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Pruebas bioquimas para
enterobacterias.
Lic. Benjamín Castillo
Características de las enterobacterias
 Crecen en agar MacConkey
 Bacilos Gram negativas
 Desdoblan los nitratos a nitritos
 Aerobios facultativos
 Oxidasa (-) Catalasa (+)
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Bioquímica
LIA UREA
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• Color: rojo ladrillo
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• Sustratos principales: lactosa, sacarosa y
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• Sustratos secundarios: tiosulfato sódico,
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• Se siembra por picadura profunda con aguja y
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TSI (Triple Sugar Iron)
TSI (Triple Sugar Iron)
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1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa +
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Ej.:
Escherichia
coli
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2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +;
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Ej.: Proteus
mirabilis
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Ej.: Shigella
flexneri
TSI (Triple Sugar Iron)
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Pseudomonas
* Este resultado no es de una
enterobacteria
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LIA (Lysine Iron Agar)
• Color: lila
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: lisina y glucosa
• Sustratos secundarios: peptona, tiosulfato de
sodio, extracto de levaduras.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y
luego por estrías en el pico
LIA (Lysine Iron Agar)
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1.- Lisina descarboxilasa +
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medio)
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Pseudomonas
* Este resultado no es de una
enterobacteria
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• Indicador: azul de bromotimol
• Sustrato principal: citrato de sodio
• Sustratos secundarios: fosfato
dipotásico, cloruro de sodio, sulfato de
magnesio y fosfato monoamónico.
• Se siembra por picadura profunda con
aguja y luego por estrías en el pico.
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Citrato de Simmons
Este medio nos permite comprobar la capacidad de la
bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de
carbono.
La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del
medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a
azul prusia.
Citrato de Simmons
1.- Citrato positivo:
La bacteria consume el citrato
como fuente exclusiva de carbono
Cit- Na+
Cit+ Na+
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alcaliniza el
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2.- Citrato negativo
La bacteria no consume el
citrato como fuente de carbono.
Ej.: Escherichia coli
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En este medio se observa la capacidad de la bacteria de
degradar la úrea por medio de la enzima ureasa formando
amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio por lo
cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza.
• Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia
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Enterobacter.
• Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
Urea
Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganiiEj.: Klebsiella pneumoniae
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
• Color: lila
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: ornitina y glucosa.
• Sustratos secundarios: peptona, triptona
y extractos.
• Se siembra por picadura profunda
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
Este medio se usa para la identificación de enterobacterias
en base a su movilidad, producción de indol y actividad de ornitina
descarboxilasa.
MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
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MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
I: negativo
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MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
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Pruebas bioquimicas en Enterobacterias

  • 2. Características de las enterobacterias  Crecen en agar MacConkey  Bacilos Gram negativas  Desdoblan los nitratos a nitritos  Aerobios facultativos  Oxidasa (-) Catalasa (+)  Fermentan glucosa
  • 4. TSI (Triple Sugar Iron) • Color: rojo ladrillo • Inhibidores: no tiene • Indicador: rojo de fenol • Sustratos principales: lactosa, sacarosa y glucosa (la proporción en el medio de lactosa y sacarosa es de 10: 1 con la glucosa) • Sustratos secundarios: tiosulfato sódico, peptona, citrato férrico amoniacal y extractos. • Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembra por estrías en el pico
  • 7. TSI (Triple Sugar Iron) 1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa + A/A +;- Ej.: Escherichia coli A/A -;-
  • 8. TSI (Triple Sugar Iron) A/A ++, ++ Ej.: Citrobacter freundii
  • 9. TSI (Triple Sugar Iron) 2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +; lactosa y sacarosa -) K/A -, ++++ Ej.: Proteus mirabilis K/A -;- Ej.: Shigella flexneri
  • 10. TSI (Triple Sugar Iron) N/N -;- Pseudomonas * Este resultado no es de una enterobacteria 3.- Bacilos no fermentadores
  • 11. LIA (Lysine Iron Agar) • Color: lila • Inhibidores: no tiene • Indicador: púrpura de bromocresol • Sustratos principales: lisina y glucosa • Sustratos secundarios: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levaduras. • Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico
  • 14. LIA (Lysine Iron Agar) 1.- Lisina descarboxilasa + Lisina cadaverina (alcaliniza el medio) lisina descarboxilasa Ej.: Escherichia coli
  • 15. LIA (Lysine Iron Agar) 2.- Lisina descarboxilasa +, H2S + Ej.: Salmonella
  • 16. LIA (Lysine Iron Agar) 3.- Lisina descarboxilasa - Ej.: Shigella
  • 17. LIA (Lysine Iron Agar) 4.- Lisina deaminasa + Lisina alfa cetácido Lisina deaminasa Ej.: Proteus mirabilis
  • 18. LIA (Lysine Iron Agar) N/N -;- Pseudomonas * Este resultado no es de una enterobacteria
  • 19.
  • 20. Citrato de Simmons • Color: verde • Inhibidor: no tiene • Indicador: azul de bromotimol • Sustrato principal: citrato de sodio • Sustratos secundarios: fosfato dipotásico, cloruro de sodio, sulfato de magnesio y fosfato monoamónico. • Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrías en el pico.
  • 22. Citrato de Simmons Este medio nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de carbono. La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a azul prusia.
  • 23. Citrato de Simmons 1.- Citrato positivo: La bacteria consume el citrato como fuente exclusiva de carbono Cit- Na+ Cit+ Na+ OH – alcaliniza el medio Ej.: Klebsiella pneumoniae citritasa
  • 24. Citrato de Simmons 2.- Citrato negativo La bacteria no consume el citrato como fuente de carbono. Ej.: Escherichia coli
  • 25. Úrea En este medio se observa la capacidad de la bacteria de degradar la úrea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio por lo cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza. • Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia • Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y Enterobacter. • Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella
  • 26. Urea Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganiiEj.: Klebsiella pneumoniae
  • 27. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) • Color: lila • Inhibidor: no tiene • Indicador: púrpura de bromocresol • Sustratos principales: ornitina y glucosa. • Sustratos secundarios: peptona, triptona y extractos. • Se siembra por picadura profunda
  • 28. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) Este medio se usa para la identificación de enterobacterias en base a su movilidad, producción de indol y actividad de ornitina descarboxilasa.
  • 29. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) M: negativa I: positivo O: negativo Ej.: Klebsiella oxytoca
  • 30. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) M: positiva I: negativo O: positiva Ej: Enterobacter aerogenes
  • 31. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina) M: positiva I: positivo O: positivo Ej.: Escherichia coli
  • 32.
  • 33.