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Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia




    1. Conceptos generales: statico, cida, lítico
    2. Empleo y diversidad de los antimicrobianos:
           •    Esterilizantes
           •    Desinfectantes
           •    Antisépticos
           •    Quimioterápicos de síntesis y antibióticos
    3. Desinfectantes y antisépticos
                  - Agentes que dañan la membrana
                  - Agentes que desnaturalizan proteínas
            - Agentes modificadores de grupos funcionales de proteínas y ácidos
    nucleicos
    4. Evaluación de la actividad antimicrobiana de los desinfectantes y
       antisépticos
             p
                  −Técnica de dilución en tubo
                  −Técnica de la placa de agar
                  −Técnica del coeficiente fenol
                   Té i d l       fi i t f     l
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia




      Objetivos del tema
      • conocer cuales son los agentes antimicrobianos no
                    l        l       t     ti i     bi
      terapéuticos, es decir, los agentes esterilizantes,
                                          esterilizantes,
      desinfectantes y antisépticos
                       antisépticos.


      •conocer el mecanismo de acción y aplicaciones de
      estos agentes


      •   conocer el concepto y utilidad del coeficiente fenol
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



   1. Conceptos y definiciones
  Antimicrobianos
  Microbiostático-Microbicida-Microbiolítico:
    Bactericida / Bacteriostático, bacterias
    Fungicida / Fungiostático, hongos.
                    Adición del agente
                                                     Las células pueden
                                                     crecer si se retira el
                                                           agente




                                                             Cinética de muerte microbiana: supervivencia a
                                                                    121ºC el valor D121 es de 1 minuto
             Efecto de los antimicrobianos sobre el
                          crecimiento
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



    2. Diversidad y empleo de los antimicrobianos
                      p


    Agentes esterilizantes: Esterilización


    Desinfectantes: Desinfección


    Antisépticos: Antisepsia


    Quimioterápicos Toxicidad selectiva. Quimioterapia
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



  2. Diversidad y empleo de los antimicrobianos
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia


                                 Agentes esterilizantes: Agentes físicos



                                                Agentes fi i
                                                A   t fisicos


     Radiaciones                                     Temperatura
                                                        p                Filtración


                                                                  Altas
                                                               temperaturas




                                                       Calor húmedo       Calor seco
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



                 Agentes esterilizantes: Agentes químicos

                                                Agentes Químicos


          Oxido de etileno                                    Glutaraldehído
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



   3. Desinfectantes y antisépticos
                             p


                    Desinfectantes y antisépticos

                                                                                   Modifican
                                                       Desnaturalizan
     Dañan la Membrana                                                             Proteínas
                                                         Proteinas                A. nucléicos


                                                     Ácidos y    Ácidos      Metales
    Detergentes               Fenoles                                                    Colorantes
                                                      álcalis   orgánicos
                                                                  g          p
                                                                             pesados




                 Alcoholes
                                                                            Oxidantes    Alquilantes
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



     Desinfectantes y antisépticos que dañan la membrana

    Detergentes: Surfactantes
   Detergentes aniónicos: jabones, sales biliares. Dodecil sulfato
      sódico o lauril sulfato sódico; sulfonato de alquil benceno
                                                         O
                                                                     O-
                                                             S
                                                     O
                                                                 O




     Detergentes cationicos: compuestos de
        amonio cuaternario




    Detergentes no iónicos: Tween 80
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



     Desinfectantes y antisépticos que dañan la membrana

    Fenoles y compuestos fenólicos

              Fenol: Solución acuosa al 5% mata células vegetativas
                                                     Tóxico y olor desagradable




         Cresoles:
         Cresoles: derivados metilados del fenol que se usa unido a jabones

         Bifenoles halogenados: Hexaclorofeno: derivado halogenado del fenol
                   halogenados:




           Triclosan,
           Triclosan, Lysol®
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



     Desinfectantes y antisépticos que dañan la membrana
      Alcoholes
    Desnaturalizan proteínas, disuelven las capas 
    D      t li         t í    di l      l
    lipídicas y son agentes deshidratantes 
     Etanol al 96%, isopropanol, alcohol metílico
                  , p p        ,




    CLORHEXIDINA                                Biguanida
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



     Desinfectantes y antisépticos que modifican proteínas




                    Desinfectantes y antisépticos

                                                                             Modifican
                                                       Desnaturalizan
     Dañan la Membrana                                                       Proteínas
                                                         Proteinas          A. nucléicos


                                                     Ácidos y    Ácidos
                                                      álcalis   orgánicos
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



     Desinfectantes y antisépticos que modifican proteínas
  Acidos y álcalis

                Ácido sulfúrico (H2SO4)
                Ácido nítrico (HNO3)
                Hidróxido ódi (N OH)
                Hid ó id sódico (NaOH)
                Hidróxido potásico (KOH)



   Acidos orgánicos

                 ácido acético
                 ácido láctico
                 ácido benzoico
                 ácido sórbico
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia



     Desinfectantes y antisépticos que modifican grupos
     funcionales de proteínas y ácidos nucleicos
      Metales pesados:
              p

         Mercurio: mercurocromo, mertiolato
         Zinc : óxido
         Cobre: sulfato
         Plata: Solución l
         Pl t S l ió al 1% nitrato de plata
                            it t d l t

     Compuestos oxidantes:
        Halógenos: cloro, yodo
        Peróxido d hid ó
        P ó id de hidrógeno 6%
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia


     Desinfectantes y antisépticos que modifican grupos
     funcionales de proteínas y ácidos nucleicos
     f   i   l d       t í      á id      l i

    Colorantes: tinturas de colorantes
          Derivados de la anilina:
          Derivados de la acridina


      Agentes alquilantes:
       g        q

      Formaldehído (frente a formas vegetativas y esporas)

      Glutaraldehido (“esteriliza en frío”)

      Beta-propionil-lactona (25 veces más activa que el formol)
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia




    4.
    4 Evaluación de la actividad antimicrobiana de los desinfectantes y
       antisépticos
                  −Técnica de dilución en tubo
                  −Técnica de la placa de agar
                  −Técnica del coeficiente fenol

       Técnica de dilución en tubo Técnica de difusión en placa
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia


  Coeficiente fenol:
      técnica t d i d
      té i estandarizada para comparar el poder desinfectante de un agente
                                        l d d i f t t d                 t
      químico frente al del fenol

                                               Presencia de crecimiento (minutos)
           Agente y
           dilución
                                                5             10              15
     Fenol
                 1:80
                                                 -             -               -
                 1:90                           +              -               -
               1:100                            +              +               -
     Compuesto
          1:400
                                                 -             -               -
                1:450                           +              -               -
                1:500                           +              +               -

                                Coeficiente fenol: 1/450/1/90 = 0.64
Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia

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Tema 39

  • 1. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia 1. Conceptos generales: statico, cida, lítico 2. Empleo y diversidad de los antimicrobianos: • Esterilizantes • Desinfectantes • Antisépticos • Quimioterápicos de síntesis y antibióticos 3. Desinfectantes y antisépticos - Agentes que dañan la membrana - Agentes que desnaturalizan proteínas - Agentes modificadores de grupos funcionales de proteínas y ácidos nucleicos 4. Evaluación de la actividad antimicrobiana de los desinfectantes y antisépticos p −Técnica de dilución en tubo −Técnica de la placa de agar −Técnica del coeficiente fenol Té i d l fi i t f l
  • 2. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Objetivos del tema • conocer cuales son los agentes antimicrobianos no l l t ti i bi terapéuticos, es decir, los agentes esterilizantes, esterilizantes, desinfectantes y antisépticos antisépticos. •conocer el mecanismo de acción y aplicaciones de estos agentes • conocer el concepto y utilidad del coeficiente fenol
  • 3. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia 1. Conceptos y definiciones Antimicrobianos Microbiostático-Microbicida-Microbiolítico: Bactericida / Bacteriostático, bacterias Fungicida / Fungiostático, hongos. Adición del agente Las células pueden crecer si se retira el agente Cinética de muerte microbiana: supervivencia a 121ºC el valor D121 es de 1 minuto Efecto de los antimicrobianos sobre el crecimiento
  • 4. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia 2. Diversidad y empleo de los antimicrobianos p Agentes esterilizantes: Esterilización Desinfectantes: Desinfección Antisépticos: Antisepsia Quimioterápicos Toxicidad selectiva. Quimioterapia
  • 5. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia 2. Diversidad y empleo de los antimicrobianos
  • 6. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Agentes esterilizantes: Agentes físicos Agentes fi i A t fisicos Radiaciones Temperatura p Filtración Altas temperaturas Calor húmedo Calor seco
  • 7. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Agentes esterilizantes: Agentes químicos Agentes Químicos Oxido de etileno Glutaraldehído
  • 8. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia 3. Desinfectantes y antisépticos p Desinfectantes y antisépticos Modifican Desnaturalizan Dañan la Membrana Proteínas Proteinas A. nucléicos Ácidos y Ácidos Metales Detergentes Fenoles Colorantes álcalis orgánicos g p pesados Alcoholes Oxidantes Alquilantes
  • 9. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Desinfectantes y antisépticos que dañan la membrana Detergentes: Surfactantes Detergentes aniónicos: jabones, sales biliares. Dodecil sulfato sódico o lauril sulfato sódico; sulfonato de alquil benceno O O- S O O Detergentes cationicos: compuestos de amonio cuaternario Detergentes no iónicos: Tween 80
  • 10. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Desinfectantes y antisépticos que dañan la membrana Fenoles y compuestos fenólicos Fenol: Solución acuosa al 5% mata células vegetativas Tóxico y olor desagradable Cresoles: Cresoles: derivados metilados del fenol que se usa unido a jabones Bifenoles halogenados: Hexaclorofeno: derivado halogenado del fenol halogenados: Triclosan, Triclosan, Lysol®
  • 11. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Desinfectantes y antisépticos que dañan la membrana Alcoholes Desnaturalizan proteínas, disuelven las capas  D t li t í di l l lipídicas y son agentes deshidratantes  Etanol al 96%, isopropanol, alcohol metílico , p p , CLORHEXIDINA Biguanida
  • 12. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Desinfectantes y antisépticos que modifican proteínas Desinfectantes y antisépticos Modifican Desnaturalizan Dañan la Membrana Proteínas Proteinas A. nucléicos Ácidos y Ácidos álcalis orgánicos
  • 13. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Desinfectantes y antisépticos que modifican proteínas Acidos y álcalis Ácido sulfúrico (H2SO4) Ácido nítrico (HNO3) Hidróxido ódi (N OH) Hid ó id sódico (NaOH) Hidróxido potásico (KOH) Acidos orgánicos ácido acético ácido láctico ácido benzoico ácido sórbico
  • 14. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Desinfectantes y antisépticos que modifican grupos funcionales de proteínas y ácidos nucleicos Metales pesados: p Mercurio: mercurocromo, mertiolato Zinc : óxido Cobre: sulfato Plata: Solución l Pl t S l ió al 1% nitrato de plata it t d l t Compuestos oxidantes: Halógenos: cloro, yodo Peróxido d hid ó P ó id de hidrógeno 6%
  • 15. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Desinfectantes y antisépticos que modifican grupos funcionales de proteínas y ácidos nucleicos f i l d t í á id l i Colorantes: tinturas de colorantes Derivados de la anilina: Derivados de la acridina Agentes alquilantes: g q Formaldehído (frente a formas vegetativas y esporas) Glutaraldehido (“esteriliza en frío”) Beta-propionil-lactona (25 veces más activa que el formol)
  • 16. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia
  • 17. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia 4. 4 Evaluación de la actividad antimicrobiana de los desinfectantes y antisépticos −Técnica de dilución en tubo −Técnica de la placa de agar −Técnica del coeficiente fenol Técnica de dilución en tubo Técnica de difusión en placa
  • 18. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia Coeficiente fenol: técnica t d i d té i estandarizada para comparar el poder desinfectante de un agente l d d i f t t d t químico frente al del fenol Presencia de crecimiento (minutos) Agente y dilución 5 10 15 Fenol 1:80 - - - 1:90 + - - 1:100 + + - Compuesto 1:400 - - - 1:450 + - - 1:500 + + - Coeficiente fenol: 1/450/1/90 = 0.64
  • 19. Tema 38. Esterilización, desinfección y antisepsia