1.
Hematología Clínica I
Laboratorio de Hemostasia

2.
Hemostasia

3.
Coagulación Fibrinolisis
Hemostasia
Plaquetas
Endotelio vascular

4.
Trombina Plaquetas
TROMBO
Sistema
fibrinolítico
Lesión

5.
Formación del tapón
hemostático
• 1. Vasoconstricción
• 2. Adhesividad y agregación plaquetaria
• 3. Activación del sistema de coagulación
• 4. Activación del sistema fibrinolítico

6.
LESION
Adhesividad Plaquetaria
Agregacion Plaquetaria
Relación
Endotelio Vascular/Plaquetas
SISTEMA DE FLUJO MEDIO
Fibrina

7.
Plaquetaria Relación Endotelio Vascular/Plaquetas
Plaquetas SISTEMA DE ALTO FLUJO
Plaquetaria Agregación Plaquetaria Relación
Adhesividad Plaquetaria Agregación
LESION

8.
SUBENDOTELIO
ADHESIVIDAD PLAQUETARIA
Von Willebrand
GP Ib-IX-V
GP IIb-IIIa
(IIbβ3)Plaqueta
Alto Flujo >>>

9.
Farmacología

10.
Celula Endotelial
fosfolipidos
Fosfolipasa A2
Acido araquidonico
Ciclo-oxigenasa
Prostaciclina
Prostaciclina
sintetasa
PG G2 PGH2
Plaqueta
fosfolipidos
Fosfolipasa A2
Acido araquidonico
Ciclo-oxigenasa
Tromboxano A2
Tromboxano
sintetasa
PG G2 PGH2
ASPIRINA
AINE

11.
• INHIBIDORES DE LA CICLO-OXIGENASA (COX-1)
• INHIBIDORES DE LA TROMBOXANO SINTETASA
• BLOQUEADORES DE LOS RECEPTORES DEL
TROMBOXANO A2
• INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA
• INHIBIDORES DEL ACOPLE AL ADP
• INHIBIDORES DE LOS RECEPTORES PLAQUETARIOS
NIVEL DE ACCION DE LOS
ANTIAGREGANTES PLAQUETARIOS

12.
TROMBINA
COAGULAC. INTRINSECA COAGULAC. EXTRINSECA
ENDOTELIO FACTOR TISULAR

13.
Serino
Proteasa 1
Zimógeno
Serino
Proteasa 2
Péptido de
activación
MECANISMO DE ACTIVACIÓN EN CASCADA

14.
Resumen de la cascada

15.
Cal PreCal=QAPM
XII XIIa
QAPM=XI XIa
IX
VIIIa Calcio
Fosfolipidos
X Va Calcio
Fosfolipidos
XIIIa
XIII
FIBRINOGENO
VII
F.Tisular
Calcio
VIIa
IXa
Xa
Lesión Vascular
F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I

16.
Cal PreCal=QAPM
XII XIIa
QAPM=XI XIa
IX
VIIIa Calcio
Fosfolipidos
X
Va Calcio
Fosfolipidos
XIIIa
XIII
FIBRINOGENO
VII
F.Tisular
Calcio
VIIa
IXa
Xa
Lesión Vascular
F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I
Ca
ANTITROMBINA
PROTEINA C
PROTEINA S

17.
Cal PreCal=QAPM
XII XIIa
QAPM=XI XIa
IX
VIIIa Calcio
Fosfolip.
X
Va Calcio
Fosfolip.
XIIIa
XIII
FIBRINOGENO
VII
F.Tisular
Calcio
VIIa
IXa
Xa
Lesión Vascular
F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I
ANTITROMBINA
PROTEINA C
PROTEINA S

18.
TROMBINA
ACCION ACCION ACCION
COAGULANTE INHIBIDORA ANTIFIBRINOLITICA
PLAQUETAS
FIBRINOGENO
FIBRINA
F V F Va
F VIII F VIIIa
F XIII F XIIIa
PROTEINA C
PROTEINA Ca
TAFI
INHIBE
ACTIVA
TRANSFORMA
Trombomodulina
EPCR
Factor V

19.
Factores Vitamina K
dependientes

20.
Gama carboxilacion

21.
Información
Genetica
Aminoacidos Sintesis Proteica
Pro-Factores
II, VII, IX, X, PC, PS, etc.
Carboxilasa FACTORES K
DEPENDIENTES
VITAMINA K
DICUMARINICOS

22.
VIDA MEDIA DE LOS FACTORES
K DEPENDIENTES
Factor VII
Proteina C
Factor X
Factor IX
Factor II
Proteina S
6 horas
6 horas
48 horas
30 horas
72 horas
50 horas

23.
TIEMPO DE PROTROMBINA
Expresion
A. CONCENTRACION
B. TASA
C. INR (Razon Internacional
Normatizada)

24.
Intensidad de la Anticoagulacion
EventosClinicos
Ventana
Terapeutica
50

25.
PLASMINATROMBINA
AUMENTA
DISMINUYE
TROMBOSIS
TROMBOSIS
HEMORRAGIA
HEMORRAGIA

26.
t-PA
PLASMINÓGENO PLASMINA
Prouroquinasa
Uroquinasa
pdfFIBRINA
PK KK
XII
PAI-1
PAI-1
2AP
HRG
t-PA
Uroquinasa
XII
SK
2macroglobulina

27.
MALLA DE FIBRINA
FIBRINÓGENO
PLASMINA
lisislisis
DÍMERO - D PDF

28.
FIBRINOGENO
A A
B B
NH2terminal
COOH terminal COOH terminal
COOH terminal COOH terminal

29.
E
D
E
E
D
E
DD
E
DD
E DD
ED
D
E
E DD
ED
D
E
D DD
E
D
D
D D
D
plasmina
plasmina
plasmina
trombina
A + B
F XIIIa
Xfp
Yfp
X0
Y0
DIMERO D

30.
ENFERMEDADES HEMORRAGICAS
Mecanismos de
Hemostasia
Interacción
Endotelio-Plaquetas
Mecanismo
Fibrinolítico
Extrínseca (Explosión)
Intrínseca (Ampliación)
Lesión
Adhesión
Agregación

31.
Laboratorio de Hemostasia

32.
Tiempo de Protrombina

33.
Equipamiento y Muestra

34.
Técnica
• Se utiliza plasma pobre en plaquetas (PPP) y tromboplastina cálcica
• En un baño a 37ºC se coloca un tubo de vidrio de Khan o hemólisis
• Agregar 50 µ de PPP
• Incubar 30 segundos
• Agregar 100 µ de Reactivo y disparar el cronometro
• Detener el cronometro cuando se visualiza la formación del coagulo.
Para obtener los resultados en % de actividad es necesario realizar la
curva de calibrado donde se interpolan los resultados obtenidos en
segundos

35.
Curva de Calibración
Pool Buffer Porcentaje Tiempo
0,100 ml 0 100
0,70 ml 0,30 ml 70
0,50 ml 0,50 ml 50
0,25 ml 0,75 ml 25
Log de cc (%)
Tpo. (seg)

36.
RIN
• RIN = Fórmula para expresar el TQuick en
pacientes anticoagulados con ACO que nos
independiza de la tromboplastina de trabajo
• RIN = ( PT pac/ MNPT) ISI
• MNPT: Media Geométrica del tiempo de
Quick de 20 normales del día de la
calibración de la tromboplastina de trabajo
• PT pac: Tiempo de Quick del paciente

37.
TP prolongado
• CAUSAS MÁS FRECUENTES DE
DÉFICIT
• Avitaminosis K: adquirida, iatrogénica
sindromes de mala absorción, etc.
• Hepatopatías: Obstructiva,funcional.
• Inhibidores. La anticoagulación con ACO se controla
con el RIN

38.
TP. prolongado
TP Prolongado
Corrección
c/plasma Normal
Corrige No corrige
Déficit de factores Inhibidores
Dosar
Factores
Repetir
Secuencia de Trabajo

39.
Corrección con Plasma
Normal
• El TQuick se puede prolongar por déficit de los
factores o por presencia de inhibidores.
• Se hace una mezcla de partes iguales del plasma
problema y de un normal de concentración conocida,
• se hace el TQuick de la mezcla
• Corrige si el valor en % es igual o mayor que el
promedio de los TQuick del paciente y el normal
• TQuick teórico (%paciente +% normal)
2
• Ejemplo de corrección
• Plasma problema (P) TQuick de 50%
• Plasma normal (N) TQuick de 80%
• Mezcla P + N TQuick de 65% o más

40.
KPTT o APTT
• Es la prueba más sensible
• Es la prueba más reproducible
• Es sensible a los déficit de factores de
fase de contacto, IX y VIII
• Es sensible a inhibidores
neutralizantes
• Es sensible a inhibidores de
interferencia
• Es sensible a la heparina

41.
Fundamento
Se incuba el
PPP del
paciente con
una mezcla de
fosfolípidos y
un activador
de contacto
entre 2 a 4
minutos y se
recalcifica
con CL2Ca
25mM

42.
Técnica
• En baño termostatizado a 37ºC
Colocar un tubo de hémolisis o Khan
de vidrio
Agregar 100µl de PPP y 100µl de
Reactivo de aPTT
• Incubar según indicación del
fabricante
• Agregar 100µl de CL2Ca 25mM y
disparar el cronómetro
• Detener el cronómetro cuando aparece
el coágulo

43.
Utilidad
El aPTT se utiliza para el
seguimiento de pacientes
heparinizados con heparina
regular

44.
Algoritmo de corrección
• Índice de Rosner
• (aPTT mezcla + aPTT
normal/aPTT paciente).100
• < de 10% corrige
• ≥ de 10% no corrige

45.
Aplicación del Índice de
Rosner
CORRIGE
• Dédicit de factores de la vía intrínseca
NO CORRIGE
• Inhibidor contra factor
• Inhibidor de interferencia
• Heparina

46.
DOSAJE DE FACTORES DE LA
VÍA INTRÍNSECA
Es un aPTT modificado
• En un baño termostatizado colocar un
tubos de vidrio
• Agregar 50µl de plasma diluido
• 50µl de plasma deficiente
• 50µl de reactivo de aPTT
• Incubar según indicación del fabricante
• Recalcificar con 50µl de CL2Ca 25mM
• Cronometrar
• Interpolar en la curva de calibración

47.
• Graficar en papel log-log tiempo vs
concentración

48.
Evaluación de la Vía final
común

49.
Tiempo de Trombina
• Mide el tiempo que tarda en coagular una
alícuota (100µl) de PPP por el agregado
de una alícuota (100µl) de trombina de
a 37ºC.
• Se informa tiempo del paciente/normal
• TT prolongado
•Afibrinogenemia
•Hipofibrinogenemia
•Disfibrinogenemia
•PDF/pdf muy elevados
•Paraproteínas
•Heparina

50.
Criterio de Corrección del TT
• TT de normal al medio N/2
• TT de la mezcla P+N
• Corrige si el TT de P+N es ≤ TT de N/2
• Ejemplo:
TT paciente↑ TT P+N > N/2
TT cálcica Normal 18seg
TT cálcica Paciente 19seg

51.
Dimero D

52.
Dimero D

53.
Etapa pre analítica