1. RADIAL IMMUNODIFFUSION (RID) MEITI MULJANTI, dr SITI ROCHMATOEN HARMADJI, dr, SpPK (K) TUTOR IMUNOLOGI

2. PENDAHULUAN RADIAL IMMUNODIFFUSION (RID) Penentuan antigen – antibodi berdasarkan reaksi presipitasi.

6. Tabel 1. Macam Tehnik Reaksi Presipitasi (Sheehan, 1990)

7. Tabel 2. Keuntungan & Kerugian Uji Presipitasi (Sheehan, 1990) TEHNIK KEUNTUNGAN KERUGIAN Capillary tube precipitation Mudah Tidak sensitif Waktu reaksi lama Semikuantitatif Radial immunodiffusion (RID) Sensitif Kuantitatif Waktu reaksi (kinetik : 18 jam; Endpoint : 48 jam) Hanya menentukan 1 Ag/ plate Double diffusion (Ouchterlony) Dapat mendeteksi Ag yg sama Semikuantitatif Waktu reaksi lama Counter immunoelectro phoresis (CIEP) Lebih cepat dibanding tes lainnya Semikuantitatif Immunoelectro phoresis (IEP) Sensitif Sedikit masalah dgn rasio Ag/ Ab Semikuatitatif Immunofixation electrophoresis (IFE) Sensitif Dapat mendeteksi variasi genetik dari Ag Semikuantitatif Rasio Ag/ Ab penting Rocket Technique (Laurell) Waktu reaksi cepat Kuantitatif Hanya menentukan 1 Ag / plate

8. FAKTOR YG MEMPENGARUHI Reaksi Presipitasi Mekanisme daya tahan tdk spesifik Sifat Ag Waktu & suhu (Handojo, 2003) Ratio Ag-Ab Elektrolit & pH

9. RADIAL IMMUNODIFFUSION (RID) dinginkan pd suhu kamar Antisera dalam agar 1 2 3 4 5 6 7 8 Tes serum Tes serum Tes serum Tes serum Tes serum Serum standar 50 – 80 jam  cincin presipitasi (Handojo, 2003) Ukur diameter cincin presipitasi, tempatkan pd kurva standar  menentukan kadar imunoglobulin secara kuantitatif Gel agarosa fase cair (50 o C) Antisera/ Ab

10. KECEPATAN DIFUSI Viskositas & Hidrasi gel Interaksi matriks gel & reaktan Ukuran molekul Berat molekul Ag Temperatur FAKTOR (Sheehan, 1990)

11. CARA PEMBACAAN RID Fahey, or kinetic diffusion. METODE Mancini, or endpoint diffusion. (Sheehan, 1990)

15. HASIL Hasil dikali faktor pengenceran Hasil kurang dari standar (Sheehan, 1990)

16. KESALAHAN PEMBACAAN RID mengisi sumuran terlalu sedikit/ banyak menumpahkan serum pasien ke dalam gel agarosa melubangi samping sumuran Waktu&suhu Inkubasi tdk tepat hasil tdk akurat  perlu diulang (Sheehan, 1990)

19. Tabel 3. Penentuan klinis menggunakan uji presipitasi (Sheehan, 1990) Uji Metode C-reactive protein Capillary tube precipitation Immunoglobulin quantitation IgG, total dan subklas IgA; IgM; IgD RID Protein komplemen C3; C4 RID Antigen mikroba CIEP Protein monoklonal (Serum, urine, & cairan serebrospinal) IEP dan IFE

21. Gambar 8. NOR Partigen Plate (Lab. PK, 2010)

23. Gambar 9. Meβ Projector (Lab. PK, 2010)

24. Gambar 10. Tabel Referensi (Lab. PK, 2010)

27. Terimakasih

30. REAKSI AGLUTINASI & PRESIPITASI (Sheehan, 1990) AGLUTINASI PRESIPITASI Partikel Ag tidak larut Ag larut Ag memp 2 antigenic determinants Ag memp 2 antigenic determinants Hsl Ag excess pd postzone Hsl Ag excess pd postzone Hsl Ab excess pd prozone Hsl Ab excess pd prozone Waktu reaksi : menit - jam Waktu reaksi : jam - hari Hsl : kualitatif/ semikuantitatif Hsl : kualitatif, semikuantitatif/ kuantitatif

33. Aktivasi komplemen jalur klasik, lectin & jalur alternatif. 3 jalur bertemu pd pemecahan C3 & pembentukan C5 convertase, penyebab jalur ahir lisis. MASP, mannose-binding lectin-associated serine protease; MBL, mannose-binding lectin. David, 2005