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UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
FACULTAD: INGENIERÍA
CARRERA PROFESIONAL: INGENIERÍA AMBIENTAL
NOMBRE DEL CURSO
BIOTECNOLOGÍA
TAREA N° 01
“TECNICA DE CONSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS POR
LIOFILIZACIÓN”
ENTREGADO POR:
SIORY ESTEFANY TICONA VILCA
REVISADO POR:
Dr. HEBERT HERNAN SOTO GONZALES
Mayo del 2022
ILO – PERÚ
1. INTRODUCCIÓN
Desde tiempos remotos los microorganismos han sido empleados como materiales esenciales de
trabajo en la obtención de medicamentos (antibióticos, vitaminas y aminoácidos), elaboración de
alimentos (pan, queso, leche, bebidas y licores) y fabricación de solventes y reactivos, entre otras
aplicaciones. El creciente uso de estos materiales biológicos en la biotecnología y la protección
medioambiental han fortalecido la necesidad de mantener los cultivos microbianos de manera que
las propiedades que los hacen importantes permanezcan estables. Por ello, hoy en día es
importante la conservación de microorganismos y sus distintos métodos que asegure en mayor
proporción la estabilidad genética, viabilidad y pureza de los microorganismos. En este trabajo se
revisará una de las muchas técnicas utilizadas en la conservación de los microorganismos, esta es
la técnica de liofilización la cuál se ha convertido en uno de los métodos de conservación elegidos
a nivel mundial en industrias de alimentos, farmacéutica y en la medicina, en donde tomó gran
fuerza, pues así eran conservadas las vacunas por largos periodos de tiempo.
2. ANTECEDENTES HISTÓRICOS DE LA LIOFILIZACIÓN
Abarcando un poco su historia, la liofilización tuvo su origen en el imperio Inca, alrededor del
año 200 a.C., en la zona del altiplano andino a 4.000 msnm, el cual era utilizado para la fabricación
del chuño (papa deshidratada) y charqui (carne de llama deshidratada); posteriormente, los
vikingos utilizaron este proceso para la conservación de pescado. El proceso de liofilización fue
re-inventado en 1906 por Arsène d’Arsonval y Frédéric Bordas, mientras que en el año 1911
surgen los primeros métodos de liofilización para bacterias, empleando suero y leche como
agentes protectores. La técnica de liofilización se desarrolla en forma industrial durante la
Segunda Guerra Mundial y fue aplicada, fundamentalmente, a la liofilización de plasma humano
y producción de penicilina.
3. ¿EN QUE CONSISTE ESTA TÉCNICA DE CONSERVACIÓN DE
MICROORGANISMOS?
Este es un método de largo plazo, que se basa en eliminar el agua por sublimación y
posteriormente se realiza un vacío, de manera que se evita la contaminación de la cepa y la
variabilidad genética, se han realizado variaciones a este método convencional por ello se han
derivado modificaciones como por ejemplo el micro secado, el cual se diferencia en que no hay
previa congelación de la suspensión microbiana, esta se pone sobre el papel filtro y luego es
sometida al proceso de secado al vacío. Este proceso consta de cuatro grandes etapas:
Recepción de cultivo
microbiano
Verificación de pureza del
microorganismo
Liofilización de pureza del
microorganismo
Evaluación de viabilidad
pos-liofilización
Como ya se mencionó anteriormente, la liofilización consiste en la eliminación del agua presente
en una sustancia congelada, a través de la sublimación del hielo; es decir, el agua en estado sólido
pasa a estado gaseoso directamente, sin pasar por estado líquido. Para lograr la sublimación del
agua congelada, la temperatura y la presión parcial del vapor de agua deben ser inferiores a la del
punto triple del agua, es decir menor que 0,0099 °C y menor que 0,006 atm (610,5 Pa ) y, cuando
la muestra se calienta, el hielo se sublima directamente a vapor sin pasar por estado líquido
4. EQUIPO PARA LA LIOFILIZACIÓN
El liofilizador es el encargado de deshidratar una muestra a través de la sublimación. El
liofilizador se compone de 4 partes fundamentales:
a. Cámara de secado: Donde se produce la sublimación del
solvente contenido en la muestra congelada
b. Condensador: Donde ocurre la condensación del vapor
del solvente sublimado en la cámara de secado.
c. Sensor de temperatura y vapor: Permite monitorear estos
parámetros en tiempo real.
d. Manivela de sellado: Permite bajar las bandejas
superiores y sellar los viales que se encuentran dentro
del equipo.
5. CONCLUSIONES
- El proceso de liofilización tiene varias ventajas, por ejemplo, tiene un bajo costo de
mantenimiento debido a que los microorganismos liofilizados son preservados en viales
o ampollas de vidrio.
- Para utilizar esta técnica se debe seguir las etapas establecidas, así como asegurarse la
temperatura del liofilizador.
- Para utilizar esta técnica hay que asegurarse que el microorganismo sea tolerante a la
liofilización, de lo contrario es necesario desarrollar nuevos protocolos para lograr este
objetivo.
a
b
c
d
6. BIBLIOGRAFÍA
- Cecilia Santelices S. Jean Franco Castro F. Preservación de microorganismos por
liofilización.
https://biblioteca.inia.cl/bitstream/handle/20.500.14001/6945/NR42412.pdf?sequence=1
1&isAllowed=y
- Weng Alemán, Zulia, Esther Díaz Rosa, Olvido, & Álvarez Molina, . Inalvis. (2005).
Conservación de microorganismos: ¿qué debemos conocer?. Revista Cubana de Higiene
y Epidemiología, 43(3) Recuperado en 09 de mayo de 2022, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-
30032005000300006&lng=es&tlng=es.

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  • 1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA FACULTAD: INGENIERÍA CARRERA PROFESIONAL: INGENIERÍA AMBIENTAL NOMBRE DEL CURSO BIOTECNOLOGÍA TAREA N° 01 “TECNICA DE CONSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS POR LIOFILIZACIÓN” ENTREGADO POR: SIORY ESTEFANY TICONA VILCA REVISADO POR: Dr. HEBERT HERNAN SOTO GONZALES Mayo del 2022 ILO – PERÚ
  • 2. 1. INTRODUCCIÓN Desde tiempos remotos los microorganismos han sido empleados como materiales esenciales de trabajo en la obtención de medicamentos (antibióticos, vitaminas y aminoácidos), elaboración de alimentos (pan, queso, leche, bebidas y licores) y fabricación de solventes y reactivos, entre otras aplicaciones. El creciente uso de estos materiales biológicos en la biotecnología y la protección medioambiental han fortalecido la necesidad de mantener los cultivos microbianos de manera que las propiedades que los hacen importantes permanezcan estables. Por ello, hoy en día es importante la conservación de microorganismos y sus distintos métodos que asegure en mayor proporción la estabilidad genética, viabilidad y pureza de los microorganismos. En este trabajo se revisará una de las muchas técnicas utilizadas en la conservación de los microorganismos, esta es la técnica de liofilización la cuál se ha convertido en uno de los métodos de conservación elegidos a nivel mundial en industrias de alimentos, farmacéutica y en la medicina, en donde tomó gran fuerza, pues así eran conservadas las vacunas por largos periodos de tiempo. 2. ANTECEDENTES HISTÓRICOS DE LA LIOFILIZACIÓN Abarcando un poco su historia, la liofilización tuvo su origen en el imperio Inca, alrededor del año 200 a.C., en la zona del altiplano andino a 4.000 msnm, el cual era utilizado para la fabricación del chuño (papa deshidratada) y charqui (carne de llama deshidratada); posteriormente, los vikingos utilizaron este proceso para la conservación de pescado. El proceso de liofilización fue re-inventado en 1906 por Arsène d’Arsonval y Frédéric Bordas, mientras que en el año 1911 surgen los primeros métodos de liofilización para bacterias, empleando suero y leche como agentes protectores. La técnica de liofilización se desarrolla en forma industrial durante la Segunda Guerra Mundial y fue aplicada, fundamentalmente, a la liofilización de plasma humano y producción de penicilina. 3. ¿EN QUE CONSISTE ESTA TÉCNICA DE CONSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS? Este es un método de largo plazo, que se basa en eliminar el agua por sublimación y posteriormente se realiza un vacío, de manera que se evita la contaminación de la cepa y la variabilidad genética, se han realizado variaciones a este método convencional por ello se han derivado modificaciones como por ejemplo el micro secado, el cual se diferencia en que no hay previa congelación de la suspensión microbiana, esta se pone sobre el papel filtro y luego es sometida al proceso de secado al vacío. Este proceso consta de cuatro grandes etapas: Recepción de cultivo microbiano Verificación de pureza del microorganismo Liofilización de pureza del microorganismo Evaluación de viabilidad pos-liofilización
  • 3. Como ya se mencionó anteriormente, la liofilización consiste en la eliminación del agua presente en una sustancia congelada, a través de la sublimación del hielo; es decir, el agua en estado sólido pasa a estado gaseoso directamente, sin pasar por estado líquido. Para lograr la sublimación del agua congelada, la temperatura y la presión parcial del vapor de agua deben ser inferiores a la del punto triple del agua, es decir menor que 0,0099 °C y menor que 0,006 atm (610,5 Pa ) y, cuando la muestra se calienta, el hielo se sublima directamente a vapor sin pasar por estado líquido 4. EQUIPO PARA LA LIOFILIZACIÓN El liofilizador es el encargado de deshidratar una muestra a través de la sublimación. El liofilizador se compone de 4 partes fundamentales: a. Cámara de secado: Donde se produce la sublimación del solvente contenido en la muestra congelada b. Condensador: Donde ocurre la condensación del vapor del solvente sublimado en la cámara de secado. c. Sensor de temperatura y vapor: Permite monitorear estos parámetros en tiempo real. d. Manivela de sellado: Permite bajar las bandejas superiores y sellar los viales que se encuentran dentro del equipo. 5. CONCLUSIONES - El proceso de liofilización tiene varias ventajas, por ejemplo, tiene un bajo costo de mantenimiento debido a que los microorganismos liofilizados son preservados en viales o ampollas de vidrio. - Para utilizar esta técnica se debe seguir las etapas establecidas, así como asegurarse la temperatura del liofilizador. - Para utilizar esta técnica hay que asegurarse que el microorganismo sea tolerante a la liofilización, de lo contrario es necesario desarrollar nuevos protocolos para lograr este objetivo. a b c d
  • 4. 6. BIBLIOGRAFÍA - Cecilia Santelices S. Jean Franco Castro F. Preservación de microorganismos por liofilización. https://biblioteca.inia.cl/bitstream/handle/20.500.14001/6945/NR42412.pdf?sequence=1 1&isAllowed=y - Weng Alemán, Zulia, Esther Díaz Rosa, Olvido, & Álvarez Molina, . Inalvis. (2005). Conservación de microorganismos: ¿qué debemos conocer?. Revista Cubana de Higiene y Epidemiología, 43(3) Recuperado en 09 de mayo de 2022, de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561- 30032005000300006&lng=es&tlng=es.