Citocina il 6 elisa

Interleukin-6
ELISA
Inmunoensayo enzimático para la determinación cuantitativa de
Interleucina-6 (IL-6) en suero y plasma humanos
y sobrenadantes de cultivo celular.
BE53061
96
2-8°C
I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H
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Instrucciones de Uso

Interleukin-6 (IL-6) ELISA (BE53061) ESPAÑOL
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INFORMACIÓN Y MANUAL DEL PRODUCTO
1. USO PROPUESTO 2
2. RESUMEN 2
3. PRINCIPIO DEL ENSAYO 3
4. REACTIVOS SUMINISTRADOS 4
5. INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO 4
6. TOMA DE LAS MUESTRAS Y INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO 5
7. MATERIAL REQUIRIDO PERO NO SUMINISTRADO 5
8. PRECAUCIONES DE USO 5
9. PREPARACIÓN DE REACTIVOS 6
10. PROTOCOLO DE ENSAYO 8
11. CALCULO DE RESULTADOS 11
12. LÍMITES 12
13. PRUEBAS FUNCIONALES 13
14. INFORMACIÓN DE PEDIDOS 16
15. RESUMEN PREPARACIÓN DE REACTIVOS 16
16. RESUMEN DEL PROTOCOLO 17
17 REFERENCIAS SOBRE EL PRODUCTO 18

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1. Uso Propuesto
El ELISA IL-6 humana es un inmunoensayo enzimático para la detección cuantitativa de la IL-6 humana.
El ELISA IL-6 humana es para el diagnóstico in vitro. No debe utilizarse en los procedimientos
terapéuticos
2. Resumen
La interleucina 6 (IL-6) es una citocina multifuncional que regula las respuestas inmunitarias, las reacciones
de fase aguda y la hematopoyesis, y puede cumplir una función central en los mecanismos de defensa
anfitriones. El gen de la IL-6 humana se localizó en el cromosoma 7p21. Se determinó la secuencia
genómica. Por lo general, las células normales no producen constitutivamente la IL-6, pero su expresión se
induce fácilmente por una variedad de citocinas, infecciones virales o por lipopolisacáridos. El producto del
gen de la IL-6 es una proteína de cadena única con una masa molecular que va de 21 a 28 kDa, según la
fuente celular. Las amplias modificaciones postransductivas, como N- y O-glucosilación, así como la
fosforilación, parecen explicar esta heterogeneidad. El ADN complementario para la IL-6 predice una
proteína precursora de 212 aminoácidos. La IL-6 es una citocina pleiotrópica producida por distintas
células. Actúa en una amplia gama de tejidos, provocando la inducción del crecimiento, la inhibición del
crecimiento y la diferenciación, respectivamente, según la naturaleza de los dianocitos.
IL-6 participa en
- la inducción de la diferenciación de células B,
- la inducción de proteínas de fase aguda en células del hígado,
- promoción de crecimiento de células de mieloma/plasmacitoma/hibridoma,
- inducción de la expresión del receptor de IL-2 e IL-2,
- proliferación y diferenciación de células T,
- inhibición del crecimiento de células de ciertos líneas célulares de leucemia mioloide y inducción a
su diferenciación a macrófagos,
- aumento de la formación de colonias celulares multipotenciales inducidas por la IL-3 en
hemocitoblastos e inducción de la maduración de megacariocitos como un factor
trombocitopoyético,
- inducción de crecimiento mesangial,
- inducción de diferenciación neural de las células PC 12 e
- inducción de crecimiento de los queratinócitos.
Primero se indicó que la producción anormal de la IL-6 estaba relacionada con la activación de linfocitos B
policlonales con producción de autoanticuerpos en pacientes con mixoma cardíaco. Desde entonces, se ha
indicado que la IL-6 participa en la patogenia de distintas enfermedades. Así, la medición de los niveles de
la IL-6 en el suero y otros líquidos corporales proporciona información más detallada sobre distintas
situaciones patológicas.
Infecciones:
Los fluidos corporales de pacientes con infecciones agudas bactieranas locales o virales y suero de
pacientes con bacteremia Gram Negativa o positiva contienen niveles elevados de IL-6 biologicamente
activa.
Enfermedades Obstétricas:
La IL-6 ha surgido como una citocina indicadora para la infección intraamniótica.
Enfermedades asociadas con un sistema inmunitario alterado (anormalías de células B policlonales o
enfermedades autoinmunes):
Se han detectado niveles elevados de IL-6 circolante en pacientes con mixoma cardiaco, enfermedad de
Castleman artritis reumatoide, gammopatía IgM y en aquellos con síndrome de inmunodeficiencia
adquerida, así como la hepátopatía alcohólica (cirrosis).
Enfermedades proliferativas:
Se observa el aumento de los niveles de plasma de la IL-6 en los pacientes con psoriasis y
glomerulonefritis proliferativa mesangial.

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Enfermedades neoplásicas:
Se detectó un aumento de los niveles generales de la IL-6 en pacientes con mieloma múltiple, otras
discracias de linfocitos B, linfoma T de Lennert, enfermedad de Castleman, carcinoma de células renales y
distintos tumores sólidos.
Respuestas inflamatorias:
La IL-6 participa en la inducción de proteínas de fase aguda y en la inducción de fiebre. El aumento de los
niveles de suero de la IL-6 también se encuentran en pacientes con quemaduras graves, en el suero y el
plasma como un marcador para predecir complicaciones posoperatorias, en el suero y la orina de
receptores de trasplantes de riñón antes del rechazo, en el suero de pacientes con choque septicémico y
en pacientes con artritis inflamatoria y artritis traumática.
3. Principio de Ensayo
Los pocillos de la microplaca son recubiertos con anticuerpos
anti-IL-6 humana.
Figura 1
La IL-6 humana presente en la muestra o el estándar se une a
los anticuerpos adsorbidos en los micropocillos. Se agrega un
anticuerpo anti-IL-6 humano conjugado a biotina que se une a la
IL-6 humana capturada por los primeros anticuerpos.
Figura 2
Después de la incubación se elimina el conjugado no unido
mediante una etapa de lavado. Se agrega una solución de
estreptavidina-peroxidasa de rábano qui se une al conjugado de
biotina anti-IL-6.
Figura 3
Estreptavidina-HRP-
Estándar o Muestra
Conjugado Biotina
Micropocillos Recubiertos
Primera Incubación
Segunda Incubación
Anticuerpo para el Recubrimiento

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Después de la incubación se elimina la estreptavidina-HRP no
unida mediante una etapa de lavado y se agrega una solución de
Substrato reactiva a Enzima Peroxidasa a los pocillos.
Figura 4
Se forma un producto de color proporcional a la cantidad de la
IL-6 presente en la muestra o el estándar. La reacción es
terminada por la adición de ácido y la absorbancia se mide a
450 nm. Se prepara una curva estándar a partir de 7 diluciones
estándar de IL-6 y se determina la concentración de IL-6 humana
en la muestra.
Figura 5
4. Reactivos Suministrados
1 bolsa de aluminio con una Placa de Micropocillos recubiertos con anticuerpos monoclonales
anti-IL-6 humana.
1 vial (70 µL) de Conjuguado de Biotina (anticuerpos monoclonales anti-IL-6 humana)
1 vial (150 µL) con Estreptavidina-HRP
2 viales de Estándar IL-6 humano liofilizado, 200 pg/mL después de la reconstitución
1 vial del Control alto
1 vial del Control bajo
1 vial (5 mL) de Solución Buffer de Ensayo Concentrado 20x
(PBS con 1 % de Tween 20, BSA al 10 %)
1 frasco (50 mL) de Solución Buffer de Lavado Concentrado 20x
(PBS con 1 % de Tween 20)
1 vial (15 mL) de Solución de Substrato (tetrametil-benzidina)
1 vial (15 mL) de Solución de Parada (1M Acido Fosfórico)
4 Tapas para placas, Adhesivas
5. Instrucciones de Almacenamiento
Conservar los reactivos del juego de reactivos a una temperatura comprendida entre 2 °C y 8 °C. Conservar
los controles liofilizados a -20 °C.
Inmediatamente después de utilizarlos deberá volver a conservar los reactivos a dicha temperatura fría
(2 °C y 8 °C) y los controles a -20 °C. En las etiquetas figuran las fechas de caducidad del juego de
reactivos y de los reactivos.
Sólo se podrá garantizar la fecha de caducidad de los componentes del juego de reactivos si se le
conservan adecuadamente y si, en caso de uso reiterado de un mismo componente, el reactivo no queda
contaminado en la primera manipulación.
Substrato
Tercera Incubación
Substrato Reaccionado

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6. Toma de las Muestras y Instrucciones de Almacenamiento
Sobrenadantes de cultivos celulares, suero y plasma (EDTA, citrato, heparina) fueron probados con este
ensayo. Otras muestras biológicas pueden ser adecuadas para su uso en el ensayo. Separar el suero o
plasma del coágulo o de las células lo antes posible después de la coagulación y separación.
Las muestras que contienen un precipitado visible deben ser aclararadas antes de su uso en el ensayo. No
utilizar muestras altamente hemolizadas o lipémicas.
Las muestras deben ser alícuotadas y se debe congeladar a -20 °C para evitar la pérdida de IL-6 humana
bioactiva. Si se van a usar las muestras dentro de las 24 horas, se pueden almacenar ente 2 °C y 8 °C
(para la estabilidad de la muestra consulte el cápitulo 13.5).
Evite ciclos repetidos de congelación-descongelación. Antes del ensayo, la muestra congelada debe
alcanzar lentamente la temperatura ambiente y ser mezclada suavemente.
7. Material Requirido Pero No Suministrado
- Pipetas graduadas de 5 mL y 10 mL
- Micropipetas monocanales de 5 µL a 1000 µL con puntas desechables
- Micropipetas multicanales de 50 µL a 300 µL con puntas desechables
- Depósito para micropipetas multicanales
- Vasos de precipitados, matraz, probeta, necesarios para la preparación de reactivos
- Frasco lavador, sistema automatizado o semi-automatizado de lavado de placas de microtitulación
- Fotómetro para placas de microtitulación capaz de leer absorbancias a 450 nm
(opcional: 620 nm longitud de onda de referencia)
- Agua bidestilada o deionizada en un recipiente de vidrio
- Programa estadístico informático para llevar a cabo un análisis de regresión
8. Precauciones de Uso
- Todos los productos químicos deben considerarse potencialmente peligrosos. Por lo tanto,
recomendamos que este producto sea manipulado únicamente por aquellas personas que hayan sido
entrenadas en técnicas de laboratorio y que sea usado de acuerdo con los principios de buenas
prácticas de laboratorio. Se debe llevar ropa de protección apropiada como puedan ser las batas de
laboratorio, gafas de seguridad y guantes. Se debe trabajar con cuidado para evitar cualquier contacto
con piel y ojos. En el caso de que tenga lugar un contacto con piel u ojos, proceder de forma inmediata
a lavar la parte afectada con abundante agua. Véase la(s) hoja(s) de seguridad y/o declaraciones de
seguridad para recomendaciones específicas.
- Los reactivos están destinados para un uso en diagnóstico in vitro y no se deben usar en
procedimientos terapéuticos.
- No mezclar o sustituir los reactivos por los equivalentes de otros lotes u otras fuentes.
- No usar reactivos caducados
- No exponer los reactivos del kit a una luz intensa durante su almacenamiento o incubación.
- No pipetear con la boca
- No se recomienda comer o fumar en las zonas donde se manipulen muestras o reactivos
- Evitar el contacto de los reactivos del kit o de las muestras con piel o mucosas.
- Se recomienda el uso de guantes desechables de goma o látex durante la manipulación de las
muestras y reactivos.
- Evitar el contacto de la solución de substrato con agentes oxidantes y metales.
- Evitar salpicaduras y la generación de aerosoles.

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- Con el propósito de evitar una contaminación microbiológica o contaminaciones cruzadas de reactivos y
muestras que puedan invalidar el test se recomienda el uso de pipetas y/o puntas de pipetas de un solo
uso.
- Usar recipientes limpios y específicos de reactivos para la dispensación de reactivos de sustrato.
- La exposición a los ácidos inactiva el conjugado.
- Se debe usar agua destilada o desionizada en la preparación de los reactivos.
- La solución de substrato debe de estar a temperatura ambiente antes de su uso.
- Descontaminar y disponer las muestras y todos los materiales potencialmente contaminados como si
pudieran contener agentes infecciosos. El método preferente de descontaminación es un autoclavado
durante un mínimo de 1 hora a 121.5 °C.
- Los residuos líquidos que no contengan ácido y los residuos neutralizados pueden ser mezclados con
hipoclorito sódico en volúmenes tales que la mezcla final contenga 1.0 % de hipoclorito sódico. Dejar
actuar durante 30 minutos para una efectiva descontaminación. Los residuos líquidos que contengan
ácido deben ser neutralizados previamente a la adición de hipoclorito sódico.
9. Preparación de los Reactivos
Las Soluciónes de Buffer Concentradas deben de alcanzar la temperatura ambiente y ser diluídas antes
de iniciar el procedimiento del ensayo. Si en las Soluciónes de Buffer Concentradas se han formado
cristales, caliente suavemente hasta su completa disolución.
9.1. Solución Buffer de Lavado (1x)
Vierta todo el contenido (50 mL) de la Solución Buffer de Lavado Concentrada (20x) en un matraz
aforado de 1000 mL limpio. Enrase en matraz con agua destilada o desionizada. Mezcle suavemente para
evitar la formación de espuma.
Transfiera la solución a un frasco de lavado limpio y consérvela a una temperatura entre 2 °C y 25 °C. La
Solución Buffer de Lavado (1x) permanece estable durante 30 días
En función de la cantidad que vaya a necesitar, prepare la Solución Buffer de Lavado (1x) de acuerdo a la
siguiente tabla:
Número de Tiras Solución Buffer de Lavado Concentrada (20x) (mL) Agua Destilada (mL)
1 - 6 25 475
1 - 12 50 950
9.2. Solución Buffer de Ensayo (1x)
Vierta todo el contenido (5 mL) de la Solución Buffer de Ensayo Concentrada (20x) en un matraz limpio
aforado de 100 mL. Enrase en matraz con agua destilada o desionizada aun volumen final de 100 mL.
Mezcle suavemente para evitar la formación de espuma.
Conserve la solución a una temperatura de entre 2 °C y 8 °C. La Solución Buffer de Ensayo permanece
estable durante 30 días.
En función de la cantidad que vaya a necesitar, prepare la Solución Buffer de Ensayo (1x) de acuerdo a la
siguiente tabla:
Número de Tiras Solución Buffer de Ensayo Concentrada (20x) (mL) Agua Destilada (mL)
1 - 6 2.5 47.5
1 - 12 5.0 95.0

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9.3. Preparación de Conjugado de Biotina
Utilice el Conjugado de Biotina antes de transcurridos 30 minutos desde su dilución.
Justo antes de utilizar el Conjugado de Biotina, se debe diluirlo en una proporción de 1:100 con la
Solución Buffer de Ensayo (1x) en un tubo de ensayo de plástico limpio.
En función de la cantidad que vaya a necesitar, prepare el Conjugado de Biotina de acuerdo a la siguiente
tabla:
Número de Tiras Conjugado de Biotina (mL) Solución Buffer de Ensayo (1x) (mL)
1 - 6 0.03 2.97
1 - 12 0.06 5.94
9.4. Estreptavidina-HRP
Utilice la Estreptavidina-HRP antes de transcurridos 30 minutos desde su dilución.
Justo antes de utilizar la solución concentrada de Estreptavidina-HRP, se debe diluirlo en una proporción
de 1:200 con la Solución Buffer de Ensayo (1x) en un tubo de ensayo de plástico limpio.
En función de la cantidad que vaya a necesitar, prepare la Estreptavidina-HRP de acuerdo a la siguiente
tabla:
Número de Tiras Estreptavidina-HRP (mL) Solución Buffer de Ensayo (1x) (mL)
1 – 6 0.03 5.97
1 - 12 0.06 11.94
9.5. Estándar IL-6 Humano
Reconstituir el Estándar IL-6 humano añadiendo agua destilada.
El volumen de reconstitución está indicado en la etiqueta del vial del estándar. Girar o mezclar
cuidadosamente para garantizar una solubilización completa y homogénea (concentración del estándar
reconstituido = 200 pg/mL). Permitir que el estándar reconstituido se asiente durante 10-30 minutos.
Mezclar bien previamente a realizar las diluciones.
Tras su uso los restos del estándar no pueden ser almacenados y deben ser descartados.
Las diluciones estándares pueden ser preparadas directamente en la placa multipocillo (véase 10.c) o
alternativamente en tubos (véase 9.5.1).
9.5.1. Dilución Estándar Externa
Rotular 7 tubos, uno para cada curva estándar.
S1, S2, S3, S4, S5, S6, S7.
Acto seguido, preparar diluciones seriadas 1:2 para la curva estándar como se indica a continuación:
Pipetear 225 µL de Solución Buffer Ensayo (1x) a todos los tubos.
Pipetear 225 µL de estándar reconstituido (concentración del estándar = 200 pg/mL) en el primer tubo,
etiquetado como S1, y mezclar (concentración del estándar 1 = 100 pg/mL).
Pipetear 225 µL de esta dilución en el segundo tubo, etiquetado como S2, y mezclar completamente antes
de la siguiente transferencia. Repetir la serie de diluciones 5 veces más de manera que se obtengan los
diferentes puntos de la curva estándar (véase figura 6).
La Solución Buffer de Ensayo (1x) sirve como blanco.

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Figura 6
9.6. Controles
Solubilizar añadiendo 300 µL de agua destilada al controles liofilizados. Permitir que il controles liofilizados
se asiente durante 10-30 minutos. Mezclar bien previamente a realizar las diluciones. Vortear
concienzudamente para asegurar una solubilización homogénea y completa. A partir de aquí, tratar il
controles de la misma forma que las muestras. El rango del control viene indicado en el certificado de
calidad y en la etiqueta del vial. Almacenar il controles reconstituidos y alicuotado a -20 °C. Evitar ciclos
repetidos de congelación y descongelación.
10. Protocolo de Ensayo
a. Determine el número de tiras necesarias para analizar el número deseado de muestras y
además añada las tiras para blancos y estándares (de color). Cada muestra, estándar, blanco y la
muestra de control opcional deben ser analizadas por duplicado. Retire del soporte las tiras
sobrantes y consérvelas, junto con el desecante suministrado en una bolsa metalizada y
cerrada herméticamente, a una temperatura de 2-8 °C.
b. Lave las tiras 2 veces con aproximadamente 400 µL de Solución Buffer de Lavado por cada
pocillo, aspirando completamente el contenido de los pocillos entre cada lavado. Permitir que la
Solución Buffer de Lavado permanezca en los pocillos durante 10-15 segundos antes de su
aspiración. Evite rayar la superficie de los pocillos.
Tras el último lavado, golpee suavemente las tiras contra un papel absorbente o una toallita de
papel para eliminar el exceso de tampón de lavado. Utilice las tiras inmediatamente después de
lavadas o bien colóquelas boca abajo sobre un papel absorbente húmedo durante como máximo
15 minutos. No deje secar los pocillos.
c. Dilución Estándar en la placa de microtitración
(Alternativamente, la dilución estándar puede ser preparada en tubos – véase 9.5.1)
Añadir 100 µL de Solucón Buffer de Ensayo (1x) en duplicado a todos los pocillos estándar.
Pipetear 100 µL de estándar preparado (véase Preparación del Estándar 9.5,
concentración = 200 pg/mL) por duplicado en los pocillos A1 y A2 (véase Tabla 1). Mezclar el
contenido de los pocillos A1 y A2 por repetidas aspiraciones y expulsiones del contenido con la
pipeta (concentración del estándar 1, S1 = 100 pg/mL), y transferir 100 µL a los pocillos B1 y B2,
respectivamente. (véase Figura 7). Cuidar de no rascar la superficie interior de los micropocillos con
la punta de la pipeta. Continuar este procedimiento 5 veces, formando dos filas de diluciones
estándar del human IL-6 ordenadas desde 100 a 1.56 ng/mL. Descartar 100 µL de los contenidos de
los últimos micropocillos (G1, G2) usados.
Transferir 225 µL
IL-6 Humano
Estándar Reconstituido
S1 S2 S3 S4 - S7
Solución Buffer de Ensayo (1x)
225 µL
Descartar
225 µL

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Figura 7
En caso de una dilución estándar externa (véase 9.5.1), pipetear 100 µL de estas diluciones estándares
(S1-S7) en los pocillos estándares correspondientes de acuerdo con la Tabla 1.
Tabla 1
Tabla describiendo un ejemplo de la disposición de los blancos, estándares y muestras en las tiras
de los micropocillos
1 2 3 4
A
Estándar 1
(100.00 pg/mL)
Estándar 1
(100.00 pg/mL)
Muestra 1 Muestra 1
B
Estándar 2
(50.00 pg/mL)
Estándar 2
(50.00 pg/mL)
Muestra 2 Muestra 2
C
Estándar 3
(25.00 pg/mL)
Estándar 3
(25.00 pg/mL)
Muestra 3 Muestra 3
D
Estándar 4
(12.50 pg/mL)
Estándar 4
(12.50 pg/mL)
Muestra 4 Muestra 4
E
Estándar 5
(6.25 pg/mL)
Estándar 5
(6.25 pg/mL)
Muestra 5 Muestra 5
F
Estándar 6
(3.13 pg/mL)
Estándar 6
(3.13 pg/mL)
Muestra 6 Muestra 6
G
Estándar 7
(1.56 pg/mL)
Estándar 7
(1.56 pg/mL)
Muestra 7 Muestra 7
H Blanco Blanco Muestra 8 Muestra 8
Transferir 100 µL
IL-6 Humana
Estándar Reconstituido
S1 S2 S3 S4 - S7
Solución Buffer de Ensayo (1x)
100 µL
Descartar
100 µL

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d. Añadir 100 µL de Solución Buffer de Ensayo (1x) en duplicado a los pocillos del blanco.
e. Añadir 50 µL de cada Solución Buffer de Ensayo (1x) a los pocillos con la muestra.
f. Añadir 50 µL de cada muestra en duplicado a los pocillos designados.
g. Prepare el Conjugado de Biotina (véase la preparación del Conjugado de Biotina 9.3)
h. Añada 50 µL el Conjugado de Biotina a todos los pocillos.
i. Cubra la placa con una tapa e incúbela a temperatura ambiente (18-25 °C) durante 2 horas en un
agitador mecánico a 400 rpm, si es posible.
j. Prepare Estreptavidina-HRP (véase la preparación de estreptavidina-HRP 9.4).
k. Retire la tapa y vacíe los pocillos. Lavar los micropocillos de las tiras 4 veces de acuerdo al
punto b del protocolo del test. Proseguir inmediatamente después al próximo paso.
l. Añada 100 µL Estreptavidina-HRP a todos los pocillos.
m. Cubra la placa con una tapa e incúbela a temperatura ambiente (18-25 °C) durante 1 hora (en un
agitador mecánico a 400 rpm, si es posible)
n. Retire la tapa y vacíe los pocillos. Lavar los micropocillos de las tiras 4 veces de acuerdo al
punto b del protocolo del test. Proseguir inmediatamente después al próximo paso.
o. Pipetee 100 µl de Solución de Substrato TMB y viértalos en todos los pocillos, incluidos los del
blanco.
p. Incube las tiras de microtitración a temperatura ambiente (18-25 °C) durante aproximadamente
10 minutos. Evite la exposición directa a la luz intensa.
Deben monitorizarse los valores DO de la placa para detener la reacción del substrato
(véase el siguiente punto de este protocolo) antes de que deje de ser posible registrar
correctamente los pocillos positivos.
La determinación del tiempo adecuado para el desarrollo del color, debe realizarse de
forma individual para cada ensayo.
Se recomienda añadir la solución de parada cuando el estándar más alto presente un color azul
oscuro. Alternativamente el desarrollo de color puede ser monitorizado con un lector de placas de
ELISA a 620 nm. La reacción del substrato debería ser parada cuando el Estándar 1 alcance una
DO entre 0.9 y 0.95.
q. Detenga la reacción enzimática pipeteando rápidamente 100 µL de la Solución de Parada en cada
pocillo, incluidos los del blanco. Es importante dispensar la Solución de Parada de forma rápida y
uniforme en todos los pocillos para inactivar totalmente la enzima. Los resultados deben leerse
inmediatamente después de añadir la solución de parada o, como máximo, en el plazo de 1 hora si
las tiras se conservan a una temperatura entre 2-8 °C en un lugar oscuro.
r. Lea la absorbancia de cada pocillo en un espectrofotómetro utilizando 450 nm como longitud de
onda principal (opcionalmente 620 nm como longitud de onda de referencia; los valores
comprendidos entre 610 nm y 650 nm son aceptables). Utilizar los pocillos de blanco para medir el
blanco del lector de placas de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Determine la
absorbancia de las muestras y de los IL-6 humana.
Nota: En caso de incubar sin agitar, los valores de D.O. pueden ser inferiores a los indicados más
abajo. De todas formas los resultados siguen siendo válidos.

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11. CALCULO DE RESULTADOS
- Calcular los valores de absorbancia media para cada conjunto de duplicados de los estándares y
muestras. Los duplicados deben estar dentro del 20 por ciento del valor medio
- Construir una curva estándar mediante la representación de la absorbancia media obtenido para cada
estándar frente a la concentración de IL-6 humana con el valor de absorbancia en el eje-y y la
concentración en el eje-x. Se logra un buen ajuste con 5 Parameter Logistics.
- Para determinar la concentración de la IL-6 humana circulante para cada muestra, primero encontrar el
valor de absorbancia media en la ordenada y extender una línea horizontal a la curva estándar. En el
punto de intersección, extender una línea vertical al eje de abscisas y leer la concentración la IL-6
humana.
- Si se han seguido las instrucciones de este protocolo, se han diluido 1:2 las muestras (50 µL de muestra
+ 50 µL de Solución Buffer de Ensayo (1x)), la concentración leída a partir de la curva estándar se debe
multiplicar por el factor de dilución (2x).
- Cálculo de las muestras con una concentración superior al estándar 1, puede dar lugar a
concentraciones incorrectas, bajas en IL-6 humana. Estas muestras requieren más predilución externa
según los valores esperados de IL-6 humana con la Solución Buffer de Ensayo (1x) para cuantificar con
precisión la concentración real de IL-6 humana.
- Se recomienda que cada centro de pruebas establece una muestra de control con concentraciones
conocidas de IL-6 humana y se ejecuta este control adicional con cada ensayo. Si los valores obtenidos
no están dentro del intervalo esperado del control, los resultados del análisis pueden ser no válidos.
- En la figura 8 se muestra una representativa curva estándar. Esta curva no se puede utilizar para
obtener resultados de las pruebas. Cada laboratorio debe preparar una curva estándar por cada grupo
de tiras ensayadas.
Figura 8
Representativa curva estándar para el ELISA IL-6 humana. Se diluyó la IL-6 humana en serie de 2 etapas
en la Solución Buffer de Ensayo (1x). No use esta curva estándar para obtener resultados de las pruebas.
Se debe ejecutar una curva estándar para cada grupo de tiras ensayadas.
Interleukin-6 ELISA
0.1
1.0
10.0
1 10 100 1000
(pg/mL)
DO(450nm)

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Tabla 2
Datos típicos del ELISA IL-6 humana
Longitud de onda: 450 nm
Longitud de onda de referencia: 620 nm
Estándar
Concentración
IL-6 humana
(pg/mL)
D.O.
(450 nm)
D.O.
Media
C.V.
(%)
1 100.00 1.848
1.854
1.851 0.2
2 50.00 1.005
1.002
1.004 0.2
3 25.00 0.553
0.570
0.562 2.1
4 12.50 0.355
0.343
0.349 2.4
5 6.25 0.201
0.212
0.207 3.8
6 3.13 0.146
0.158
0.152 5.6
7 1.56 0.116
0.125
0.121 5.3
Blanco 0.00 0.075
0.086
0.081
Los valores de DO de la curva estándar pueden variar según las condiciones de la realización del ensayo
(por ejemplo empleados del laboratorio, técnica de pipeteo, técnica de lavado o efectos de la temperatura).
Por otra parte el almacenamiento del equipo puede afectar la actividad enzimática y por tanto la intensidad
de color. Los valores medidos siguen siendo válidas.
12. LÍMITES
- Dado que las condiciones exactas pueden variar de un ensayo a otro ensayo, se debe crear una curva
estándar para cada prueba.
- La contaminación de las muestras o los reactivos por bacterias o hongos, o una contaminación cruzada
entre los reactivos puede dar resultados erróneos.
- Se debe utilizar preferiblemente puntas de pipeta desechables, matraz de vidrio o frascos de vidrio. Los
frascos de vidrio reutilizables deben ser lavados antes de su uso y todos los productos de limpieza ser
eliminados por un enjuague minucioso.
- Un lavado incorrecto o inadecuado durante cada paso del procedimiento de ensayo puede conducir a
resultados erróneos ya sea falsos positivos o falsos negativos. Vaciar los pocillos completamente antes
de pipetear la Solución de Lavado fresca. Pipetear la Solución Buffer de Lavado en los pocillos como se
especifica para cada ciclo de lavado y no deje que los pocillos estén no cubiertos durante mucho tiempo
o que se secan.
- Por la aplicación de radioinmunoterapia, el número de pacientes con los anticuerpos humanos IgG
antiratón (HAMA) ha aumentado significativamente. HAMA puede interferir en ensayos que utilicen
anticuerpos monoclonales murinos, y dar lugar a resultados tantos falsos positivos como falsos
negativos. Muestras de suero que contienen anticuerpos contra inmunoglobulinas murinas pueden
todavía ser ensayadas en ensayos de este tipo si se añaden inmunoglobulinas murinas (suero, líquido
ascítico o anticuerpos monoclonales no específicos) a la muestra.

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13. PRUEBAS FUNCIONALES
13.1. Sensibilidad
El límite de detección de IL-6 humana definido como la concentración del analito resultando en una
absorción significativamente más alta que la del medio de dilución (media más dos desviaciones estándar),
se determinó de ser 0.92 pg/mL (media de 6 ensayos independientes).
13.2. Recuperación
13.2.1. Intra-ensayo
La recuperación del intra-ensayo se evaluó en tres experimentos independientes. Cada ensayo se llevó a
cabo con 6 repeticiones de 8 muestras de suero que contienen diferentes concentraciones de IL-6 humana.
Se llevaron a cabo dos curvas de estándar en cada placa. Los datos a continuación muestran la
concentración media de IL-6 humana y el coeficiente de variación para cada muestra (ver Tabla 3).
El calculado coeficiente de variación intra-ensayo total fue del 3.4 %.
Tabla 3
La concentración media de IL-6 humana y el coeficiente de variación para cada muestra
Muestra Experimento
Concentración Media
IL-6 humana (pg/mL)
Coefficiente de
Variación (%)
1 1
2
40.7
42.2
7.8
1.6
2 1
2
40.1
40.1
4.1
2.6
3 1
2
43.2
41.7
1.1
3.5
4 1
2
65.6
65.4
2.3
4.6
5 1
2
47.2
78.0
1.6
2.1
6 1
2
34.1
37.8
2.5
5.4
7 1
2
27.3
35.2
0.2
7.7
8 1
2
37.8
42.6
4.1
2.4

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13.2.2. Inter-ensayo
La recuperación inter-ensayo dentro de un laboratorio se evaluó en dos experimentos independientes.
Cada ensayo se llevó a cabo con 6 repeticiones de 8 muestras de suero que contienen diferentes
concentraciones de IL-6 humana. Dos curvas de calibración se realizaron en cada placa. Los datos a
continuación muestran la concentración media de IL-6 humana y el coeficiente de variación calculado en 18
determinaciones de cada muestra (ver Tabla 4). El coeficiente de variación total calculado de inter-ensayo
fue del 5.2 %
Tabla 4
La concentración media de IL-6 humana y el coeficiente de variación para cada muestra
Muestra
Concentración Media de
IL-6 Humana (pg/mL)
Coefficiente de
Variación (%)
1 41.5 2.6
2 40.1 0.0
3 42.5 4.4
4 65.5 0.2
5 47.6 1.2
6 35.9 7.3
7 31.3 17.8
8 40.2 8.4
13.3. Recuperación después del Enriquecimiento
La recuperación del enriquecimiento fue evaluada enriqueciendo cuatro niveles de IL-6 humana en
muestras combinadas de suero normal. Las recuperaciones se determinaron en dos experimentos
independientes con 8 repeticiones cada uno.
El suero no enriquecido sirvó como blanco en estos experimentos.
La recuperación varió entre 78 % a 105 % con una recuperación total media de 88 %.
13.4. Dilución en Paralelo
Se analizaron muestras de suero con diferentes concentraciones de IL-6 humana mediante 2 diluciones en
serie con 4 repeticiones cada uno.
La recuperación varió entre 98 % a 111 %, con una recuperación total de 105 % (ver Tabla 5).
Tabla 5
Muestra Dilución
Concentración
Expectada de IL-6
Humana (pg/mL)
Concentración
Observada de IL-6
Humana (pg/mL)
Recuperación de
Concentración
Expectada (%)
1
1:2
1:4
1:8
-
23.2
11.6
46.4
22.7
11.8
-
98
102
2
1:2
1:4
1:8
-
47.5
23.8
95.0
50.3
23.4
-
106
99
3
1:2
1:4
1:8
-
26.0
13.0
51.9
28.8
14.4
-
111
111

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13.5. Estabilidad de Muestras
13.5.1. Estabilidad Congelación - Descongelación
Alícuotas de las muestras de suero (enriquecidas o no enriquecidas) fueron almacenadas a -20 °C y
posteriormente descongeladas hasta 5 veces, y se determinó las concentraciones del IL-6 humana. No
hubo pérdidas significativas de la inmunoreactividad de IL-6 humana por la congelación y descongelación.
13.5.2. Estabilidad de Almacenamiento
Alícuotas de las muestras de suero (enriquecidas o no enriquecidas) fueron almacenadas a -20 °C, 2-8 °C,
temperatura ambiente (TA) y a 37 °C, y la concentración de IL-6 humana fue determinada después de las
24 horas. No se detectó una pérdida significativa de la inmunoreactividad del Il-6 humana durante el
almacenamiento en condiciones descritos anteriormente.
13.6. Comparación de Suero y Plasma
Se obtuvieron muestras de suero así como plasma EDTA, citrato y heparina al mismo tiempo de dos
donantes y se ensayó la concentración de IL-6 humana. Las concentraciones no fueron significativamente
diferentes y por tanto todas estas fluidos corporales son adecuadas para su uso en este ensayo. Sin
embargo, se recomienda asegurar la uniformidad de los preparaciones de sangre.
13.7. Especificidad
La interferencia de factores circulantes del sistema inmune fue evaluada por enriquecer estas proteínas a
concentraciones fisiológicamente relevantes en un suero positivo de IL-6 humana. No se ha detectado
reactividad cruzada.
13.8. Valores Esperados
Un panel de muestras procedentes de donantes aparentement sanos seleccionados al azar (hombres y
mujeres ) fue probado por Il-6 humana. Los niveles medidos pueden variar con la colección de la muestra
utilizada. Los niveles de IL-6 humana detectados se detallan en la Tabla 6.
Tabla 6
Matriz de
Muestra
Número de Muestras
Evaluadas
Rango
(pg/mL)
% Detectable
Media de Detectable
(pg/mL)
Suero 40 nd* - 12.7 47.5 5.8
Plasma (EDTA) 40 nd* - 13.0 17.5 6.4
Plasma (Citrato) 40 nd* - 6.6 2.5 6.6
Plasma (Heparina) 40 nd* - 6.5 30.0 5.0
*n.d. = non-detectable (no detectable), muestras medidas por debajo del punto estándar más bajo se consideran no
detectables
13.9. Calibración
El inmunoensayo es calibrado con recombinante IL-6 humana altamente purificada, que ha sido evaluado
según el estándar de referencia internacional NIBSC 89/548 y se ha demostrado que son equivalentes.
NIBSC 89/548 se cuantifica en unidades internacionales (UI) de una IU que corresponde a 10 pg de la IL-6
humana.

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14. INFORMACIÓN DE PEDIDOS
Para los pedidos póngase en contacto con:
Véase la última página.
Para preguntas técnicas comuníquese con:
e-mail: IBL@IBL-International.com
www.IBL-International.com
15. Resumen: Preparación de Reactivos
15.1. Solución Buffer de Lavado (1x)
Añadir 50 mL de la Solución Buffer de Lavado Concentrado (20x) a 950 mL de agua destilada.
Número de
Tiras
Solución Buffer de Lavado
Concentrada (mL)
Agua Destilada
(mL)
1-6 25 475
1-12 50 950
15.2. Solución Buffer de Ensayo
Añadir 5 mL Solución Buffer de Ensayo Concentrada (20x) a 95 mL de agua destilada.
Número de
Tiras
Solución Buffer de Ensayo
Concentrada (mL)
Agua Destilada
(mL)
1-6 2.5 47.5
1-12 5.0 95.0
15.3. Conjugado de Biotina
Hacer una dilución 1:100 del Conjugado de Biotina en la Solución Buffer de Ensayo (1x):
1-6 0.03 2.97
1-12 0.06 5.94
15.4. Estreptavidina-HRP
Hacer una dilución 1:200 del Estreptavidina-HRP en la Solución Buffer de Ensayo (1x):
1-6 0.03 5.97
1-12 0.06 11.94
15.5. Estándar IL-6 Humana
Reconstituir el estándar liofilizado IL-6 humana con agua destilada.
(El volumen de reconstitución se indica en la etiqueta del frasco estándar.)
15.6. Controles
Añadir 300 µL de agua destilada a los controles liofilizados.

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16. Resumen de Protocolo de Ensayo
1. Determinar el número requirido de tiras de la placa de microtitulación.
2. Lavar las tiras de la placa de microtitulación dos veces con Solución Buffer de Lavado.
3. Dilución estándar en la placa de microtitración: Añadir 100 µL de Solución Buffer de Ensayo (1x),
por duplicado, a todos los pocillos estándar. Pipetear 100 µL de estándar preparado en los primeros
pocillos y crear diluciones estándar mediante la transferencia de 100 µL de pocillo a pocillo.
Deseche 100 µL de los últimos pocillos.
Alternativamente dilución estándar externa en tubos (ver 9.5.1): Pipetear 100 µL de estas diluciones
estándares en las tiras de los micropocillos.
4. Añadir 100 µL de Solución Buffer de Ensayo (1x), por duplicado, a los pocillos blancos.
5. Añadir 50 µL de Solución Buffer de Ensayo (1x) a los pocillos de muestra.
6. Añadir 50 µL de muestras por duplicado a los pocillos respectivos.
7. Preparar el Conjugado de Biotina.
8. Añadir 50 µL de Conjugado de Biotina a todos los pocillos.
9. Cubrir las tiras e incubar 2 horas a temperatura ambiente (18-25 °C).
10. Preparar Estreptavidina-HRP.
11. Vaciar y lavar los pocillos 4 veces con Solución Buffer de Lavado.
12. Añadir 100 µL de la Solución de Substrato TMB a todos los pocillos.
13. Cubrir las tiras e incubar 1 hora a temperatura ambiente (18-25 °C).
14. Vaciar y lavar los pocillos 4 veces con Solución Buffer de Lavado.
15. Añadir 100 µL de Solución Substrato TMB a todos los pocillos.
16. Incubar las tiras para approximadamente 10 minutos a temperatura ambiante (18-25 °C).
17. Añadir 100 µL de Solución de Parada a todos los pocillos.
18. Ajustar el fotómetro y medir la absorbancia a 450 nm.
Nota: Si han seguido las instrucciones en este protocolo las muestras han sido diluidas 1:2
(50 µL de muestra, 50 µL de Solución Buffer de Ensayo (1x)), la concentración leída de la curva
estándar debe ser multiplicada por el factor de dilución (x 2).

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17. REFERENCIAS SOBRE EL PRODUCTO
1. Helfgott,D.C.; Tatter,S.B.; Santhanam,U.; Clarick,R.H.; Bhardwaj,N.; May,L.T.; Sehgal,P.B.. Multiple forms of IFN-beta
2/IL-6 in serum and body fluids during acute bacterial infection. J.Immunol. 1989; 142:948-953.
2. Ueyama,M.; Maruyama,I.; Osame,M.; Sawada,Y.. Marked increase in plasma interleukin-6 in burn patients. J.Lab
Clin.Med. 1992; 120:693-698.
3. May,L.T.; Santhanam,U.; Tatter,S.B.; Bhardwaj,N.; Ghrayeb,J.; Sehgal,P.B.. Phosphorylation of secreted forms of
human beta 2-interferon/hepatocyte stimulating factor/interleukin-6. Biochem.Biophys.Res.Commun. 1988; 152:1144-
1150.
4. Martinez-Maza,O.. IL6 and AIDS. Res.Immunol. 1992; 143:764-769.
5. Santhanam,U.; Avila,C.; Romero,R.; Viguet,H.; Ida,N.; Sakurai,S.; Sehgal,P.B.. Cytokines in normal and abnormal
parturition: elevated amniotic fluid interleukin-6 levels in women with premature rupture of membranes associated with
intrauterine infection. Cytokine 1991; 3:155-163.
6. Nakajima,K.; Martinez-Maza,O.; Hirano,T.; Breen,E.C.; Nishanian,P.G.; Salazar-Gonzalez,J.F.; Fahey,J.L.; Kishimoto,T..
Induction of IL-6 (B cell stimulatory factor-2/IFN-beta 2) production by HIV. J.Immunol. 1989; 142:531-536.
7. Cayphas,S.; Van,Damme J.; Vink,A.; Simpson,R.J.; Billiau,A.; Van,Snick J.. Identification of an interleukin HP1-like
plasmacytoma growth factor produced by L cells in response to viral infection. J.Immunol. 1987; 139:2965-2969.
8. Koj Aleksander. Regulation of the acute phase and immune responses: interleukin-6. Ann.N Y.Acad.Sci. 1989; 557:1-
583.
9. Hirano,T.; Matsuda,T.; Turner,M.; Miyasaka,N.; Buchan,G.; Tang,B.; Sato,K.; Shimizu,M.; Maini,R.; Feldmann,M.; ..
Excessive production of interleukin 6/B cell stimulatory factor-2 in rheumatoid arthritis. Eur.J.Immunol. 1988; 18:1797-
1801.
10. Sheron,N.; Bird,G.; Goka,J.; Alexander,G.; Williams,R.. Elevated plasma interleukin-6 and increased severity and
mortality in alcoholic hepatitis. Clin.Exp.Immunol. 1991; 84:449-453.
11. Zilberstein,A.; Ruggieri,R.; Korn,J.H.; Revel,M.. Structure and expression of cDNA and genes for human interferon-beta-
2, a distinct species inducible by growth-stimulatory cytokines. EMBO J. 1986; 5:2529-2537.
12. Helle,M.; Brakenhoff,J.P.; De Groot,E.R.; Aarden,L.A.. Interleukin 6 is involved in interleukin 1-induced activities.
Eur.J.Immunol. 1988; 18:957-959.
13. Pettersson,T.; Metsarinne,K.; Teppo,A.M.; Fyhrquist,F.. Immunoreactive interleukin-6 in serum of patients with B-
lymphoproliferative diseases. J.Intern.Med. 1992; 232:439-442.
14. Hirano,T.; Yasukawa,K.; Harada,H.; Taga,T.; Watanabe,Y.; Matsuda,T.; Kashiwamura,S.; Nakajima,K.; Koyama,K.;
Iwamatsu,A.; .. Complementary DNA for a novel human interleukin (BSF-2) that induces B lymphocytes to produce
immunoglobulin. Nature 1986; 324:73-76.
15. Ray,A.; Tatter,S.B.; Santhanam,U.; Helfgott,D.C.; May,L.T.; Sehgal,P.B.. Regulation of expression of interleukin-6.
Molecular and clinical studies. Ann.N Y.Acad.Sci. 1989; 557:353-361.
16. May,L.T.; Ghrayeb,J.; Santhanam,U.; Tatter,S.B.; Sthoeger,Z.; Helfgott,D.C.; Chiorazzi,N.; Grieninger,G.; Sehgal,P.B..
Synthesis and secretion of multiple forms of beta 2-interferon/B-cell differentiation factor 2/hepatocyte-stimulating factor
by human fibroblasts and monocytes. J.Biol.Chem. 1988; 263:7760-7766.
17. Hirano,T.; Taga,T.; Nakano,N.; Yasukawa,K.; Kashiwamura,S.; Shimizu,K.; Nakajima,K.; Pyun,K.H.; Kishimoto,T..
Purification to homogeneity and characterization of human B-cell differentiation factor (BCDF or BSFp-2).
Proc.Natl.Acad.Sci.U S A 1985; 82:5490-5494.
18. Oka,Y.; Murata,A.; Nishijima,J.; Yasuda,T.; Hiraoka,N.; Ohmachi,Y.; Kitagawa,K.; Yasuda,T.; Toda,H.; Tanaka,N.; ..
Circulating interleukin 6 as a useful marker for predicting postoperative complications. Cytokine 1992; 4:298-304.
19. Horii,Y.; Iwano,M.; Hirata,E.; Shiiki,M.; Fujii,Y.; Dohi,K.; Ishikawa,H.. Role of interleukin-6 in the progression of
mesangial proliferative glomerulonephritis. Kidney Int.Suppl 1993; 39:S71-S75.
20. Ray,A.; Tatter,S.B.; Santhanam,U.; Helfgott,D.C.; May,L.T.; Sehgal,P.B.. Regulation of expression of interleukin-6.
Molecular and clinical studies. Ann.N.Y.Acad.Sci. 1989; 557:353-361.
21. Hirano,T.; Akira,S.; Taga,T.; Kishimoto,T.. Biological and clinical aspects of interleukin 6. Immunol.Today 1990; 11:443-
449.
22. Elder,J.T.; Sartor,C.I.; Boman,D.K.; Benrazavi,S.; Fisher,G.J.; Pittelkow,M.R.. Interleukin-6 in psoriasis: expression and
mitogenicity studies. Arch.Dermatol.Res. 1992; 284:324-332.
23. Merico,F.; Bergui,L.; Gregoretti,M.G.; Ghia,P.; Aimo,G.; Lindley,I.J.; Caligaris-Cappio,F.. Cytokines involved in the
progression of multiple myeloma. Clin.Exp.Immunol. 1993; 92:27-31.
24. Seguchi,T.; Yokokawa,K.; Sugao,H.; Nakano,E.; Sonoda,T.; Okuyama,A.. Interleukin-6 activity in urine and serum in
patients with bladder carcinoma. J.Urol. 1992; 48:791-794.
25. Hirano,T.; Taga,T.; Yasukawa,K.; Nakajima,K.; Nakano,N.; Takatsuki,F.; Shimizu,M.; Murashima,A.; Tsunasawa,S.;
Sakiyama,F.; .. Human B-cell differentiation factor defined by an anti-peptide antibody and its possible role in
autoantibody production. Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A 1987; 84:228-231.

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Αριθµός εξετάσεων:
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LYO Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασµένο
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Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In
Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ∆ιάγνωση.
Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos
para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης.
Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. /
Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni
prima dell’uso. / ∆ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση.
Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. /
Garder à l’abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la
luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να
φυλάσσεται µακριά από θερµότητα και άµεση επαφή µε το φως του ηλίου.
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στους:
Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός:
Caution! / Vorsicht! / Attention! / ¡Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή!
Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED.
Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben.
Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit.
Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS.
Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS.
Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT.
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