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UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS                                            AÑO LECTIVO: 2011 – 2012
                    GUÍA DE LABORATORIO Nº 09                                           DOCENTE(S): Ana Alfaro




1. DATOS INFORMATIVOS:

  ESTUDIANTE:                    ....................................................
  ASIGNATURA:                    BIOLOGÍA
  AÑO DE ESTUDIO:                SEGUNDO BACHILLERATO A – B – C
  DOCENTE:                       Ana Alfaro                                             CALIFICACIÓN /10
  FECHA:                         ....................................................

2. TEMA A TRATAR :

   1. Respiración Celular.

3. OBJETIVO:

   1. Diferenciar entre respiración aeróbica y anaeróbica.

4. INTRODUCCIÓN:

Las células llevan a cabo diversos procesos para mantener su funcionamiento normal,
muchos de los cuales requieren energía. La respiración celular se realiza mediante una serie
de reacciones mediante las cuales la célula degrada moléculas orgánicas y produce energía.
Todas las células vivas llevan a cabo respiración celular par obtener la energía necesaria para
sus funciones. Usualment se usa glucosa como materia prima.




La respiración celular se divide en paso s y sigue distintas sutas en presencia o ausencia de
oxígeno. En presencia de oxígeno sucede respiración aeróbica y en ausencia de oxígeno
sucede respiración anaeróbica. Abos procesos comienzan con la glucólisis.
La glucólisis consiste en una serie de reacciones que ocurren en el citoplasma de la célula y
de la cual se producen dos moléculas de ácido pirúvico.

Respiración celular aeróbica
La respiración celular aeróbica es el conjunto de reacciones en las cuales el ácido pirúvico
producido por la glucólisis se transforma en CO2 y H2O, y en el proceso se producen
moléculas de ATP.

Respiración celular anaeróbica
Ocurre en ausencia de oxígeno. Este mecanismo no es tan eficiente como la respiración
aeróbica, ya que solo produce 2 moléculas de ATP, pero al menos permite obtener alguna
UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS – ÁREA ACADÉMICA : www.atenas.edu.ec                              Pág.   1
energía a partir del piruvato que se produjo en glucólisis. Hay dos tipos de respiración
celular anaeróbica: fermentación láctica y fermentación alcohólica
Fermentación láctica:


La fermentación láctica ocurre en algunas bacterias y gracias a este proceso obtenemos
productos de origen lácteo tales como yogurt, crema agria y quesos. Este proceso sucede
también en el músculo esquelético humano cuando hay deficiencia de oxígeno, como por
ejemplo, durante el ejercicio fuerte y continuo. La acumulación del ácido láctico causa el
dolor característico cuando ejercitamos los músculos excesivamente.

Fermentación alcohólic
Se dan dos reacciones consecutivas




Este tipo de fermentación ocurre en levaduras, ciertos hongos y algunas bacterias,
produciéndose CO2 y alcohol etílico, ambos productos se usan en la producción de pan,
cerveza y vino.

PRIMERA PARTE
En la primera parte de la práctica se estudiará el proceso de fementación alcohólica que
llevan a cabo las levaduras. Estos organismos llevan a cabo respiración aeróbica en presencia
de oxígeno y respiración anaeróbica en ausencia de éste. La levadura que se usará es
Saccharomyces cerevisiae, la misma que se utiliza para la producción de pan, cerveza y vino.
En la fermentación alcohólica se produce dióxido de carbono y alcohol etílico (etanol). El
dióxido de carbono crea la efervescencia en la cerveza y hace que el pan “crezca” dentro del
horno. El etanol que se produce es el alcohol presente en la cerveza y los vinos. Se usarán
varias soluciones de carbohidratos para determinar cuáles pueden metabolizarse mediante
la fermentación.

5. MATERIALES Y REACTIVOS:

       Gradilla para tubos de ensayo
       Cuantro tubos de ensayo medianos
       Cuatro pipetas graduadas de 1 ml
       Cuatro pipets Pasteur desechables
       Sobre de levadura liofilizada
       Azúcar o melasa
       Vaso de 200 ml
       Soluciones de sacarosa, galactosa, maltosa y lactosa.
       Plastilina


6. PROCEDIMIENTO :

a. Prepare un suspensión de levaduras mezclando:
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- Un paquete de levaduras
       - 2 g de sacarosa o melaza
       - 100 ml de agua tibia
b. Rotule cuatro tubos del 1 al 4. Añada y mezcle bien lo siguiente:
   - tubo 1: 2 ml de solución de sacarosa y 2 ml de suspensión de levadura
   - tubo 2: 2 ml de solución de galactosa y 2 ml de suspensión de levadura
   - tubo 3: 2 ml de solución de maltosa y 2 ml de suspensión de levadura
   - tubo 4: 2 ml de solución de lactosa y 2 ml de suspensión de levadura

c. Para cada tubo
      - Llene una pipeta gradadua con la solución del tubo
      - Tape el extremo con el dedo mientras sella el lado opuesto con plastilina
      - Utilizando la pipeta Pasteur, continue llenando la pipeta graduada con la
          solución hasta que se desborde
      - Invierta la pipeta, colocándola en el tubo de ensayo

d. Durante la fermentación, el CO2 subirá y se acumulará en el extremo superior de la
   pipeta. Anote la producción de CO2 en cada pipeta a intervalos de 5 minutos durante
   20 minutos y anótelo en la siguiente tabla:
                        Producción de dióxido de carbono durante la fermentación
   Tiempo              en Tubo 1             Tubo 2            Tubo 3            Tubo 4
   minutos
   5
   10
   15
   20



7. CUESTIONARIO :
   1. ¿cuál fue la producción final de dióxido de carbono (ml/20 min) para cada tubo?
   2. ¿qué tipo de fermentación ocurrió?
   3. Puede la levadura usar diferente carbohidratos?
   4. Qué sucedería si no se sella el extremo superior de la pipeta?




SEGUNDA PARTE:
En la siguiente parte se comparará el proceso de respiración celular en varios organismos que viven
en agua dulce. El dióxido de carbono que producen estos organismo durante la respiración celular
se convierte en un ácido (ácido carbónico), cuya concentración se medirá por medio de una
titulación usando un indicador de pH (fenolftaleína). Con este indicador se observará el punto de
cambio en pH, donse se obtiene el equilibrio entre pH ácido y básico. Este cambio en pH sucede al
añadirle una solución básica de NaOh a la muestra ácida y se observa por un cambio en color, de
esta forma se podrá calcular la producción de CO2 para cada organismo. Se estudiará una planta
acuática para determinar si lleva a cabo respiración celular en la oscuridad y en presencia de luz.

5.b. MATERIALES Y REACTIVOS

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Cinco vasos de precipitación de 150 ml
        Cinco vasos de precipitación de 100 ml
        Papel de aluminio
        Fenolftaleína
        Solución de NaOH 0.25 M (para diluir 1:100)
        Bureta para titular
        Pipetas graduadas de 5 y 10 ml
        Peces
        Caracoles
        Elodea fresca
        Lámpara

6.b PROCEDIMIENTO :

   1. Determine el volumen que se añadió al producirse ácido carbónico en el agua para cada
      organismo a utilizarse ( pez, caracol, elodea) y anote la información en la tabla
      Para determinar el volumen siga estos pasos:
      - Añada el organismo a un vaso pequeño con 50 ml de agua
      - Haga una marca donde queda el menisco
      - Remueva el organismo
      - Con una pipeta añada agua hasta llegar a la marca
      - La diferencia de lectura en la pipeta indicará el volumen del organismo
      - Repita para cada organismo

   2. Rotule cinco vasos (150 ml) del 1 al 5 y añádale a cada uno:
      1: 100 ml de agua + 1 pez
      2: 25 ml de agua + un caracol grande (o dos caracoles pequeños)
      3: 100 ml de agua + 5 cm de elodea fresca
      4: 100 ml de agua + 5 cm de elodea fresca
      5: 100 ml de agua
      Tome en cuenta que el agua que se debe colocar en los vasos debe ser agua previamente
      reposada para que haya perdido el cloro.

   3. Tape la boca de los vasos con papel alumnino, excepto el vaso 4 que se cubrirá por
       completo para mantener la Elodea en oscuridad
   4. Coloque el vaso 3 cerca de la luz
   5. Después de 30 minutos, remueva los organismos
   6. Transfiera 25 ml de la solución del vaso 1 a un vaso pequeño
   7. Añada cuatro gotas de fenolftaleína y mezcle.
   8. Llene la bureta de titulación con la solución de 0.0025 M de NaOH
   9. Mueva el vaso en círculos y añada gotas de la solución de NaOH hasta obtener un color
       rosado persistente
   10. Anote en la tabla que se muestra a continuación la cantidad de NaOH que utilizó para la
       titulación
   11. Repita el proceso con los demás vasos
   12. Calcule la producción de dióxido de carbono para cada vaso mediante esta ecuación:




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*se obtiene al titular el agua del vaso 5

   13. Coloque los resultados en la siguiente tabla:
       Respiración celular aeróbica en plantas y animales
       Vaso           de Organismo            NaOH                       Volumen     del Cantidad          de
       precipitación                          (ml)                       organismo       CO2
                                                                         (ml)            (ml)
         1                      Pez
         2                      Caracol
         3                      Elodea (en luz)
         4                      Elodea      (en
                                oscuridad)
         5                      Agua (control)



8. CUESTIONARIO :
   a.    Qué organismo tiene el metabolismo más alto? Por qué?
   b.    Qué organismo tiene el metabolismo más bajo? Por qué?
   c.    Por qué la planta lleva a cabo fotosíntesis y también respiración celular?
   d.    Compare los resultados de Elodea en la oscuridad y en la luz. Cuál tiene una mayor tasa de
         respiración celular? Por qué?




9. BIBLIOGRAFÍA :

            Audesirk, T. Audesirk, G. Byers, B. (2003). La vida en la Tierra. Sexta edición. Pearson
             Education.
            Freire, H. investigación en la Biología. Segunda edición. Editorial Fray Jodoco Ricke.
             Quito-Ecuador.
            Nelson, G. Latina, A. conceptos fundamentales de Biología. Manual de laboratorio.
             Editorial Limusa




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  • 1. UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS AÑO LECTIVO: 2011 – 2012 GUÍA DE LABORATORIO Nº 09 DOCENTE(S): Ana Alfaro 1. DATOS INFORMATIVOS: ESTUDIANTE: .................................................... ASIGNATURA: BIOLOGÍA AÑO DE ESTUDIO: SEGUNDO BACHILLERATO A – B – C DOCENTE: Ana Alfaro CALIFICACIÓN /10 FECHA: .................................................... 2. TEMA A TRATAR : 1. Respiración Celular. 3. OBJETIVO: 1. Diferenciar entre respiración aeróbica y anaeróbica. 4. INTRODUCCIÓN: Las células llevan a cabo diversos procesos para mantener su funcionamiento normal, muchos de los cuales requieren energía. La respiración celular se realiza mediante una serie de reacciones mediante las cuales la célula degrada moléculas orgánicas y produce energía. Todas las células vivas llevan a cabo respiración celular par obtener la energía necesaria para sus funciones. Usualment se usa glucosa como materia prima. La respiración celular se divide en paso s y sigue distintas sutas en presencia o ausencia de oxígeno. En presencia de oxígeno sucede respiración aeróbica y en ausencia de oxígeno sucede respiración anaeróbica. Abos procesos comienzan con la glucólisis. La glucólisis consiste en una serie de reacciones que ocurren en el citoplasma de la célula y de la cual se producen dos moléculas de ácido pirúvico. Respiración celular aeróbica La respiración celular aeróbica es el conjunto de reacciones en las cuales el ácido pirúvico producido por la glucólisis se transforma en CO2 y H2O, y en el proceso se producen moléculas de ATP. Respiración celular anaeróbica Ocurre en ausencia de oxígeno. Este mecanismo no es tan eficiente como la respiración aeróbica, ya que solo produce 2 moléculas de ATP, pero al menos permite obtener alguna UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS – ÁREA ACADÉMICA : www.atenas.edu.ec Pág. 1
  • 2. energía a partir del piruvato que se produjo en glucólisis. Hay dos tipos de respiración celular anaeróbica: fermentación láctica y fermentación alcohólica Fermentación láctica: La fermentación láctica ocurre en algunas bacterias y gracias a este proceso obtenemos productos de origen lácteo tales como yogurt, crema agria y quesos. Este proceso sucede también en el músculo esquelético humano cuando hay deficiencia de oxígeno, como por ejemplo, durante el ejercicio fuerte y continuo. La acumulación del ácido láctico causa el dolor característico cuando ejercitamos los músculos excesivamente. Fermentación alcohólic Se dan dos reacciones consecutivas Este tipo de fermentación ocurre en levaduras, ciertos hongos y algunas bacterias, produciéndose CO2 y alcohol etílico, ambos productos se usan en la producción de pan, cerveza y vino. PRIMERA PARTE En la primera parte de la práctica se estudiará el proceso de fementación alcohólica que llevan a cabo las levaduras. Estos organismos llevan a cabo respiración aeróbica en presencia de oxígeno y respiración anaeróbica en ausencia de éste. La levadura que se usará es Saccharomyces cerevisiae, la misma que se utiliza para la producción de pan, cerveza y vino. En la fermentación alcohólica se produce dióxido de carbono y alcohol etílico (etanol). El dióxido de carbono crea la efervescencia en la cerveza y hace que el pan “crezca” dentro del horno. El etanol que se produce es el alcohol presente en la cerveza y los vinos. Se usarán varias soluciones de carbohidratos para determinar cuáles pueden metabolizarse mediante la fermentación. 5. MATERIALES Y REACTIVOS:  Gradilla para tubos de ensayo  Cuantro tubos de ensayo medianos  Cuatro pipetas graduadas de 1 ml  Cuatro pipets Pasteur desechables  Sobre de levadura liofilizada  Azúcar o melasa  Vaso de 200 ml  Soluciones de sacarosa, galactosa, maltosa y lactosa.  Plastilina 6. PROCEDIMIENTO : a. Prepare un suspensión de levaduras mezclando: UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS – ÁREA ACADÉMICA : www.atenas.edu.ec Pág. 2
  • 3. - Un paquete de levaduras - 2 g de sacarosa o melaza - 100 ml de agua tibia b. Rotule cuatro tubos del 1 al 4. Añada y mezcle bien lo siguiente: - tubo 1: 2 ml de solución de sacarosa y 2 ml de suspensión de levadura - tubo 2: 2 ml de solución de galactosa y 2 ml de suspensión de levadura - tubo 3: 2 ml de solución de maltosa y 2 ml de suspensión de levadura - tubo 4: 2 ml de solución de lactosa y 2 ml de suspensión de levadura c. Para cada tubo - Llene una pipeta gradadua con la solución del tubo - Tape el extremo con el dedo mientras sella el lado opuesto con plastilina - Utilizando la pipeta Pasteur, continue llenando la pipeta graduada con la solución hasta que se desborde - Invierta la pipeta, colocándola en el tubo de ensayo d. Durante la fermentación, el CO2 subirá y se acumulará en el extremo superior de la pipeta. Anote la producción de CO2 en cada pipeta a intervalos de 5 minutos durante 20 minutos y anótelo en la siguiente tabla: Producción de dióxido de carbono durante la fermentación Tiempo en Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 minutos 5 10 15 20 7. CUESTIONARIO : 1. ¿cuál fue la producción final de dióxido de carbono (ml/20 min) para cada tubo? 2. ¿qué tipo de fermentación ocurrió? 3. Puede la levadura usar diferente carbohidratos? 4. Qué sucedería si no se sella el extremo superior de la pipeta? SEGUNDA PARTE: En la siguiente parte se comparará el proceso de respiración celular en varios organismos que viven en agua dulce. El dióxido de carbono que producen estos organismo durante la respiración celular se convierte en un ácido (ácido carbónico), cuya concentración se medirá por medio de una titulación usando un indicador de pH (fenolftaleína). Con este indicador se observará el punto de cambio en pH, donse se obtiene el equilibrio entre pH ácido y básico. Este cambio en pH sucede al añadirle una solución básica de NaOh a la muestra ácida y se observa por un cambio en color, de esta forma se podrá calcular la producción de CO2 para cada organismo. Se estudiará una planta acuática para determinar si lleva a cabo respiración celular en la oscuridad y en presencia de luz. 5.b. MATERIALES Y REACTIVOS UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS – ÁREA ACADÉMICA : www.atenas.edu.ec Pág. 3
  • 4. Cinco vasos de precipitación de 150 ml Cinco vasos de precipitación de 100 ml Papel de aluminio Fenolftaleína Solución de NaOH 0.25 M (para diluir 1:100) Bureta para titular Pipetas graduadas de 5 y 10 ml Peces Caracoles Elodea fresca Lámpara 6.b PROCEDIMIENTO : 1. Determine el volumen que se añadió al producirse ácido carbónico en el agua para cada organismo a utilizarse ( pez, caracol, elodea) y anote la información en la tabla Para determinar el volumen siga estos pasos: - Añada el organismo a un vaso pequeño con 50 ml de agua - Haga una marca donde queda el menisco - Remueva el organismo - Con una pipeta añada agua hasta llegar a la marca - La diferencia de lectura en la pipeta indicará el volumen del organismo - Repita para cada organismo 2. Rotule cinco vasos (150 ml) del 1 al 5 y añádale a cada uno: 1: 100 ml de agua + 1 pez 2: 25 ml de agua + un caracol grande (o dos caracoles pequeños) 3: 100 ml de agua + 5 cm de elodea fresca 4: 100 ml de agua + 5 cm de elodea fresca 5: 100 ml de agua Tome en cuenta que el agua que se debe colocar en los vasos debe ser agua previamente reposada para que haya perdido el cloro. 3. Tape la boca de los vasos con papel alumnino, excepto el vaso 4 que se cubrirá por completo para mantener la Elodea en oscuridad 4. Coloque el vaso 3 cerca de la luz 5. Después de 30 minutos, remueva los organismos 6. Transfiera 25 ml de la solución del vaso 1 a un vaso pequeño 7. Añada cuatro gotas de fenolftaleína y mezcle. 8. Llene la bureta de titulación con la solución de 0.0025 M de NaOH 9. Mueva el vaso en círculos y añada gotas de la solución de NaOH hasta obtener un color rosado persistente 10. Anote en la tabla que se muestra a continuación la cantidad de NaOH que utilizó para la titulación 11. Repita el proceso con los demás vasos 12. Calcule la producción de dióxido de carbono para cada vaso mediante esta ecuación: UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS – ÁREA ACADÉMICA : www.atenas.edu.ec Pág. 4
  • 5. *se obtiene al titular el agua del vaso 5 13. Coloque los resultados en la siguiente tabla: Respiración celular aeróbica en plantas y animales Vaso de Organismo NaOH Volumen del Cantidad de precipitación (ml) organismo CO2 (ml) (ml) 1 Pez 2 Caracol 3 Elodea (en luz) 4 Elodea (en oscuridad) 5 Agua (control) 8. CUESTIONARIO : a. Qué organismo tiene el metabolismo más alto? Por qué? b. Qué organismo tiene el metabolismo más bajo? Por qué? c. Por qué la planta lleva a cabo fotosíntesis y también respiración celular? d. Compare los resultados de Elodea en la oscuridad y en la luz. Cuál tiene una mayor tasa de respiración celular? Por qué? 9. BIBLIOGRAFÍA :  Audesirk, T. Audesirk, G. Byers, B. (2003). La vida en la Tierra. Sexta edición. Pearson Education.  Freire, H. investigación en la Biología. Segunda edición. Editorial Fray Jodoco Ricke. Quito-Ecuador.  Nelson, G. Latina, A. conceptos fundamentales de Biología. Manual de laboratorio. Editorial Limusa UNIDAD EDUCATIVA BILINGÜE ATENAS – ÁREA ACADÉMICA : www.atenas.edu.ec Pág. 5