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Una aproximación a la
        utilidad de la Ciencia
Curso 2008-09

    ¿Sabías que el descubrimiento de la
    doble hélice del ADN ha revolucionado
    la criminología?
                  Álvaro Martínez del Pozo
     Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I
            Universidad Complutense de Madrid




        http://solea.quim.ucm.es/public_html/divul/sabias2.htm
¿Sabías que el descubrimiento de la
 doble hélice del ADN ha permitido
  que Horatio pueda mirarnos con
            superioridad?
Identificación mediante la “PRUEBA DEL ADN”

  ESPECIFICIDAD: Sólo puede corresponder a una persona.
                 No puede haber equívocos

  SENSIBILIDAD: Escasa muestra biológica de partida
El descubrimiento de la estructura
     en doble hélice del ADN
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                          Premio Nobel en 1915
Todo
Los protagonistas       comienza
                        en 1951…
            Laboratorio Cavendish
                 (Cambridge)

            James Watson
             Francis Crick
                King’s College
                  (Londres)

            Maurice Wilkins
   ~80 km   Rosalind Franklin
Laboratorio Cavendish (Cambridge)
James Watson (1928)

                                Americano
                                 Biólogo
                                 Soltero
                                 Doctor
                               con 23 años
                              Muy ambicioso
                               Iconoclasta
  Iconoclasta: Se dice de quien niega y rechaza la merecida autoridad de
                       maestros, normas y modelos
Francis Crick (1916-2004)
  Británico

   Físico

   Casado

  35 años

No es doctor
 Un teórico
  ¡Un genio!
No les gustaba hacer
   experimentos…

Hablaban mucho, tomaban café y construían modelos
King’s College (Londres)
Maurice Wilkins (1916-2004)
     Neozelandés
        Físico
       Soltero

       35 años

       Doctor

      “Rarito”
Rosalind Franklin (1920-1958)

    Británica
     Química
     Soltera
     31 años
 Experimentadora
   “Feminista”
  Independiente
También algo rarita
 No consiguió llevarse bien con Wilkins
Invitación al funeral por la
                       muerte de la hélice de ADN




  Rosalind fue quien
 hizo el experimento
  clave, pero nunca
creyó que se trataba
    de una hélice
Crick
            Perutz                   Watson
  Wilkins
                         Steinbeck
                                          Kendrew




Ceremonia de entrega del Premio Nobel de 1962
El resultado:
                    A-T y G-C




¡La estructura en doble hélice del ADN!
La temperatura a
                       la cual se
                       produce la
                   desnaturalización
LA ESPECIFICIDAD      depende del
                   contenido en G+C
ADN
               pol




   Caliento
  y separo
 las hebras

 Añado un
  cebador
 específico
  y enfrío               La ADN
                        polimerasa
                         copia el
                        fragmento
                     correspondiente

       Replicación del ADN
específica y en el tubo de ensayo
1987: La invención de la reacción
       en cadena de la polimerasa (PCR)
    En este caso, hay 2n moléculas mutantes por cada hebra silvestre:
                       La selección no es necesaria




         desnaturalización
                          hibridación
                                     síntesis DNA
                     oligonucleótidos
                         cebadores
Región del gen
o cDNA que se
quiere amplificar




              PRIMER CICLO (2 moléculas de dsDNA)   SEGUNDO CICLO (4 molec. DNA)   TERCER CICLO (8molec. dsDNA)



                                                                                                         moléculas/ciclo
Yellowstone (Wyoming, EEUU)




                          Oso Yogui




Termophilus aquaticus
Kary Mullis
  (1944)




                     Tras 30 ciclos de
               amplificación tendremos más
               de mil millones de hebras por
                   cada hebra original
Premio Nobel
 de Química
  en 1993
               LA SENSIBILIDAD
¿CÓMO SE HACE?
      El concepto de
identificación por ADN se
  introdujo en 1985 por
parte del genetista inglés
      Alec Jeffreys

 Encontró que ciertas regiones contiguas del ADN humano
      contenían secuencias repetidas (minisatélites).




           Distinto tamaño
Regiones que se denominan VNTRs
  (Variable Number of Tandem Repeats)
        Individuo 1

     Individuo 2


 Individuo 3


    Además descubrió que el número de
repeticiones variaba de un individuo a otro.
ELECTROFORESIS
     Los ácidos nucleicos siempre tienen carga negativa

       +                                             -
Bajo la acción de un campo eléctrico siempre se mueven hacia
                       el polo positivo




 -                          +

  Si hago que se muevan por un gel poroso cuyo poro sea de
     dimensiones similares a las del ácido nucleico, puedo
              separarlos por su distinto tamaño
Se suelen analizar 13-16 regiones del ADN de cada
muestra, fijándonos en estas regiones que se repiten.
Concretamente, en las más cortas, porque se analizan
                     más rápido:
            STRs (Short Tandem Repeats)
 Gracias al desarrollo de la PCR, el resultado se puede obtener
 en sólo unas pocas horas y a partir del material contenido en
                         una única célula

                      Especificidad
       Uno en tres billones (1/3000000000000): 12 ceros
   En la Tierra hay unos 6000000000 de habitantes: 9 ceros
           500 veces la población actual de la Tierra

                       Sensibilidad
El análisis puede ser realizado en 5 horas a partir de una mancha
          de sangre del tamaño de la cabeza de un alfiler
El resultado es la
    “HUELLA DE ADN”
  (“DNA FINGERPRINT”)




Una característica individual
¿PARA QUÉ VALE?
• Identificación sospechosos de un crimen
• Exoneración de inocentes erróneamente acusados
• Identificación de víctimas de un accidente, crimen o atentado
• Identificación individuos de especies protegidas
• Detección de microorganismos contaminantes
• Evaluación de compatibilidad de órganos
• Determinación el pedigrí de microorganismos, plantas y
  animales
• Autentificación de “denominaciones de origen”
• Autentificación de restos arqueológicos
• Pruebas de paternidad
Exoneración de inocentes
 erróneamente acusados
20 de abril de 2008
O la condena de
 los culpables…
Atentado del 11M


La policía emplea estas técnicas forenses para identificar sospechosos y víctimas
¡Kary Mullis testificó a favor de
  O.J. Simpson afirmando que la
PCR no era suficientemente fiable!
Identificación de víctimas de un
  accidente, crimen o atentado
Se compararon los tipajes de unas 2800
víctimas con los de unos 6000 parientes,
  a los que se les tomó una muestra de
     saliva, para poder identificarlos

                    Se analizaron 20000
                       restos humanos
                   recuperados de los más
                      de 20 millones de
                  toneladas que produjo el
                          derrumbe


                     Más de 1100 víctimas del 11S
                      permanecen sin identificar
Accidente aéreo
                                      de Barajas




Las pruebas de ADN fueron fundamentales para la
correcta identificación de muchos de los cadáveres
Identificación individuos de
      especies protegidas

                  18 de enero de 2007



La Estación de Doñana
  ultima un plan para
 seguir linces por las
         heces
  Los científicos detectan un ADN
      específico de los felinos
Detección de microorganismos
       contaminantes
ELPAIS.es 13/02/2006
Gripe aviar   La gripe aviar llega a Europa




                        Veredus lanzó el año pasado un
                       test de reacción a la cadena de
                       polimerasa (PCR) que detecta la
                      variedad H5N1 tanto en humanos
                      como en aves, en menos de cuatro
                       horas. El producto ya está en el
                          mercado, principalmente en
                        Europa, Asia y Oriente Medio.
Determinación del pedigrí de
microorganismos, plantas y animales
                    ¿De quién desciende tu
                            perro?
                       Ahora será fácil saberlo.
                  Investigadores estadounidenses han
                 desarrollado una prueba de ADN que
                puede establecer el pedigrí de cualquier
                    can con una exactitud del 99%.
Pruebas de paternidad




Hereda 27 millones de euros
La Ciencia y el
                   saber producen
                       placer


                  Un placer que no
                    puede sentir
                     ningún otro
                      organismo
                       conocido


Y además…

    ¡Valen para algo!
Sabias Que... (Alvaro Martinez)

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Sabias Que... (Alvaro Martinez)

  • 1. Una aproximación a la utilidad de la Ciencia Curso 2008-09 ¿Sabías que el descubrimiento de la doble hélice del ADN ha revolucionado la criminología? Álvaro Martínez del Pozo Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I Universidad Complutense de Madrid http://solea.quim.ucm.es/public_html/divul/sabias2.htm
  • 2. ¿Sabías que el descubrimiento de la doble hélice del ADN ha permitido que Horatio pueda mirarnos con superioridad?
  • 3. Identificación mediante la “PRUEBA DEL ADN” ESPECIFICIDAD: Sólo puede corresponder a una persona. No puede haber equívocos SENSIBILIDAD: Escasa muestra biológica de partida
  • 4. El descubrimiento de la estructura en doble hélice del ADN El fundamento teórico: La ley de Bragg Premio Nobel en 1915
  • 5. Todo Los protagonistas comienza en 1951… Laboratorio Cavendish (Cambridge) James Watson Francis Crick King’s College (Londres) Maurice Wilkins ~80 km Rosalind Franklin
  • 6. Laboratorio Cavendish (Cambridge) James Watson (1928) Americano Biólogo Soltero Doctor con 23 años Muy ambicioso Iconoclasta Iconoclasta: Se dice de quien niega y rechaza la merecida autoridad de maestros, normas y modelos
  • 7.
  • 8. Francis Crick (1916-2004) Británico Físico Casado 35 años No es doctor Un teórico ¡Un genio!
  • 9. No les gustaba hacer experimentos… Hablaban mucho, tomaban café y construían modelos
  • 10. King’s College (Londres) Maurice Wilkins (1916-2004) Neozelandés Físico Soltero 35 años Doctor “Rarito”
  • 11. Rosalind Franklin (1920-1958) Británica Química Soltera 31 años Experimentadora “Feminista” Independiente También algo rarita No consiguió llevarse bien con Wilkins
  • 12. Invitación al funeral por la muerte de la hélice de ADN Rosalind fue quien hizo el experimento clave, pero nunca creyó que se trataba de una hélice
  • 13.
  • 14. Crick Perutz Watson Wilkins Steinbeck Kendrew Ceremonia de entrega del Premio Nobel de 1962
  • 15. El resultado: A-T y G-C ¡La estructura en doble hélice del ADN!
  • 16. La temperatura a la cual se produce la desnaturalización LA ESPECIFICIDAD depende del contenido en G+C
  • 17. ADN pol Caliento y separo las hebras Añado un cebador específico y enfrío La ADN polimerasa copia el fragmento correspondiente Replicación del ADN específica y en el tubo de ensayo
  • 18. 1987: La invención de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) En este caso, hay 2n moléculas mutantes por cada hebra silvestre: La selección no es necesaria desnaturalización hibridación síntesis DNA oligonucleótidos cebadores Región del gen o cDNA que se quiere amplificar PRIMER CICLO (2 moléculas de dsDNA) SEGUNDO CICLO (4 molec. DNA) TERCER CICLO (8molec. dsDNA) moléculas/ciclo
  • 19. Yellowstone (Wyoming, EEUU) Oso Yogui Termophilus aquaticus
  • 20. Kary Mullis (1944) Tras 30 ciclos de amplificación tendremos más de mil millones de hebras por cada hebra original Premio Nobel de Química en 1993 LA SENSIBILIDAD
  • 21. ¿CÓMO SE HACE? El concepto de identificación por ADN se introdujo en 1985 por parte del genetista inglés Alec Jeffreys Encontró que ciertas regiones contiguas del ADN humano contenían secuencias repetidas (minisatélites). Distinto tamaño
  • 22. Regiones que se denominan VNTRs (Variable Number of Tandem Repeats) Individuo 1 Individuo 2 Individuo 3 Además descubrió que el número de repeticiones variaba de un individuo a otro.
  • 23. ELECTROFORESIS Los ácidos nucleicos siempre tienen carga negativa + - Bajo la acción de un campo eléctrico siempre se mueven hacia el polo positivo - + Si hago que se muevan por un gel poroso cuyo poro sea de dimensiones similares a las del ácido nucleico, puedo separarlos por su distinto tamaño
  • 24. Se suelen analizar 13-16 regiones del ADN de cada muestra, fijándonos en estas regiones que se repiten. Concretamente, en las más cortas, porque se analizan más rápido: STRs (Short Tandem Repeats) Gracias al desarrollo de la PCR, el resultado se puede obtener en sólo unas pocas horas y a partir del material contenido en una única célula Especificidad Uno en tres billones (1/3000000000000): 12 ceros En la Tierra hay unos 6000000000 de habitantes: 9 ceros 500 veces la población actual de la Tierra Sensibilidad El análisis puede ser realizado en 5 horas a partir de una mancha de sangre del tamaño de la cabeza de un alfiler
  • 25. El resultado es la “HUELLA DE ADN” (“DNA FINGERPRINT”) Una característica individual
  • 26. ¿PARA QUÉ VALE? • Identificación sospechosos de un crimen • Exoneración de inocentes erróneamente acusados • Identificación de víctimas de un accidente, crimen o atentado • Identificación individuos de especies protegidas • Detección de microorganismos contaminantes • Evaluación de compatibilidad de órganos • Determinación el pedigrí de microorganismos, plantas y animales • Autentificación de “denominaciones de origen” • Autentificación de restos arqueológicos • Pruebas de paternidad
  • 27. Exoneración de inocentes erróneamente acusados
  • 28. 20 de abril de 2008
  • 29. O la condena de los culpables…
  • 30. Atentado del 11M La policía emplea estas técnicas forenses para identificar sospechosos y víctimas
  • 31. ¡Kary Mullis testificó a favor de O.J. Simpson afirmando que la PCR no era suficientemente fiable!
  • 32. Identificación de víctimas de un accidente, crimen o atentado Se compararon los tipajes de unas 2800 víctimas con los de unos 6000 parientes, a los que se les tomó una muestra de saliva, para poder identificarlos Se analizaron 20000 restos humanos recuperados de los más de 20 millones de toneladas que produjo el derrumbe Más de 1100 víctimas del 11S permanecen sin identificar
  • 33. Accidente aéreo de Barajas Las pruebas de ADN fueron fundamentales para la correcta identificación de muchos de los cadáveres
  • 34. Identificación individuos de especies protegidas 18 de enero de 2007 La Estación de Doñana ultima un plan para seguir linces por las heces Los científicos detectan un ADN específico de los felinos
  • 35.
  • 37. ELPAIS.es 13/02/2006 Gripe aviar La gripe aviar llega a Europa Veredus lanzó el año pasado un test de reacción a la cadena de polimerasa (PCR) que detecta la variedad H5N1 tanto en humanos como en aves, en menos de cuatro horas. El producto ya está en el mercado, principalmente en Europa, Asia y Oriente Medio.
  • 38. Determinación del pedigrí de microorganismos, plantas y animales ¿De quién desciende tu perro? Ahora será fácil saberlo. Investigadores estadounidenses han desarrollado una prueba de ADN que puede establecer el pedigrí de cualquier can con una exactitud del 99%.
  • 39. Pruebas de paternidad Hereda 27 millones de euros
  • 40. La Ciencia y el saber producen placer Un placer que no puede sentir ningún otro organismo conocido Y además… ¡Valen para algo!