Informe

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍAAMBIENTAL
TRABAJO ENCARGADO:
Informe de salida de campo a Titire e identificación de microorganismos
extremófilos en el microscopio
CURSO:
BIOTECNOLOGÍA
INTEGRANTES:
CHUNGA CORMILLUNI, DAYANA YOSSELYN
ESCALANTE YUPANQUI, LIA ESTEFANY
MARTINEZ JIMENEZ, OLGA RAMIRA
OBANDO OVIEDO, FLAVIA LISSETH
DOCENTE:
Dr. SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN
CICLO:
VII
Ilo, 16 de Noviembre del 2022

2. 2
RESUMEN
En el presente informe se realizó una visita técnica a Titire donde se hizo el reconocimiento
del lugar y la toma de muestra como son de agua, sedimento, lodos, musgo.
Se reconocieron las bacterias que habitan ese lugar y cómo soportan las altas temperaturas.
Este análisis se realizó en el laboratorio de microbiología con ayuda del microscopio. Se
reconocieron las diferentes bacterias extremófilas presentes en las diferentes muestras
recolectadas.

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ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN 4
2. OBJETIVOS 4
3. MARCO TEÓRICO 5
4. MATERIALES Y EQUIPOS 9
4.1. MATERIALES 9
4.2. EQUIPOS 13
5. DETALLES SALIDA DE CAMPO 14
5.1. PUNTO DE ENCUENTRO Y VIAJE 14
5.2. PUNTO DE LLEGADA Y MUESTREO 17
5.3. RESULTADOS DEL MULTIPARÁMETRO PARA MUESTRAS DE AGUA 19
5.4. TRANSPORTE DE MUESTRAS A LABORATORIO 21
6. PROCEDIMIENTO LABORATORIO 22
7. RESULTADOS Y ANÁLISIS 23
8. CONCLUSIONES 26
9. RECOMENDACIONES 26
10. BIBLIOGRAFÍA 26
11. ANEXOS 27

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1. INTRODUCCIÓN
Durante mucho tiempo se pensó que era imposible encontrar algún organismo que viviera en
sitios con condiciones extremas, inhabitables para la gran mayoría de los organismos
conocidos: temperaturas superiores a 80ºC, presiones aplastantes, oscuridad total, altas
concentraciones de sales o minerales, ambientes muy ácidos, o sitios de temperaturas
extremadamente bajas. No obstante, cuando las técnicas utilizadas para explorar esos nichos
tan extremos se perfeccionaron, se pudo encontrar una diversidad de organismos que habitan
en ellos. Se los conoce como “extremófilos”, amantes de las condiciones extremas, y pueden
ser bacterias, plantas o animales.
Los extremófilos se encuentran en los géiseres o chimeneas negras de los fondos de los
océanos, donde se expulsa agua a más de 200ºC a una profundidad tal que soportan una
presión extrema; también en las salinas o el Mar Muerto, donde la concentración de sal
supera varias veces la concentración “normal” para el desarrollo de vida. Otros extremófilos
son los que viven en minas o plantas de desechos industriales, y que pueden obtener energía a
partir de compuestos inorgánicos con azufre o hierro. Los extremófilos que habitan en altas
temperaturas son conocidos como termófilos, los que habitan a bajas temperaturas,
psicrófilos, los que viven en altas concentraciones salinas son denominados halófilos, los que
viven en sitios de pH ácido, acidófilos y los de pH básico, alcalófilos. Existen
microorganismos conocidos como metanógenos que son capaces de generar metano (CH4),
un gas combustible, en condiciones anaeróbicas (sin oxígeno). Estos organismos viven en el
fondo de depósitos acuáticos y en el rumen de algunos mamíferos herbívoros (rumiantes). El
rumen es el órgano digestivo donde se lleva a cabo la degradación de celulosa y otros
polisacáridos mediante la actividad microbiana, ya que estos animales carecen de las enzimas
necesarias para digerirlos.
En este informe se realizó la recolección de muestra donde hay bacterias extremófilas, debido
a su condición en donde viven. Se reconoció la presencia de estas bacterias por medio del
microscopio en el laboratorio.
2. OBJETIVOS
Objetivo general:
Reconocer la presencia de bacterias extremófilas en el géiser de Titire.

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Objetivo específico:
Reconocer el lugar de Titire para la obtención de muestra.
Obtener todo tipo de muestra del lugar para el análisis en laboratorio.
3. MARCO TEÓRICO
Que son bacterias extremofilas
Los organismos extremófilos son aquellos que pueden soportar condiciones extremas en las
que otros organismos morirían. Tales condiciones pueden ser frío con temperaturas cercanas a
cero, temperaturas altas de hasta 121°C, pH muy ácido o muy alcalino, presiones
barométricas de varias toneladas, carencia de oxígeno y hasta radioactividad. Los
extremófilos son de tamaño pequeño y pueden ser:
Hongos.
Arqueas.
Bacterias: la mayoría de organismos extremófilos pertenecen a este grupo. Para saber más
sobre los tipos de bacterias que existen no dudes en leer este artículo.
Eucarias.
Levaduras.
Características de los extremófilos
Los extremófilos tienen cualidades muy particulares y diferentes entre ellos, a raíz de la
variedad de hábitats extremos que pueden existir. Estas son algunas de las características más
importantes de los extremófilos.
Los extremófilos son mayoritariamente microorganismos procariontes pertenecientes a las
Eubacterias y las Archaebacterias (o Arqueas). Si bien estos microorganismos comparten la
característica de ser unicelulares procariotas, estudios moleculares recientes han demostrado
que las Arqueas tienen un funcionamiento a nivel molecular más similar a las células
eucariotas. Por tal motivo, estos dos grupos de organismos procariotas están ubicados en
dominios distintos, como se indica en el siguiente esquema:

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Figura 1: Caracterización de los extremófilos
Fuente: Cuaderno de biotecnología.
Dónde viven los extremófilos
Los extremófilos pueden vivir en lugares impensables para otros seres vivos. Algunos
ejemplos de estos lugares son:
● Desiertos: donde se carece de agua.
● Fuentes hidrotermales volcánicas o submarinas: de temperaturas más altas que la de la
superficie, y con altos niveles de minerales que pueden ser sulfuro, cloro, hierro, entre
otros.
● En aguas o suelos con gran salinidad y fumarolas hidrotermales.
● Compuestas y escorias de minas.
● Aguas muy ácidas, o muy alcalinas.
● Suelos carbonatados.
● Océano Ártico y glaciares: también pueden vivir en lechos oceánicos muy profundos,
donde hay presiones de millones de toneladas.
● Espacios exteriores o cuevas subterráneas: localizados también en rocas bajo la
superficie terrestre.
Alimentación de los extremófilos

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La alimentación de los extremófilos depende del grupo al que pertenezcan y, normalmente,
consumen lo que el medio les proporcione. Al estar los extremófilos en sitios muy peculiares,
su alimento también es variado.
Las algas y algunas bacterias pueden hacer fotosíntesis para alimentarse. Si quieres saber más
sobre la Fotosíntesis: qué es, fases e importancia, no dudes en leer este artículo que te
recomendamos.
Las bacterias asociadas a metales pueden alimentarse de estos mismos.
Pueden alimentarse también de materia en descomposición de compuestos orgánicos o
inorgánicos, sal, petróleo o de sustancias químicas que estén en el entorno.
Otras características de los extremófilos
Estos organismos tienen una capacidad enzimática muy superior y con estabilidad en
condiciones extremas. A estas enzimas se les conoce como extremoenzimas y han sido
ampliamente utilizadas en la biotecnología. Más adelante te explicaremos cómo pueden ser
aprovechadas.
Estas extremoenzimas pueden ser de distintos tipos, y cada una procesa un sustrato distinto.
Por ejemplo, las proteasas procesan proteínas.
● Proteasas.
● Celulasas.
● Lipasas.
● Amilasas.
● Quitinasas.
● Deshidrogenasas.
● Glicosilhidrolasas.
Termófilos: sobreviven en altísimas temperaturas, superiores a 65 °C. Se alimentan de
sustancias inorgánicas y tienen enzimas para soportar las temperaturas.
Psicrófilos: se manejan en ambientes acuáticos muy fríos, de 5°C hasta -24,4 °C. Han
desarrollado enzimas anticongelantes para poder sobrevivir frías temperaturas. Las

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temperaturas frías son más comunes que las cálidas en nuestro planeta. En estas zonas frías
suele haber también presiones altas y alta concentración salina.
Alcalófilos: sobreviven en ambientes con pH superior a 9. Tienen que aislar su interior con
ayuda de enzimas para que su célula funcione correctamente.
Acidófilos: viven en pH cercano a 5, pues son casi nulos los organismos que pueden vivir a
pH 0. Estos ambientes ácidos son normalmente resultado de actividad geoquímica, como por
ejemplo volcanes.
Xerófilos: viven en lugares sin agua, o resistiendo por largos periodos sin ella, y expuestos al
sol constantemente. Suelen ser hongos, cactus, líquenes y algas.
Metalófilos: viven donde hay grandes concentraciones de metales, incluyendo metales
pesados. Algunos de los metales son zinc, plomo, cromo, níquel, cobre, entre otros. Logran
sobrevivir gracias a que reducen los metales a una bioactividad más baja.
Halófitos: toleran altas cantidades de salinidad. Pueden soportar cantidades bajas, hasta 20%
de salinidad, y esto depende del organismo. Necesitan acumular diferentes compuestos en su
citoplasma para regularse osmóticamente.
Piezófilos o barófilos: necesitan altas presiones para vivir, mayores a 1 atm. Pueden
encontrarse a profundidades de 5 mil metros y hasta 10 mil metros, profundidades asociadas
a fondos marinos.
Poliextremófilos: sobreviven una gran variedad de condiciones extremas, como el espacio
exterior, temperaturas frías, secas y carencia de oxígeno.

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4. MATERIALES Y EQUIPOS
4.1. MATERIALES
Bolsa Ziploc
Una bolsa de cierre zip, bolsa de almacenamiento
con cremallera o bolsa deslizante es una bolsa de
almacenamiento rectangular, flexible, económica,
generalmente transparente, hecha de polietileno o
algún plástico similar, que puede ser sellada y abierta
muchas veces por un deslizador.
Marcador
Un rotulador o marcador, fibra es un instrumento de
escritura, parecido al bolígrafo, que contiene su
propia tinta y cuyo uso principal es escribir sobre
superficies distintas al papel.
Permite rotular los envases de las muestras para su
identificación en laboratorio.
Cinta de embalaje
Se utiliza para sellar las bolsas ziploc, como un
refuerzo para evitar que las muestras se salgan de sus
respectivos envases.

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Caja de cartón
Las cajas de cartón son la solución más común para
empaquetar, almacenar y enviar diferentes tipos de
productos. Su resistencia evita las deformaciones
características del apilamiento y están pensadas para
soportar los cambios de temperatura sin dañar la
mercancía interior.
Se utiliza para transportar las muestras.
Frasco de vidrio
Fabricadas a partir de vidrio borosilicado resistente
al calor, duradero con paredes gruesas y esquinas
resistentes a la compresión. La capa gruesa, la base
pesada y la llanta reforzada evitan que se rompa
durante el lavado y el transporte.
Se usa para la recolección de las muestras de agua y
sedimentos.
Portaobjetos de microscopio
El portaobjetos de laboratorio es una pieza clave
para observar una muestra en el microscopio. Un
portaobjetos es una lámina rectangular de vidrio
transparente sobre la cual se coloca la muestra que
deberá ser observada con el microscopio.

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Cubre objetos
Un cubreobjetos es una fina hoja de material
transparente de planta cuadrada (normalmente 20
mm x 20 mm) o rectangular (de 20 mm x 40 mm
habitualmente). Se coloca sobre un objeto que va a
ser observado bajo microscopio, el cual se suele
encontrar sobre un portaobjetos.
Guantes de nitrilo
La función principal que se busca en ellos es la
protección contra las sustancias químicas que
podrían provocar quemaduras o irritaciones en la piel
al entrar en contacto directo con ella.
Agua destilada
El agua destilada es una forma de agua (H2O) que ha
sido sometida a procedimientos de destilación para
retirarle todos sus añadidos disueltos y llevarla a un
estado de máxima pureza y es de uso frecuente en
laboratorios y en industrias.
Cooler
Contar con una nevera portátil o cooler es de gran
utilidad para mantener a una determinada
temperatura las muestras.

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Papel Tissue
Sirve para prevenir la formación de partículas de
suciedad y secado de equipos altamente delicados
durante su uso.
Pizarra acrílica
Las pizarras de plástico acrílico, también conocido
como metacrilato, son muy ligeras. Por su bajo peso,
este tipo de material se suele usar para las pizarras de
mano.
Se usa para completar información de los puntos de
muestreo.
Pala
Herramienta para cavar y para recoger y trasladar
materiales, en especial blandos o pastosos como arena
o tierra, que consiste en una pieza plana de metal,
madera o plástico, rectangular o trapezoidal, con los
cantos más o menos redondeados, y normalmente
algo cóncava, que está sujeta a un mango largo.
Jarra
Se utiliza para recolectar la muestra y medir los
parámetros in situ, como pH, oxígeno disuelto,
temperatura, conductividad.

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4.2. EQUIPOS
Termómetro láser
Un termómetro de infrarrojos, pirómetro de
infrarrojos, termómetro sin contacto o termómetro de
radiación, es un medidor de temperatura de una
porción de superficie de un objeto a partir de la
emisión de luz del tipo cuerpo negro que produce.
Multiparámetro
El medidor multiparámetro es un instrumento a
prueba de agua que realiza mediciones de diversos
parámetros del agua tales como el pH, la
conductividad,, el oxígeno disuelto y la temperatura.
Microscopio
Instrumento óptico para ampliar la imagen de objetos
o seres, o de detalles de estos, tan pequeños que no se
pueden ver a simple vista; consta de un sistema de
lentes de gran aumento.

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GPS
El Sistema de Posicionamiento Global, originalmente
Navstar GPS, es un sistema que permite localizar
cualquier objeto sobre la Tierra con una precisión de
hasta centímetros, aunque lo común son unos pocos
metros.
5. DETALLES SALIDA DE CAMPO
5.1. PUNTO DE ENCUENTRO Y VIAJE
El punto de encuentro considerado para la presente salida de campo fue la plaza de
armas de Ilo, el día 25 de noviembre del 2022 a las 6 am.
Para ello se citó a todos los estudiantes y docente del curso para que puedan llegar
antes de la hora para salir rumbo a Titire en la movilidad contratada.
Figura 01: Ubicación del primer punto de encuentro, Fuente: Elaboración propia

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Tabla 01: Coordenadas de ubicación del primer punto de encuentro
COORDENADAS DEL PUNTO DE ENCUENTRO
ESTE NORTE ZONA
251186.00 m 8047426.00 m S 19 K
Fuente: Elaboración propia
En vista que algunos compañeros del curso viven en la Pampa, se consideró otro
punto de encuentro que es frente al terminal, de este punto se recogió
aproximadamente a 5 personas.
Figura 02: Ubicación del segundo punto de encuentro, Fuente: Elaboración propia
Tabla 02: Coordenadas de ubicación del primer punto de encuentro
COORDENADAS DEL SEGUNDO PUNTO DE ENCUENTRO
ESTE NORTE ZONA
252701.00 m E 8045805.00 m S 19 K
Fuente: Elaboración propia

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Luego de recoger a todos los estudiantes, se procedió a viajar a la ciudad de
Moquegua para luego ir hacia Titire a realizar el muestreo de agua y sedimento.
Figura 03: Ruta Ilo - Moquegua, Fuente: Elaboración propia
De Ilo a Moquegua, se tiene una distancia de 93 km aproximadamente, haciendo un
tiempo para llegar a este destino de 1 hora y media.
Se llegó a Moquegua a las 8 am, y se procedió a partir inmediatamente hacia Titire.
Figura 04: Ruta Moquegua - Titire, Fuente: Elaboración propia

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Se hizo el recorrido hasta las aguas termales de Puente Bello, lugar en el que se hizo
el muestreo y análisis de parámetros en situ, como pH, conductividad, temperatura y
oxígeno disuelto.
Tabla 03: Tiempo de viaje ruta Ilo - Titire
TIEMPO DE VIAJE
Ilo - Moquegua Moquegua - Titire Total
1: 30 hrs. 3:10 hrs 4:40 hrs.
Fuente: Elaboración propia
5.2. PUNTO DE LLEGADA Y MUESTREO
Se llegó a las aguas termales de Puente Bello y se procedió a recoger las muestras de
agua y sedimentos.
Figura 05: Vista general - Titire, Fuente: Elaboración propia
Para la recolección de la muestra de sedimento se utilizó una pala y un envase de
vidrio de 250 ml, la pala permitió recoger el material a estudiar y el envase sirvió
como almacenador del mismo, una vez que se recogió la muestra, se enroscó el envase
y se rotuló para luego guardarlo en el cooler.

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Para ello también se consideró medir las coordenadas del lugar , así como anotar en la
pizarra acrílica datos como, hora, fecha , punto de muestreo y resultados del
multiparámetro.
Figura 06: Recolección de sedimento- Titire, Fuente: Elaboración propia
Figura 07: Información de los puntos analizados - Titire,
Fuente: Elaboración propia

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Figura 08: Resultados del multiparámetro, Fuente: Elaboración propia
5.3. RESULTADOS DEL MULTIPARÁMETRO PARA MUESTRAS DE AGUA
A continuación se muestran algunos de los resultados del multiparámetro para las
muestras de agua analizadas en diferentes puntos.
Figura 09: Resultados del multiparámetro punto 1 ,
Fuente: Elaboración propia

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Figura 10: Resultados del multiparámetro punto 2 ,
Fuente: Elaboración propia
Como se puede observar los valores para temperatura y para pH varían según el punto
a analizar.
Figura 11: Resultados del multiparámetro punto 3 ,
Fuente: Elaboración propia

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Valores máximo y mínimos de temperatura y ph
En la siguiente tabla se hace una recopilación de la información obtenida por el
multiparámetro.
Tabla 04: Valores máximo y mínimos de temperatura y ph
VALORES MÁXIMOS Y MÍNIMOS DE TEMPERATURA Y pH
pH Temperatura
Mínimo Máximo Mínimo Máximo
4.47 7.25 16.1 °C 43.3 °C
Fuente: Elaboración propia
5.4. TRANSPORTE DE MUESTRAS A LABORATORIO
Una vez recolectadas las muestras, se procedió a llevarlas al laboratorio de
biotecnología de la UNAM, para su análisis; cada muestra se llevó correctamente
rotulada y bien sellada para evitar que se pierdan las muestras.
Figura 12: Muestras del grupo 03, Fuente: Elaboración propia

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Figura 13: Muestras de agua, Fuente: Elaboración propia
6. PROCEDIMIENTO LABORATORIO
Para la identificación de microorganismos extremófilos en las muestras recogidas del río
Titire, se utilizó el microscopio y un libro del Dr. Alejandro M. Fernández “MANUAL DE
LAS DIATOMEAS PERUANAS” para el reconocimiento de las mismas.
Figura 14: Manual de las Diatomeas Peruanas. Fuente:Dr. Alejandro M. Fernandez

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7. RESULTADOS Y ANÁLISIS
Tabla 05: Muestra de Algas en paredes Filtrantes
MUESTRA DE ALGAS EN PAREDES FILTRANTES
Ulothrix Algae
tricratium favus.
tricratium favus.
Muestra de Algas en Paredes Filtrantes
Fuente: Elaboración propia
Tabla 06: Musgo en la Pared
MUESTRA DE MUSGO EN LA PARED
Frustulia patrickii,diatomeas
.

24. 24
Muestra de Musgo en la Pared
Tabla 06: Muestra de alrededores del Río Titire
MUESTRA DE ALREDEDORES DEL RÍO TITIRE
Venturia chlorospora
Diatomea Bacillariophyta
Pinnularia viridis
Muestra de alrededor del Río Titire

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Tabla 06: Muestra de Líquido de Algas
MUESTRA DE
Pinnularia viridis tricratium favus./ Chlorophyta
Tabla 06: Muestreo de sales - alrededores
MUESTRA DE SALES - ALREDEDORES
Oxalato de calcio
Muestreo de sales - alrededores

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8. CONCLUSIONES
● Luego de la visita a Titire y análisis en laboratorio se puede decir que se llegó a
reconocer exitosamente las bacterias extremófilas que habitan y en el geiser de Titire
comprobando su existencia en este lugar.
● Por otro lado, se pudo determinar que Titire es un lugar que cuenta con un grado de
dificultad para su acceso, es decir que puede afectar a algunas personas que hagan este
recorrido ya que este lugar se encuentra aproximadamente a 4200 m.s.n.m, siendo una
altura considerable para la afección en ciertas personas por la altura y a otras por los
olores fuertes de Sulfuros de los Géiseres que existen en la zonas cercanas al río
Tambo.
● Además, gracias al recorrido realizado se ha logrado comprender que Titire es un lugar
importante para la formación de Ingenieros Ambientales, ya que gracias a la expedición
en Titire se pudo saber de la problemática ambiental que existe en las alturas de
Moquegua, siendo solo un lugar de los muchos que existen a nivel nacional y en el
mundo.
● En conclusión, la estadía en Titire permitió aplicar lo aprendido a lo largo de la Carrera
Profesional de Ingeniería Ambiental en la UNAM, como la toma de muestras de agua,
sedimentos, especies alrededor y condiciones de vida de microorganismos, además de
análisis en laboratorio y manejo de equipos, esto con el final de saber interpretar los
resultados de las pruebas realizadas.

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9. RECOMENDACIONES
● Para salidas de campo a lugares que se encuentre a altura altas, se sugiere tener
precaución llevando pastillas para los mareos y demás cosas necesarias para evitar
malestares durante el camino y el tiempo de estar en el lugar, algunas cosas necesarias
son bolsas, papel, alcohol, casaca y demás para la protección de cada individuo.
● Por otro lado, se recomienda llevar ropa adecuada para el lugar como botas de agua,
gorras y lentes de sol ya que hay presencia de lodos y caminos los cuales son difíciles
de pasar con zapatillas comunes o zapatos bajos por el río que atraviesa este lugar.
10. BIBLIOGRAFÍA
Osorio, U. R. (2022, febrero 18). Extremófilos: qué son, características y ejemplos.
ecologiaverde.com.
https://www.ecologiaverde.com/extremofilos-que-son-caracteristicas-y-ejemplos-
3768.html

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11. ANEXOS
Figura 15: Punto de muestreo de agua, Fuente: Elaboración propia
Figura 16: Llenado de datos para el punto de muestreo, Fuente: Elaboración propia

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Figura 17: Lectura del multiparámetro punto 1 . Fuente: Elaboración propia
Figura 18: Lectura del multiparámetro punto 2, Fuente: Elaboración propia

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Figura 19: Posicionamiento de los sensores del multiparámetro, Fuente: Elaboración
propia
Figura 20: Muestreo de agua, Fuente: Elaboración propia

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Figura 21: Muestras de sedimento, Fuente: Elaboración propia
Figura 22: Recolección de sales, Fuente: Elaboración propia

32. 32
Figura 23: Muestras recolectadas, Fuente: Elaboración propia
Figura 24: Manual de las Diatomeas Peruanas. Fuente:Dr. Alejandro M. Fernandez

33. 33
Figura 25:Microscopio usado para la visualización de microorganismo extremófilos, Fuente:
Elaboración propia
Figura 26: Muestra de agua . Fuente:Dr. Alejandro M. Fernandez

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Figura 27: Herramienta de laboratorio. Fuente:Laboratorio de Biotecnología - UNAM
Figura 28: Portaobjetos para microscopio. Fuente:Laboratorio de Biotecnología - UNAM

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Figura 29: Tapa de porta objetivo para microscopios. Fuente: Laboratorio de Biotecnología
- UNAM
Figura 30:Portaobjetivos con muestra. Fuente: Elaboración propia

36. 36
Figura 31: Microorganismos desde un microscopio. Fuente: Elaboración propia
Figura 32: Microorganismos desde un microscopio. Fuente: Elaboración propia

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Figura 24:Microorganismos desde un microscopio.. Fuente: Elaboración propia
Figura 24: Microorganismos desde un microscopio.. Fuente: Elaboración propia