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VIIIVIII
Biología. 2º Bachillerato. IES SANTA CLARA.
 BelénRuiz
 Departamento Biología- Geología.
 https://biologiageologiaiessantaclarabelenruiz.wordpress.com/2o-bachillerato/2o-biologiaI
 IES SantaClara
TEMA 8. GENÉTICA MOLECULAR
NATURALEZA DEL MATERIAL
GENÉTICO
GENERALIDADES (ADN)
Requisitos: (4), El material genético (moléculas con
capacidad de almacenar Información) debe presentar las
siguientes propiedades:
 Estable
 Replicable
 Mutable Susceptible de experimentar cambios o
variaciones, que permitiese la aparición de variantes de la
información básica.
 Transmisible (a la generación siguiente)
¿Qué moléculas pueden cumplir estos requisitos, las
Proteínas o el ADN?
El ADN se conocía desde 1869 y cuando se descubrió que los cromosomas se dividían y
transmitían durante la división celular se pensó en esta molécula como la portadora de la
información genética.
Esta cuestión fue resuelta por los científicos:
(*) Experimento de A. Hersey y M. Chase
Frederick Griffith en 1928 demostró la transferencia de material genético
entre células y cómo el material genético de una célula podía modificar la
función de otra.
En 1944, Oswald T. Avery, Maclyn Mccarty y Colin MacLeod observaron
que la capacidad de transformarse las cepas bacterianas desaparecía al
agregar enzimas destructoras del ADN, y dedujeron que el factor
transformante era la molécula de ADN.
En 1952 Martha Chase y Alfred
Hersey demostraron, mediante
la replicación del bacteriófago
T2, que el material genético
era el ADN y no las proteínas.
Al año siguiente, James
Watson y Francis Crick
propusieron el modelo de
doble hélice para explicar la
estructura del ADN.
ELEL EXPERIMENTOEXPERIMENTO DEDE HERSHEYHERSHEY YY CHASECHASE
La información genética está contenidaLa información genética está contenida
en el ADN , no en las proteínasen el ADN , no en las proteínas
Los fagos liberadosLos fagos liberados
tras la lisis detras la lisis de
nuevas bacteriasnuevas bacterias NONO
aparecen marcadosaparecen marcados
Algunos fagosAlgunos fagos
liberados tras la lisisliberados tras la lisis
dede
nuevas bacteriasnuevas bacterias SISI
aparecen marcadosaparecen marcados
El material genético en procariotas y
eucariotas
Procariotas Eucariotas
Todo el ADN codifica, y cada gen
codificador se compone de una
secuencia continua de nucleótidos.
Solo codifica el 10% o menos de todo
el ADN, el resto tiene funciones poco
conocidas.
ADN muy poco repetitivo ADN muy repetitivo, posiblemente
relacionado con la estabilidad de la
estructura de los cromosomas
Las secuencias nucleotídicas
codificantes son continuas (solo
poseen exones)
Las secuencias codificantes (exones)
se alternan con secuencias no
codificantes (intrones).
Cuanto más compleja y reciente es
una especie, más abundantes y más
largos son sus intrones. Parece una
ventaja evolutiva al favorecer la
recombinación.
LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN:
(DURANTE EL PERIODO S)
 MODELOS
 Replicación SEMICONSERVATIVA
 Otros modelos rechazados:
 La replicación o autoduplicación consiste en la
generación de una copia idéntica del ADN,
previa a la división celular, para que la
información genética se transmita con fidelidad
de padres a hijos.
 Tipos:
 Conservativa: se mantiene la doble cadena
original y se sintetiza una copia completamente
nueva.
 Semiconservativa: Cada una de las hebras de la
doble hélice sirve como molde para la síntesis de
la otra hebra. Cada célula hija portará una hebra
de la célula madre y una hebra nueva. Es el
modelo correcto, propuesto por Watson y Crick .
 Dispersiva: en cada nueva doble cadena de ADN
existen fragmentos de la cadena original y
fragmentos nuevos.
Watson y Crick 1953 artículo en Nature
https://es.slideshare.net/gustavotoledo/replicacin-dna2012ok?from_action=save
Doble hélice: estructura del DNA
“No escapa a nuestro conocimiento que el apareamiento específico
que hemos postulado sugiere inmediatamente un posible mecanismo
de copiado del material genético” Watson & Crick
Direccionalidad del DNA
 Necesitas
enumerar los
Carbonos!
 ¿Qué importa
esto?
OH
O
4′
5′ CH2
3′ 2′
1′
PO4
Base N
ribosa
nucleótido
¡Esto será
importante!!
El eje o esqueleto del DNA
O
3′
PO4
base
2
O
base
–O
1′
2′
1′
2′
3′
OH
C
3′
O
P O
O
5′
CH2
4′
4′
5′ CH
5′
 Uniendo el eje del DNA
 Se refiere a los extremos 3′ y 5′ del
DNA
 El último Carbono de los
extremos.
Suena trivial,
pero…
¡esto es importante!
Los nucleótidos en el esqueleto
del DNA están unidos por
enlaces entre el fosfato de un
nucleótido y la pentosa
siguiente entre los carbonos 3′
y 5′.
La molécula de DNA tiene
“dirección”
Hebras complementarias
corren en dirección opuesta 3′
5′
5′
3′
Hebras Antiparalelas
Enlaces en el DNA
…¿Enlaces fuertes o débiles?
¿Cómo encajan los enlaces en el mecanismo de copiado del DNA?
3′
5′ 3′
5′
Enlace covalente
Fosfodiéster
Puentes de
Hidrógeno
Complementariedad de bases en el DNA
 Purinas
 Adenina (A)
 guanina (G)
 Pirimidinas
 timina (T)
 citosina (C)
 Pareo
 A : T
 2 puentes de H
 C : G
 3 puentes de H
LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN:
MECANISMO
– 1.- Iniciación:
 Enzimas: (Helicasas, Topoisomerasas, Prot. SSB)
– 2.- Síntesis:
 Enzimas: RNA-Polimerasa (Primasa), DNA-Polimerasa
Nucleótidos: dATP, dTTP, dGTP, dCTP (materia prima y
energía)
 Proceso:
– Sínte sis co ntinua: Cebador + copia ADN ⇒ hebra conductora
– Sínte sis disco ntinua : F. De Okazaki ⇒ hebra retardada
– 3.- Finalización:
 Enzimas: (DNA-Polimerasa , DNA-Ligasa )
 Proceso: a) Digestión de cebadores, b) síntesis de ADN,
c) unión de fragmentos
Copiando el DNA
 Replicación del DNA
 El pareo de bases permite que cada
hebra sirva como un Molde para una
nueva hebra
 Cada Hebra tienen ½ de la hebra
molde y ½ DNA nuevo.
http://bcs.whfreeman.com/phelanphys1e/default.asp#543
http://www.johnkyrk.com/DNAreplication.esp.html
a. Inicio de la replicación
 Se inicia en determinadas (secuencias concretas) zonas del ADN con la formación
de la horquilla o burbuja de replicación, que consiste en la apertura de la doble
hebra por rotura de los puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadas.
 Participan varias enzimas:
 Helicasas: separan las hebras de ADN (rompen los puentes de hidrógeno).
 Topoisomerasas I y II (o girasa): desespiralizan las hebras para disminuir
tensiones y evitar rotura de la hebra.
 Proteínas SSB: estabilizan la burbuja, impiden que se cierre y dan tiempo a
que las enzimas ADN-polimerasas sinteticen las nuevas cadenas de ADN.
Proteínas de unión a cadena simple Horquilla de Replicación
 Apertura del DNA
 Enzima Helicasa
 Cataliza el desdoble y apertura de la hélice del DNA
 Estabilizada por Proteínas de unión a cadena
simple(Single strand binding protein)
helicasahelicasa
HELICASA
La replicación de lleva a cabo
según el modelo semiconservativo
Tanto en eucariotas como en
Procariotas
Replicación en
Eucariotas
Replicación en
Procariotas
En eucariotas aparecen
muchos ojos de replicación
(replicones ) simultaneamente
En Procariotas aparece un
solo replicón
 Un equipo grande de enzimas
coordina la replicación
Permítanme
presentarle
s al equipo
b. Formación de las nuevas hebras
 Inmediatamente comienza la síntesis de las hebras
complementarias sobre cada una de las originales. Este proceso lo
realiza la ADN-polimerasa III, que precisa los siguientes requisitos:
 AÑADE NUCLEOTIDOS AL EXTREMO 3´LIBRE. 5’ 3’→ . Une
nucleótidos en sentido 5’3’ , es decir, la nueva hebra crece en
sentido contrario a la hebra molde.
 Necesita una hebra molde de ADN que corre en sentido 3’5’ y
sobre la que se sintetiza la hebra complementaria.
 Utiliza nucleótidos trifosfato, que además proporcionan la energía
necesaria para formar los enlaces correspondientes.
 Precisa un ARN cebador para añadir nucleótidos a un extremo 3’
de una cadena nucleotídica previa. La enzima primasa sintetiza el
ARN cebador.
BIOLOGÍA-
DNA
Polimerasa III
¿De dónde se
obtiene la energía
para realizar los
enlaces?
 Se construye hebra de DNA hija
 Se añaden nuevas bases
complementarias.
 DNA polimerasa III
-BIOLOGÍA
 Necesita un nucleótido
de “inicio” para
unirse a la hebra en
crecimiento en sentido
5′→3′
DNA
Polimerasa III
DNA
Polimerasa III
DNA
Polimerasa III
DNA
Polimerasa III
energía
energía
energía
3′
3′
5′La energía regula
el proceso
5′
ene
rgía
A-BIOLOG
ATPGTPTTPCTP
Energía para la Replicación
ADPAMPGMPTMPCMP
Nucleótido modificado
eEnergí
a
¿De dónde viene la energía para formar los enlaces?
y dejamos
atrás un
nucleótido!
Recuerdas
al ATP!
Venimos con
nuestra propia
energía
Venimos con
nuestra propia
energía
ATP
GTP
TTP
CTP
 La ADN polimerasa III recorre el
ADN molde en sentido 3’5’, y una
de las hebras es recorrida
normalmente, pero la otra hebra
discurre en sentido opuesto 5’3’ y
la enzima no puede hacerlo de
forma directa sino de forma
discontínua (a pequeños saltos),
formando los denominados
fragmentos de Okazaki, que tras la
unión mediante las enzimas ligasas
forman la hebra retardada.
 A continuación la enzima ADN-
polimerasa I elimina los ARN-
cebadores y rellena los huecos del
cebador consiguiendo recuperar
casi todo el ADN.
Límites de la DNA polimerasa III
Sólo puede añadir nucleótidos en un
grupo 3′-OH de una hebra de DNA
existente.
Hebra adelantada o conductora y
retrasada
5′
5′
5′
3′
3′
3′
5′
3′
Hebra adelantada
Hebra retrasada
Fragmentos de Okazaki
ligasa
Okazaki
Hebra conductora
Síntesis continua
Hebra retrasada
Fragmentos de Okazaki
Unidos por ligasa
 Enzima “soldadora de puntos”
DNA polimerasa III
5
′
3′
5′
3′
5′
Horquilla de
Replicación
3′
www.youtube.com/watch?v=teV62zrm2P0
DNA Polimerasa III
Horquilla y burbujas de Replicación
5′
3′
5′
3′
Hebra adelantada
Hebra retrasada
Hebra adelantada
Hebra retrasada
5′
3′
5
∋
5′
3′
3′
5′
5′
3′
Horquilla de replic
creciente5′
3′
Horquilla de replicación creciente
Hebra adelantada
3′
5′
5′
5′
5′
5′
3′
3′
5′
5′
Hebra retrasada
5′ 3′
DNA Polimerasa III
RNA primer
Formado por la primasa
Sirve como cebador (iniciador)
de la secuencia para la DNA
Polimerasa III
Límites de la DNA Polimerasa III
Puede sólo construir sobre el
extremo 3′ de una hebra de DNA
existente.
Inicio de síntesis de DNA : RNA primers
5′
5′
3′
3′
3′
5′
3′
5′
3′ 5′ 3′
Horquilla de replicación
creciente
primasa
RNA 5′
DNA Polimerasa I
remueve secciones del RNA
primer y los reemplaza con
nucleótidos de DNA.
Pero la DNA Polimerasa I
todavía puede sólo construir
sobre el extremo 3′ de una
hebra de DNA existente.
Reemplazo de los RNA primers con DNA
5′
5′
5′
3′
3′
3′
Horquilla de
rep3li′cación
creciente
DNA Polimerasa I
RNA 5′
ligasa
Pérdida de bases en el extremo 5′ en
cada Replicación
Los cromosomas se acortan con cada
Replicación
Limita el Nº de divisiones celulares
DNA Polimerasa III
Todas las DNA Polimerasas
pueden sólo añadir en el
extremo 3′ de una hebra de
DNA existente.
Erosión del cromosoma
5′
5′
3′
3′
3′
5′
Horquilla de repl3ic′
ación
creciente
DNA Polimerasa I
RNA 5′
¡Houston, tenemos
un problema!
BIOLOGÍA-
Secuencias no codificantes en el extremo de
los cromosomas = Capucha protectora
Limita a ~50 divisiones celulares
Telomerasa
 enzima que actúa en los extremos: Telómeros
 Puede añadir bases de DNA en el extremo 5′
 Diferentes niveles de actividad en differentes células
 Alta en células madres y cancerosas -- ¿Por qué?
telomerasa
Telómeros
5′
5′
5′
5′
3′
3′
Horquilla de repl3ic′
ación
creciente
TTAAGGGTTAAGGG 3′
TTAAGGG
Horquilla de replicación creciente
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’ 5’
helicasa
Dirección de Replicación
primasa
DNA
Polimerasa III
DNA
Polimerasa III
DNA
Polimerasa I
ligasa
Fragmentosde
Okazaki
Hebra adelantada
Hebra retardada
SSB
c) Finalización
 Al final de la síntesis de la cadena copia y la que ha
servido como patrón se disponen enrolladas originando
la doble hélice.
 Este proceso a pesar de lo complejo se produce a gran
velocidad, del orden de 45.000 nucleótidos/minuto.
DIFERENCIAS EN EL PROCESO REPLICATIVO ENTRE PROCARIOTAS YDIFERENCIAS EN EL PROCESO REPLICATIVO ENTRE PROCARIOTAS Y
EUCARIOTASEUCARIOTAS
El mecanismo básico es el mismo, las diferencias son las siguientes:
 El ADN eucariota está asociado a histonas, pero el bacteriano no: Así en el
primer caso se deben sintetizar también histonas y en el segundo no.
 El tamaño de los fragmentos de Okazaki es menor en los eucariotas que en
los procariotas.
 Existen 3 tipos de ADN-polimerasa en procariotas y 5 en las eucariotas.
 En las procariotas se forma una sola burbuja de replicación y en las
eucariotas se producen varios cientos en cada cromosoma
simultáneamente, para acelerar el proceso.
 La velocidad de replicación es menor en las eucariotas que en las
procariotas.
LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN:LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN:
CORRECCIÓN DE ERRORESCORRECCIÓN DE ERRORES
 Simultánea a la síntesis: Exonucleasas
 Posterior : (Metilado tardío de adeninas de la hebra nueva. Para detectar errores el
paso imprescindible es detectar la cadena primaria o antigua, que se consigue por
metilación de las adeninas. De manera que la cadena que porta las adeninas metiladas
es la correcta).
 Endonucleasas detectan los errores y cortan la cadena.
 Exonucleasas: eliminan los nucleótidos erróneos.
 ADN-polimerasas tipo I sintetizan el fragmento de ADN eliminado.
 ADN-ligasas unen el nuevo segmento sintetizado a la cadena de ADN.
 Errores: 1 / 107-8
⇒ 1 / 1010
 ( variabilidad ⇒ evolución)
BIOLOGÍA-
DNA Polimerasas
 DNA Polimerasa III
 1000 bases/segundos!
 principal Constructor de DNA
 DNA Polimerasa I
 20 bases/segundos
 edita, repara y remueve primers
DNA Polimerasa III
enzima
Arthur Kornberg
1959
Roger Kornberg
2006 (DPII)
Edición y corrección de DNA
 1000 bases/segundo
=
¡Un lote de errores
“tipográficos”!
 DNA Polimerasa I



 Corrige errores
Repara bases malpareadas
Remueve bases anormales
 repara daños a través de la
toda tu hermosa vida
Reduce la tasa de error de 1
en 10.000 a
1 en 100 millones de bases
¡Rápido y preciso!
 A E. coli le toma <1 hora para copiar los 5
millones de pares de bases de su único
cromosoma
 Se divide para formar 2 células hijas
idénticas.
 Células humanas copian sus 3 mil millones
de bases y se dividen en células hijas en
sólo unas pocas horas
 Extremadamente preciso
 solo ~1 error por 100 millones de
bases~30 errores por ciclo celular.
Expresión de la información
genética
EL DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGÍA
MOLECULAR
“ Un gen una proteína”
ADN ARN
PROTEÍNA
Transcripción Traducción
 Hoy día se sabe que la información genética es la causa de la síntesis de
proteínas, entre ellas las enzimas, responsables de las características
estructurales y funcionales de un organismo.
 En 1948 se enuncia la hipótesis:
un gen → una enzima
 En 1970 Francis Crick enuncia el dogma central de la biología molecular:
El ADN copia una parte de su mensaje sintetizando una molécula de ARN mensajero
(proceso denominado transcripción), la cual constituye la información utilizada por
los ribosomas para la síntesis de una proteína (proceso de traducción).
ADN → ARN → Proteína
 El mensaje se transmite en dos etapas sucesivas, en las que el ARN es el
intermediario imprescindible.
 El flujo de la información genética: Dogma Central
de la Biología Molecular: “Un gen, una proteína”
 Excepciones al dogma
1.- No todos los genes se expresan en proteínas
2.- Retrotranscripción
3.- Algunos ARN no se traducen
4.- En realidad “un gen varias proteínas diferentes.”
5.- Priones
6.- Los ribozimas
Transcripción Traducción
Replicación: ADN ARN cadena polipeptídica
“Un gen, una proteína”¿seguro?
Expresión de la información
genética
Expresión de la información
genéticaMatizaciones de EL DOGMA CENTRAL DE LA
BIOLOGÍA MOLECULAR
ADN ARN
PROTEÍNA
No todos los genes se
expresan , algunos
presentan funciones
reguladoras (operador,
promotor, ADN basura,
intrones?)
Retrotranscripción
Las retrotranscriptasas
catalizan la síntesis de
ADN a partir de ARN
En realidad un gen
puede servir para
codificar varias
proteínas
Algunos ARN no se
traducen,
intervienen en
procesos
reguladores
Los priones pueden
“replicarse”
Algunos ARN, los ribozimas
pueden autorreplicarse
La información fluye del ARN al AND, es la transcripción
inversa o retrotranscripción, fue descubierta en los virus
de ARN (Retrovirus)
LA TRANSCRIPCIÓN DE LA INFORMACIÓN
GENÉTICA (SÍNTESIS DE RNA)
 Consiste en copiar una parte del mensaje genético desde su forma original (ADN) a otra (ARN),
que se pueda utilizar directamente para la síntesis de proteínas.
 En el proceso de transcripción se forma una cadena de ARN cuya secuencia de bases
nitrogenadas es la misma que la de la hebra madre del ADN.
 La responsable de la transcripción es la enzima ARN polimerasa ADN dependiente, que
presenta las siguientes características:
 Une nucleótidos mediante enlace fosfodiéster (nucleotídicos), siempre en sentido 5’→3’.
 Utiliza nucleótidos trifosfato.
 Necesita una molécula de ADN como molde o patrón.
 Se fija a regiones específicas del ADN (genes promotores) para comenzar su acción a partir
de ese punto.
LA TRANSCRIPCIÓN DE LA INFORMACIÓN
GENÉTICA (SÍNTESIS DE RNA)
INICIACIÓN :
–Elementos :
 ADN molde (una hebra):
Región promotora: ej.TATAATG
(Promotor)
 ARN- Polimerasa (no necesita
cebador)
 factores de iniciación: factor
σ (sigma).
ELONGACIÓN: ( 5´ → 3´ ):
“Formación de un fragmento
transitorio de ADN-ARN
espiralizado”
–Elementos :
 ADN molde
 ARN- Polimerasa
 factores de elongación
 nucleótidos trifosfato (ATP,
UTP,GTP,CTP)
TERMINACIÓN:
Elementos :
 ADN molde: Región de
terminación ej. TTATTT (E)
 ARN- Polimerasa
 factores de terminación: factor
ρ (rho)
http://www.youtube.com/watch?v=Jqx4Y0OjWW4
ORGANIZACIÓN DEL GENOMA EN PROCARIOTAS
Y EUCARIOTAS
CARACTERÍSTICAS DEL
MATERIAL GENÉTICO
– Procariotas: 100%
transcribible.
– Eucariotas:
 DNA basura
(FUNCIONES
PARCIALMENTE
DESCONOCIDAS)
 DNA transcribible:
– Genes fragmentados:
Exones e Intrones ⇒
maduración de ARNm
Transcripción en células procariotas
 En procariotas solo existe un tipo de ARN polimerasa, formada por dos subunidades:
α y β.
 La ARN polimerasa se debe unir al factor σ para reconocer y fijarse a la zona
promotora (rica en timina y adenina: TATAATG. Después el factor σ se suelta.
 La ARN polimerasa fijada al ADN produce el desenrollamiento de una vuelta de la
doble hélice, y comienza a sintetizar ARN en sentido 5’→3’.
 La cadena de ARN finaliza al llegar a la señal de terminación (zona rica en guanina
y citosina). El factor ρ reconoce esta zona.
 La velocidad de transcripción es alta: une 30 a 40 nucleótidos por segundo).
 Mediante este proceso se sintetizan tres tipos de ARN: mensajero, ribosómico y
transferente. Este último debe sufrir un proceso de maduración antes de activarse.
 No se corrigen los errores producidos durante la síntesis de ARN ya que son bien
tolerados y nunca se transmiten a la descendencia.
Transcripción en células eucariotas
 La transcripción es más compleja en eucariotas.
– Intervienen factores proteicos ausentes en las procariotas.
– Hay 3 tipos de ARN polimerasas diferentes:
 Tipo I: transcribe ARN ribosómico.
 Tipo II: transcribe ARN mensajero.
 Tipo III: transcribe ARN de transferencia.
 MADURACIÓN DEL RNApremensajero:
 Tras la transcripción es preciso un proceso de maduración antes de que el ARNm sea
funcional (deben ser eliminados los intrones y dejar solamente los exones).
 Para transcribir el ADN es preciso que las histonas hayan desbloqueado la hebra de ADN
y que éste se haya desespiralizado.
 La región promotora tiene una secuencia específica: TATA o CAAT.
 Cuando se han agregado 30 nulcleótidos, se añade al extremo 5’ una caperuza de 7-
metil-guanosina trifosfato (punto de reconocimiento para procesos posteriores).
 Tras la señal de finalización (secuencia TTATTT), sobre el extremo 3’ se añade una
cadena de unos 200 poli-A.
http://www.youtube.com/watch?v=Jqx4Y0OjWW4
ARN Polimerasa
MADURACIÓN DEL ARN
Maduración del ARNm
http://www.youtube.com/watch?v=w8FSDQwumTw&feature=related
 Este proceso afecta sobre todo
al ARN mensajero.
 Proceso en el que se eliminan
los intrones y se unen los
exones entre sí constituyendo
una única cadena.
 En este proceso participan las
ribonucleoproteínas pequeñas
nucleares (RNPpn), también
conocidas con espliceosomas o
tijeras genéticas, capaces de
cortar y volver a unir el ARN.
 El ARNt tras su síntesis debe
plegarse hasta adoptar la forma
funcional. Aspecto
característico de boomerang.
 La síntesis de ARNr es compleja
y se produce en el nucléolo.
LA EXPRESIÓN DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA
Un gen determina una proteína (normalmente un enzima) y esta a su
vez, un carácter
EL CÓDIGO GENÉTICO:la relación entre la secuencia de nucleótidos
(concretamente, de las bases nitrogenadas presentes en ellos) del ARNm y
la secuencia de aminoácidos que constituyen una proteína.
El código genético es la clave que permite la traducción del ADN a su forma
funcional, es decir, las proteínas.
– Código de Tripletes de ARN ( 43
= 64 codones) De los que 61 codones
codifican para aminoácidos y 3 codifican el fin de la traducción (UAA,
UAG y UGA).
– Propiedades:
1.- Triplete de iniciación AUG y tres de terminación UAA, UGA, UAG
2.- Código lineal: el orden de los codones ⇒ orden de aminoácidos
3.- NOespaciamientos, NO solapamientos
4.- Está DEGENERADO: 64 codones para 20 aminoácidos
5.- Es Universal, es el mismo para todas las células de todas las
CÓDIGO GENÉTICO
LA EXPRESIÓN DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA: EL
CÓDIGOGENÉTICO
…..AAATGCGCGCGAATTTCGTGGGTCAGGCTTGAAG…..
…..TTTACGCGCGCTTAAAGCACC CAGTCCGAACTTC…..
Transcripción
(En el núcleo)
.
…..AAAUGCGCGCGAAUUUCGUGGGUCAGGCUUGAAG…..
Traducción
(En el citoplasma: ribosomas)
Met – Arg – Ala – Asn – Phe – Val – Gly – Lys – Gln - Ala
INICIO STOP
TRADUCCIÓN DEL MENSAJE GENÉTICO: (síntesis de
cadenas polipeptídicas)
PROCESO: Localizado en los ribosomas
– ACTIVACIÓN DE AMINOÁCIDOS : Aminoacil ARNt
sintetasa
Ecuación global:
– aa + ATP + ARNt → aa-ARNt + AMP + PPi
– SÍNTESIS DE PROTEÍNAS: (cadenas polipeptídicas)
INICIACIÓN
– Comienza con el codón AUG → Metionina (E) o
formil metionina (P)
– - COMPLEJO DE INICIACIÓN = 1° Subunidad menor
+ 2° ARNm + 3° fMet-ARNt + 4° Subunidad mayor
- GTP y
Factores de iniciación
 En esta fase todo el sistema se prepara para la síntesis, se forma el COMPLEJO DE INICIACIÓN:
– En primer lugar, el ARNm se une por el extremo 5’ a la subunidad menor del ribosoma gracias al
factor proteico IF3.
– A continuación, se produce la fijación del primer aminoacil-RNAt por complementariedad entre
el anticodón del ARNt y el codón de ARNm.
– El primer codón siempre es AUG y el aminoácido que porta es metionina.
– Por último se produce el acoplamiento de la subunidad mayor del ribosoma, para lo que se
precisa el factor proteico IF1 e iones Mg++
.
 El ribosoma tiene dos zonas activas: sitio P o peptidil y sitio A o aminoacil. El A es donde se une el
aminoacil-ARNt y el P es donde se sitúa el aminoácido una vez unido a la cadena peptídica.
 El proceso de iniciación precisa energía, que es aportada por el GTP.
 ELONGACIÓN
– A.- Unión del aa1-ARNt al sitio
A:
 GTP y Factores de
elongación
– B.- Formación del enlace
peptídico:
 Peptidil transferasa (ARNr
con actividad catalítica)
– C.- Translocación al sitio P :
 GTP y Factores de
elongación
– Queda libre el sitio A
– Unión al sitio A de un nuevo
aa2-ARNt y repetición del
proceso ( A, B, C )
 En esta etapa se sintetiza la cadena peptídica por la unión sucesiva de aminoácidos.
 El ribosoma se desplaza a lo largo del ARNm y los ARNt aportan los aminoácidos correspondientes.
 Se pueden diferenciar 3 subetapas:
– Unión de un aminoacil-ARNt al sitio A. Solo se produce si el ARNt es complementario del codón
del ARNm y aquí se consume una molécula de GTP.
– Formación del enlace peptídico. Una vez anclados los dos aminoaciles-ARNt a los sitios P y A, la
enzima peptidiltransferasa (situada en la subunidad mayor) produce el enlace peptídico.
– Translocación del dipéptido al sitio P. Se produce el desplazamiento del ribosoma un codón en
sentido 5’ 3’. Así el segundo aminoacil-ARNt salta al sitio P quedando libre el sitio A para que se→
una un nuevo aminoacil-ARNt.
 TERMINACIÓN
– Termina con las secuencias UAA, UAG o
UGA que no codifican para ningún
aminoácido.
– - Factor de terminación y GTP: Unión a sitio
A del Factor de terminación
 Existen 3 codones de terminación: UAA, UAG y UGA, para los
que no existe ARNt y cuando llega a este punto la síntesis
proteica se detiene.
 Esta fase también precisa energía en forma de GTP.
 Al detenerse la síntesis:
 La cadena peptídica se libera del ribosoma.
 La dos subunidades ribosómicas se separan.
 El ARNm es destruido para que no se hagan copias innecesarias.
 La síntesis se produce a una velocidad de 1400 aminoácidos
por minuto y las cadenas de ARNm suelen ser leídas por más
de un ribosoma simultáneamente.
http://www.youtube.com/watch?v=Ikq9AcBcohA&feature=fvwrel
La Traducción en células eucariotas
Diferencias en eucariotas con relación a procariotas:
 Se produce en RER en vez de citoplasma.
 El ARNm eucariota es más estable.
 El ARNm eucariota es monocistrónico (solo porta
información para un péptido).
 Los ribosomas son diferentes.
 El primer ARNt lleva metionina.
 Los factores proteicos implicados en el proceso son
diferentes.
 El extremo 5’ de los ARNm tiene metilguanosina trifosfato
para ser reconocido.
 El primer ARNt se une antes a la subunidad menor que al
ARNm.
REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GENÉTICA
 GEN :“Secuencia de nucleótidos en la molécula de ADN, que
desempeña una función específica tal como codificar una molécula de
ARN ounacadenapolipeptídica”.
 NECESIDADDEREGULACIÓN DELA EXPRESIÓN GENÉTICA
 Variacio ne s de l m e dio e xtra o intrace lular ⇒ Ne ce sidade s
pro te icas dife re nte s.
 Mo rfo g é ne sis: Dife re nciació n de te jido s, de sarro llo e m brio nario
 Ciclo ce lular: dife re nte s e tapas ⇒ dife re nte s ne ce sidade s
PUNTOS DONDE ES POSIBLE REGULAR LA EXPRESIÓN
GENÉTICA
 Transcripció n (PRINCIPALMENTE)
 Maduració n de ARNm
 Transpo rte de ARNm ,
 Traducció n.
Regulación en procariotas
François Jacob y Jacques Monod en los años 1960 propusieron el modelo OPERÓN
para explicar la regulación de la transcripción. Según este modelo se distinguen 4
tipos de genes:
 Genes estructurales: contienen la información para la síntesis de las enzimas
que intervienen en la ruta metabólica.
 Gen promotor: Está constituido por la secuencia de ADN donde se une la ARN
polimerasa para comenzar la transcripción.
 Gen operador: Es el lugar del ADN donde puede unirse una proteína reguladora e
impedir la transcripción de los genes estructurales. Se sitúa inmediatamente
delante de éstos.
 Gen regulador: sintetiza la proteína reguladora. Puede localizarse enn un lugar
distinto a los otros genes del operón.
Según se trate de una ruta catabólica o anabólica se diferencian dos tipos de
regulación génica: inducible y represible.
Elementos del OPERÓN
Sistema inducible
 Cuando el sustrato sobre el que va actuar la enzima provoca la síntesis del enzima. Al
efecto del sustrato se le denomina inducción positiva. Por ejemplo, en E. coli en ausencia
de galactósido (sustrato) hay de una a diez unidades de galactosidasa (enzima) por 
miligramo de materia seca, mientras que en presencia de galactósido se detectan hasta
10.000 unidades de galactosidasa por miligramo de materia seca. Al compuesto que
desencadena la síntesis del enzima se le denomina Inductor.
 Los sistemas inducibles se corresponden a procesos catabólicos de degradación, por
ejemplo, el operón lactosa, el operón arabinosa, el operón maltosa. Se trata de sistemas
enzimáticos encargados de degradar la lactosa, arabinosa, maltosa, etc.
 Regulaciónenprocariotas:
 Sistemainducible(control+)
Sistema represible
 Sistemas represibles: cuando el producto final de la reacción que cataliza el enzima
impide la síntesis de la misma. Este fenómeno recibe el nombre de inducción negativa. Al
compuesto que impide la síntesis del enzima se le denomina correpresor.
 Los sistemas represibles se corresponden con procesos síntesis o Anabolismo, por ejemplo
el operón triptófano y el operón histina. Se trata de las rutas metabólicas que conducen a
la síntesis de triptófano y síntesis de histidina.
 Regulaciónenprocariotas:
 Sistemarepresible(control-)
Regulación en eucariotas
 La regulación en organismos eucariotas y sobre todo pluricelulares
es mucho más compleja que en procariotas.
 La regulación se puede producir en varios procesos:
 Transcripción.
 Maduración del ARNm transcrito.
 Transporte del ARNm.
 Traducción.
 El mecanismo más habitual se realiza en la transcripción actuando
sobre la ARN polimerasa y sobre procesos específicos:
 Separación de las histonas, para acceder al ADN.
 Existencia de factores activadores intra y extracelulares
(hormonas, fitocromo en las plantas, etc.).
 Regulacióneneucariotas:
 Sistemas complejos (normalmentedecontrol +)
 Estructura de la cromatina y eliminación de histonas
(condensación)
 Factores epigenéticos (metilaciones)
 Porfactores de activación (Hormonas, etc.)
 ADN no codificante (“basura”, intrones, secuencia no
codificante de ADN)
 Hormonas
LAS MUTACIONES
 Concepto: alteraciones “cualitativas” en la
secuencia de bases del ADN
CLASIFICACIÓN:
 GÉNICAS OPUNTUALES
 CROMOSÓMICAS
 GENÓMICAS
LAS MUTACIONES génicas
– GÉNICAS OPUNTUALES: afectan a un GEN (1 o
más bases)
• Causas:
– Errores en la replicación
– Agentes físicos, químicos y biológicos.
• Tipos:
– Sustituciones: Cambios de bases
» púrica x púrica o pirimidínica x pirimidínica :
transiciones ⇒
(T ≡ G, A ≡ C)
» pirimidínica x púrica: transversiones ⇒
(T ≡ C, A ≡ G)
– Deleciones e Inserciones: Pérdida o inserción de bases
(mutaciones graves)
LAS MUTACIONES cromosómicas
CROMOSÓMICAS: Afectan a un
cromosoma (varios genes)
 Nº incorrecto de genes ⇐
Sobrecruzamiento erróneo por
apareamiento desigual en profase I
 Deleciones cromosómicas
 Duplicaciones (importancia
evolutiva)
 Alteraciones en el orden de los
genes
 Inversiones
 Translocaciones
 Transposiciones:
 “transposones” o “genes
saltarines”)
 Translocación recíproca
cc
– Mutaciones CROMOSÓMICAS: Profase I
Mutaciones CROMOSÓMICAS
LAS MUTACIONES genómicas
GENÓMICAS
 Vistas en meiosis
 Aneuploídías
 Poliploidías
 Efectos fenotípicos:
 Aneuploidías
 En autosomas: Normalmente
letales
 En cromosomas sexuales:
efectos graves
 Poliploidías
 Animales: Normalmente letales
 Vegetales: mayor tamaño
TIPOS DE AGENTES MUTÁGENOS
– Físicos: Radiaciones
 Radiacio ne s io nizante s (x, α, β, γ y neutrones)
 Efectos: M. cromosómicas (deleciones y
traslocaciones)
 Radiacio ne s no io nizante s : UV
 Efectos: dímeros de T
– Químicos: Sustancia químicas
 Reacciones químicas: Ej.benzopirenos, acridina,
nitrosaminas, …
 Análogos químicos: Ej. 5-bromouracilo análogo
de la T,…
– Efectos: M. puntuales, principalmente
sustituciones
– Biológicos: virus o transposones
 Virus:(oncogenes) : provirus ⇒ saltos
intercelulares
– Efectos: Principalmente a nivel de regulación
( ej. papiloma humano)
SUSTANCIASMUTAGÉNICAS
 EFECTOFENOTÍPICODE LAS MUTACIONES
 Silenciosas, beneficiosos, perjudiciales.
 MUTACIONES Y EVOLUCIÓN
– Fuentes de variabilidad:
 Mutacio ne s ⇒ nue vo s ale lo s : im po rtancia adaptativa y
e vo lutiva
 “Fe nó m e no s ” se xuale s:
 Meiosis:
» Segregación cromosómica ⇒ reordenación de
alelos
» Recombinación ⇒ reordenación de alelos
 Fecundación ⇒ reordenación de alelos
 Fe n. Parase xuale s: co njug ació n, e tc.
 MUTACIONES Y CANCER (en regulación del ciclo celular)
TEST DE REPASO
TEMA 8 Genética molecular
Comenta brevemente la relación existente entre variedad
alélica y evolución, b) ¿de qué forma se originan nuevas
variantes alélicas a partir de un alelo original?
a) variedad alélica permite selección natural ⇒ evolución
b) mutaciones
a)Describe, por medio de un esquema, el fenómeno de
transcripción genética, indicando su finalidad biológica b) tipos
de moléculas que intervienen en el mismo, indicando además
en qué lugar de la célula se lleva a cabo (indicar para
eucarióticas y procarióticas respectivamente).
a) Esquema + finalidad: (síntesis de ARN)
b) ADN molde, ARN- Polimerasa, factores de iniciación,
elongación y terminación; Ribonucleótidos trifosfato (ATP,
UTP, GTP, CTP).
c) Eucariotas: En el núcleo
Procariotas: En el citosol
a) Define el concepto de mutación. b) ¿En qué consiste una mutación por
sustitución? ¿y por deleción? c) ¿De cuál de los dos tipos de mutación cabría
esperar una alteración fenotípica mayor? Razona la respuesta.
a) Alteraciones “cualitativas” en la secuencia de bases del ADN
b) Sustitución: cambio de base (nucleótido). Deleción: pérdida de base
c) Deleción: la secuencia de tripletas resulta alterada a partir de ese punto⇒
proteína muy diferente, si la sustitución determina codón de terminación,
tb. grave
Define el concepto de código genético. ¿Por qué consideramos que el código es
universal y degenerado?
a) Código de tripletes de ribonucleótidos (ARN) cada uno de los cuales se
corresponde con un determinado aminoácido o con un factor de terminación.
b) Universal: todos los seres vivos, degenerado varios tripletes se
corresponden con un mismo aa, recuerda 43
= 64 para 20 aa
¿Cuál es la razón por la cual la replicación del ADN no tiene lugar de igual
manera en la hebra principal y en la retardada? ¿En qué consiste esta
diferencia?
Las polimerasas sintetizan en dirección 5´---3´ ⇒ la horquilla 3´---5´
(disposición adecuada) ⇒ s. continua. La horquilla 5´---3´ (disposición
contraria) ⇒ fragmentos de Okazaki ⇒ s. discontinua. Todo según el
modelo semiconservativo + necesidad de cebadores.
¿De qué forma asegura la maquinaria replicativa la fidelidad de la copia de
ADN?
Modelo semiconservativo (por complementariedad de bases).
Explicar modelo
Por qué razón es tan importante que la expresión genética esté regulada? Razona
la respuesta.
- Variaciones del medio extra o intracelular ⇒ Necesidades proteicas
diferentes.
- Morfogénesis: Diferenciación de tejidos, desarrollo embrionario
- Ciclo celular: diferentes etapas ⇒ diferentes necesidades
En definitiva, las condiciones ambientales cambiantes determinan distintas
necesidades celulares y en consecuencia la expresión o no de ciertos
genes.
Define el concepto de gen e indica las diferencias más relevantes en la estructura
de un gen eucariótico y otro procariótico. ¿De qué forma se refleja esta diferencia
en el producto de la transcripción? Razona la respuesta. Ayúdate de un dibujo.
a) GEN: “Secuencia de nucleótidos en la
molécula de ADN, que desempeña una
función específica tal como codificar una
molécula de ARN o una cadena
polipeptídica”.
b) Procariotas: continuos, E: fragmentados
(intrones y exones)
c) Eucariotas. Necesidad de maduración de
ARN. Dibujar transcrito 1 ario
extremos,
intrones y exones y 2ario
Desarrolla un texto corto (no más de 10 líneas) en el que se relacionen de
forma coherente y en un contexto biológico los siguientes conceptos:
transcripción, polimerasa, DNA molde, proteína
La expresión genética requiere de varios procesos consecutivos,
fundamentalmente la trascripción de una de las hebras del ADN molde a
partir del reconocimiento de la región promotora, para dar una molécula
de ARN, todo ello catalizado por las ARN polimerasas. En eucariotas
dicho transcrito sufre una serie de procesos de maduración con el fin de
eliminar los intrones de manera que el ARNm maduro pueda ser traducido
en los ribosomas en la proteína correspondiente.
Representa mediante un esquema claro cómo tiene lugar la traducción de un
mRNA (etapa de inicio y etapa de elongación), indicando los elementos
moleculares que intervienen en el mismo.
1º) Dibujo de elementos de complejo de iniciación: subunidades del ribosoma +
Metionil o formilmetionil RNAt + ARM m maduro + GTP + factores de iniciación
2º) Dibujo del proceso de elongación
A.- Unión del aa1-ARNt al sitio A: GTP y Factores de elongación
B.- Formación del enlace peptídico: Peptidil transferasa (ARNr con actividad
catalítica)
C.-Translocación al sitio P: GTP y Factores de elongación
- Queda libre el sitio A
Unión al sitio A de un nuevo aa2-ARNt y repetición del proceso (A, B, C)
INICIACIÓN
ELONGACIÓN
TERMINACIÓN
 Biología. 2ºBachillerato. SANZ ESTEBAN, Miguel. SERRANO BARRERO, Susana.
TORRALBA REDONDO. Begoña. Editorial Oxford.
 Biología. 2ºBachillerato. ALCAMÍ, José. BASTERO, Juan José. FERNÁNDEZ, Benjamín.
GÓMEZ DE SALAZAR, José María. MÉNDEZ, Mª Jesús. SLÖCKERJavier. Editorial SM.
 https://es.slideshare.net/gustavotoledo/replicacin-dna2012ok?from_action=save
 http://www.biologia.edu.ar/bacterias/micro5.htm
 http://centros.edu.xunta.es/iesastelleiras/depart/bioxeo/lgazon/presen/bac2/bio/presf.html
 http://centros.edu.xunta.es/iesastelleiras/depart/bioxeo/lgazon/presen/bac2/bio/pdf/envcel.
pdf
 http://cienciastella.com
 http://departamentobiologiageologiaiesmuriedas.wordpress.com/2o-bachillerato/biologia-
2/
 http://docentes.educacion.navarra.es/~metayosa/bach2/2biometabo2.html
 http://www.educa.madrid.org/web/cc.nsdelasabiduria.madrid/Ejercicios/2b/Biologia/Enzim
as/enzimas.htm
 http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/
 http://www.ehu.es/biomoleculas/an/an41.htm
 http://www.geocities.ws/batxillerat_biologia/glucids.htm
 http://hnncbiol.blogspot.com.es/2008/01/acidos
 http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso2001/accesit_4
 http://temabiomoleculas.blogspot.com.es/
 http://tertuliadeamigos.webcindario.com/biocou04.html
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Genetica molecular2017

  • 1. VIIIVIII Biología. 2º Bachillerato. IES SANTA CLARA.  BelénRuiz  Departamento Biología- Geología.  https://biologiageologiaiessantaclarabelenruiz.wordpress.com/2o-bachillerato/2o-biologiaI  IES SantaClara TEMA 8. GENÉTICA MOLECULAR
  • 2. NATURALEZA DEL MATERIAL GENÉTICO GENERALIDADES (ADN) Requisitos: (4), El material genético (moléculas con capacidad de almacenar Información) debe presentar las siguientes propiedades:  Estable  Replicable  Mutable Susceptible de experimentar cambios o variaciones, que permitiese la aparición de variantes de la información básica.  Transmisible (a la generación siguiente) ¿Qué moléculas pueden cumplir estos requisitos, las Proteínas o el ADN? El ADN se conocía desde 1869 y cuando se descubrió que los cromosomas se dividían y transmitían durante la división celular se pensó en esta molécula como la portadora de la información genética. Esta cuestión fue resuelta por los científicos: (*) Experimento de A. Hersey y M. Chase
  • 3. Frederick Griffith en 1928 demostró la transferencia de material genético entre células y cómo el material genético de una célula podía modificar la función de otra. En 1944, Oswald T. Avery, Maclyn Mccarty y Colin MacLeod observaron que la capacidad de transformarse las cepas bacterianas desaparecía al agregar enzimas destructoras del ADN, y dedujeron que el factor transformante era la molécula de ADN.
  • 4.
  • 5.
  • 6. En 1952 Martha Chase y Alfred Hersey demostraron, mediante la replicación del bacteriófago T2, que el material genético era el ADN y no las proteínas. Al año siguiente, James Watson y Francis Crick propusieron el modelo de doble hélice para explicar la estructura del ADN.
  • 7. ELEL EXPERIMENTOEXPERIMENTO DEDE HERSHEYHERSHEY YY CHASECHASE La información genética está contenidaLa información genética está contenida en el ADN , no en las proteínasen el ADN , no en las proteínas Los fagos liberadosLos fagos liberados tras la lisis detras la lisis de nuevas bacteriasnuevas bacterias NONO aparecen marcadosaparecen marcados Algunos fagosAlgunos fagos liberados tras la lisisliberados tras la lisis dede nuevas bacteriasnuevas bacterias SISI aparecen marcadosaparecen marcados
  • 8. El material genético en procariotas y eucariotas Procariotas Eucariotas Todo el ADN codifica, y cada gen codificador se compone de una secuencia continua de nucleótidos. Solo codifica el 10% o menos de todo el ADN, el resto tiene funciones poco conocidas. ADN muy poco repetitivo ADN muy repetitivo, posiblemente relacionado con la estabilidad de la estructura de los cromosomas Las secuencias nucleotídicas codificantes son continuas (solo poseen exones) Las secuencias codificantes (exones) se alternan con secuencias no codificantes (intrones). Cuanto más compleja y reciente es una especie, más abundantes y más largos son sus intrones. Parece una ventaja evolutiva al favorecer la recombinación.
  • 9. LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN: (DURANTE EL PERIODO S)  MODELOS  Replicación SEMICONSERVATIVA  Otros modelos rechazados:
  • 10.  La replicación o autoduplicación consiste en la generación de una copia idéntica del ADN, previa a la división celular, para que la información genética se transmita con fidelidad de padres a hijos.  Tipos:  Conservativa: se mantiene la doble cadena original y se sintetiza una copia completamente nueva.  Semiconservativa: Cada una de las hebras de la doble hélice sirve como molde para la síntesis de la otra hebra. Cada célula hija portará una hebra de la célula madre y una hebra nueva. Es el modelo correcto, propuesto por Watson y Crick .  Dispersiva: en cada nueva doble cadena de ADN existen fragmentos de la cadena original y fragmentos nuevos.
  • 11.
  • 12.
  • 13.
  • 14. Watson y Crick 1953 artículo en Nature https://es.slideshare.net/gustavotoledo/replicacin-dna2012ok?from_action=save
  • 15. Doble hélice: estructura del DNA “No escapa a nuestro conocimiento que el apareamiento específico que hemos postulado sugiere inmediatamente un posible mecanismo de copiado del material genético” Watson & Crick
  • 16. Direccionalidad del DNA  Necesitas enumerar los Carbonos!  ¿Qué importa esto? OH O 4′ 5′ CH2 3′ 2′ 1′ PO4 Base N ribosa nucleótido ¡Esto será importante!!
  • 17. El eje o esqueleto del DNA O 3′ PO4 base 2 O base –O 1′ 2′ 1′ 2′ 3′ OH C 3′ O P O O 5′ CH2 4′ 4′ 5′ CH 5′  Uniendo el eje del DNA  Se refiere a los extremos 3′ y 5′ del DNA  El último Carbono de los extremos. Suena trivial, pero… ¡esto es importante!
  • 18. Los nucleótidos en el esqueleto del DNA están unidos por enlaces entre el fosfato de un nucleótido y la pentosa siguiente entre los carbonos 3′ y 5′. La molécula de DNA tiene “dirección” Hebras complementarias corren en dirección opuesta 3′ 5′ 5′ 3′ Hebras Antiparalelas
  • 19. Enlaces en el DNA …¿Enlaces fuertes o débiles? ¿Cómo encajan los enlaces en el mecanismo de copiado del DNA? 3′ 5′ 3′ 5′ Enlace covalente Fosfodiéster Puentes de Hidrógeno
  • 20. Complementariedad de bases en el DNA  Purinas  Adenina (A)  guanina (G)  Pirimidinas  timina (T)  citosina (C)  Pareo  A : T  2 puentes de H  C : G  3 puentes de H
  • 21. LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN: MECANISMO – 1.- Iniciación:  Enzimas: (Helicasas, Topoisomerasas, Prot. SSB) – 2.- Síntesis:  Enzimas: RNA-Polimerasa (Primasa), DNA-Polimerasa Nucleótidos: dATP, dTTP, dGTP, dCTP (materia prima y energía)  Proceso: – Sínte sis co ntinua: Cebador + copia ADN ⇒ hebra conductora – Sínte sis disco ntinua : F. De Okazaki ⇒ hebra retardada – 3.- Finalización:  Enzimas: (DNA-Polimerasa , DNA-Ligasa )  Proceso: a) Digestión de cebadores, b) síntesis de ADN, c) unión de fragmentos
  • 22. Copiando el DNA  Replicación del DNA  El pareo de bases permite que cada hebra sirva como un Molde para una nueva hebra  Cada Hebra tienen ½ de la hebra molde y ½ DNA nuevo. http://bcs.whfreeman.com/phelanphys1e/default.asp#543 http://www.johnkyrk.com/DNAreplication.esp.html
  • 23. a. Inicio de la replicación  Se inicia en determinadas (secuencias concretas) zonas del ADN con la formación de la horquilla o burbuja de replicación, que consiste en la apertura de la doble hebra por rotura de los puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadas.  Participan varias enzimas:  Helicasas: separan las hebras de ADN (rompen los puentes de hidrógeno).  Topoisomerasas I y II (o girasa): desespiralizan las hebras para disminuir tensiones y evitar rotura de la hebra.  Proteínas SSB: estabilizan la burbuja, impiden que se cierre y dan tiempo a que las enzimas ADN-polimerasas sinteticen las nuevas cadenas de ADN.
  • 24. Proteínas de unión a cadena simple Horquilla de Replicación  Apertura del DNA  Enzima Helicasa  Cataliza el desdoble y apertura de la hélice del DNA  Estabilizada por Proteínas de unión a cadena simple(Single strand binding protein) helicasahelicasa
  • 26. La replicación de lleva a cabo según el modelo semiconservativo Tanto en eucariotas como en Procariotas Replicación en Eucariotas Replicación en Procariotas En eucariotas aparecen muchos ojos de replicación (replicones ) simultaneamente En Procariotas aparece un solo replicón
  • 27.  Un equipo grande de enzimas coordina la replicación Permítanme presentarle s al equipo
  • 28. b. Formación de las nuevas hebras  Inmediatamente comienza la síntesis de las hebras complementarias sobre cada una de las originales. Este proceso lo realiza la ADN-polimerasa III, que precisa los siguientes requisitos:  AÑADE NUCLEOTIDOS AL EXTREMO 3´LIBRE. 5’ 3’→ . Une nucleótidos en sentido 5’3’ , es decir, la nueva hebra crece en sentido contrario a la hebra molde.  Necesita una hebra molde de ADN que corre en sentido 3’5’ y sobre la que se sintetiza la hebra complementaria.  Utiliza nucleótidos trifosfato, que además proporcionan la energía necesaria para formar los enlaces correspondientes.  Precisa un ARN cebador para añadir nucleótidos a un extremo 3’ de una cadena nucleotídica previa. La enzima primasa sintetiza el ARN cebador.
  • 29. BIOLOGÍA- DNA Polimerasa III ¿De dónde se obtiene la energía para realizar los enlaces?  Se construye hebra de DNA hija  Se añaden nuevas bases complementarias.  DNA polimerasa III
  • 30. -BIOLOGÍA  Necesita un nucleótido de “inicio” para unirse a la hebra en crecimiento en sentido 5′→3′ DNA Polimerasa III DNA Polimerasa III DNA Polimerasa III DNA Polimerasa III energía energía energía 3′ 3′ 5′La energía regula el proceso 5′ ene rgía
  • 31. A-BIOLOG ATPGTPTTPCTP Energía para la Replicación ADPAMPGMPTMPCMP Nucleótido modificado eEnergí a ¿De dónde viene la energía para formar los enlaces? y dejamos atrás un nucleótido! Recuerdas al ATP! Venimos con nuestra propia energía Venimos con nuestra propia energía
  • 33.
  • 34.  La ADN polimerasa III recorre el ADN molde en sentido 3’5’, y una de las hebras es recorrida normalmente, pero la otra hebra discurre en sentido opuesto 5’3’ y la enzima no puede hacerlo de forma directa sino de forma discontínua (a pequeños saltos), formando los denominados fragmentos de Okazaki, que tras la unión mediante las enzimas ligasas forman la hebra retardada.  A continuación la enzima ADN- polimerasa I elimina los ARN- cebadores y rellena los huecos del cebador consiguiendo recuperar casi todo el ADN.
  • 35. Límites de la DNA polimerasa III Sólo puede añadir nucleótidos en un grupo 3′-OH de una hebra de DNA existente. Hebra adelantada o conductora y retrasada 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 3′ Hebra adelantada Hebra retrasada Fragmentos de Okazaki ligasa Okazaki Hebra conductora Síntesis continua Hebra retrasada Fragmentos de Okazaki Unidos por ligasa  Enzima “soldadora de puntos” DNA polimerasa III 5 ′ 3′ 5′ 3′ 5′ Horquilla de Replicación 3′
  • 36.
  • 37.
  • 39.
  • 40. DNA Polimerasa III Horquilla y burbujas de Replicación 5′ 3′ 5′ 3′ Hebra adelantada Hebra retrasada Hebra adelantada Hebra retrasada 5′ 3′ 5 ∋ 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ 3′ Horquilla de replic creciente5′ 3′ Horquilla de replicación creciente Hebra adelantada 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ Hebra retrasada 5′ 3′
  • 41. DNA Polimerasa III RNA primer Formado por la primasa Sirve como cebador (iniciador) de la secuencia para la DNA Polimerasa III Límites de la DNA Polimerasa III Puede sólo construir sobre el extremo 3′ de una hebra de DNA existente. Inicio de síntesis de DNA : RNA primers 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ Horquilla de replicación creciente primasa RNA 5′
  • 42. DNA Polimerasa I remueve secciones del RNA primer y los reemplaza con nucleótidos de DNA. Pero la DNA Polimerasa I todavía puede sólo construir sobre el extremo 3′ de una hebra de DNA existente. Reemplazo de los RNA primers con DNA 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ Horquilla de rep3li′cación creciente DNA Polimerasa I RNA 5′ ligasa
  • 43. Pérdida de bases en el extremo 5′ en cada Replicación Los cromosomas se acortan con cada Replicación Limita el Nº de divisiones celulares DNA Polimerasa III Todas las DNA Polimerasas pueden sólo añadir en el extremo 3′ de una hebra de DNA existente. Erosión del cromosoma 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ Horquilla de repl3ic′ ación creciente DNA Polimerasa I RNA 5′ ¡Houston, tenemos un problema!
  • 44. BIOLOGÍA- Secuencias no codificantes en el extremo de los cromosomas = Capucha protectora Limita a ~50 divisiones celulares Telomerasa  enzima que actúa en los extremos: Telómeros  Puede añadir bases de DNA en el extremo 5′  Diferentes niveles de actividad en differentes células  Alta en células madres y cancerosas -- ¿Por qué? telomerasa Telómeros 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ Horquilla de repl3ic′ ación creciente TTAAGGGTTAAGGG 3′ TTAAGGG
  • 45. Horquilla de replicación creciente 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ helicasa Dirección de Replicación primasa DNA Polimerasa III DNA Polimerasa III DNA Polimerasa I ligasa Fragmentosde Okazaki Hebra adelantada Hebra retardada SSB
  • 46.
  • 47.
  • 48. c) Finalización  Al final de la síntesis de la cadena copia y la que ha servido como patrón se disponen enrolladas originando la doble hélice.  Este proceso a pesar de lo complejo se produce a gran velocidad, del orden de 45.000 nucleótidos/minuto.
  • 49.
  • 50. DIFERENCIAS EN EL PROCESO REPLICATIVO ENTRE PROCARIOTAS YDIFERENCIAS EN EL PROCESO REPLICATIVO ENTRE PROCARIOTAS Y EUCARIOTASEUCARIOTAS El mecanismo básico es el mismo, las diferencias son las siguientes:  El ADN eucariota está asociado a histonas, pero el bacteriano no: Así en el primer caso se deben sintetizar también histonas y en el segundo no.  El tamaño de los fragmentos de Okazaki es menor en los eucariotas que en los procariotas.  Existen 3 tipos de ADN-polimerasa en procariotas y 5 en las eucariotas.  En las procariotas se forma una sola burbuja de replicación y en las eucariotas se producen varios cientos en cada cromosoma simultáneamente, para acelerar el proceso.  La velocidad de replicación es menor en las eucariotas que en las procariotas.
  • 51.
  • 52. LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN:LA REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN: CORRECCIÓN DE ERRORESCORRECCIÓN DE ERRORES  Simultánea a la síntesis: Exonucleasas  Posterior : (Metilado tardío de adeninas de la hebra nueva. Para detectar errores el paso imprescindible es detectar la cadena primaria o antigua, que se consigue por metilación de las adeninas. De manera que la cadena que porta las adeninas metiladas es la correcta).  Endonucleasas detectan los errores y cortan la cadena.  Exonucleasas: eliminan los nucleótidos erróneos.  ADN-polimerasas tipo I sintetizan el fragmento de ADN eliminado.  ADN-ligasas unen el nuevo segmento sintetizado a la cadena de ADN.  Errores: 1 / 107-8 ⇒ 1 / 1010  ( variabilidad ⇒ evolución)
  • 53.
  • 54.
  • 55. BIOLOGÍA- DNA Polimerasas  DNA Polimerasa III  1000 bases/segundos!  principal Constructor de DNA  DNA Polimerasa I  20 bases/segundos  edita, repara y remueve primers DNA Polimerasa III enzima Arthur Kornberg 1959 Roger Kornberg 2006 (DPII)
  • 56. Edición y corrección de DNA  1000 bases/segundo = ¡Un lote de errores “tipográficos”!  DNA Polimerasa I     Corrige errores Repara bases malpareadas Remueve bases anormales  repara daños a través de la toda tu hermosa vida Reduce la tasa de error de 1 en 10.000 a 1 en 100 millones de bases
  • 57. ¡Rápido y preciso!  A E. coli le toma <1 hora para copiar los 5 millones de pares de bases de su único cromosoma  Se divide para formar 2 células hijas idénticas.  Células humanas copian sus 3 mil millones de bases y se dividen en células hijas en sólo unas pocas horas  Extremadamente preciso  solo ~1 error por 100 millones de bases~30 errores por ciclo celular.
  • 58.
  • 59.
  • 60.
  • 61.
  • 62.
  • 63.
  • 64.
  • 65.
  • 66. Expresión de la información genética EL DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR “ Un gen una proteína” ADN ARN PROTEÍNA Transcripción Traducción
  • 67.  Hoy día se sabe que la información genética es la causa de la síntesis de proteínas, entre ellas las enzimas, responsables de las características estructurales y funcionales de un organismo.  En 1948 se enuncia la hipótesis: un gen → una enzima  En 1970 Francis Crick enuncia el dogma central de la biología molecular: El ADN copia una parte de su mensaje sintetizando una molécula de ARN mensajero (proceso denominado transcripción), la cual constituye la información utilizada por los ribosomas para la síntesis de una proteína (proceso de traducción). ADN → ARN → Proteína  El mensaje se transmite en dos etapas sucesivas, en las que el ARN es el intermediario imprescindible.
  • 68.  El flujo de la información genética: Dogma Central de la Biología Molecular: “Un gen, una proteína”  Excepciones al dogma 1.- No todos los genes se expresan en proteínas 2.- Retrotranscripción 3.- Algunos ARN no se traducen 4.- En realidad “un gen varias proteínas diferentes.” 5.- Priones 6.- Los ribozimas Transcripción Traducción Replicación: ADN ARN cadena polipeptídica “Un gen, una proteína”¿seguro? Expresión de la información genética
  • 69. Expresión de la información genéticaMatizaciones de EL DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR ADN ARN PROTEÍNA No todos los genes se expresan , algunos presentan funciones reguladoras (operador, promotor, ADN basura, intrones?) Retrotranscripción Las retrotranscriptasas catalizan la síntesis de ADN a partir de ARN En realidad un gen puede servir para codificar varias proteínas Algunos ARN no se traducen, intervienen en procesos reguladores Los priones pueden “replicarse” Algunos ARN, los ribozimas pueden autorreplicarse
  • 70. La información fluye del ARN al AND, es la transcripción inversa o retrotranscripción, fue descubierta en los virus de ARN (Retrovirus)
  • 71.
  • 72.
  • 73.
  • 74. LA TRANSCRIPCIÓN DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA (SÍNTESIS DE RNA)
  • 75.  Consiste en copiar una parte del mensaje genético desde su forma original (ADN) a otra (ARN), que se pueda utilizar directamente para la síntesis de proteínas.  En el proceso de transcripción se forma una cadena de ARN cuya secuencia de bases nitrogenadas es la misma que la de la hebra madre del ADN.  La responsable de la transcripción es la enzima ARN polimerasa ADN dependiente, que presenta las siguientes características:  Une nucleótidos mediante enlace fosfodiéster (nucleotídicos), siempre en sentido 5’→3’.  Utiliza nucleótidos trifosfato.  Necesita una molécula de ADN como molde o patrón.  Se fija a regiones específicas del ADN (genes promotores) para comenzar su acción a partir de ese punto. LA TRANSCRIPCIÓN DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA (SÍNTESIS DE RNA)
  • 76. INICIACIÓN : –Elementos :  ADN molde (una hebra): Región promotora: ej.TATAATG (Promotor)  ARN- Polimerasa (no necesita cebador)  factores de iniciación: factor σ (sigma).
  • 77. ELONGACIÓN: ( 5´ → 3´ ): “Formación de un fragmento transitorio de ADN-ARN espiralizado” –Elementos :  ADN molde  ARN- Polimerasa  factores de elongación  nucleótidos trifosfato (ATP, UTP,GTP,CTP)
  • 78. TERMINACIÓN: Elementos :  ADN molde: Región de terminación ej. TTATTT (E)  ARN- Polimerasa  factores de terminación: factor ρ (rho)
  • 80. ORGANIZACIÓN DEL GENOMA EN PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS CARACTERÍSTICAS DEL MATERIAL GENÉTICO – Procariotas: 100% transcribible. – Eucariotas:  DNA basura (FUNCIONES PARCIALMENTE DESCONOCIDAS)  DNA transcribible: – Genes fragmentados: Exones e Intrones ⇒ maduración de ARNm
  • 81. Transcripción en células procariotas  En procariotas solo existe un tipo de ARN polimerasa, formada por dos subunidades: α y β.  La ARN polimerasa se debe unir al factor σ para reconocer y fijarse a la zona promotora (rica en timina y adenina: TATAATG. Después el factor σ se suelta.  La ARN polimerasa fijada al ADN produce el desenrollamiento de una vuelta de la doble hélice, y comienza a sintetizar ARN en sentido 5’→3’.  La cadena de ARN finaliza al llegar a la señal de terminación (zona rica en guanina y citosina). El factor ρ reconoce esta zona.  La velocidad de transcripción es alta: une 30 a 40 nucleótidos por segundo).  Mediante este proceso se sintetizan tres tipos de ARN: mensajero, ribosómico y transferente. Este último debe sufrir un proceso de maduración antes de activarse.  No se corrigen los errores producidos durante la síntesis de ARN ya que son bien tolerados y nunca se transmiten a la descendencia.
  • 82. Transcripción en células eucariotas  La transcripción es más compleja en eucariotas. – Intervienen factores proteicos ausentes en las procariotas. – Hay 3 tipos de ARN polimerasas diferentes:  Tipo I: transcribe ARN ribosómico.  Tipo II: transcribe ARN mensajero.  Tipo III: transcribe ARN de transferencia.  MADURACIÓN DEL RNApremensajero:  Tras la transcripción es preciso un proceso de maduración antes de que el ARNm sea funcional (deben ser eliminados los intrones y dejar solamente los exones).  Para transcribir el ADN es preciso que las histonas hayan desbloqueado la hebra de ADN y que éste se haya desespiralizado.  La región promotora tiene una secuencia específica: TATA o CAAT.  Cuando se han agregado 30 nulcleótidos, se añade al extremo 5’ una caperuza de 7- metil-guanosina trifosfato (punto de reconocimiento para procesos posteriores).  Tras la señal de finalización (secuencia TTATTT), sobre el extremo 3’ se añade una cadena de unos 200 poli-A.
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  • 88. Maduración del ARNm http://www.youtube.com/watch?v=w8FSDQwumTw&feature=related  Este proceso afecta sobre todo al ARN mensajero.  Proceso en el que se eliminan los intrones y se unen los exones entre sí constituyendo una única cadena.  En este proceso participan las ribonucleoproteínas pequeñas nucleares (RNPpn), también conocidas con espliceosomas o tijeras genéticas, capaces de cortar y volver a unir el ARN.  El ARNt tras su síntesis debe plegarse hasta adoptar la forma funcional. Aspecto característico de boomerang.  La síntesis de ARNr es compleja y se produce en el nucléolo.
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  • 93. LA EXPRESIÓN DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA Un gen determina una proteína (normalmente un enzima) y esta a su vez, un carácter EL CÓDIGO GENÉTICO:la relación entre la secuencia de nucleótidos (concretamente, de las bases nitrogenadas presentes en ellos) del ARNm y la secuencia de aminoácidos que constituyen una proteína. El código genético es la clave que permite la traducción del ADN a su forma funcional, es decir, las proteínas. – Código de Tripletes de ARN ( 43 = 64 codones) De los que 61 codones codifican para aminoácidos y 3 codifican el fin de la traducción (UAA, UAG y UGA). – Propiedades: 1.- Triplete de iniciación AUG y tres de terminación UAA, UGA, UAG 2.- Código lineal: el orden de los codones ⇒ orden de aminoácidos 3.- NOespaciamientos, NO solapamientos 4.- Está DEGENERADO: 64 codones para 20 aminoácidos 5.- Es Universal, es el mismo para todas las células de todas las
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  • 96. LA EXPRESIÓN DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA: EL CÓDIGOGENÉTICO …..AAATGCGCGCGAATTTCGTGGGTCAGGCTTGAAG….. …..TTTACGCGCGCTTAAAGCACC CAGTCCGAACTTC….. Transcripción (En el núcleo) . …..AAAUGCGCGCGAAUUUCGUGGGUCAGGCUUGAAG….. Traducción (En el citoplasma: ribosomas) Met – Arg – Ala – Asn – Phe – Val – Gly – Lys – Gln - Ala INICIO STOP
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  • 100. TRADUCCIÓN DEL MENSAJE GENÉTICO: (síntesis de cadenas polipeptídicas) PROCESO: Localizado en los ribosomas – ACTIVACIÓN DE AMINOÁCIDOS : Aminoacil ARNt sintetasa Ecuación global: – aa + ATP + ARNt → aa-ARNt + AMP + PPi – SÍNTESIS DE PROTEÍNAS: (cadenas polipeptídicas) INICIACIÓN – Comienza con el codón AUG → Metionina (E) o formil metionina (P) – - COMPLEJO DE INICIACIÓN = 1° Subunidad menor + 2° ARNm + 3° fMet-ARNt + 4° Subunidad mayor - GTP y Factores de iniciación
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  • 102.  En esta fase todo el sistema se prepara para la síntesis, se forma el COMPLEJO DE INICIACIÓN: – En primer lugar, el ARNm se une por el extremo 5’ a la subunidad menor del ribosoma gracias al factor proteico IF3. – A continuación, se produce la fijación del primer aminoacil-RNAt por complementariedad entre el anticodón del ARNt y el codón de ARNm. – El primer codón siempre es AUG y el aminoácido que porta es metionina. – Por último se produce el acoplamiento de la subunidad mayor del ribosoma, para lo que se precisa el factor proteico IF1 e iones Mg++ .  El ribosoma tiene dos zonas activas: sitio P o peptidil y sitio A o aminoacil. El A es donde se une el aminoacil-ARNt y el P es donde se sitúa el aminoácido una vez unido a la cadena peptídica.  El proceso de iniciación precisa energía, que es aportada por el GTP.
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  • 104.  ELONGACIÓN – A.- Unión del aa1-ARNt al sitio A:  GTP y Factores de elongación – B.- Formación del enlace peptídico:  Peptidil transferasa (ARNr con actividad catalítica) – C.- Translocación al sitio P :  GTP y Factores de elongación – Queda libre el sitio A – Unión al sitio A de un nuevo aa2-ARNt y repetición del proceso ( A, B, C )
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  • 106.  En esta etapa se sintetiza la cadena peptídica por la unión sucesiva de aminoácidos.  El ribosoma se desplaza a lo largo del ARNm y los ARNt aportan los aminoácidos correspondientes.  Se pueden diferenciar 3 subetapas: – Unión de un aminoacil-ARNt al sitio A. Solo se produce si el ARNt es complementario del codón del ARNm y aquí se consume una molécula de GTP. – Formación del enlace peptídico. Una vez anclados los dos aminoaciles-ARNt a los sitios P y A, la enzima peptidiltransferasa (situada en la subunidad mayor) produce el enlace peptídico. – Translocación del dipéptido al sitio P. Se produce el desplazamiento del ribosoma un codón en sentido 5’ 3’. Así el segundo aminoacil-ARNt salta al sitio P quedando libre el sitio A para que se→ una un nuevo aminoacil-ARNt.
  • 107.  TERMINACIÓN – Termina con las secuencias UAA, UAG o UGA que no codifican para ningún aminoácido. – - Factor de terminación y GTP: Unión a sitio A del Factor de terminación
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  • 110.  Existen 3 codones de terminación: UAA, UAG y UGA, para los que no existe ARNt y cuando llega a este punto la síntesis proteica se detiene.  Esta fase también precisa energía en forma de GTP.  Al detenerse la síntesis:  La cadena peptídica se libera del ribosoma.  La dos subunidades ribosómicas se separan.  El ARNm es destruido para que no se hagan copias innecesarias.  La síntesis se produce a una velocidad de 1400 aminoácidos por minuto y las cadenas de ARNm suelen ser leídas por más de un ribosoma simultáneamente.
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  • 113. La Traducción en células eucariotas Diferencias en eucariotas con relación a procariotas:  Se produce en RER en vez de citoplasma.  El ARNm eucariota es más estable.  El ARNm eucariota es monocistrónico (solo porta información para un péptido).  Los ribosomas son diferentes.  El primer ARNt lleva metionina.  Los factores proteicos implicados en el proceso son diferentes.  El extremo 5’ de los ARNm tiene metilguanosina trifosfato para ser reconocido.  El primer ARNt se une antes a la subunidad menor que al ARNm.
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  • 115. REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GENÉTICA  GEN :“Secuencia de nucleótidos en la molécula de ADN, que desempeña una función específica tal como codificar una molécula de ARN ounacadenapolipeptídica”.  NECESIDADDEREGULACIÓN DELA EXPRESIÓN GENÉTICA  Variacio ne s de l m e dio e xtra o intrace lular ⇒ Ne ce sidade s pro te icas dife re nte s.  Mo rfo g é ne sis: Dife re nciació n de te jido s, de sarro llo e m brio nario  Ciclo ce lular: dife re nte s e tapas ⇒ dife re nte s ne ce sidade s PUNTOS DONDE ES POSIBLE REGULAR LA EXPRESIÓN GENÉTICA  Transcripció n (PRINCIPALMENTE)  Maduració n de ARNm  Transpo rte de ARNm ,  Traducció n.
  • 116. Regulación en procariotas François Jacob y Jacques Monod en los años 1960 propusieron el modelo OPERÓN para explicar la regulación de la transcripción. Según este modelo se distinguen 4 tipos de genes:  Genes estructurales: contienen la información para la síntesis de las enzimas que intervienen en la ruta metabólica.  Gen promotor: Está constituido por la secuencia de ADN donde se une la ARN polimerasa para comenzar la transcripción.  Gen operador: Es el lugar del ADN donde puede unirse una proteína reguladora e impedir la transcripción de los genes estructurales. Se sitúa inmediatamente delante de éstos.  Gen regulador: sintetiza la proteína reguladora. Puede localizarse enn un lugar distinto a los otros genes del operón. Según se trate de una ruta catabólica o anabólica se diferencian dos tipos de regulación génica: inducible y represible.
  • 118. Sistema inducible  Cuando el sustrato sobre el que va actuar la enzima provoca la síntesis del enzima. Al efecto del sustrato se le denomina inducción positiva. Por ejemplo, en E. coli en ausencia de galactósido (sustrato) hay de una a diez unidades de galactosidasa (enzima) por  miligramo de materia seca, mientras que en presencia de galactósido se detectan hasta 10.000 unidades de galactosidasa por miligramo de materia seca. Al compuesto que desencadena la síntesis del enzima se le denomina Inductor.  Los sistemas inducibles se corresponden a procesos catabólicos de degradación, por ejemplo, el operón lactosa, el operón arabinosa, el operón maltosa. Se trata de sistemas enzimáticos encargados de degradar la lactosa, arabinosa, maltosa, etc.
  • 120. Sistema represible  Sistemas represibles: cuando el producto final de la reacción que cataliza el enzima impide la síntesis de la misma. Este fenómeno recibe el nombre de inducción negativa. Al compuesto que impide la síntesis del enzima se le denomina correpresor.  Los sistemas represibles se corresponden con procesos síntesis o Anabolismo, por ejemplo el operón triptófano y el operón histina. Se trata de las rutas metabólicas que conducen a la síntesis de triptófano y síntesis de histidina.
  • 122. Regulación en eucariotas  La regulación en organismos eucariotas y sobre todo pluricelulares es mucho más compleja que en procariotas.  La regulación se puede producir en varios procesos:  Transcripción.  Maduración del ARNm transcrito.  Transporte del ARNm.  Traducción.  El mecanismo más habitual se realiza en la transcripción actuando sobre la ARN polimerasa y sobre procesos específicos:  Separación de las histonas, para acceder al ADN.  Existencia de factores activadores intra y extracelulares (hormonas, fitocromo en las plantas, etc.).
  • 123.  Regulacióneneucariotas:  Sistemas complejos (normalmentedecontrol +)  Estructura de la cromatina y eliminación de histonas (condensación)  Factores epigenéticos (metilaciones)  Porfactores de activación (Hormonas, etc.)  ADN no codificante (“basura”, intrones, secuencia no codificante de ADN)
  • 125. LAS MUTACIONES  Concepto: alteraciones “cualitativas” en la secuencia de bases del ADN CLASIFICACIÓN:  GÉNICAS OPUNTUALES  CROMOSÓMICAS  GENÓMICAS
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  • 127. LAS MUTACIONES génicas – GÉNICAS OPUNTUALES: afectan a un GEN (1 o más bases) • Causas: – Errores en la replicación – Agentes físicos, químicos y biológicos. • Tipos: – Sustituciones: Cambios de bases » púrica x púrica o pirimidínica x pirimidínica : transiciones ⇒ (T ≡ G, A ≡ C) » pirimidínica x púrica: transversiones ⇒ (T ≡ C, A ≡ G) – Deleciones e Inserciones: Pérdida o inserción de bases (mutaciones graves)
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  • 132. LAS MUTACIONES cromosómicas CROMOSÓMICAS: Afectan a un cromosoma (varios genes)  Nº incorrecto de genes ⇐ Sobrecruzamiento erróneo por apareamiento desigual en profase I  Deleciones cromosómicas  Duplicaciones (importancia evolutiva)  Alteraciones en el orden de los genes  Inversiones  Translocaciones  Transposiciones:  “transposones” o “genes saltarines”)  Translocación recíproca
  • 133. cc
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  • 137. LAS MUTACIONES genómicas GENÓMICAS  Vistas en meiosis  Aneuploídías  Poliploidías  Efectos fenotípicos:  Aneuploidías  En autosomas: Normalmente letales  En cromosomas sexuales: efectos graves  Poliploidías  Animales: Normalmente letales  Vegetales: mayor tamaño
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  • 150. TIPOS DE AGENTES MUTÁGENOS – Físicos: Radiaciones  Radiacio ne s io nizante s (x, α, β, γ y neutrones)  Efectos: M. cromosómicas (deleciones y traslocaciones)  Radiacio ne s no io nizante s : UV  Efectos: dímeros de T – Químicos: Sustancia químicas  Reacciones químicas: Ej.benzopirenos, acridina, nitrosaminas, …  Análogos químicos: Ej. 5-bromouracilo análogo de la T,… – Efectos: M. puntuales, principalmente sustituciones – Biológicos: virus o transposones  Virus:(oncogenes) : provirus ⇒ saltos intercelulares – Efectos: Principalmente a nivel de regulación ( ej. papiloma humano)
  • 152.  EFECTOFENOTÍPICODE LAS MUTACIONES  Silenciosas, beneficiosos, perjudiciales.  MUTACIONES Y EVOLUCIÓN – Fuentes de variabilidad:  Mutacio ne s ⇒ nue vo s ale lo s : im po rtancia adaptativa y e vo lutiva  “Fe nó m e no s ” se xuale s:  Meiosis: » Segregación cromosómica ⇒ reordenación de alelos » Recombinación ⇒ reordenación de alelos  Fecundación ⇒ reordenación de alelos  Fe n. Parase xuale s: co njug ació n, e tc.  MUTACIONES Y CANCER (en regulación del ciclo celular)
  • 153. TEST DE REPASO TEMA 8 Genética molecular
  • 154. Comenta brevemente la relación existente entre variedad alélica y evolución, b) ¿de qué forma se originan nuevas variantes alélicas a partir de un alelo original? a) variedad alélica permite selección natural ⇒ evolución b) mutaciones a)Describe, por medio de un esquema, el fenómeno de transcripción genética, indicando su finalidad biológica b) tipos de moléculas que intervienen en el mismo, indicando además en qué lugar de la célula se lleva a cabo (indicar para eucarióticas y procarióticas respectivamente). a) Esquema + finalidad: (síntesis de ARN) b) ADN molde, ARN- Polimerasa, factores de iniciación, elongación y terminación; Ribonucleótidos trifosfato (ATP, UTP, GTP, CTP). c) Eucariotas: En el núcleo Procariotas: En el citosol a) Define el concepto de mutación. b) ¿En qué consiste una mutación por sustitución? ¿y por deleción? c) ¿De cuál de los dos tipos de mutación cabría esperar una alteración fenotípica mayor? Razona la respuesta. a) Alteraciones “cualitativas” en la secuencia de bases del ADN b) Sustitución: cambio de base (nucleótido). Deleción: pérdida de base c) Deleción: la secuencia de tripletas resulta alterada a partir de ese punto⇒ proteína muy diferente, si la sustitución determina codón de terminación, tb. grave
  • 155. Define el concepto de código genético. ¿Por qué consideramos que el código es universal y degenerado? a) Código de tripletes de ribonucleótidos (ARN) cada uno de los cuales se corresponde con un determinado aminoácido o con un factor de terminación. b) Universal: todos los seres vivos, degenerado varios tripletes se corresponden con un mismo aa, recuerda 43 = 64 para 20 aa ¿Cuál es la razón por la cual la replicación del ADN no tiene lugar de igual manera en la hebra principal y en la retardada? ¿En qué consiste esta diferencia? Las polimerasas sintetizan en dirección 5´---3´ ⇒ la horquilla 3´---5´ (disposición adecuada) ⇒ s. continua. La horquilla 5´---3´ (disposición contraria) ⇒ fragmentos de Okazaki ⇒ s. discontinua. Todo según el modelo semiconservativo + necesidad de cebadores. ¿De qué forma asegura la maquinaria replicativa la fidelidad de la copia de ADN? Modelo semiconservativo (por complementariedad de bases). Explicar modelo
  • 156. Por qué razón es tan importante que la expresión genética esté regulada? Razona la respuesta. - Variaciones del medio extra o intracelular ⇒ Necesidades proteicas diferentes. - Morfogénesis: Diferenciación de tejidos, desarrollo embrionario - Ciclo celular: diferentes etapas ⇒ diferentes necesidades En definitiva, las condiciones ambientales cambiantes determinan distintas necesidades celulares y en consecuencia la expresión o no de ciertos genes. Define el concepto de gen e indica las diferencias más relevantes en la estructura de un gen eucariótico y otro procariótico. ¿De qué forma se refleja esta diferencia en el producto de la transcripción? Razona la respuesta. Ayúdate de un dibujo. a) GEN: “Secuencia de nucleótidos en la molécula de ADN, que desempeña una función específica tal como codificar una molécula de ARN o una cadena polipeptídica”. b) Procariotas: continuos, E: fragmentados (intrones y exones) c) Eucariotas. Necesidad de maduración de ARN. Dibujar transcrito 1 ario extremos, intrones y exones y 2ario
  • 157. Desarrolla un texto corto (no más de 10 líneas) en el que se relacionen de forma coherente y en un contexto biológico los siguientes conceptos: transcripción, polimerasa, DNA molde, proteína La expresión genética requiere de varios procesos consecutivos, fundamentalmente la trascripción de una de las hebras del ADN molde a partir del reconocimiento de la región promotora, para dar una molécula de ARN, todo ello catalizado por las ARN polimerasas. En eucariotas dicho transcrito sufre una serie de procesos de maduración con el fin de eliminar los intrones de manera que el ARNm maduro pueda ser traducido en los ribosomas en la proteína correspondiente. Representa mediante un esquema claro cómo tiene lugar la traducción de un mRNA (etapa de inicio y etapa de elongación), indicando los elementos moleculares que intervienen en el mismo. 1º) Dibujo de elementos de complejo de iniciación: subunidades del ribosoma + Metionil o formilmetionil RNAt + ARM m maduro + GTP + factores de iniciación 2º) Dibujo del proceso de elongación A.- Unión del aa1-ARNt al sitio A: GTP y Factores de elongación B.- Formación del enlace peptídico: Peptidil transferasa (ARNr con actividad catalítica) C.-Translocación al sitio P: GTP y Factores de elongación - Queda libre el sitio A Unión al sitio A de un nuevo aa2-ARNt y repetición del proceso (A, B, C)
  • 159.  Biología. 2ºBachillerato. SANZ ESTEBAN, Miguel. SERRANO BARRERO, Susana. TORRALBA REDONDO. Begoña. Editorial Oxford.  Biología. 2ºBachillerato. ALCAMÍ, José. BASTERO, Juan José. FERNÁNDEZ, Benjamín. GÓMEZ DE SALAZAR, José María. MÉNDEZ, Mª Jesús. SLÖCKERJavier. Editorial SM.  https://es.slideshare.net/gustavotoledo/replicacin-dna2012ok?from_action=save  http://www.biologia.edu.ar/bacterias/micro5.htm  http://centros.edu.xunta.es/iesastelleiras/depart/bioxeo/lgazon/presen/bac2/bio/presf.html  http://centros.edu.xunta.es/iesastelleiras/depart/bioxeo/lgazon/presen/bac2/bio/pdf/envcel. pdf  http://cienciastella.com  http://departamentobiologiageologiaiesmuriedas.wordpress.com/2o-bachillerato/biologia- 2/  http://docentes.educacion.navarra.es/~metayosa/bach2/2biometabo2.html  http://www.educa.madrid.org/web/cc.nsdelasabiduria.madrid/Ejercicios/2b/Biologia/Enzim as/enzimas.htm  http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/  http://www.ehu.es/biomoleculas/an/an41.htm  http://www.geocities.ws/batxillerat_biologia/glucids.htm  http://hnncbiol.blogspot.com.es/2008/01/acidos  http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso2001/accesit_4  http://temabiomoleculas.blogspot.com.es/  http://tertuliadeamigos.webcindario.com/biocou04.html BIBIOGRAFÍA Y PÁGINAS WEB