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Hematología Clínica I
Laboratorio de Hemostasia
Hemostasia
Coagulación Fibrinolisis
Hemostasia
Plaquetas
Endotelio vascular
Trombina Plaquetas
TROMBO
Sistema
fibrinolítico
Lesión
Formación del tapón
hemostático
• 1. Vasoconstricción
• 2. Adhesividad y agregación plaquetaria
• 3. Activación del sistema de coagulación
• 4. Activación del sistema fibrinolítico
LESION
Adhesividad Plaquetaria
Agregacion Plaquetaria
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Endotelio Vascular/Plaquetas
SISTEMA DE FLUJO MEDIO
Fibrina
Plaquetaria Relación Endotelio Vascular/Plaquetas
Plaquetas SISTEMA DE ALTO FLUJO
Plaquetaria Agregación Plaquetaria Relación
Adhesividad Plaquetaria Agregación
LESION
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ADHESIVIDAD PLAQUETARIA
Von Willebrand
GP Ib-IX-V
GP IIb-IIIa
(IIbβ3)Plaqueta
Alto Flujo >>>
Farmacología
Celula Endotelial
fosfolipidos
Fosfolipasa A2
Acido araquidonico
Ciclo-oxigenasa
Prostaciclina
Prostaciclina
sintetasa
PG G2 PGH2
Plaqueta
fosfolipidos
Fosfolipasa A2
Acido araquidonico
Ciclo-oxigenasa
Tromboxano A2
Tromboxano
sintetasa
PG G2 PGH2
ASPIRINA
AINE
• INHIBIDORES DE LA CICLO-OXIGENASA (COX-1)
• INHIBIDORES DE LA TROMBOXANO SINTETASA
• BLOQUEADORES DE LOS RECEPTORES DEL
TROMBOXANO A2
• INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA
• INHIBIDORES DEL ACOPLE AL ADP
• INHIBIDORES DE LOS RECEPTORES PLAQUETARIOS
NIVEL DE ACCION DE LOS
ANTIAGREGANTES PLAQUETARIOS
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ENDOTELIO FACTOR TISULAR
Serino
Proteasa 1
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Péptido de
activación
MECANISMO DE ACTIVACIÓN EN CASCADA
Resumen de la cascada
Cal PreCal=QAPM
XII XIIa
QAPM=XI XIa
IX
VIIIa Calcio
Fosfolipidos
X Va Calcio
Fosfolipidos
XIIIa
XIII
FIBRINOGENO
VII
F.Tisular
Calcio
VIIa
IXa
Xa
Lesión Vascular
F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I
Cal PreCal=QAPM
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FIBRINA S FIBRINA I
Ca
ANTITROMBINA
PROTEINA C
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F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I
ANTITROMBINA
PROTEINA C
PROTEINA S
TROMBINA
ACCION ACCION ACCION
COAGULANTE INHIBIDORA ANTIFIBRINOLITICA
PLAQUETAS
FIBRINOGENO
FIBRINA
F V F Va
F VIII F VIIIa
F XIII F XIIIa
PROTEINA C
PROTEINA Ca
TAFI
INHIBE
ACTIVA
TRANSFORMA
Trombomodulina
EPCR
Factor V
Factores Vitamina K
dependientes
Gama carboxilacion
Información
Genetica
Aminoacidos Sintesis Proteica
Pro-Factores
II, VII, IX, X, PC, PS, etc.
Carboxilasa FACTORES K
DEPENDIENTES
VITAMINA K
DICUMARINICOS
VIDA MEDIA DE LOS FACTORES
K DEPENDIENTES
Factor VII
Proteina C
Factor X
Factor IX
Factor II
Proteina S
6 horas
6 horas
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30 horas
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TIEMPO DE PROTROMBINA
Expresion
A. CONCENTRACION
B. TASA
C. INR (Razon Internacional
Normatizada)
Intensidad de la Anticoagulacion
EventosClinicos
Ventana
Terapeutica
50
PLASMINATROMBINA
AUMENTA
DISMINUYE
TROMBOSIS
TROMBOSIS
HEMORRAGIA
HEMORRAGIA
t-PA
PLASMINÓGENO PLASMINA
Prouroquinasa
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pdfFIBRINA
PK KK
XII
PAI-1
PAI-1
2AP
HRG
t-PA
Uroquinasa
XII
SK
2macroglobulina
MALLA DE FIBRINA
FIBRINÓGENO
PLASMINA
lisislisis
DÍMERO - D PDF
FIBRINOGENO
A A
B B
NH2terminal
COOH terminal COOH terminal
COOH terminal COOH terminal
E
D
E
E
D
E
DD
E
DD
E DD
ED
D
E
E DD
ED
D
E
D DD
E
D
D
D D
D
plasmina
plasmina
plasmina
trombina
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F XIIIa
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DIMERO D
ENFERMEDADES HEMORRAGICAS
Mecanismos de
Hemostasia
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Endotelio-Plaquetas
Mecanismo
Fibrinolítico
Extrínseca (Explosión)
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Laboratorio de Hemostasia
Tiempo de Protrombina
Equipamiento y Muestra
Técnica
• Se utiliza plasma pobre en plaquetas (PPP) y tromboplastina cálcica
• En un baño a 37ºC se coloca un tubo de vidrio de Khan o hemólisis
• Agregar 50 µ de PPP
• Incubar 30 segundos
• Agregar 100 µ de Reactivo y disparar el cronometro
• Detener el cronometro cuando se visualiza la formación del coagulo.
Para obtener los resultados en % de actividad es necesario realizar la
curva de calibrado donde se interpolan los resultados obtenidos en
segundos
Curva de Calibración
Pool Buffer Porcentaje Tiempo
0,100 ml 0 100
0,70 ml 0,30 ml 70
0,50 ml 0,50 ml 50
0,25 ml 0,75 ml 25
Log de cc (%)
Tpo. (seg)
RIN
• RIN = Fórmula para expresar el TQuick en
pacientes anticoagulados con ACO que nos
independiza de la tromboplastina de trabajo
• RIN = ( PT pac/ MNPT) ISI
• MNPT: Media Geométrica del tiempo de
Quick de 20 normales del día de la
calibración de la tromboplastina de trabajo
• PT pac: Tiempo de Quick del paciente
TP prolongado
• CAUSAS MÁS FRECUENTES DE
DÉFICIT
• Avitaminosis K: adquirida, iatrogénica
sindromes de mala absorción, etc.
• Hepatopatías: Obstructiva,funcional.
• Inhibidores. La anticoagulación con ACO se controla
con el RIN
TP. prolongado
TP Prolongado
Corrección
c/plasma Normal
Corrige No corrige
Déficit de factores Inhibidores
Dosar
Factores
Repetir
Secuencia de Trabajo
Corrección con Plasma
Normal
• El TQuick se puede prolongar por déficit de los
factores o por presencia de inhibidores.
• Se hace una mezcla de partes iguales del plasma
problema y de un normal de concentración conocida,
• se hace el TQuick de la mezcla
• Corrige si el valor en % es igual o mayor que el
promedio de los TQuick del paciente y el normal
• TQuick teórico (%paciente +% normal)
2
• Ejemplo de corrección
• Plasma problema (P) TQuick de 50%
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• Mezcla P + N TQuick de 65% o más
KPTT o APTT
• Es la prueba más sensible
• Es la prueba más reproducible
• Es sensible a los déficit de factores de
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• Es sensible a inhibidores
neutralizantes
• Es sensible a inhibidores de
interferencia
• Es sensible a la heparina
Fundamento
Se incuba el
PPP del
paciente con
una mezcla de
fosfolípidos y
un activador
de contacto
entre 2 a 4
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recalcifica
con CL2Ca
25mM
Técnica
• En baño termostatizado a 37ºC
Colocar un tubo de hémolisis o Khan
de vidrio
Agregar 100µl de PPP y 100µl de
Reactivo de aPTT
• Incubar según indicación del
fabricante
• Agregar 100µl de CL2Ca 25mM y
disparar el cronómetro
• Detener el cronómetro cuando aparece
el coágulo
Utilidad
El aPTT se utiliza para el
seguimiento de pacientes
heparinizados con heparina
regular
Algoritmo de corrección
• Índice de Rosner
• (aPTT mezcla + aPTT
normal/aPTT paciente).100
• < de 10% corrige
• ≥ de 10% no corrige
Aplicación del Índice de
Rosner
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• Dédicit de factores de la vía intrínseca
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• Inhibidor contra factor
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• Heparina
DOSAJE DE FACTORES DE LA
VÍA INTRÍNSECA
Es un aPTT modificado
• En un baño termostatizado colocar un
tubos de vidrio
• Agregar 50µl de plasma diluido
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• 50µl de reactivo de aPTT
• Incubar según indicación del fabricante
• Recalcificar con 50µl de CL2Ca 25mM
• Cronometrar
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concentración
Evaluación de la Vía final
común
Tiempo de Trombina
• Mide el tiempo que tarda en coagular una
alícuota (100µl) de PPP por el agregado
de una alícuota (100µl) de trombina de
a 37ºC.
• Se informa tiempo del paciente/normal
• TT prolongado
•Afibrinogenemia
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•PDF/pdf muy elevados
•Paraproteínas
•Heparina
Criterio de Corrección del TT
• TT de normal al medio N/2
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• Corrige si el TT de P+N es ≤ TT de N/2
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TT cálcica Normal 18seg
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