CLASE DE MICROBIOLOGIA

1. MICROBIOLOGIA
UNIDAD 11I
TEMA 11
BACILOS GRAM POSITIVOS
ANAEROBIOS
NO ESPORULADOS
Dr. Mario Javier Melgarejo Careaga
2021

2. ACTINOMYCES
 Son bacilos grampositivos anaerobios facultativos o anaerobios estrictos.
 No son acidorresistentes
 Crecen lentamente en cultivos y suelen producir infecciones crónicas que se desarrollan con lentitud.
 En las muestras clínicas o cuando se aíslan en cultivo forman habitualmente unos delicados filamentos o
hifas.
 Son bacterias verdaderas debido a que carecen de mitocondrias y membrana nuclear, se reproducen por
fisión y se inhiben con penicilina, pero no con los antibióticos antifúngicos.
 Especies: Actinomyces israelii, Actinomyces meyeri, Actinomyces naeslundii, Actinomyces odontolyticus y
Actinomyces viscosus son los responsables de la mayoría de las infecciones en el ser humano.
 Sólo A. meyeri es anaerobio estricto.
 Las otras especies crecen mejor en condiciones anaerobias pero pueden desarrollarse anaerobiamente.

3. PATOGENIA
 Colonizan las vías respiratorias superiores, el aparato digestivo y el aparato genital femenino.
 Estas bacterias no están normalmente presentes en la superficie cutánea.
 Tienen un bajo potencial de virulencia, y únicamente provocan enfermedad cuando las barreras mucosas
normales se alteran por traumatismos, cirugía o infección.

4. PATOGENIA
 La enfermedad se conoce como Actinomicosis
 Se caracteriza por el desarrollo de lesiones granulomatosas crónicas que se tornan supurativas y dan
lugar abscesos conectados entre sí mediante fístulas
 En los abscesos y en los tractos fistulosos se constata con frecuencia la presencia de colonias
macroscópicas de microorganismos que remedan granos de arena.
 Estas colonias, llamadas gránulos de azufre por su aspecto amarillo o naranja, son masas de
microorganismos filamentosos unidos entre sí por fosfato cálcico
 Las zonas de supuración se rodean de un tejido fibroso de granulación, lo que confiere una consistencia
dura o leñosa a la superficie que recubre los tejidos afectados.

5. EPIDEMIOLOGIA
 Infección endógena
 Cervicofaciales afectan a individuos con una higiene bucodental deficiente, o bien a aquellas que han
sido sometidas a un procedimiento dental invasivo o a un traumatismo bucal.
 Están presentes en la cavidad bucal invaden los tejidos enfermos e inician el proceso infeccioso.
 Torácicas tienen generalmente antecedentes de aspiración, con lo que la enfermedad afecta en una
primera fase a los pulmones y posteriormente se extiende hacia los tejidos adyacentes.
 Abdominales suelen ocurrir en los sujetos que han sido sometidos a una intervención quirúrgica
digestiva o han sufrido un traumatismo en el intestino.
 Pélvica puede ser una manifestación secundaria de la actinomicosis abdominal o puede ser una
infección primaria en una mujer portadora de un dispositivo intrauterino
 En el SNC representan generalmente la diseminación hematógena desde otros tejidos infectados, como
los pulmones.

6. CUADRO CLINICO
 La mayoría son de tipo cervicofacial , puede presentarse como una infección piógena aguda o, más
frecuentemente, como un cuadro de evolución lenta y relativamente indoloro.
 El hallazgo de inflamación tisular con fibrosis y cicatrización, así como la aparición de fístulas de drenaje
a lo largo del ángulo de la mandíbula y del cuello, debe alertar al médico de la posibilidad de
actinomicosis.
 Los síntomas de la actinomicosis torácica son inespecíficos.
 Se pueden formar abscesos en el tejido pulmonar en la etapa inicial del proceso, y posteriormente
diseminarse a los tejidos adyacentes conforme la enfermedad progresa.

7. CUADRO CLINICO
 La actinomicosis abdominal se puede extender por todo el abdomen, y podría llegar a afectar a casi
cualquier órgano.
 La actinomicosis pélvica puede aparecer como una forma relativamente benigna de vaginitis, o más
frecuentemente, puede provocar una notable destrucción de tejidos, con formación de abscesos
tuboováricos u obstrucción ureteral.
 La manifestación del SNC es un absceso cerebral solitario, pero también se pueden observar meningitis,
empiema subdural y abscesos epidurales.

8. DIAGNOSTICO
 La confirmación resulta complicada.
 Puesto que los microorganismos se concentran en los gránulos de azufre y escasean en los tejidos
afectados, se debe recoger una gran cantidad de tejido o de pus.
 Si se detectan gránulos de azufre en una fístula o en un tejido, el granulo se debe aplastar entre dos
portaobjetos de cristal para ser teñido y observado al microscopio.
 Se puede apreciar la presencia de bacilos grampositivos delgados y ramificados en la periferia de los
gránulos.
 Son exigentes y crecen lentamente en condiciones anaerobias; el aislamiento de estas bacterias puede
requerir de un período de incubación de 2 o más semanas.
 Las colonias son blancas y tienen una superficie en forma de cúpula que se puede tornar irregular
después de la incubación durante una semana o más, lo que recuerda a la parte superior de una muela

9. DIAGNOSTICO
 Las especies individuales de Actinomyces se pueden diferenciar mediante pruebas bioquímicas; sin
embargo, este procedimiento puede llevar tiempo.
 Generalmente, tan sólo es necesario determinar que la cepa pertenece al género Actinomyces.
 La recuperación de actinomicetos a partir de hemocultivos se debe evaluar de manera cuidadosa.
 La mayor parte de las cepas representa una bacteriemia temporal carente de significación procedente de
la bucofaríngea o el aparato digestivo.
 Si la cepa tiene relevancia clínica, se deben obtener indicios de daño tisular.

10. CUTIBACTERIUM
 Antes denominadas Propionibacterium
 Son bacilos grampositivos pequeños que se disponen generalmente en
cadenas cortas o en agregados
 Se suelen encontrar en la piel (en contraposición con Actinomyces), la
conjuntiva, el oído externo, la bucofaringe y el aparato genital
femenino.
 Los microorganismos son anaerobios o aerotolerantes, inmóviles,
catalasa-positivos y capaces de fermentar hidratos de carbono,
produciendo como principal residuo ácido propiónico.
 Las dos especies que se aíslan con una frecuencia mayor son
:Cutibacterium acnés y Cutibacterium propionicus.

11. CUTIBACTERIUM
 C. acnés origina dos tipos de infecciones:
1. El acné (como su propio nombre indica) en adolescentes y adultos jóvenes
2. Infecciones oportunistas en pacientes portadores de prótesis (p. ej., válvulas cardíacas artificiales o
prótesis articulares), o dispositivos intravasculares (p. ej., catéteres, derivaciones del líquido
cefalorraquídeo).
 Las Cutibacterium se aíslan también de forma frecuencia en los hemocultivos, pero este hallazgo suele
ser una contaminación por bacterias colonizadoras de la piel que recubre el punto de venopunción.

12. CUTIBACTERIUM
 La función principal de C. acnés en el acné radica en la estimulación de la respuesta inflamatoria.
 La producción de péptidos de bajo peso molecular por parte de las bacterias que subsisten en los
folículos sebáceos atrae a los leucocitos.
 Se fagocitan las bacterias, lo que va seguido de la liberación de enzimas hidrolíticas (lipasas, proteasas,
neuraminidasa e hialuronidasa) que estimulan una respuesta inflamatoria localizada.
 Cuando se inyecta en los animales de experimentación, C propionicus produce una canaliculitis lacrimal
(inflamación del conducto lagrimal) y abscesos.

13. CUTIBACTERIUM
 Las Cutibacterium pueden desarrollarse en la mayoría de los medios de cultivo, aunque puede
llevar entre 2 y 5 días que se haga evidente el crecimiento.
 Se debe tener cuidado para evitar la contaminación de las muestras por los microorganismos que
normalmente se encuentran en la piel.
 La significación de la recuperación de una cepa se debe interpretar teniendo en cuenta la
presentación clínica (p. ej., un catéter u otro cuerpo extraño puede servir de foco para estos
patógenos oportunistas).

14. CUTIBACTERIUM
 El acné no está relacionado con la eficacia de la limpieza de la piel, debido a que las lesiones se
forman en el interior de los folículos sebáceos.
 Por este motivo, el acné se trata fundamentalmente mediante la aplicación tópica de peróxido de
benzoico y de antibióticos.
 Eritromicina,Doxiciclina y clindamicina, en el tratamiento.

15. MOBILUNCUS
 Son bacilos gram variables o gramnegativos anaerobios estrictos de
morfología curvada con extremos afilados.
 Se clasifican como bacilos grampositivos debido a que:
1. Poseen una pared celular grampositiva
2. Carecen de endotoxina
3. Son sensibles a vancomicina, clindamicina, eritromicina y ampicilina,
pero resistentes a colistina.
 Exigentes desde el punto de vista nutricional, y crecen lentamente
incluso en medios enriquecidos complementados con suero de conejo
o de caballo.

16. MOBILUNCUS
 En el ser humano se han identificado dos especies, Mobiluncus curtisii y
Mobiluncus mulieris.
 Colonizan el aparato genital femenino en un número bajo, pero son
abundantes en las mujeres con vaginosis bacteriana (vaginitis).
 Su aspecto microscópico constituye un marcador útil de esta entidad,
pero no está clara la función precisa de estos microorganismos en la
patogenia de la vaginosis bacteriana.

17. LACTOBACILLUS
 Son bacilos anaerobios facultativos o anaerobios estrictos.
 Se encuentran formando parte de la flora normal de la cavidad bucal, el estómago, el intestino y el
aparato genitourinario.
 Suelen aislar de las muestras de orina y en los hemocultivos.
 Más frecuentes en la uretra, su recuperación en los urocultivos procede invariablemente de la
contaminación de la muestra, incluso cuando está presente un número elevado de microorganismos.
 La razón de que los lactobacilos rara vez produzcan infecciones en el aparato urinario es su incapacidad
para crecer en la orina.

18. LACTOBACILLUS
 La invasión hematológica tiene lugar en cualquiera de las tres situaciones siguientes:
1) Bacteriemia transitoria de origen genitourinario
2) Endocarditis,
3) Septicemia oportunista en un paciente inmunodeprimido.
 El tratamiento de la endocarditis y de las infecciones oportunistas es difícil debido a que los lactobacilos
son resistentes a vancomicina

19. BIFIDOBACTERÍUM Y EUBACTERÍUM
 Los géneros Bifidobacteríum y Eubacteríum se encuentran con frecuencia en la
bucofaríngea, el intestino grueso y la vagina.
 Estas bacterias se pueden aislar en las muestras clínicas, pero tienen un potencial de
virulencia muy bajo
 Generalmente representan una contaminación carente de significación clínica.
 La confirmación de su implicación etiológica en una infección exige el aislamiento
repetido de un gran número de muestras y la ausencia de otros microorganismos
patógenos.

20. MICROBIOLOGIA
BACILOS GRAM NEGATIVAS
ANAEROBIOS

21.  Los anaerobios gramnegativos más importantes que colonizan las vías respiratorias superiores, el
aparato genitourinario y el aparato digestivo de los humanos son los bacilos de los géneros
Bacteroides, Fusobacterium, Porphyromonas y Prevotella.
 Los anaerobios son las bacterias predominantes en cada una de estas localizaciones, sobrepasando el
número de bacterias aerobias de 10 a 1000 veces.
 La diversidad de las especies anaerobias es amplia, y se cree que hasta 500 especies diferentes
colonizarían el bolsillo periodontal y que muchas de ellas son anaerobias.
 A pesar de la abundancia y de la diversidad de estas bacterias, la mayoría de las infecciones están
producidas por un grupo relativamente pequeño de especies .
 Entre estos patógenos, el más importante es Bacteroides fragilis, prototipo del patógeno anaerobio
endógeno.

22. BACTEROIDES
 Una característica compartida por las especies es la estimulación de su desarrollo por bilis al 20%.
 Por el contrario, las especies sensibles a la bilis se han clasificado de nuevo en otros géneros, como
Porphyromonas y Prevotella
 B. fragilis, la especie más importante de este género
 Es pleomorfo en forma y tamaño y remeda una población microbiana mixta cuando se examina de
forma accidental en una tinción Gram

23. BACTEROIDES
 La mayoría de los gram negativos anaerobios se tiñen débilmente
con la tinción de Gram
 Estructura de pared celular habitual de los gramnegativos, que
puede estar rodeada de una cápsula de polisacáridos.
 Un componente fundamental de la pared celular es un
lipopolisacárido (LPS) de superficie.
 Los cocos anaerobios gramnegativos rara vez se aíslan de las
muestras clínicas, excepto cuando se presentan como
contaminantes.

24. PATOGENIA
 Son relativamente pocos los responsables de producir enfermedades.
 Bacteroides distasonis y Bacteroides thetaiotaomicron se encuentran en el aparato digestivo
 La mayoría de las infecciones intraabdominales se asocia a B. fragilis
 La mayor virulencia de este y de otros anaerobios patógenos se atribuye a varios factores de virulencia
que facilitan la adhesión de los microorganismos a los tejidos del organismo anfitrión, la protección
frente a la respuesta inmunitaria del anfitrión y la destrucción tisular

25. PATOGENIA
ADHESINAS
 B. fragilis y las cepas de Prevotella melaninogenica capaces de adherirse a la superficie peritoneal de
forma más eficaz que otros anaerobios debido a que su superficie está recubierta de una cápsula de
polisacáridos.
 Bacteroides fragilis y otras especies del género Bacteroides, al igual que Porphyromonas gingivales, se
pueden adherir a las células epiteliales por medio de las fimbrias

26. EPIDEMIOLOGIA
 Colonizan el organismo humano en un número muy elevado.
 Funciones de estabilización de la flora bacteriana residente y favorece en la digestión de la comida.
 Producen enfermedades graves cuando migran desde sus nichos endógenos a zonas que normalmente
son estériles
 La diferencia se relaciona con el potencial de virulencia de los microorganismos patógenos, y su
capacidad para aumentar desde un número relativamente bajo en las superficies mucosas hasta
convertirse en los microorganismos predominantes en el foco de la infección.
 B.fragilis se suele asociar a infecciones pleuropulmonares, intraabdominales y genitales.
 Constituye menos del 1% de la microflora colónica, y rara vez se aísla de la bucofaríngea o del aparato
genital de los individuos sanos a no ser que se usen técnicas muy selectivas.

27. INFECCIONES DELTRACTO RESPIRATORIO
 Las infecciones crónicas de los senos y de los oídos, y las infecciones periodontales, presentan una
mezcla de anaerobios gramnegativos entre los que se aíslan los géneros Prevotella, Porphyromonas,
Fusobacterium y Bacteroides no fragilis.
 Los anaerobios se asocian con una frecuencia menor a infecciones de las vías respiratorias inferiores
excepto en aquellos sujetos con antecedentes de aspiración de secreciones orales.

28. ABSCESO CEREBRAL
 Las infecciones cerebrales por anaerobios se asocian de forma característica a antecedentes de sinusitis
o de otitis crónica.
 Estos datos se confirman por medio de indicios radiológicos de una extensión directa al cerebro.
 Una causa menos frecuente de estas infecciones es la diseminación bacteriemica desde un foco
pulmonar.
 En este caso suelen estar presentes múltiples abscesos.
 Los más frecuentes pertenecen a los géneros Prevotella, Porphyromonas y Fusobacterium

29. INFECCIONES INTRAABDOMINALES
 A pesar de la diversidad de poblaciones bacterianas que colonizan el
aparato digestivo, son relativamente pocas las especies que se
asocian a las infecciones intraabdominales.
 Los anaerobios se aíslan en casi todas estas infecciones, siendo
B.fragilis el microorganismo más frecuente, ocasionando abscesos
hepáticos muy frecuentemente
 Otros anaerobios importantes son B. thetaiotaomicron y P.
melaninogenica, así como los cocos grampositivos anaerobios y
aerobios.

30. INFECCIONES GINECOLÓGICAS
 Responsables de producir infecciones en el aparato genital femenino
 Se puede aislar una gran variedad de anaerobios, Prevotella bivia
 B. fragilis suele estar implicado en la formación de abscesos.

31. INFECCIONES CUTÁNEAS Y DE PARTES BLANDAS
 Aunque las bacterias gramnegativas anaerobias no forman parte de la flora normal de la piel pueden
introducirse por una mordedura o por la contaminación de una superficie que haya sufrido un
traumatismo.
 Pueden colonizar o progresar rápidamente a una enfermedad que ponga en peligro la vida, como la
mionecrosis
 B. fragilis se asocia con una frecuencia mayor a una enfermedad importante.

32. BACTERIEMIA
 En otros tiempos responsables de más del 20% de las bacteriemias clínicamente significativas
 Actualmente 1% a 3% de estas infecciones.
 Esto se pueda atribuir al uso generalizado de antibióticos de amplio espectro.
 El anaerobio que se aísla con una frecuencia mayor en los hemocultivos es B. fragilis.

33. GASTROENTERITIS
 Las cepas de B. fragilis productoras de enterotoxinas pueden causar una diarrea acuosa de resolución
espontánea.
 La mayor parte de las infecciones afectan a niños menores de 5 años de edad, si bien la enfermedad se
ha descrito también en la población adulta.

34. CUADROS CLINICOS
Abscesos cerebrales
 Peptoestreptococos, Fusobacterium nucleatum y otros
Infecciones bucofaríngeas
 Anaerobios bucofaríngeos; especies de los géneros Actinomyces, Prevotella melaninogenica y
especies del género Fusobacterium
Infecciones pleuropulmonares
 Peptoestreptococos; especies de Fusobacterium; Prevotella melaninogenica, Bacteroides fragilis en
20-25%
Infecciones intraabdominales
 Absceso pulmonar, anaerobios mixtos en 40-90%; microorganismos facultativos
 Abscesos abdominales; Bacteroides fragilis; otra microflora digestiva

35. CUADROS CLINICOS
Infecciones genitales femeninas
 Abscesos vulgares: Peptoestreptococos y otros
 Abscesos tuboováricos y pélvicos: Prevotella bivia y Prevotella disiens; Peptoestreptococos; otros
Piel, tejidos blandos e infecciones óseas
 Microflora anaerobia mixta; Propionibacterium acnes
Bacteriemia
 Bacteroides fragilis; Peptoestreptococos; Cutibacterium;
 Fusobacteria; Clostridium; otros
Endocarditis
 Bacteroides fragilis, Actinomyces

36. DIAGNOSTICO
 Se pueden teñir débilmente o hacerlo de forma irregular, el hallazgo de bacilos gramnegativos
pleomorfos e irregulares puede aportar una información inicial valiosa.
CULTIVO
 Se deben recoger y transportar en un sistema carente de oxígeno
 Es importante recoger las muestras de modo que no se contaminen.
 Se deben mantener en un ambiente húmedo, ya que la desecación conlleva una pérdida significativa de
las poblaciones bacterianas.
 La mayoría crece rápidamente y se deberían detectar tras un período de incubación de 2 días;
 Es difícil aislar todas las bacterias clínicamente significativas debido a la presencia de diferentes
microorganismos en las infecciones polimicrobianas.
 El uso de medios selectivos ha facilitado el aislamiento de los anaerobios más importantes
 Los medios enriquecidos con sangre usada estimulan la producción de pigmentos en microorganismos
como Prevotella

37. IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA
 La identificación del grupo B. fragilis se puede efectuar por medio
1) La tinción de Gram y la morfología de las colonias
2) La resistencia a kanamicina, vancomicina y colistina,
3) La estimulación del crecimiento con bilis al 20%.
 La identificación definitiva de este grupo y de otros anaerobios gramnegativos se fundamenta en el uso
de sistemas bioquímicos .

38. TRATAMIENTO
 El tratamiento antibiótico combinado con la intervención quirúrgica es el enfoque fundamental para
tratar las infecciones anaeróbicas graves.
 Casi todos los miembros del grupo B. fragilis, muchas especies de Prevotella y Porphyromonas, y
algunas cepas de Fusobacterium sintetizan |3-Iactamasas.
 Estas enzimas confieren resistencia a penicilina y a muchas cefalosporinas.
 Los antibióticos dotados de la mejor actividad frente a los bacilos anaerobios gramnegativos son
metronidazol, los carbapenémicos (como Imipenem) y los inhibidores de |3-lactamasas P-lactámicas
(como Piperacilina-tazobactam).
 La prevalencia de la resistencia a clindamicina de Bacteroides, la cual está codificada en un plásmido, se
ha incrementado; una media del 20% al 25% de las cepas son ahora resistentes.