Este documento describe tres pruebas de coagulación: el tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPa), el tiempo de protrombina (TP), y el tiempo de trombina (TT). El TTPa mide la integridad de las vías intrínseca y común de la coagulación. El TP evalúa específicamente la vía extrínseca y común. El TT mide la función y calidad del fibrinógeno en la última fase de la coagulación.
4. Tiempo de tromboplastina parcial
activada
Es un ensayo de escrutinio que permite valorar las
vías intrínseca y común de la coagulación.
Consiste en la medición del tiempo que tarda en
coagular el plasma en presencia de una
tromboplastina parcial activada mediante una
sustancia de contacto más la presencia de calcio.
Refleja la integridad global del sistema intrínseco
de la coagulación.
5. Indicaciones clínicas
Se emplea en la evaluación preoperatoria y es
fundamental para descartar deficiencias de factores de
la coagulación, así como en el seguimiento de la
terapia anticoagulante con heparina de alto peso
molecular.
La prolongación del TTPa se observa en deficiencias de
FVIII, FIX, FXI, FXII, precalicreína y cininógeno de alto
peso molecular, falla hepática, CID, Ab circulantes
específicos para algún factor de la vía intrínseca e
inhibidores tipo lúpico.
6. Fundamento
Se basa en la recalcificación del plasma in vitro en
presencia de fosfolípidos como sustituto de
plaquetas y de una sustancia activadora.
7. Método
Valor de referencia: 60 a 85 segundos
Obtención de
sangre
Diluir 1:10 con
citrato de
sodio (3.8%)
Centrifugar 20
minutos a
3000rpm
Extraer
plasma
Baño María a
37°C
Observar a
intervalos de
2 segundos
Medir TTPa
antes de 2
horas
8. Recomendaciones
Es importante incluir en el informe del TTPa el resultado obtenido del plasma del paciente,
así como el TTPa del plasma testigo normal, si la diferencia entre ambos tiempos es > 5
segundos, el resultado es anormal y debe estudiarse al paciente.
Los reactivos que emplean caolín como activador de la tromboplastina parcial son más
sensibles a la presencia de anticoagulante lúpico y heparina.
Dependiendo del origen y calidad del reactivo, éste será sensible a la deficiencia de
factores de la coagulación, por lo que debe seleccionar el tipo de tromboplastina que se
ajuste a sus necesidades.
Para la deficiencia de factor XII se recomienda medir el TTP con reactivo de
tromboplastina parcial sin activar, o bien, realizar la dosificación directa del FXII, ya que
algunos de los reactivos previamente activados no detectan deficiencias de este factor
y/o la de otros elementos de la fase de contacto.
10. El tiempo de protrombina (TP)
un método que mide el
tiempo que tarda en
coagular el plasma citratado,
después de agregarle un
extracto de tromboplastina
completa y calcio.
Evalúan específicamente la
vía extrínseca y común de la
coagulación sanguínea.
13. INR (Internacional Normalized Ratio)
El INR es un método de estandarización cuyo objetivo es reducir diferencias entre reactivos de
tromboplastina mediante un proceso de calibración en el que todas las tromboplastinas
comerciales se comparan con una preparación de referencia internacional.
Se usa en el tratamiento con anticoagulantes orales, y se hizo necesario debido a la distinta
sensibilidad de las tromboplastinas comerciales usadas como reactivo.
INR= TP del paciente ISI
TP del testigo
Dónde
ISI= Índice de Sensibilidad Internacional
14. Cálculo de Actividad Protrombotica
Es una expresión derivada de la curva obtenida por Quick.
Actividad Protrombinica = _K___
( % del normal) TP-a
Dónde:
TP es el tiempo de Protrombina en segundos
K= 330 a= 8.7
Para tiempos de protrombina normales distintos a 12 segundos debemos emplear:
Actividad Protrombinica = _TP normal en segundos -8.7__
( % del normal) TP paciente en segundos -8.7
16. Recolectar 4.5 mL de
sangre venosa en un
tubo con citrato de
sodio al 3.8%
Homogenizar
perfectamente la
muestra mediante
inversión.
Centrifugar a 3000
revoluciones por 20
minutos.
Extraer el plasma de la
muestra cuidadosamente
con pipeta Pasteur.
En un tubo se coloca la
misma cantidad de
tromboplastina histica que
de cloruro de calcio
0.025M. Se coloca en baño
maría 1 minuto.
Colocar 0.1 mL del plasma
en estudio en un tubo de
13x100 incubar a 37 °C
durante un minuto.
Agregar la mezcla de
tromboplastina hística con
cloruro de calcio.
Poner en marcha el
cronómetro en cuanto se
agregue la mezcla de
tromboplastina histica-
cloruro de calcio.
El tiempo de coagulación se determina
observando la aparición de las primeras
trazas de fibrina al inclinar el tubo. Con un
asa bacteriológica tratar de jalar el
plasma para poder observar los hilos de
fibrina.
M
E
T
O
D
O
L
O
G
Í
A
18. Evalúa la última fase de la coagulación, es decir, la
función y calidad del fibrinógeno. La trombina es una
enzima altamente específica que actúa sobre el
fibrinógeno, transformándolo en fibrina
El TT es un parámetro que permite medir el tiempo
durante el cual el fibrinógeno presente en el plasma in
vitro se transforma en fibrina, por la adición de una
cantidad estandarizada de trombina.
19. La presencia de una
cantidad de trombina
determinada en un plasma
normal forma un coágulo en
un tiempo definido y
constante que permite
investigar la etapa de
fibrinoformación.
Valores de referencia
18 segundos
20. MÉTODO MANUAL
Preincubar el reactivo de Trombina a 37°C
En tubos de 10x75 mm calentar por separado a
37 ºC por 3 min, 200μL de los plasmas control, testigo y
problema, e inmediatamente añadir 200μL del reactivo de
Trombina precalentado.
Mezclar suavemente, y accionar el cronómetro y
detenerlo al observar el inicio de la formación del coágulo. El TT
por duplicado no debe ser diferente
± 1 segundo entre ambos resultados.
21. Elaborado por:
Viridiana Lizeth Luna González
Omar Fernández Rivera
Bibliografía:
• Millán A. Manual sobre pruebas de
coagulación y coagulopatías de la
hemostasia primaria y evaluación de su
utilidad en los estudiantes de las áreas
biomédicas. México.
Facultad de Estudios
Superiores Zaragoza
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