Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar es un medio de cultivo utilizado para detectar y contar enterobacterias totales en alimentos. Contiene nutrientes como peptona y extracto de levadura para el crecimiento bacteriano, así como sales biliares y cristal violeta que inhiben la flora Gram positiva. Las enterobacterias fermentan la glucosa presente y acidifican el medio, tornándolo de color rojo púrpura.
1. Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar.
Medio de cultivo utilizado para la detección y el recuento de enterobacterias totales, a partir de alimentos.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento
bacteriano,las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora acompañante Gram positiva, la glucosa es el
hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH.
Todas las enterobacterias fermentan la glucosa, esto produce la acidificación del medio y el viraje del indicador de pH al
color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo púrpura, de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas,
generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada.
Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones
Peptona de carne 7.0
Extracto de levadura 3.0
Cloruro de sodio 5.0
Suspender 41,5 g del polvo por litro de agua
Glucosa 10.0
destilada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar a
Mezcla de sales biliares 1.5
ebullición hasta disolución total. NO AUTOCLAVAR.
Rojo neutro 0.03
Violeta cristal 0.002
Agar 15.0
pH final: 7.3 ± 0.2
Siembra
- Para recuento bacteriano: sembrar en profundidad 1ml de la muestra directa o de la dilución apropiada, agregar
aproximadamente 12-15 ml de medio de cultivo enfriado a 45 ºC, agitar por rotación y dejar solidificar.
Luego, agregar una sobrecapa de medio de cultivo para crear condiciones anaeróbicas de manera que se evite el
crecimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de azúcares y el crecimiento en forma invasiva de
Proteus spp.
- Para propósitos generales: sembrar en superficie, una ansada a partir de los tubos con gas de un medio para coliformes.
Incubación
A 35-37 ºC durante 18-24 horas, en aerobiosis.
Resultados
Microorganismos Crecimiento Producción de pigmento
Escherichia coli ATCC 25922 Bueno Rojo púrpura
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Bueno Rojo púrpura
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibido ---
Características del medio
Medio preparado: púrpura rojo.
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Presentación
x 100g :Código: B02-172-05 x 500g :Código: B02-172-06