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ESTABILIDADE OXIDATIVA DO LEITE UHT ENRIQUECIDO COM ACIDO
ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO E ÁCIDO VACÊNICO
Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”
Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas
Disciplina: Tecnologia de Alimentos – Parte 1
Lucas Portilho da Cunha
Patricia
Giuliana
Mariani
Leite no Mundo
ÁCIDO VACÊNICO
(TVA)
ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO
(CLA)
ÁCIDO VACÊNICO
(TVA)
ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO
(CLA)
ANTI - OBESIDADE,
ANTI - CANCERÍGENOS
1%
(55mg a 3,5g por dia)
2%
Não foi informado
DIMINUIÇÃO DO LDL COLESTEROL
ÁCIDO VACÊNICO (TVA)
ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO (CLA)
Aumento de Concentração de CLA e TVA
Técnica para Aumentar a Concentração
ALIMENTANÇÃO ENRIQUECIDA:
Óleo de Cártamo
Vitamina E
Técnica para Aumentar a Concentração
10 VEZES MAIOR
CLA TVA
VANTAGENS
C 14:0 - ÁCIDO MIRÍSTICO
C 16:0 - ÁCIDO PALMÍTICO
DESVANTAGENS
C 18:0 - ÁCIDO ESTEÁRICO
40 – 57%
REDUÇÃO DO TEOR DE GORDURA
DESVANTAGENS
A INDUÇÃO PARA MAIOR PRODUÇÃO DE
CLA E TVA PODEM TER IMPACTO
PREJUDICIAIS NA INSTABILIDADE
OXIDATIVA DO LEITE DURANTE O
PROCESSO E TAMBÉM NO
ARMAZENAMENTO
Provas
Martínez Monteagudo e Saldaña (2014)
leite rico em CLA e TVA
90 - 120 ° C durante 15 minutos
e descobriu que os restantes valores de
ambos os ácidos foram reduzidos para
80% CLA e 60% TVA,
Processo Temperatura Tempo Durabilidade
Pasteurização 72 – 75°C 15 – 20s 15 dias a 6°C
UHT 130 – 150°C 2 – 10S 180 dias
Temp. Amb
Tratamento do Leite
OBJETIVOS
O OBJETIVO DO ESTUDO FOI AVALIAR A
ESTABILIDADE OXIDATIVA DO LEITE RICO EM CLA E TVA,
NA SEQUÊNCIA DE TRATAMENTOS
UHT E DURANTE O ARMAZENAMENTO
COMO ATINGIR OS OBJETIVOS ?
• Dieta das vacas por 21 dias
• Óleo de cártamo e vitamina E
• Final no regime – Concentração de gordura
• CLA 43 +/- 2 mg/g
• TVA 106 +/- 2 mg/g
Enriquecimento do Leite
MATERIAL E MÉTODO
1. Padronização e
Homogeneização
2. Processamento UHT
3. Embalagem e
Armazenamento
Tratamento UHT
MATERIAL E MÉTODO
1. Padronização e Homogeneização
Tratamento UHT
• Conforme outros estudos dos mesmos autores
MATERIAL E MÉTODO
2. Processamento UHT
Tratamento UHT
Condições mais frequentes – prolongar vida de prateleira
Tratamento 125°C/2s 135°C/3s 145°C/4s
Tratamento 125°C/15s 125°C/10s 145°C/20s
MATERIAL E MÉTODO
3. Embalagem e Armazenamento
Tratamento UHT
Tratamento 125°C/15s 125°C/10s 145°C/20s
Armazenamento 4°C 4°C 4°C
Armazenamento 25°C 25°C 25°C
Análise 0 7 15 30 60 120 dias
• Frascos de vidro âmbar
• Outras amostras – 30 dias a 4 e 5°C
MATERIAL E MÉTODO
• Concentrações determinadas por
– Cromatografia Gasosa
– Detector de ionização de chama
• Extração de ácidos graxos
• Metilação
– Segundo trabalho anterior
CLA e TVA
MATERIAL E MÉTODO
• Espectrofotometricamente
• Concentração de hidroperóxido lipídico
calculada por curva de calibração de
hidroperóxido cimeno
Determinação de Hidroperóxido
MATERIAL E MÉTODO
• Os produtos de oxidação secundários foram
avaliados através de TBARS
• O TBARS foi calculada usando uma curva de
calibração de tetraetoxipropeno (TPE)
Determinação de Substâncias
Reativas ao Ácido Tiobarbitúrico
MATERIAL E MÉTODO
• O2d no leite foi medido com medidor de oxigênio OM4
• O medidor foi calibrado usando calibração em dois
pontos
• Todas as medições de O2d foram realizadas em duplicata
Determinação de Oxigênio Dissolvido
0 %
100 %
Obtida por ebulição e resfriamento
com N
(saturação de O2 na água) -
borbulhamento do O2 através da
água durante 45 min. à T amb.
MATERIAL E MÉTODO
• Foram a extraídos hexanal, heptanal e octanal
• Analisados por GC e espectrometria de massa
Determinação de Voláteis
MATERIAL E MÉTODO
• Os dados obtidos para o conteúdo de CLA e TVA
restantes após o tratamento UHT durante o
armazenamento foram montados com um
modelo de primeira ordem, de acordo com a
equação:
Análise de Dados
MATERIAL E MÉTODO
• FA t / FA S = fração resultante de CLA e TVA
• K = velocidade de reação constante
• k obtido através de análise de regressão não-
linear utilizando Solver, Excel
Análise de Dados
MATERIAL E MÉTODO
• Todos os dados foram coletados em triplicata
• Comparações de pares para as médias dos
tratamentos de armazenamento foram avaliadas
com teste de Tukey a 5% de significância -
SigmaPlot
Análise de Dados
MATERIAL E MÉTODO
3.1 Estabilidade do CLA e TVA
3.1.1 Durante o UHT
%CLA (78-97) < %TVA (87-100)
RESULTADOS E DISCUSSÃO
3.1 Estabilidade do CLA e TVA
3.1.1 Durante o UHT
CLA oxida mais rápido que o AL não conjugado!!!
CLA  tratamento térmico  CLA pode estabilizar radicais
livres (deslocalização)  formação compostos furano
RESULTADOS E DISCUSSÃO
3.1 Estabilidade do CLA e TVA
3.1.2 Durante o armazenamento
Leite UHT enriquecido  Tratamento em alta temperatura 
Formação de radicais livres  Oxidação do CLA durante
armazenagem
RESULTADOS E DISCUSSÃO
3.1 Estabilidade do CLA e TVA
3.1.2 Durante o armazenamento
4°C
25°C
3.2 Formação de produtos de oxidação
3.2.2 Durante o UHT
RESULTADOS E DISCUSSÃO
3.2 Formação de produtos de oxidação
3.2.2 Durante o UHT
Smet el al., 2009  leite = insaturado/saturado = 0,4
Neste estudo  leite enriquecido = I/S= 1,38
formação de radicais livres
RESULTADOS E DISCUSSÃO
3.2 Formação de produtos de oxidação
3.2.2 Durante o UHT
TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) 
Aumentou conforme tempo de retenção
RESULTADOS E DISCUSSÃO
3.2 Formação de produtos de oxidação
3.2.2 Durante o armazenamento
4°C
25°C
• Em geral, a formação de
produtos de oxidação
primária dependiam das
condições de UHT
utilizados.
• Após 15 dias formação
abundante de
hidroperóxidos em ambas
temperaturas
3.2 Formação de produtos de oxidação
3.2.2 Durante o armazenamento
Os níveis de retenção de CLA e TVA durante o armazenamento
foram avaliados por meio do valor da constante de velocidade de
reação ( k , d ¹)
RESULTADOS E DISCUSSÃO
3.2 Formação de produtos de oxidação
3.2.2 Durante o armazenamento
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os voláteis formados durantes o UHT
• Os produtos da oxidação secundária durante o
tratamento UHT em leite enriquecido foram:
– Hexanal
– Heptanal
– Octanal
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Quanto > o tempo
↑[ ]de hexanal
Porém esse ↑ foi menor quando
comparado em 3% de leite UHT
comercial
• ↑[ ] heptanal após 15s em 125°C
• ↑[ ] heptanal após 4s em 135°C
• ↑[ ] heptanal após 2 e 20s em 145°C
• A [ ] de octanal nos ≠ tratamentos teve um aumento ligeiro
assemelhando-se com es resultados obtidos em leite UHT
convencional
Os voláteis formados durante o
armazenamento
Oxigênio diluído
CONCLUSÃO
• A estabilidade quanto a oxidação do leite
enriquecido foi avaliada após o tratamento
UHT juntamente com o armazenamento
resultou que :
CONCLUSÃO
• Após o UHT as percas com TVA foi menor do que
com CTA dependendo da temperatura e do
tempo usado
• Estabilidade à oxidação:
• CLA TVA
78-97% 87-100%
permaneceu após o tratamento de 125-145°C
2-20s
CONCLUSÃO
• CTA TVA
17-48% 45-48%
Permaneceu após armazenamento
À 4°C por até 120 dias
CONCLUSÃO
• CTA TVA
4-43% 20-57%
Permaneceu após armazenamento
À 25°C por até 120 dias
CONCLUSÃO
heptanal como indicador
CONCLUSÃO
• A retenção do CLA necessita de maior
correlação com outros indicadores de danos
térmicos / oxidação para estabelecer o valor
máximo de conservação em relação:
– Tempo
– Temperatura
– Armazenamento
– Em Leites CLA/TVA enriquecidos
CONCLUSÃO

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  • 1. ESTABILIDADE OXIDATIVA DO LEITE UHT ENRIQUECIDO COM ACIDO ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO E ÁCIDO VACÊNICO Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas Disciplina: Tecnologia de Alimentos – Parte 1 Lucas Portilho da Cunha Patricia Giuliana Mariani
  • 4. ÁCIDO VACÊNICO (TVA) ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO (CLA) ANTI - OBESIDADE, ANTI - CANCERÍGENOS 1% (55mg a 3,5g por dia) 2% Não foi informado DIMINUIÇÃO DO LDL COLESTEROL
  • 5. ÁCIDO VACÊNICO (TVA) ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO (CLA) Aumento de Concentração de CLA e TVA
  • 6. Técnica para Aumentar a Concentração ALIMENTANÇÃO ENRIQUECIDA: Óleo de Cártamo Vitamina E
  • 7. Técnica para Aumentar a Concentração 10 VEZES MAIOR CLA TVA
  • 8. VANTAGENS C 14:0 - ÁCIDO MIRÍSTICO C 16:0 - ÁCIDO PALMÍTICO
  • 9. DESVANTAGENS C 18:0 - ÁCIDO ESTEÁRICO 40 – 57% REDUÇÃO DO TEOR DE GORDURA
  • 10. DESVANTAGENS A INDUÇÃO PARA MAIOR PRODUÇÃO DE CLA E TVA PODEM TER IMPACTO PREJUDICIAIS NA INSTABILIDADE OXIDATIVA DO LEITE DURANTE O PROCESSO E TAMBÉM NO ARMAZENAMENTO
  • 11. Provas Martínez Monteagudo e Saldaña (2014) leite rico em CLA e TVA 90 - 120 ° C durante 15 minutos e descobriu que os restantes valores de ambos os ácidos foram reduzidos para 80% CLA e 60% TVA,
  • 12. Processo Temperatura Tempo Durabilidade Pasteurização 72 – 75°C 15 – 20s 15 dias a 6°C UHT 130 – 150°C 2 – 10S 180 dias Temp. Amb Tratamento do Leite
  • 13. OBJETIVOS O OBJETIVO DO ESTUDO FOI AVALIAR A ESTABILIDADE OXIDATIVA DO LEITE RICO EM CLA E TVA, NA SEQUÊNCIA DE TRATAMENTOS UHT E DURANTE O ARMAZENAMENTO
  • 14. COMO ATINGIR OS OBJETIVOS ?
  • 15. • Dieta das vacas por 21 dias • Óleo de cártamo e vitamina E • Final no regime – Concentração de gordura • CLA 43 +/- 2 mg/g • TVA 106 +/- 2 mg/g Enriquecimento do Leite MATERIAL E MÉTODO
  • 16. 1. Padronização e Homogeneização 2. Processamento UHT 3. Embalagem e Armazenamento Tratamento UHT MATERIAL E MÉTODO
  • 17. 1. Padronização e Homogeneização Tratamento UHT • Conforme outros estudos dos mesmos autores MATERIAL E MÉTODO
  • 18. 2. Processamento UHT Tratamento UHT Condições mais frequentes – prolongar vida de prateleira Tratamento 125°C/2s 135°C/3s 145°C/4s Tratamento 125°C/15s 125°C/10s 145°C/20s MATERIAL E MÉTODO
  • 19. 3. Embalagem e Armazenamento Tratamento UHT Tratamento 125°C/15s 125°C/10s 145°C/20s Armazenamento 4°C 4°C 4°C Armazenamento 25°C 25°C 25°C Análise 0 7 15 30 60 120 dias • Frascos de vidro âmbar • Outras amostras – 30 dias a 4 e 5°C MATERIAL E MÉTODO
  • 20. • Concentrações determinadas por – Cromatografia Gasosa – Detector de ionização de chama • Extração de ácidos graxos • Metilação – Segundo trabalho anterior CLA e TVA MATERIAL E MÉTODO
  • 21. • Espectrofotometricamente • Concentração de hidroperóxido lipídico calculada por curva de calibração de hidroperóxido cimeno Determinação de Hidroperóxido MATERIAL E MÉTODO
  • 22. • Os produtos de oxidação secundários foram avaliados através de TBARS • O TBARS foi calculada usando uma curva de calibração de tetraetoxipropeno (TPE) Determinação de Substâncias Reativas ao Ácido Tiobarbitúrico MATERIAL E MÉTODO
  • 23. • O2d no leite foi medido com medidor de oxigênio OM4 • O medidor foi calibrado usando calibração em dois pontos • Todas as medições de O2d foram realizadas em duplicata Determinação de Oxigênio Dissolvido 0 % 100 % Obtida por ebulição e resfriamento com N (saturação de O2 na água) - borbulhamento do O2 através da água durante 45 min. à T amb. MATERIAL E MÉTODO
  • 24. • Foram a extraídos hexanal, heptanal e octanal • Analisados por GC e espectrometria de massa Determinação de Voláteis MATERIAL E MÉTODO
  • 25. • Os dados obtidos para o conteúdo de CLA e TVA restantes após o tratamento UHT durante o armazenamento foram montados com um modelo de primeira ordem, de acordo com a equação: Análise de Dados MATERIAL E MÉTODO
  • 26. • FA t / FA S = fração resultante de CLA e TVA • K = velocidade de reação constante • k obtido através de análise de regressão não- linear utilizando Solver, Excel Análise de Dados MATERIAL E MÉTODO
  • 27. • Todos os dados foram coletados em triplicata • Comparações de pares para as médias dos tratamentos de armazenamento foram avaliadas com teste de Tukey a 5% de significância - SigmaPlot Análise de Dados MATERIAL E MÉTODO
  • 28. 3.1 Estabilidade do CLA e TVA 3.1.1 Durante o UHT %CLA (78-97) < %TVA (87-100) RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 29. 3.1 Estabilidade do CLA e TVA 3.1.1 Durante o UHT CLA oxida mais rápido que o AL não conjugado!!! CLA  tratamento térmico  CLA pode estabilizar radicais livres (deslocalização)  formação compostos furano RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 30. 3.1 Estabilidade do CLA e TVA 3.1.2 Durante o armazenamento Leite UHT enriquecido  Tratamento em alta temperatura  Formação de radicais livres  Oxidação do CLA durante armazenagem RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 31. 3.1 Estabilidade do CLA e TVA 3.1.2 Durante o armazenamento 4°C 25°C
  • 32. 3.2 Formação de produtos de oxidação 3.2.2 Durante o UHT RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 33. 3.2 Formação de produtos de oxidação 3.2.2 Durante o UHT Smet el al., 2009  leite = insaturado/saturado = 0,4 Neste estudo  leite enriquecido = I/S= 1,38 formação de radicais livres RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 34. 3.2 Formação de produtos de oxidação 3.2.2 Durante o UHT TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico)  Aumentou conforme tempo de retenção RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 35. 3.2 Formação de produtos de oxidação 3.2.2 Durante o armazenamento 4°C 25°C • Em geral, a formação de produtos de oxidação primária dependiam das condições de UHT utilizados. • Após 15 dias formação abundante de hidroperóxidos em ambas temperaturas
  • 36. 3.2 Formação de produtos de oxidação 3.2.2 Durante o armazenamento Os níveis de retenção de CLA e TVA durante o armazenamento foram avaliados por meio do valor da constante de velocidade de reação ( k , d ¹) RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 37. 3.2 Formação de produtos de oxidação 3.2.2 Durante o armazenamento RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 38. Os voláteis formados durantes o UHT • Os produtos da oxidação secundária durante o tratamento UHT em leite enriquecido foram: – Hexanal – Heptanal – Octanal RESULTADOS E DISCUSSÃO
  • 39. Quanto > o tempo ↑[ ]de hexanal Porém esse ↑ foi menor quando comparado em 3% de leite UHT comercial
  • 40. • ↑[ ] heptanal após 15s em 125°C • ↑[ ] heptanal após 4s em 135°C • ↑[ ] heptanal após 2 e 20s em 145°C
  • 41. • A [ ] de octanal nos ≠ tratamentos teve um aumento ligeiro assemelhando-se com es resultados obtidos em leite UHT convencional
  • 42. Os voláteis formados durante o armazenamento
  • 43.
  • 44.
  • 47. • A estabilidade quanto a oxidação do leite enriquecido foi avaliada após o tratamento UHT juntamente com o armazenamento resultou que : CONCLUSÃO
  • 48. • Após o UHT as percas com TVA foi menor do que com CTA dependendo da temperatura e do tempo usado • Estabilidade à oxidação: • CLA TVA 78-97% 87-100% permaneceu após o tratamento de 125-145°C 2-20s CONCLUSÃO
  • 49. • CTA TVA 17-48% 45-48% Permaneceu após armazenamento À 4°C por até 120 dias CONCLUSÃO
  • 50. • CTA TVA 4-43% 20-57% Permaneceu após armazenamento À 25°C por até 120 dias CONCLUSÃO
  • 52. • A retenção do CLA necessita de maior correlação com outros indicadores de danos térmicos / oxidação para estabelecer o valor máximo de conservação em relação: – Tempo – Temperatura – Armazenamento – Em Leites CLA/TVA enriquecidos CONCLUSÃO