7.1 (1)
- 1. 1
ปฏิ บติการที่ 7 ในสิ่ งมีชีวิตมีสารเคมี
ั
กิ จกรรมที่ 7.1 กรดนิ วคลีอิก
เรื่องการสกัดDNA จากหัวหอมและมะเขือเทศ
ชื่อกลุ่ม...............................................................................
สมาชิ ก
1.....................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา...........................
2.....................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา...........................
3......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา...........................
4......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา...........................
5......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา...........................
6......................................................................ห้อง....................รหัสนักศึกษา...........................
จุดประสงค์
1. เพือศึกษาวิธการสกัด DNA จากหอมหัวใหญ่และมะเขือเทศ
่ ี
2.เพือศึกษาการแปลงสภาพของโปรตีน
่
สมมติ ฐาน
ในหอมหัวใหญ่และมะเขือเทศมี DNA ซึงเป็ น สารทางพันธุกรรม ทีสามารถสกัด
่ ่
ออกมาได้
ตัวแปรต้น
หอมหัวใหญ่ , มะเขือเทศ
ตัวแปรตาม
สายทางพันธุกรรม DNA
- 2. 2
ตัวแปรควบคุม
ปริ มาณสารสกัด DNA
ปริ มาณของหอมหัวใหญ่ , มะเขือเทศ
ปริ มาณ Alcohol 95 % ,เวลาที่ใช้ในการปัน
่
บทนา
DNA หรือ Deoxyribonucleic acid เป็ นสารพันธุกรรมทีโดยทัวไป จะพบอยูในนิวเคลียส
่ ่ ่
ของสิงมีชวต นอกจากนี้ยงพบได้ในไมโทคอนเดรียด้วย DNA ไม่สามารถมองเห็นได้ดวยตา
่ ีิ ั ้
เปล่า แต่สามารถศึกษาได้จากการมองผ่านกล้องจุลทรรศน์ หรือการสกัดออกมาโดยใช้เทคนิค
ชันสูง (ซึงมีความยุงยากซับซ้อนในขันตอนการทดลอง) แต่การทดลองนี้จะแสดงให้เห็นถึง
้ ่ ่ ้
วิธการง่ายๆ ทีจะสกัด DNA ออกมา โดยใช้สารต่างๆ ทีมอยูในห้องปฏิบตการในมหาวิทยาลัย
ี ่ ่ ี ่ ั ิ
หรือโรงเรียน
อุปกรณ์
1.หัวหอม 6 หัว มะเขือเทศ 6 หัว
2.น้ ายาล้างจาน 1 ขวด(เล็ก)
3. NaCl 50 g
4.แอลกอฮอร์ 95% (แช่ในตูเย็นช่องแช่เย็นจัด ทิงไว้ขามคืน)
้ ้ ้
5.บีกเกอร์ 250 ml 12 อัน หลอดทดลอง 12 อัน
6.กระดาษกรองหรือกระชอนกรองกาก (หรือผ้าพันแผลทบหลายชัน) ้
7. กรวยกรอง,แท่งแก้ว,มีดปอกผลไม้,ถุงมือพลาสติก
ั่
8.เครื่องปนน้ าผลไม้
วิ ธีการทดลอง
1. ปอกหัวหอม 1 หัว ล้างให้สะอาด และหันให้เป็นชินเล็กๆ ใส่ไว้ในบีกเกอร์
่ ้
2. เจือจางน้ ายาล้างจาน เข้มข้น10% โดยเติมน้ ายาล้างจาน 10 มิลลิลตร ลงในน้ ากลัน
ิ ่
90 มิลลิลตร
ิ
- 3. 3
3. เทน้ ายาล้างจานเจือจาง 10 mlและNaCl 3 กรัม ลงในบีกเกอร์ทใส่ชนหัวหอม
่ี ้ิ
ั่ ั่
4. เทส่วนผสมทังหมด ลงในเครื่องปนน้ าผลไม้ และปนด้วยความเร็วสูงสุดประมาณ
้
15 วินาที
ั่
5. เทหัวหอมปนลงในบีกเกอร์ใบเดิม
6. กรองเอากากออกด้วยกระชอน หรือใช้ผาพันแผลทบหลายชันวางในกรวยพลาสติกใบ
้ ้
ใหม่ กระดาษกรอง
7. เทน้ าหัวหอมลงในหลอดทดลองประมาณ 10 มิลลิลตร ิ
8. ค่อยๆ เทแอลกอฮอร์ 95% แช่เย็นจัด ประมาณ 10 มิลลิลตร ลงตามข้างหลอด ให้
ิ
สังเกตเห็นการแยกชันของของเหลว โดยน้ าหัวหอมจะอยูดานล่างและแอลกอฮอร์อยู่
้ ่ ้
ด้านบน (การเทแอลกอฮอร์อย่างแรงจะทาให้ไม่เกิดการแยกชัน) ้
9. ถือหลอดทดลองไว้นิ่งๆ (ห้ามเขย่า) จะเริ่ มเห็นสายดีเอ็นเอปรากฏขึนในชันของ
้ ้
แอลกอฮอล์ที่อยู่ด้านบน
10. ใช้แท่งแก้วด้านปลายแบน หรือไม้แหลมค่อยๆ จุมลงไปเหนือรอยต่อของสารละลาย
่
ทัง 2 ชัน หมุนแท่งแก้วอย่างช้าๆ เพือเก็บ DNA ทีมลกษณะเป็ นเมือกเหนียวให้ตด
้ ้ ่ ่ ีั ิ
ขึนมากับแท่งแก้ว
้
11. ทาซาข้อ 1 - 10 แต่เปลี่ยนหอมหัวใหญ่เป็ นมะเขือเทศ
้
ผลการทดลอง
พืชที่ใช้สกัด ลักษณะของ DNA ที่สงเกตเห็น
ั
หอมหัวใหญ่
มะเขือเทศ
- 5. 5
คาถามหลังการทดลอง
1. ทาไมการทดลองครังนี้ตองมีน้ ายาล้างจานและNaClแล้วปน
้ ้ ั่
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
2. ทาไมการทดลองครังนี้ตองเติม Alcohol 95 %
้ ้
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
3. ในการทดลองครังนี้อะไรทีทาให้โปรตีนเกิดการแปรสภาพทางธรรมชาติ
้ ่
..............................................................................................................................................
4. นอกจากข้อ 3 มีอะไรอีกบ้างทีทาให้โปรตีนเกิดการแปรสภาพทางธรรมชาติ
่
..............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
5. นักศึกษาคิดว่าการทดลองครังนี้มประโยชน์ อย่างไรต่ออนาคตของนักศึกษาบ้าง
้ ี
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
...............................................................................................................................................
.............................................................................................................................................
