2. Introducción
La finalidad de todo tratamiento farmacológico es el alivio del
padecimiento o eliminación del mismo mediante el uso
adecuado de fármacos. Para que esto ocurra, se debe
conocer las características físico-químicas del fármaco y de
las características de la membrana biológica, y la vía de
administración.
La absorción es el movimiento del fármaco desde el sitio de
administración hasta la circulación sanguínea, es luego de la
liberación del fármaco de acuerdo a su forma farmacéutica,
uno de los procesos de entrada influenciado por factores
como el tamaño de la molécula, área de absorción,
liposolubilidad, grado de ionización (pH y pKa), entre otras.
En este experimento (modelo in vivo) se evaluó cómo se
modifica la absorción de un fármaco ante variaciones en el pH
del sitio de acción.
3. Definir las propiedades fisicoquímicas de
los fármacos, que pueden influir sobre los
procesos farmacocinéticas.
Discutir sobre cómo las modificaciones de
pH en los diferentes tejidos pueden afectar
el grado de ionización de un fármaco, y
por ende su paso a través de membranas.
Objetivos
4. Fármacos utilizados
Pentobárbital sódico (IP):
Barbitúrico
Do= 35 mg/Kg; C=65 mg/mL
Depresor del SNC
Uso: sedante e hipnótico, y en
Do subhipnóticas como
anticonvulsivante.
Diazepam (IM)
Benzodiazepina
Do= 5 mg/Kg; C=5 mg/mL
Uso: Efectos ansiolíticos,
sedantes, miorrelajantes y
anticonvulsivantes→ facilita la
acción del GABA.
5. Solución salina 0.9%
Solución isotónica.
Utilizada para limpiar la porción
del ID que se iba a utilizar.
Salicilato de sodio 400mg/L
Ácido débil
Congénere de la aspirina.
Analgésico y antipirético.
Inhibe ambas COXs (COX1 Y
COX2).
Produce una inhibición
irreversible.
Fármacos utilizados
8. Se pesó, marcó y
administró el volumen
que correspondiente a
cada ratas según la
dosis del anestésico.
Diazepam (IM):
Concentración: 5
mg/ml
Dosis: 5mg/kg
Pentobarbital sódico
(IP):
Concentración:
65mg/ml
Procedimiento
9. Cálculos de volúmenes
Fármaco
aplicado
Rata #1
Peso: 120 g = 0.12 Kg
Rata #2
Peso: 150 g = 0.15 Kg
Diazepam
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 =
5 𝑚𝑔/𝐾𝑔
[ 5 𝑚𝑔/𝑚𝐿]
x(0, 12 Kg)
𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 = 𝟎, 𝟏𝟐 𝒎𝑳
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 =
5 𝑚𝑔/𝐾𝑔
[ 5 𝑚𝑔/𝑚𝐿]
x(0, 15 Kg)
𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 = 𝟎, 𝟏𝟓 𝒎𝑳
Pentobarbital
sódico
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 =
35 𝑚𝑔/𝐾𝑔
[ 65 𝑚𝑔/𝑚𝐿]
x(0, 12
Kg)
𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 = 𝟎, 𝟎𝟔 𝒎𝑳
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 =
35 𝑚𝑔/𝐾𝑔
[ 65 𝑚𝑔/𝑚𝐿]
x(0, 15
Kg)
𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 = 𝟎, 𝟎𝟖 𝒎𝑳
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 =
𝐷𝑜
[ ]
(Peso)
10. Se inyectó el Diazepam
dentro del músculo de
una de las patas de la
rata.
Luego se administró el
Pentobarbital sódico,
en un ángulo de 45° en
cuadrante inferior
derecho.
Procedimiento
11. Luego se colocó las
ratas en la tabla de
disección y se realizó la
cirugía.
Se realizó una incisión
abdominal en forma de
T invertida.
Procedimiento
12. Se localizó el estomago e
identificó la 1° porción del
ID.
Se realizó una pequeña
incisión después del
esfínter pilórico, e introdujo
la cánula de entrada. Se
fijó con hilo.
Se realizó una pequeña
incisión en la porción
anterior a la válvula
ileocecal, e introdujo la
cánula de salida. Se fijó
con hilo.
Procedimiento
Cánula de entrada
Cánula de
salida
CIRCUITO CERRADO
13. Se conectó la cánula de
entrada a una botella con
400 mL de solución salina
normal
Se realizó un lavado de
intestinal
El extremo libre de la
cánula de salida vertió el
líquido en un vaso
químico, para la
recolección del
perfundido.
Procedimiento
14. Se reemplazó la botella de
solución salina normal por
solución Ringer-Krebs fosfato
a pH 3 (Rata 2) y a pH 8 (Rata
1), que contiene el salicilato de
sodio.
Se reguló el goteo hasta
obtener una velocidad de
infusión de 10-20 gotas/min.
Se recolectó una solución
perfundida durante 20 minutos
y se desechó.
Se utilizó la misma velocidad
de perfusión durante 10
minutos más. Se obtuvo el
perfundido final.
Procedimiento
15. Se preparó las
muestras del perfundido
final para realizar las
determinaciones
colorimétricas, de
acuerdo al fármaco
ensayado.
Procedimiento
21. Las propiedades físico-químicas del fármaco influyeron en
la farmacocinética del mismo.
El pH del medio afecta el grado de ionización de un fármaco,
y consecuentemente su absorción. Se demostró que si el
fármaco se encuentra a un pH que le permita permanecer en
su forma no ionizada o liposoluble la absorción del fármaco
será mayor.
El Salicilato de Sodio (ác. débil) se ionizará más en un medio
con un pH básico, y mientras que en un medio con pH ácido
habrá mayor fracción no ionizada, permitiendo el paso a
través de las membranas y por tanto aumentado el porcentaje
de absorción.
Existen otros factores que modifican la absorción del fármaco
como la vía de administración, la irrigación del área y la
concentración del fármaco.
Conclusiones
Hinweis der Redaktion
SEM de microvellosidades del ID
GABA: ácido gammaaminobutírico
Pentobarbital sódico: Como el resto de los barbitúricos, actúa como depresor “no selectivo” del SNC y su acción parece estar relacionada con la capacidad de aumentar o mimetizar la acción inhibidora sináptica del ácido gamma aminobutírico (GABA). Puede producir cambios en el humor, que varían de la excitación a la sedación, a la hipnosis y finalmente al coma profundo. La sobredosis puede ser mortal. Como sedante-hipnótico el pentobarbital deprime la corteza sensorial, disminuye la actividad motora, altera la función cerebral y produce somnolencia, sedación e hipnosis.
ID: Intestino delgado
Pentobarbital: Se une al receptor GABA-A (Gabamimético), aumentando el tiempo de apertura del canal de cloro, produciendo así una mayor inhibición en la conducción del impulso nervioso. También es un GABAmodulador.
Diazepam: Se une a receptor GABA-A, aumentado la frecuencia de apertura de los canales de cloro (Gabamodulador).
Se produjo un SINERGISMO DE POTENCIACIÓN
Sedación: se producía ataxia
Hipnosis
Anestesia: no tiene sensibilidad
Muerte
Ambos fármacos se combinaron con solución salina, con el objetivo de darle volumen a las pequeñas dosis utilizadas.
IM: intramuscular
IP: Intraperitoneal
Cuando se le administró el Diazepam a las ratas, se esperó alrededor de 5 minutos para luego administrar el Pentobarbital sódico.
Al aplicar estos fármacos se anestesio a la rata.
Se limpio el área constantemente con un algodón impregnado con solución salina.
Durante la operación se procedió a identificar el esfínter pilórico y la válvula ileocecal.
ID: intestino delgado
Dicho perfundido del lavado intestinal se debe desechar y posteriormente se debe enjuagar el mismo vaso químico para su uso en la recolección de muestras experimentaes.
Ph usado para la rata 1: 3.04
Ph usado para la rata 2: 8.38
El Nitrato férrico al 1% se uso como colorante en las pruebas colorimétricas.
D.O.= Densidad óptica
C= Concentración
Recordar que la fracción que se absorber es la fracción NO IONIZADA. Y la fracción que se excreta debe ser IONIZADA.
Recordar que el salicilato es un ácido débil, por lo tanto se debe ABSORBER mejor en medios ácidos.
Ciertos valores son inferiores a una unidad por lo que puede no verse la barra correspondiente.
Propiedades físico-químicas: pKa, tamaño de la molécula, si es un ácido o base.
Las características del epitelio intestinal (presencia de microvellosidades) aumenta la superficie de absorción.