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ESTERILIZACIÓN  Consiste en destruir todos los gérmenes vivos que existan sobre los objetos o sustancias que se desean libre de ellos (asépticos).  Importante Variables:   Microorganismos  Termófilos (50 hasta 113 °C ).  Hongos Esporas Materiales  de laboratorio y quirúrgicos  Áreas  Salas de operaciones Piel  del enfermo  D Ó N D E
TERMINOS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Métodos Físicos Esterilización por calor Esterilización por filtración Esterilización por radiaciones
MÉTODOS CALOR Calor seco Calor Húmedo Pasteurización Calor Directo Mechero- Asa o Superficie 170°C/ 1-2h 15 lb  15 min 121 -123°C
POR FILTRACION  BIOPORE FILTROS VIDRIO PORCELANA ASBESTO ESTER CELULOSA termosensibles
Filtración del aire : Algodones en los tubos de vidrio, mascarillas Filtro de alta eficacia de retención de partículas (HEPA) Cabinas de seguridad biológica de flujo laminar Habitaciones especiales de hospitales (inmunosuprimidos)
RAYOS  UV  - LAMPARAS UV
AGENTES QUÍMICOS DESINFECTANTE- ANTISEPTICO Ácidos y Álcalis  Ac. Sulfúrico, NaOH  Metales pesados  Plata, Mercurio  Alcoholes y fenoles  Fenol, Cresol, Alcohol etílico Colorantes  Violeta  de Genciana Halógenos  Cloro, Yodo, Peroxido de Hidrógeno Ag.Oxidantes  Permanganato de Potasio Detergentes  Catiónicos y Aniónicos
Mecanismos de Acción de Desinfectantes Desnaturalización de las proteínas Proceso Oxido-reducción Combinación de Grupos Ácidos y Básicos Inactivación de Enzimas Modificación de la permeabilidad de la pared celular Interferencias con grupos activos de las proteínas
FACTORES QUE AFECTAN SU POTENCIALIDAD Concentración Agente Tiempo pH Temperatura Presencia de Material inactivante
MEDIOS DE CULTIVO Sustrato en el que se desarrollan microorganismos . NUTRIENTES  Fuente de Carbono, Nitrógeno (Proteínas,  Peptónas,  Carbohidratos, extractos de carne o levaduras) FACTORES DE CRECIMIENTO   Vitaminas, sangre, coenzimas, minerales. SALES   ( ISOTÓNOCOS)   Regulación osmótica pH   AGENTES SOLIDIFICANTES   Agar ó gelatina INDICADORES ESTÉRILES DIFERENCIAS EN CAPACIDAD DE EMPLEO DE NUTRIENTES  CONSTITUYE LAS BASES DE IDENTIFICACIÓN Productos para la preparación del medio. ●  Peptona......................5 g ●  Extracto de carne.......2,5 g ●  NaCl...........................2,5 g ●  Agar -agar...................10 g ●  Agua...........................500 ml
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO Varían indicaciones  según casa productora. Hacer medición de peso y  volumen correcto No sobre calentar CLASIFICACIÓN  :  LÍQUIDOS ESTADO FÍSICO  SEMISÓLIDOS SÓLIDOS SEGUN SU USO Medios de enriquecimiento y propagación Medios Diferenciales selectivos Pruebas Bioquímicas Conservación Especiales
1.- MEDIOS DE  TRANSPORTE No se multiplican los microorganismos Solo aporta nutrientes necesarios para mantenimiento No tóxico Solución Salina Fisiológica, Tampón Fosfato etc. 2. MEDIOS GENERALES .  CONTIENE NUTRUENTESBÁSICOS PARA CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS AGAR NUTRITIVO, CALDO NUTRITIVO 3. MEDIOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES CONTIENEN SUSTANCIAS ESPECIFICAS PARA EL DESARROLLO DE MICROORGANISMOS PARTICULARES. ADEMAS DE CONTENER INDICADORES QUE IDENTIFIQUEN EL CRECIMEINTO CARACTERÍSTICO EMB,  SS,  S110,  AGAR SANGRE, MC.CONKEY,
DISOLVER AL MECHERO VACIAR EN CAJAS ESTERILES DEJAR SOLIDIFICAR  TAPAR Y GUARDAR EN REFRIGERACION TAPAR ALGODÓN GASA
VACIADO EN PLACA   RECUENTO DE UFC UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS. ESTRIACION CON ASA   BACTERIOLOGICA AISLAMIENTOCOLONIAS METODOS DE SIEMBRA DE MICROORGANISMOS   VERTIDO  EXTENSIÓN
 
 
IDENTIFICACIÓN ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
AGAR TSI TRIPLE-AZUCAR -HIERRO  AGAR LIA LISINA -HIERRO   CALDO UREA   SIM SULFURO  INDOL  MOVILIDAD PRUEBAS BIOQUIMICAS MAS COMUNES
SEMBRADO ESPECIAL INCUBACIÓN SELECCIÓN COLONIA
MICROLOG-BIOLOG EQUIPO DE LECTURA
PRACTICAS 15 y 16 PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO Y ESTERILIZACION   MATERIALES TUBOS DE CULTIVO MATRACES AGARES SOLUCION SALINA FISIOLÓGICA ESTERIL

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  • 1. ESTERILIZACIÓN Consiste en destruir todos los gérmenes vivos que existan sobre los objetos o sustancias que se desean libre de ellos (asépticos). Importante Variables: Microorganismos Termófilos (50 hasta 113 °C ). Hongos Esporas Materiales de laboratorio y quirúrgicos Áreas Salas de operaciones Piel del enfermo D Ó N D E
  • 2.
  • 3. Métodos Físicos Esterilización por calor Esterilización por filtración Esterilización por radiaciones
  • 4. MÉTODOS CALOR Calor seco Calor Húmedo Pasteurización Calor Directo Mechero- Asa o Superficie 170°C/ 1-2h 15 lb 15 min 121 -123°C
  • 5. POR FILTRACION BIOPORE FILTROS VIDRIO PORCELANA ASBESTO ESTER CELULOSA termosensibles
  • 6. Filtración del aire : Algodones en los tubos de vidrio, mascarillas Filtro de alta eficacia de retención de partículas (HEPA) Cabinas de seguridad biológica de flujo laminar Habitaciones especiales de hospitales (inmunosuprimidos)
  • 7. RAYOS UV - LAMPARAS UV
  • 8. AGENTES QUÍMICOS DESINFECTANTE- ANTISEPTICO Ácidos y Álcalis Ac. Sulfúrico, NaOH Metales pesados Plata, Mercurio Alcoholes y fenoles Fenol, Cresol, Alcohol etílico Colorantes Violeta de Genciana Halógenos Cloro, Yodo, Peroxido de Hidrógeno Ag.Oxidantes Permanganato de Potasio Detergentes Catiónicos y Aniónicos
  • 9. Mecanismos de Acción de Desinfectantes Desnaturalización de las proteínas Proceso Oxido-reducción Combinación de Grupos Ácidos y Básicos Inactivación de Enzimas Modificación de la permeabilidad de la pared celular Interferencias con grupos activos de las proteínas
  • 10. FACTORES QUE AFECTAN SU POTENCIALIDAD Concentración Agente Tiempo pH Temperatura Presencia de Material inactivante
  • 11. MEDIOS DE CULTIVO Sustrato en el que se desarrollan microorganismos . NUTRIENTES Fuente de Carbono, Nitrógeno (Proteínas, Peptónas, Carbohidratos, extractos de carne o levaduras) FACTORES DE CRECIMIENTO Vitaminas, sangre, coenzimas, minerales. SALES ( ISOTÓNOCOS) Regulación osmótica pH AGENTES SOLIDIFICANTES Agar ó gelatina INDICADORES ESTÉRILES DIFERENCIAS EN CAPACIDAD DE EMPLEO DE NUTRIENTES CONSTITUYE LAS BASES DE IDENTIFICACIÓN Productos para la preparación del medio. ● Peptona......................5 g ● Extracto de carne.......2,5 g ● NaCl...........................2,5 g ● Agar -agar...................10 g ● Agua...........................500 ml
  • 12. PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO Varían indicaciones según casa productora. Hacer medición de peso y volumen correcto No sobre calentar CLASIFICACIÓN : LÍQUIDOS ESTADO FÍSICO SEMISÓLIDOS SÓLIDOS SEGUN SU USO Medios de enriquecimiento y propagación Medios Diferenciales selectivos Pruebas Bioquímicas Conservación Especiales
  • 13. 1.- MEDIOS DE TRANSPORTE No se multiplican los microorganismos Solo aporta nutrientes necesarios para mantenimiento No tóxico Solución Salina Fisiológica, Tampón Fosfato etc. 2. MEDIOS GENERALES . CONTIENE NUTRUENTESBÁSICOS PARA CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS AGAR NUTRITIVO, CALDO NUTRITIVO 3. MEDIOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES CONTIENEN SUSTANCIAS ESPECIFICAS PARA EL DESARROLLO DE MICROORGANISMOS PARTICULARES. ADEMAS DE CONTENER INDICADORES QUE IDENTIFIQUEN EL CRECIMEINTO CARACTERÍSTICO EMB, SS, S110, AGAR SANGRE, MC.CONKEY,
  • 14. DISOLVER AL MECHERO VACIAR EN CAJAS ESTERILES DEJAR SOLIDIFICAR TAPAR Y GUARDAR EN REFRIGERACION TAPAR ALGODÓN GASA
  • 15. VACIADO EN PLACA RECUENTO DE UFC UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS. ESTRIACION CON ASA BACTERIOLOGICA AISLAMIENTOCOLONIAS METODOS DE SIEMBRA DE MICROORGANISMOS VERTIDO EXTENSIÓN
  • 16.  
  • 17.  
  • 18.
  • 19. AGAR TSI TRIPLE-AZUCAR -HIERRO AGAR LIA LISINA -HIERRO CALDO UREA SIM SULFURO INDOL MOVILIDAD PRUEBAS BIOQUIMICAS MAS COMUNES
  • 20. SEMBRADO ESPECIAL INCUBACIÓN SELECCIÓN COLONIA
  • 22. PRACTICAS 15 y 16 PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO Y ESTERILIZACION MATERIALES TUBOS DE CULTIVO MATRACES AGARES SOLUCION SALINA FISIOLÓGICA ESTERIL