O documento descreve os passos para extrair DNA de amostras de kiwi, cebola e fígado. Inclui instruções detalhadas para o procedimento de extração e fotos ilustrativas dos resultados.
PROJETO DE EXTENÇÃO - GESTÃO DE RECURSOS HUMANOS.pdf
Extracção do DNA
1. Cebola
Kiwi
Fígado
Escola Secundária de Bocage
Ciências Naturais – 9º ano – 2011/ 2012
Prof. Gabriela Bruno
2. Extracção do DNA
Toda a informação necessária para criar um
organismo encontra-se no DNA. Esta molécula é
usada durante o período de vida de um organismo
para fornecer instruções para milhões de
processos celulares que ocorrem constantemente.
Para estudar o modo como essas informações são
comunicadas à célula, os cientistas isolaram o DNA
e estudaram o modo de interacção do DNA com as
proteínas e RNAs.
3. Extracção do DNA
Este trabalho laboratorial usa um processo
semelhante ao utilizado pelos cientistas quando
começaram as primeiras investigações sobre DNA.
Para isolar o DNA os cientistas separaram-no dos
outros componentes celulares. As células são
fragmentadas e o DNA separado do conteúdo
lipídico das membranas da célula e dos organitos.
Em seguida o DNA é separado das proteínas.
4. Extracção do DNA
Pode-se realizar um procedimento muito simples para
extracção de DNA com coisas comuns existentes na
cozinha. Ao fim de 40 minutos pode-se observar aquilo
que os cientistas levaram muitos anos a descobrir.
Embora nesta actividade se utilizem procedimentos e
instrumentos muito simples que, não permitindo a
separação do DNA de proteínas e de RNA, possibilita
a visualização do conteúdo nuclear, sob a forma de
filamentos brancos.
Vão ser utilizados diferentes tecidos e ficarás apto a
observar DNA de várias origens, uma vez que todas as
células contêm DNA.
6. Extracção do DNA
Procedimento
1º Passo :
Materiais
100ml de água a 60 ̊C
4 gr de sal (NaCl)
10 ml (1 colher de chá) de detergente
Álcool etílico (Etanol) frio
1 kiwi ou ½ cebola ou 25 gr de fígado.
7. Extracção do DNA
Procedimento
1º Passo :
Materiais
Copo Gobelé
misturador Tubos de
(para o ensaio
fígado) Gaze ou
Almofariz filtros de
Colher de chá café
Bisturi Marcador ou
Espátula etiquetas
8. Extracção do DNA
Execução
Cortar em pedaços pequenos o kiwi;
Reduzir a uma pasta, no almofariz;
Adicionar o sal e o detergente;
Adicionar água a 60 ̊C;
Filtrar para o gobelé, previamente identificado,
utilizando a gaze;
Agitar suavemente a mistura e por 5 ou 10 minutos;
Passar cerca de 2,5 ml para um tubo de ensaio,
previamente identificado;
Manter o tubo aquecido na mão enquanto introduz
cerca de 5 ml de etanol;
Deixar repousar durante cerca de 5 minutos.
Observar.
9. Extracção do DNA
Foto 1 – Manter o tubo aquecido para que haja
contraste de temperaturas.
15. Extracção do DNA
Tópicos para discussão
Quais são as estruturas celulares e qual a sua
composição?
As membranas, celular e nuclear são compostas
principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se
aprisionadas na bicamada lipídica.
Os organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos
nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana.
As paredes celulares das células vegetais são compostas
essencialmente por polissacarídeos.
As pequenas estruturas celulares são compostas por
substâncias com diferentes propriedades químicas, pelo que
os procedimentos experimentais devem ser definidos de
modo a separar um determinado constituinte celular das
restantes partes, sem causar muitos danos.
16. Extracção do DNA
Onde se encontra o DNA na célula?
Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da
célula.
O restante DNA encontra-se em locais
específicos como, por exemplo, organitos (as
mitocôndrias e os cloroplastos possuem o seu
próprio DNA).
17. Extracção do DNA
Qual a função dos reagentes usados na experiência?
Sal (NaCl)?
Detergente?
Álcool?
18. Extracção do DNA
Quais as semelhanças e as diferenças entre o
DNA de origem animal e o de origem vegetal?
Porque motivo não se pode ver a dupla hélice que
constitui a molécula de DNA?