La cámara de recuento es un aparato de vidrio óptico de precisión utilizado para contar células u otras partículas en suspensiones bajo el microscopio. Se utiliza principalmente en análisis de sangre para contar leucocitos, eritrocitos y trombocitos. Está construida con ranuras longitudinales y puentes rectificados donde se graban redes de conteo. Requiere un estricto control de calidad para asegurar la precisión dimensional requerida.
2. ¿Qué es una camara de recuento y donde se
utiliza?
La cámara de conteo es un
aparato de vidrio óptico especial
de precisión. Se utiliza para
contar células u otras partículas
en suspensiones bajo el
microscopio.
Las cámaras de conteo se
utilizan principalmente para el
análisis de sangre (conteo de
leucocitos, eritrocitos,
trombocitos) Pero las cámaras de
conteo sirven también para el
conteo de bacterias , esporas del
moho y para cualquier tipo de
recuento citologico.
3. Principios de construccion
En una placa base rectangular y gruesa de vidrio óptico especial,
del tamaño de un porta-objetos, en el tercio medio se hallan
cuatro ranuras longitudinales, que transcurren en paralelo con
respecto a los laterales cortos.
Las dos superficies laterales más grandes están sin trabajar y
sirven para la rotulación. El puente central y los dos puentes
exteriores están rectificados planos y pulidos. La superficie del
puente central es más profunda que los dos puentes exteriores.
En el puente central (fondo de la cámara) están grabadas las
redes de conteo.
4.
5. FABRICACION Y EXPLICACIONES DE LA
CALIDAD
Las cámaras de conteo son aparatos de precisión. Se utilizan
principalmente en laboratorios médicos. El puente interior (fondo
de la cámara) y los dos exteriores se rectifican y pulen. Gracias
a este mecanizado se consiguen superficies especialmente planas
y el puente interior (fondo de la cámara) enfrente de los puentes
exteriores se rebaja exactamente en la profundidad de la
cámara deseada Después de estas operaciones de trabajo, en la
máquina divisora se graba con un diamante la red de conteo
correspondiente (sistema). Finalmente se efectúa la fase de
impresión y secado al horno. Todas las cámaras de conteo se
someten a un riguroso control final.
6. Exigencias en cuanto al control de calidad
Las desviaciones de límites
• Para la profundidad de la cámara en la zona de una red de conteo + 2 % del valor nominal
• Para las distancias inferiores a 0,4 mm entre cualquieras líneas + 2 µm
• Para las distancias superiores a 0,4 mm entre cualquieras líneas + 0,5 % del valor nominal
• Para los ángulos de la distribución de red + 1 grado
• El ancho de las marcas no podrá ser superior a 5 µm.
La tolerancia de planeidad,
• Para el fondo de la cámara en la zona de una red de conteo 2 µm
• Para las superficies de apoyo en la zona de una red de conteo 2 µm
• Para las láminas cubreobjetos 3µm
7. alimentacion de la camara
neubauer
Quitar del sacudidor la pipeta bien
mezclada y rechazar las primeras gotas.
Limpiar, secando, desde el exterior la
pipeta y luego mantenerla inclinada
hasta que se haya formado una pequeña
gota en la punta de la misma.
Esta gota se sitúa en el punto entre el
cubreobjeto y la cámara de conteo.
Por capilaridad se llena la hendedura
entre el cubreobjeto y el fondo de la
cámara. Antes de que la solución de
sangre pueda hincharse en los bordes de
la parte de la cámara, deberá haberse
retirado de nuevo ya hacia un lado la
punta de la pipeta. Si son visibles las
burbujas de aire o si el líquido se hincha
sobre los bordes en las ranuras, deberá
limpiarse la cámara y alimentarse de
nuevo.
8. Pipetas de mesclado de sangre
utilizadas
• Pipeta de leucocitos
(perla blanca)
• Pipeta de eritrocitos
(perla roja)
9. Dejar reposar la camara por 3 minutos , para que las celulas se
asienten
Colocar la camara en la
platina del microscopio. Con
el objetivo de 10x enfocar el
area cuadriculada de la
camara y enseguida cambiar
al objetivo 40x para contar
las celulas
10. Técnica de conteo
Secuenta todas las celdas dentro de una zona de medicion
definida: ejemplo
Recuento de leucocitos en una area de 4 mm² utilizando los
cuadros enumerados 1,3,7,9; se debe incluir en el recuento los
leucocitos que se observan sobre las lineas de cada cuadrado
revisado.
11. Calculo de numero de leucocitos en un mm3
de sangre:
1.- usar la siguiente formula
Leucocitos /mm3= leucocitos contados x10x20
4
Leucocitos /mm3=leucocitos contados x50
2.-notificar el resultado como el numero de leucocitos que hay en
1 mm3 de sangre sin diluir
Ejemplo; en los cuatro cuadros se conto 188 celulas.
leucocitos por mm3= 188x50
Resultado que se notifica :9400 leucocitos /mm3de sangre
12. Resultado de los globulos rojos:
Contar los eritrocitos
en un area de 0.2mm2
utilizando los
cuadrantes A,B,C,D y
E , se debe incluir en
el recuento las celulas
que se observan
sobre las lineas de
cada cuadro revisado
13. Limpieza de las cámaras de
recuento
Inmediatamente después del conteo
realizado, se quita el cubreobjeto y la
cámara de conteo se limpia con agua o -
en caso de necesidad - con una solución
limpiadora suave.
A continuación, la cámara se seca con un
paño blando o se lava con acetona.