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 Uno de los sistemas más importantes 
para la identificación de 
microorganismos es observar su 
crecimiento en sustancias 
alimenticias artificiales preparadas en 
el laboratorio. El material alimenticio 
en el que crecen los microorganismos 
es el Medio de Cultivo y el crecimiento 
de los microorganismos es el Cultivo.
Objetivos concretos de la práctica 
 1. Preparar medios de cultivo como 
soporte y fuente de nutrientes para el 
desarrollo de los microorganismos in vitro. 
 2. Manejar los instrumentos de uso 
rutinario, a la vez que imprescindibles, en el 
laboratorio de microbiología. 
 3. Hacer un primer acercamiento a la 
manipulación de microorganismos. Adquirir 
la idea de la importancia del trabajo en 
condiciones de esterilidad y las técnicas 
más comunes para realizarlo.
MATERIALES: 
 -Mechero de Bunsen y Fisher 
 -Tripie 
 -Tela de asbesto 
 -Algodón 
 -Gasa 
 -Papel estraza 
 -Cinta testigo 
 -Cajas Petri 
 -Olla exprés 
 -Asa de siembra 
 -2 Matraz Erlenmeyer de 250 ml 
 -Agitador de vidrio 
 -Vidrio de reloj
 SON FENOMENOS FISICOS Y 
QUIMICOS QUE ENCUADRADOS EN UN 
MARCO BIOLOGICO. 
 1)NUTRIENTES:Los nutrientes para las 
bacterias son proporcionados de 
acuerdo a sus exigencias. 
 Aquellos microorganismos que utilizan 
metabolitos orgánicos son 
denominados ORGANOTROFICOS y los 
que utilizan metabolismos inorgánicos 
son denominados LITOTROFICOS.
 NITROGENO ,AZUFRE Y FOSFORO 
 ESTOS ELEMENTOS VAN HACER 
NECESARIOS PARA LA SINTESIS DE ADN
Temperatura 
 para obtener un desarrollo 
optimo es necesario tomar 
encuenta e tipo de germenque 
se esta manipulando como las 
bacterias mesófilos crecen de 
forma óptima a temperaturas 
entre 15 y 43ºC. Otros como los 
psicrófilos crecen a 0ºC y los 
temófilos a 80ºC o incluso a 
temperaturas superiores 
(hipertemófilos). En líneas 
generales, los patógenos 
humanos crecen en rangos de 
temperatura mucho más cortos, 
alrededor de 37ºC, y los 
saprofítos tienen rangos más 
amplios.
 AEROBIAS Estas son bacterias que se 
desarrollan en presencia de oxigeno 
libre . 
 ANAEROBIAS bacterias que se 
desarrollan en ausencia de oxigeno libre 
 ANAEROBIAS FACULTATIVAS estas son 
bacterias que se desarrollan tanto en 
presencia como en ausencia de 
oxigeno libre
pH 
 La concentración de iones hidrógeno 
es muy importante para el crecimiento 
de los microorganismos. La mayoría 
de ellos se desarrollan mejor en 
medios con un pH neutro, aunque los 
hay que requieren medios más o 
menos ácidos. No se debe olvidar que 
la presencia de ácidos o bases en 
cantidades que no impiden el 
crecimiento bacteriano pueden sin 
embargo inhibirlo o incluso alterar sus 
procesos metabólicos normales.
LUZ AMBIENTAL 
 La mayoría de los microorganismos 
crecen mucho mejor en la oscuridad 
que en presencia de luz solar. Hay 
excepciones evidentes como sería el 
caso de los microorganismos 
fotosintéticos. 
OBSCURIDAD 
 otros microorganismos precisan de 
obscuridad para desarrollar su 
pigmentaciones colonias estas 
llamadas COTOCROMAGENOS
 MM.. LlÍíQqUIDOS M. SÓLIDOS 
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Existen como 
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 
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s
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de grandes volúmenes con una baja 
concentración de microorganismos.
 Medio basal: posee un solo elemento básico 
 Medio enriquecido: posee una o más sustancias 
nutritivas permite desarrollar los gérmenes. 
 Medio selectivo: posee sustancias inhibidoras que 
permite el desarrollo de un solo tipo de 
gérmenes. 
 Medio diferencial: posee sustancias inhibidoras 
que diferencia los gérmenes. 
 Medio de enriquecimiento: medios complejos con 
adictivos adicionales para favorecer el 
crecimiento de determinados 
microorganismos.
AGAR A)AGUA DE PEPTONAS 
 Derivado de proteínas 
de la acción de la 
pepsina del jugo 
gástrico y pancreático 
sobre las proteínas 
 Es un polisacárido se 
obtiene de algas que 
contienen un coloide , 
se emplea en Japón 
como medios de cultivos 
mezclados con sangre, 
sueros y peptonas,etc.
MEDIOS LIQUIDOS 
*CALDO LACTOSADO: caldo nutritivo 
*CALDO DE SANGRE: caldo nutritivo de 
sangre desfibrinada de conejo ,caballo. 
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glucosa.
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presente. permite diferenciar los fermentadores de lactosa de 
los no fermentadores gracias a la presencia del indicador azul 
de bromotimol que mira a color amarillo a ph ácido. 
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desfibrinada 
 medio rico y diferencial. 
 la sangre más comúnmente utilizada es la de oveja, al 5%, estéril 
y desfibrinada. 
 una vez preparado el medio de cultivo, se enfría hasta 45ºc y se 
le añade la sangre. 
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c 
 AGAR BILIS BUEY: 
 AGAR ASCITIS
MEDIOS DE LOWENSTEIN 
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AGAR DE CHAPMN
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Medios de cultivo

  • 1.
  • 2.  Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
  • 3. Objetivos concretos de la práctica  1. Preparar medios de cultivo como soporte y fuente de nutrientes para el desarrollo de los microorganismos in vitro.  2. Manejar los instrumentos de uso rutinario, a la vez que imprescindibles, en el laboratorio de microbiología.  3. Hacer un primer acercamiento a la manipulación de microorganismos. Adquirir la idea de la importancia del trabajo en condiciones de esterilidad y las técnicas más comunes para realizarlo.
  • 4. MATERIALES:  -Mechero de Bunsen y Fisher  -Tripie  -Tela de asbesto  -Algodón  -Gasa  -Papel estraza  -Cinta testigo  -Cajas Petri  -Olla exprés  -Asa de siembra  -2 Matraz Erlenmeyer de 250 ml  -Agitador de vidrio  -Vidrio de reloj
  • 5.  SON FENOMENOS FISICOS Y QUIMICOS QUE ENCUADRADOS EN UN MARCO BIOLOGICO.  1)NUTRIENTES:Los nutrientes para las bacterias son proporcionados de acuerdo a sus exigencias.  Aquellos microorganismos que utilizan metabolitos orgánicos son denominados ORGANOTROFICOS y los que utilizan metabolismos inorgánicos son denominados LITOTROFICOS.
  • 6.  NITROGENO ,AZUFRE Y FOSFORO  ESTOS ELEMENTOS VAN HACER NECESARIOS PARA LA SINTESIS DE ADN
  • 7. Temperatura  para obtener un desarrollo optimo es necesario tomar encuenta e tipo de germenque se esta manipulando como las bacterias mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas entre 15 y 43ºC. Otros como los psicrófilos crecen a 0ºC y los temófilos a 80ºC o incluso a temperaturas superiores (hipertemófilos). En líneas generales, los patógenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho más cortos, alrededor de 37ºC, y los saprofítos tienen rangos más amplios.
  • 8.  AEROBIAS Estas son bacterias que se desarrollan en presencia de oxigeno libre .  ANAEROBIAS bacterias que se desarrollan en ausencia de oxigeno libre  ANAEROBIAS FACULTATIVAS estas son bacterias que se desarrollan tanto en presencia como en ausencia de oxigeno libre
  • 9. pH  La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios más o menos ácidos. No se debe olvidar que la presencia de ácidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metabólicos normales.
  • 10. LUZ AMBIENTAL  La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sería el caso de los microorganismos fotosintéticos. OBSCURIDAD  otros microorganismos precisan de obscuridad para desarrollar su pigmentaciones colonias estas llamadas COTOCROMAGENOS
  • 11.
  • 12.  MM.. LlÍíQqUIDOS M. SÓLIDOS M. SEMISÓLIDOS El más utilizado es el caldo nutritivo (compuesto de carne, peptona y agua) Llevan un agente solidificante que es el Agar (polímero acídico), gelidifica por debajo de 45° C. Preparados a partir de los medios líquidos, agregando un agente solidificante en menor proporción.
  • 13. NATURALES ARTIFICIALES Existen como tales en la naturaleza : agua, suelo, papa , huevos leche, sangre, etc. Compuestos por sustancias manipuladas por el hombre en el laboratorio
  • 14. EMPÍRICOS SINTÉTICOS SEMISITÉTICOS  Aparecen sustancias orgánicas  Aparecen sustancias químicas definidas  Aparecen moléculas de naturaleza hidrolizada s
  • 15.  Enriquecidos nutrientes simples presentan enriquecedores.  Diferenciales o de aislamiento contienen colorantes, azúcares e inhibidores.  Transporte y mantenimiento utilizados en la recogida, transporte y recolección de las muestras biológicas.  Filtros de membrana Permiten un examen de grandes volúmenes con una baja concentración de microorganismos.
  • 16.  Medio basal: posee un solo elemento básico  Medio enriquecido: posee una o más sustancias nutritivas permite desarrollar los gérmenes.  Medio selectivo: posee sustancias inhibidoras que permite el desarrollo de un solo tipo de gérmenes.  Medio diferencial: posee sustancias inhibidoras que diferencia los gérmenes.  Medio de enriquecimiento: medios complejos con adictivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos.
  • 17.
  • 18. AGAR A)AGUA DE PEPTONAS  Derivado de proteínas de la acción de la pepsina del jugo gástrico y pancreático sobre las proteínas  Es un polisacárido se obtiene de algas que contienen un coloide , se emplea en Japón como medios de cultivos mezclados con sangre, sueros y peptonas,etc.
  • 19. MEDIOS LIQUIDOS *CALDO LACTOSADO: caldo nutritivo *CALDO DE SANGRE: caldo nutritivo de sangre desfibrinada de conejo ,caballo. *CALDO DE BILIS: caldo nutritivo de buey. *CALDO GLUCOSADO: caldo nutritivo de glucosa.
  • 20.  AGAR LACTOSADO:la lactosa es el único carbohidrato presente. permite diferenciar los fermentadores de lactosa de los no fermentadores gracias a la presencia del indicador azul de bromotimol que mira a color amarillo a ph ácido.  AGAR SANGRE: agar base de columbia + 5% sangre desfibrinada  medio rico y diferencial.  la sangre más comúnmente utilizada es la de oveja, al 5%, estéril y desfibrinada.  una vez preparado el medio de cultivo, se enfría hasta 45ºc y se le añade la sangre.  AGAR CHOCOLATE: es sometido hasta una temperutura de 80° c  AGAR BILIS BUEY:  AGAR ASCITIS
  • 21. MEDIOS DE LOWENSTEIN MEDIOS DE SABOURAUND AGAR DE CHAPMN
  • 22. MEDIOS DE LEVINE AGAR MAC CONKEY
  • 23.  CAJA PETRI  ASAS BACTERIOLOGICAS  MATAZ  TUBO DE ENSAYO  MECHERO DE BUNSEN