VECTORES DE CLONACION

1. VECTORES DE
CLONACION
Victor Javier Cano Calderón
6-9

2. VECTORES DE CLONACION
• Son moléculas de ADN que aceptan fragmentos de ADN y
replican los fragmentos de ADN insertados
• Difieren en lo que respecta a las células huésped en las que
pueden introducirse y en el tamaño de los insertos que pueden
transportar

3. VECTORES DE CLONACION
• Propiedades fundamentales comunes
• Contiene varios sitios de restricción
• Deben ser introducidos en células huésped para permitir la replicación
independiente del ADN del vector
• El vector debe transportar un gen marcador seleccionable
• Incorporan secuencias específicas que permiten la secuenciación del ADN
insertado
• El vector y su fragmento de ADN insertado deben poder aislarse fácilmente de
la célula huésped

4. VECTORES PLASMIDICOS
BACTERIANOS
• Plásmido
• Moléculas de ADN de doble
cadena extracromosómicas,
que se replican
independientemente de los
cromosomas dentro delas
células bacterianas

5. VECTORES PLASMIDICOS
BACTERIANOS
• Se introducen en bacterias mediante
transformación: utilizan 2 técnicas principales
• Tratar las células con iones de calcio y utilizar un
choque de calor
• Electroporación, utiliza un breve pulso eléctrico de
gran intensidad

8. VECTORES FAGICOS
• Cepas genéticamente modificadas del bacteriófago λ
• Pueden transportar insertos de hasta 45 kb
• Dentro de las bacterias, los vectores se replican y forman muchas
copias del fago infectivo
• Provocan la lisis de sus células huésped bacterianas, dando lugar a las
manchas denominadas calvas de las que se puede aislar a los fagos

9. OTROS TIPOS DE VECTORES DE
CLONACION
• Cromosomas artificiales bacterianos (BAC) y los cromosomas
artificiales de levadura (YAC)
• La cartografía y análisis de genomas eucarióticos de gran tamaño
requirió clonar vectores que pudieran transportar fragmentos de
ADN de muy gran tamaño
• BAC: 100 y 300 kilobases de longitud
• YAC: tamaño comprendido entre 230 kb 1.900 kb,; permite
clonar insertos de ADN de entre 100 y 1.000 kb

10. BIBLIOGRAFIA