1. UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – ICSDEPARTAMENTO DE BIOINTERAÇÃODISCIPLINA: IMUNOLOGIA I – ICS 045 REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO Trabalho realizado pelo Acadêmico de Medicina Veterinária da UFBA José Tadeu Raynal, sob orientação dos Professores Robert Schaer, Roberto Meyer, Claudia Brodskin e Ricardo Portela. Atualizado em Fevereiro de 2010.
3. CARACTERÍSTICAS BÁSICAS As reações de aglutinação decorrem da ligação entre o Ac e Ag particulado. É o agrupamento de partículas, usualmente por moléculas de Ac, que se ligam a Ag na superfície de partículas adjacentes. Agregação visível de partículas Eritrócitos Bactérias Fungos Látex
13. AGLUTINAÇÃO DIRETA Neste teste, o antígeno faz parte naturalmente da célula, e haverá aglutinação dessas células promovida por anticorpo contra esses antígenos (antígeno é naturalmente insolúvel). Anticorpo Antígeno Complexo precipitado Ex: Identificação de antígenos eritrocitários na tipagem sanguínea, reação de Widal (febre tifóide).
14. AGLUTINAÇÃO DIRETA Na reação de aglutinação direta utilizam-se partículas antigênicas insolúveis em sua forma íntegra ou fragmentada. Hemácias, bactérias, fungos, protozoários podem ser aglutinados diretamente por anticorpo. Os testes para detectar anticorpos específicos são realizados empregando-se diluições em série do anticorpo, frente a uma quantidade constante de antígeno. Após um período de incubação, a aglutinação se completa e o resultado é geralmente expresso como o título do anti-soro, isto é, a máxima diluição em que ocorre a aglutinação. Tipagem ABO Testes confirmatórios para sífilis Salmonelose aviária Coriza infecciosa das galinhas Micoplasmose Brucelose Aglutinação bacteriana Presença de infecção Diferenciação de espécies
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16. INIBIÇÃO DA AGLUTINAÇÃO Teste de gravidez NEGATIVO POSITIVO Urina Soro anti hCG + Urina Soro anti hCG + Ac Ac Particulas revestidas com hCG Incubados e colocados em placa Incubados e colocados em placa + + hCG Positivo não aglutina, pois os Ac se ligaram ao hCG da urina na incubação Negativo aglutina
17. TESTE DE COOMBS Acantiimunoglobulinas (Robert Coombs). Doença Hemolítica do Recém Nato – mãe produz IgG anti-Rh (DHRN) Não aglutinam os eritrócitos. Direto: Ac ligados aos eritrócitos fetais. Indireto: Ac anti-Rh não aglutinantes no soro materno. Permite detectar incompatibilidades Rh, prevenindo contra DHRN.
18. RELAÇÃO ANTÍGENO X ANTICORPO O efeito PRÓ-ZONA ocorre devido ao excesso de anticorpos na amostra, que ocorre nos soros fortemente reagentes. Pode ocasionar resultados FALSO-NEGATIVOS. Para evitar o efeito pró-zona, emprega-se soro diluído. Ocorre FALSO-POSITIVOS