DNA vaccines

1. Mariette Viladomat Jasso

2. VANGUARDIA
Cáncer.- Clínicamente efectivas
inmunoterapias pasivas.
Tratamientos con anticuerpos
Células citotóxicas Vs Tumores
Dirigir respuestas inmune a infecciones
persistentes y a células cancerígenas.
META
Inducir efectores inmunes y
establecer memoria
inmunológica capaz de
mantener una protección
constante a cáncer
emergente.|

3. Excluyendo cáncer asociado a virus, los antígenos potenciales tienen, generalmente,
muy baja inmunogenicidad, y son difíciles de determinar/catacterizar.
PROBLEMA
POSIBLES BLANCOS
Hasta la fecha, los investigadores se han enfocado en antígenos
específicos del tumor / asociados al tumor.
ESPECÍFICOS
ASOCIADOS
Antígenos que se expresan únicamente en tumores, pudiendo ser
diferentes tipos de tumores, pero nunca en células sanas.
Antígenos de Idiotipos de células B tumorales.
Cancer/testis antigens (CTA).
Antígenos que se expresan en células sanas y en células tumorales.
Cánceres epiteliales (melanoma, próstata).
Inmunidad efectiva podría dañar células sanas.

4. Dichos antígenos, incluso con su baja efectividad, han llegado a representar un
control de tumores benéfico en dadas ocasiones clínicas.
Sin embargo, en otros casos, la respuesta ha conllevado a una tolerancia
regulada principalmente por T reguladoras. Mismo que impide activar y
mantener la inmunidad por medio de vacunas.
Células tumorales podrían regular – expresión de MHC I y secretar moléculas
inmunosupresoras para evitar ataque.
RESPUESTAS A VACUNAS

6. Pacientes inmunocompetentes
Escencial que la vacuna sea poderosa.
El objetivo, finalmente, es el de activar el sistema inmune innato y las respuestas
efectoras específicas del sistema inmune adaptativo (incluyendo memoria).
Las vacunas de ADN ofrecen una oportunidad para incorporar múltiples genes
codificantes para moléculas inmunoestimuladoras (en el mismo vector que la vacuna o
en un vector separado). Esto incluye quimiocinas (atrayentes de APC), citocinas
activadoras, moléculas coestimuladoras, estimuladoras de presentación/procesamiento
del antígeno.
REQUISITOS
OBJETIVO

7. El antígeno tumoral puede presentarse como gen completo (respuesta humoral
directa) o como péptidos de unión a MHC I ó II (optimizar inducción de respuesta de
células T).
Una vez inducido el anticuerpo o célula T, éstas se dirigen al blanco (más sencillo en
líquidos y más difícil en sólidos).
T CD8+ T CD4+
-Th1
-Th2

8. Modelos Preclínicos de
Vacunas de ADN

9. Diseños de vacunas de ADN
DNA suficiente para generar una
respuesta inmune, es
generalmente transfectado
(1 a 10% ADN total se procesa
adecuadamente).

11. ETAPA DE ACTIVACIÓN ETAPA EFECTORA
Linfocitos T activados dejan los ganglios linfáticos hacia la periferia y siguen un
gradiente de quimiocinas hasta llegar el blanco.
EFECTO.
Secreción de sustancias toxicas, como
-perforinas (células CD8+)
-interleucinas con actividad inflamatoria como el INF-g (células CD4+)

12. ‘’Directores de Orquesta’’ / ‘’reguladoras’’.
Vitales para la inducción y el mantenimiento
de la memoria inmunitaria y hasta pudiendo
efectuar negativamente en presentación de
tolerancia al antígeno (regulan actividad de
linfocitos).
Sin una activación secundaria de linfocitos T CD8+, las células citotóxicas inducen
apoptosis. Sin embargo, si hay diferenciación de células T a células T de memoria, éstas
mantienen la activación de la respuesta efectora celular.
Importancia de CD4+ T helper
Antígenos de tumores.
Poco probables de producir una respuesta de TH suficiente, por lo que las células T
CD8+ están en riesgo de carecer de ‘ayuda’ -- ‘’helpless’’ y una falta de memoria de cél. T y
cél B.
Para evitar esto:

15. -Específico
para pacientes
con un
haplotipo de
MHC I.
-Más de una
vauna.
Competencia por inmunodominancia

16. Presentación crusada Vs. directa **p-DOM-epitope
Se observó que
se presentaban
sólo por
presentación
crusada
Se diseñó pDUO

17. Mutantes – MHC I, HLA-A2
Mutantes – Antígeno-expresantes
Vol. De inyección = 50 microlitros
Liposomas / Nanopartículas/ Polímeros/ Tatuaje
FACTORES QUE OPERAN EN EL ESTÍMULO
Nivel de antígeno
Activación de una respuesta inflamatoria local
ESTUDIOS PRECLINICOS Vs. ClINICOS
Ratones humanizados para probar inducción citotóxica.

18. RAZONES PARA SEGUIR MEJORANDO
SEGUROS – con un riesgo pequeño tras una inducción muy grande en la respuesta
efectora.
MEJORAR – eficacia mas que toxicidad.
-- toxicología difícil en paciente con cáncer terminal
-- en casos se ha visto respuesta humoral en 86% de pacientes vacunados
--se pueden crear métodos preventivos, ej. papiloma virus/ tras terapias
CASOS PROBADOS – vacunación de linfoma tras quimioterapia (con sólo un
idiotipo, respuestas de 72% de pacientes).
-- problema.- respuesta tras 18 días.
-- sugerencia.- electroporación.

19. CONCLUSIONES
Vacuas para prevenir infecciones ya han sido aprobadas para caballos y peces.
Fallos resultante de ensayos clínicos frustrados utilizando vacunas genómicas tienen
ahora explicación y sugerencias y hay ya casos exitosos. Se desea promover
investigación y mejorar diseños.