11. Función De La Pared Celular 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. 1.- Proteger a la bacteria de los cambios osmóticos del medio (lisis) 2.- Mantener la forma celular
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15. 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Tinción de Gram Fijación Cristal violeta Lugol Decoloración Safranina Grampositiva Gramnegativa
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17. Tinción de Gram 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. GRAM (+) AZULES GRAM (-) ROJOS
18. Muestras Clinicas teñidas con tinción de Gram 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Desgarro de paciente con neumonía: se observan diplococos Gram positivos y cocos en racimos y cadenas cortas Secreción uretral de paciente masculino: Se observan diplococos reniformes Gram negativos intracelulares
20. Estructura de Gram positivas 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. -Membrana interna o citoplasmática -Pared Celular
21. Estructura de Gram negativas 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Pared Celular Membrana interna Endotoxina Antígeno O (se usa para identificar estas bacterias (Membrana externa)
24. Membrana Citoplasmática: funciones 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. 1.- Es la barrera osmótica de la célula 2.- es sede de los sistemas de transporte activo y de las permeasas específicas 3.- en la membrana (o junto a ella) se encuentran las enzimas y componentes del transporte de electrones y fosforilación oxidativa (recordemos que en eucariotas las mismas están en las mitocondrias) 4.- allí se realiza la síntesis de componentes de la pared celular y de las cápsulas 5.- lugar de excreción de exoenzimas 6.- sede del centro de replicación del ADN 7.- punto de anclaje de los flagelos
25. 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. La membrana interna o citoplasmática de las bacterias hace lo mismo que la mitocondria: una fuerza protónica se mueve través de la membrana para generar energía, dar movimiento y permitir el transporte de nutrientes.
26. Formación del septum o tabique en la pared celular para dar dos células hijas 30/01/12 Rodolfo Norambuena A.
34. Apéndices cortos Fimbrias:Adherencia a tejidos Pili Sexual: Transferencia de material genético 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Pili F ó sexual Fimbrias
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36. Evasión de una bacteria patógena capsulada del sistema complemento 30/01/12 Rodolfo Norambuena A.
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38. Biofilms en un dispositivo intrauterino (DIU) 30/01/12 Rodolfo Norambuena A.
39. Algunas bacterias forman una endospora cuando se encuentran en condiciones adversas 30/01/12 Rodolfo Norambuena A.
40. Observación de la endospora al microscopio óptico 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Endospora refringente
41. Las endosporas no se tiñen con la Tinción de Gram 30/01/12 Rodolfo Norambuena A.
44. La endospora a microscopio electrónico: partes principales 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Región central o Core pared corteza cubiertas exosporio
45. La endospora cuando encuentra condiciones favorables ( Factores mecanicos, el pH, el calor, agua y nutrientes ) puede germinar, liberando la forma vegetativa. 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Restos de la espora Forma vegetativa
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50. 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Tiempo generacional (tg) es el tiempo que demora una bacteria en dividirse para dar dos bacterias hijas de igual tamaño. Por ejemplo 15 a 20 minutos
52. Fases de la Curva de Crecimiento bacteriano 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. 1.- Fase de latencia 2.- (..2,4,8,16,32,64…2 n ) Los tg son los más cortos. Las bacterias son más susceptibles a los ATB y desinfectantes 3 4
53. Crecimiento bacteriano en medios de cultivo líquidos y sólidos 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Turbidez en los caldos Colonias en los agares
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55. PLASMIDOS Y FAGOS 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. PLASMIDIO (ADN) BACTERIOFAGO (ADN o ARN
64. 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Virus DNA de importancia médica Viruela Herpes Adenovirus Hepatitis B Parvovirus B19
65. Virus RNA de importancia médica 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Influenza VRS, rubéola, sarampión Rabia VIH Ebola Hanta Polio Enterovirus Rotavirus
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69. Entrada del virus a la célula hospedera y su liberación 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Replicación del ácido nucleico y producción de proteinas virales Ensamblaje de nuevos virus Adhesion Denudamiento del virus 6.- Liberación (gemación o lisis) Penetración ( endocitosis o fusión)
74. REPRODUCCION DE LOS HONGOS 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Gemación en levaduras Hifas tabicadas o hifas cenocíticas Hongo dimorfico es el que alterna estos dos estados
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76. Cultivo de los hongos 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Levaduras forman colonias parecidas a la de bacterias Los hongos filamentosos forma colonias algodonosas. El conjunto de hifas se denomina micelio
87. DEFINICIONES 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. GERMICIDA : Agente químico capaz de matar microorganismos. ESPORICIDA: Germicida capaz de matar las esporas bacterianas. LIMPIEZA: Eliminación de todo elemento extraño o material orgánico de objetos mediante lavado con agua y jabón. SANITIZACION: Empleo de agentes físicos o químicos sobre objetos inanimados para reducir carga bacteriana, no elimina formas vegetativas ni esporas. DESCONTAMINACION: corresponde al empleo de agentes químicos y físicos para erradicar formas vegetativas y esporas a límites que no constituyan un riesgo para el operador
97. Controles de esterilización:indicadores químicos 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Cinta autoclave : cambia de color café oscuro solo en presencia de la combinación de los parámetros de esterilización ( tiempo, calor, vapor) Ventaja : mantiene la seguridad del sello en envoltorios de ropa, papel metal o vidrio.
98. Controles de esterilización:Indicadores biológicos 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Bacillus subtilis var niger . cambia de color verde a amarillo al sobrevivir esporas en un proceso inadecuado. Control Oxido de etileno, Hornos Pasteur Bacillus stearothermophilus . Cambia de color morado a amarillo al sobrevivir las esporas: Autoclave
99. DESINFECCION : 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Uso de agentes químicos para destruir la mayoría de los microorganismos, elimina microorganismos patógenos. Desinfectantes se clasifican de nivel alto, nivel intermedio y nivel bajo. ALTO: esterilización INTERMEDIO: sobreviven esporas BAJO: microorganismos viables
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101. Método físico : Filtración 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Procedimiento mecánico: membranas de nitrocelulosa con poros de diámetro conocido: Filtros.- 0.2 um Retención selectiva de microorganismos(bacterias y esporas hongos) Usos :Sueros, soluciones de enzimas y vitaminas, medios de cultivos azucarados o termolábiles. El aire puede esterilizarse por filtración. Ejs: mascarillas y tapones de algodón de los tubos de cultivo , Cabinas de seguridad de flujo laminar utilizan filtros de alta eficacia de retención de partículas de aire (HEPA: high-efficiency particulate air) elimina 99.97% de las partículas mayores de 0.3 um.
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104. 30/01/12 Rodolfo Norambuena A. Glutaraldehido : Líquido Concentración : 2% Acción : alquilante . Inactivado por materia orgánica . Importante : limpieza Plasma de peróxido de hidrógeno: líquido Utiliza agua oxigenada y se adiciona una onda de energía de radio-frecuencia. Se crea un campo electromagnético que genera el plasma. Es un método rápido, se usa en artículos termosensibles. Es incompatible en derivados de la celulosa como fibra, papel.
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Hinweis der Redaktion
Esquema que ilustra lo explicado en la diapositiva anterior: obsérvese las bandas ecuatoriales engrosadas de PC, que se van “separando” hacia fuera, mientras que se va sintetizando material nuevo en el interior. En el centro se formará un tabique transversal, cuya fisión señalará el nacimiento de las dos células hijas.
El patrón de flagelación (es decir, el número y localización de los flagelos) varía entre especies, y reviste interés en la determinación taxonómica: un solo flagelo: bacterias monotricas . Normalmente la inserción del flagelo (en bacterias bacilares) es polar o subpolar. dos o más flagelos formando un penacho, normalmente en un polo: lofotricas . (por ejemplo, en Spirillum volutans hay más de 80 flagelos en el penacho). dos penachos de flagelos, uno en cada polo: bacterias anfitricas . flagelos repartidos por toda la superficie: bacterias peritricas . (Por ejemplo, Escherichia coli posee 10 flagelos, mientras que Proteus mirabilis posee cientos, dando aspecto muy denso a la disposiciòn de éstos). Ciertas bacterias presentan flagelos de inserción lateral , bien en penachos densos (Selenomonas) , bien diseminados (Pectinatus) . Existe una serie de especies Gram-negativas (Vibrio, Photobacterium, Bdellovibrio) que poseen flagelos muy engrosados, debido a que están envueltos en una vaina que presenta continuidad con la membrana externa. Por otro lado Pseudomonas rhodos tiene un flagelo con vaina a base de subunidades de una proteína.
Comparación entre natación aleatoria y natación orientada (taxia positiva). En esta última hay una mayor proporción de natación en línea recta en la dirección favorable (hacia el atrayente).
Esquema simplificado que muestra cómo algunas bacterias Gram-positivas generan en su interior un nuevo tipo de célula (endospora), que finalmente queda liberada por autolisis de la célula madre
Al microscopio óptico, en fresco (sin teñir), aparecen como cuerpos esféricos, ovoides e incluso en algunas especies, cilíndricos, muy refringentes , libres, o aún incluidos en la célula vegetativa (célula madre). Esporangio = célula madre + espora.
Algunas especies de bacterias Gram positivas (principalmente de los géneros Bacillus, Clostridium, Sporosarcina y Thermoactinomyces ), disponen de una notable estrategia adaptativa cuando se ven sometidas a privación de nutrientes en su medio ambiente: si los niveles de fuentes de C, N, o P caen por debajo de un umbral, esto constituye una señal a la célula de que se avecina un largo período de privación de nutrientes. Entonces, la célula se implica en una serie de complejos cambios genéticos, metabólicos, estructurales, etc. (proceso de esporulación o esporogénesis ), que conducen a la diferenciación, en el interior de la célula vegetativa original, de una célula durmiente (la endospora ). La célula-madre (o sea, la célula vegetativa original que generó la endospora) finalmente se autolisa, liberando la espora, que es capaz de permanecer en estado criptobiótico, durmiente, varios decenios, -incluso siglos. Las esporas son fácilmente diseminadas por el aire; cuando caen en medios ricos en nutrientes, se desencadena su germinación , se reinicia la actividad metabólica, de modo que cada espora genera una nueva célula vegetativa, capaz de divisón binaria, etc. O sea, la esporulación se puede considerar como un proceso de supervivencia “en última instancia”, la “última carta” que se juegan ciertas bacterias Gram positivas cuando se enfrentan a condiciones severas de hambre de nutrientes.
Partes que comprende la endospora: Protoplasto o núcleo (“core”, en inglés), con la membrana citoplásmica de la espora (membrana esporal interna). Pared de la espora (= Germen de la pared de la futura célula vegetativa ). Corteza o córtex , rodeado externamente de la membrana esporal externa. Cubiertas Exosporio (no universal: las esporas de algunas especies carecen de él).
Una nueva célula vegetativa sale a través de las cubiertas al final de la germinación.
1) Fase de retardo (fase “lag”): Es el período de tiempo durante el que el inóculo se adapta a las condiciones del medio fresco sobre el que se ha sembrado. Se trata de un período de ajuste metabólico . Su duración depende de varios factores: tamaño del inóculo; bondad del inóculo (estado metabólico previo del inóculo); medio del que procede el inóculo (si el medio es similar al medio fresco, el lag es más corto; si el medio del inóculo era un medio rico y el medio fresco es más pobre, la fase de retardo se hace más larga, porque las bacterias necesitan un tiempo adicional para activar la síntesis de las enzimas biosintéticas que estaban reprimidas en el medio rico). 2) Fase de transición, de crecimiento acelerado , que conduce a … 3) Fase de crecimiento exponencial (= fase logarítmica). La fase 2 se debe a que cada célula entra en la fase exponencial con desfase respecto de sus compañeras. Ello demuestra que las células del inóculo no están todas en las mismas condiciones fisiológicas. Durante la fase logarítmica se da un crecimiento balanceado no restringido durante unas pocas generaciones (normalmente menos de 10). El tiempo de generación (g) es característico para cada especie o cepa, en cada medio concreto: El valor del tiempo de generación (g) depende de composición del medio, temperatura, pH, osmolaridad (tonicidad), etc. 4) Fase de aceleración negativa , de crecimiento desequilibrado, que conduce a… (sigue texto en siguiente diapositiva)