08 Italy-09
WNV polyprotein WNV proteins AF404757 FJ483548 FJ483549 GU011992
(equine) (magpie) (magpie) (human)
851 NS1-59 Val Ala
1228 NS2A-74 Ile Val Val Val
1248 NS2A-94 Ile Thr
1494 NS2B-117 Ile Val Val
1754 NS3-249 Thr Pro Pro Pro
2209 NS4A-84 Val Ile Ile Ile
2224 NS4A-98 Pro Ser Ser Ser
2581 NS5-53 His Tyr
2786 NS5-258 Val Ala Ala Ala
2950 NS5-422 Arg Lys Lys Lys
AA: aminoacido

20. La mutazione Thr249Pro è stata associata a
virulenza nel corvo americano
Brault et al. Nat Genet. 2007

21. Predizione dell’effetto della mutazione Thr249Pro
sulla struttura dell’elicasi NS3 di WNV

22. La mutazione Thr249Pro è stata identificata in altri
ceppi di WNV responsabili di infezione nell’uomo
Brault et al. Nat Genet. 2007

23. Diffusione di WNV negli USA
1999 2000 2001 2002
2003 2004 2005 2006
2007 2008 2009

24. Focolai di WNV disease negli equidi in Italia, 2008
CESME, Teramo, bollettino 2008

25. Focolai di WNV disease negli equidi in Italia, 2009
CESME, Teramo, 14 ottobre 2009

26. Ringraziamenti
Regione Veneto
Azienda Ospedaliera
di Padova