Ok

1. MÉTODOS DE ESTUDIO
MÉTODOS DE ESTUDIO
PARASITOLOGÍA Y MICOLOGÍA
PARASITOLOGÍA Y MICOLOGÍA
MÉTODOS DE ESTUDIO
MÉTODOS DE ESTUDIO
PARASITOLOGÍA Y MICOLOGÍA
PARASITOLOGÍA Y MICOLOGÍA
Dpto. Parasitología y Micología
Dpto. Parasitología y Micología
CEFA
CEFA
Dpto. Parasitología y Micología
Dpto. Parasitología y Micología
CEFA
CEFA

2. IMPORTANCIA
IMPORTANCIA
IMPORTANCIA
IMPORTANCIA

 Diagnosticar patologías propiciando su prevención y/o
Diagnosticar patologías propiciando su prevención y/o
detección precoz (enteroparasitosis).
detección precoz (enteroparasitosis).

 Promover el diagnóstico diferencial entre posibles
Promover el diagnóstico diferencial entre posibles
patologías, dando oportunidad de tratamiento específico
patologías, dando oportunidad de tratamiento específico
(infecciones: parasitarias, micóticas, bacterianas).
(infecciones: parasitarias, micóticas, bacterianas).

 Evaluación de una enfermedad ya instalada contribuyendo a
Evaluación de una enfermedad ya instalada contribuyendo a
escoger la mejor conducta terapéutica (hidatodisis).
escoger la mejor conducta terapéutica (hidatodisis).

 Estimar actividad o recurrencia de una patología
Estimar actividad o recurrencia de una patología
(toxoplasmosis).
(toxoplasmosis).

3. FASES DEL PROCESO DE
FASES DEL PROCESO DE
LABORATORIO
LABORATORIO
FASES DEL PROCESO DE
FASES DEL PROCESO DE
LABORATORIO
LABORATORIO

 PREANALITICA:
PREANALITICA: es la que insume mayor tiempo, solicitud,
es la que insume mayor tiempo, solicitud,
obtención, almacenamiento, transporte, recepción y la que
obtención, almacenamiento, transporte, recepción y la que
está sujeta a mayor porcentaje de errores.
está sujeta a mayor porcentaje de errores.

 ANALITICA:
ANALITICA: corresponde a la realización del procedimiento
corresponde a la realización del procedimiento
diagnóstico. Incluye validación de las técnicas, calibración de
diagnóstico. Incluye validación de las técnicas, calibración de
equipos, ejecución de controles de calidad, etc.
equipos, ejecución de controles de calidad, etc.

 POSANALITICA:
POSANALITICA: Cálculos, interpretación de resultados,
Cálculos, interpretación de resultados,
validación, emisión del informe.
validación, emisión del informe.

4. METODOS DIRECTOS
METODOS DIRECTOS
METODOS DIRECTOS
METODOS DIRECTOS
Son
Son aquellos
aquellos que
que ponen
ponen en
en evidencia
evidencia
el
el agente
agente o
o sus
sus formas
formas evolutivas,
evolutivas,
fragmentos,
fragmentos, antígenos,
antígenos, ADN,
ADN, etc
etc.
.

5. MÉTODOS DIRECTOS
MÉTODOS DIRECTOS
O PARASITOLÓGICOS
O PARASITOLÓGICOS
MÉTODOS DIRECTOS
MÉTODOS DIRECTOS
O PARASITOLÓGICOS
O PARASITOLÓGICOS

Son los que permiten visualizar directamente
Son los que permiten visualizar directamente
parásitos u hongos en un material patológico, o
parásitos u hongos en un material patológico, o
aislarlos del mismo.
aislarlos del mismo.

Los parásitos y hongos pueden ser vistos
Los parásitos y hongos pueden ser vistos
estudiando el material “en fresco” o mediante
estudiando el material “en fresco” o mediante
coloraciones u otros artificios.
coloraciones u otros artificios.

6. MÉTODOS DIRECTOS
MÉTODOS DIRECTOS
MÉTODOS DIRECTOS
MÉTODOS DIRECTOS

 Los materiales pueden ser tratados previamente, para
Los materiales pueden ser tratados previamente, para
concentrar y/o mejorar la visualización de parásitos y
concentrar y/o mejorar la visualización de parásitos y
hongos en ellos.
hongos en ellos.
EJEMPLOS
EJEMPLOS

 Coproparasitario: incluye “limpieza” de la suspensión
Coproparasitario: incluye “limpieza” de la suspensión
de materias fecales y enriquecimiento por
de materias fecales y enriquecimiento por
centrifugación.
centrifugación.

 Tratamiento de expectoraciones con soluciones
Tratamiento de expectoraciones con soluciones
cáusticas (reblandece el mucus y “aclara” las
cáusticas (reblandece el mucus y “aclara” las
preparaciones).
preparaciones).

7. MÉTODOS DIRECTOS
MÉTODOS DIRECTOS
EXAMEN EN FRESCO
•El material se coloca sobre una lámina
portaobjetos, montado en algún medio líquido o no,
cubierto con una laminilla, para su observación al
microscopio.
Los líquidos de montaje (solución salina fisiológica, hidróxido de
sodio o potasio 10-20%, lactofenol-azul algodón, lugol, glicerina
tamponada) facilitan la observación microscópica evitando
distorsiones de la luz, reblandeciendo el material y/o aumentando el
contraste de los objetos buscados.

8. EXAMEN EN FRESCO
EXAMEN EN FRESCO
Quistes de E.histolytica/dispar
Larva S.stercoralis
C. neoformans
Huevo de A.aegypti

9. COLORACIONES
COLORACIONES
COLORACIONES
COLORACIONES
COLORACIONES PANÓPTICAS
COLORACIONES PANÓPTICAS:
: Giemsa,
Giemsa, May Grunwald
May Grunwald-
-
Giemsa, hematoxilina eosina, otras coloraciones
Giemsa, hematoxilina eosina, otras coloraciones
hematológicas (frotis o cortes histológicos).
hematológicas (frotis o cortes histológicos).
Quiste tisular de T.gondii Corte histológico. Candida spp.
Frotis. Pseudoquiste T. gondii.
Frotis. H. capsulatum Corte histológico. Gránulo actinomicótico.
GIEMSA
HE

10. COLORACIONES ESPECÍFICAS
COLORACIONES ESPECÍFICAS
COLORACIONES ESPECÍFICAS
COLORACIONES ESPECÍFICAS

Ziehl
Ziehl-
-Neelsen, Kinyoun
Neelsen, Kinyoun
(ácido
(ácido-
-alcohol resistencia)
alcohol resistencia)

Tricrómica (protozoarios
Tricrómica (protozoarios
entéricos, microsporidios).
entéricos, microsporidios).

 Gomori, methenamino plata
Gomori, methenamino plata
(pared de los hongos)
(pared de los hongos)
●
● Hematoxilina férrica
Hematoxilina férrica
(membrana,
(membrana,
núcleos y otros
núcleos y otros
componentes de
componentes de
protozoarios)
protozoarios).
.

11. CULTIVOS I
CULTIVOS I
CULTIVOS I
CULTIVOS I
MEDIOS GENERALES
MEDIOS GENERALES

 Sirven para el aislamiento primario de una
Sirven para el aislamiento primario de una
variedad de agentes
variedad de agentes

 Pueden ser modificados con el agregado o cambio
Pueden ser modificados con el agregado o cambio
de algún componente para darle mayor
de algún componente para darle mayor
especificidad
especificidad
EJEMPLOS
EJEMPLOS

 Sabouraud, para hongos
Sabouraud, para hongos

 NNN, para protozoarios hemoflagelados
NNN, para protozoarios hemoflagelados

12. CULTIVOS II
CULTIVOS II
CULTIVOS II
CULTIVOS II
MEDIOS SELECTIVOS
MEDIOS SELECTIVOS

Sirven para el aislamiento de un agente o
Sirven para el aislamiento de un agente o
grupo de agentes determinados
grupo de agentes determinados

Tienen una formulación muy bien definida
Tienen una formulación muy bien definida
EJEMPLOS
EJEMPLOS

DTM, para dermatofitos
DTM, para dermatofitos

LIT: para tripanosomas
LIT: para tripanosomas

13. TÉCNICAS DE AISLAMIENTO
TÉCNICAS DE AISLAMIENTO
POR INOCULACIÓN
POR INOCULACIÓN
TÉCNICAS DE AISLAMIENTO
TÉCNICAS DE AISLAMIENTO
POR INOCULACIÓN
POR INOCULACIÓN

En animales de experimentación.
En animales de experimentación.

Excepcional (aunque es necesario frente a
Excepcional (aunque es necesario frente a
determinados agentes de difícil identificación o
determinados agentes de difícil identificación o
aislamiento por otros medios, ej:
aislamiento por otros medios, ej: Toxoplasma
Toxoplasma
gondii
gondii en líquido amniótico)
en líquido amniótico)

Exige seguir rigurosas normas de bioética,
Exige seguir rigurosas normas de bioética,
bioseguridad y calidad operacional.
bioseguridad y calidad operacional.

14. DETECCIÓN DE OTROS
DETECCIÓN DE OTROS
COMPONENTES PARASITARIOS
COMPONENTES PARASITARIOS
DETECCIÓN DE OTROS
DETECCIÓN DE OTROS
COMPONENTES PARASITARIOS
COMPONENTES PARASITARIOS
Mediante diversas técnicas también se
Mediante diversas técnicas también se
puede evidenciar:
puede evidenciar:

Antígenos.
Antígenos.

Ácidos nucleicos.
Ácidos nucleicos.

Otras moléculas.
Otras moléculas.

15. TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS
TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS
DIRECTAS
DIRECTAS
TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS
TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS
DIRECTAS
DIRECTAS

16. DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS

17. ÁCIDOS NUCLEICOS
ÁCIDOS NUCLEICOS
ÁCIDOS NUCLEICOS
ÁCIDOS NUCLEICOS

18. MÉTODOS INDIRECTOS
MÉTODOS INDIRECTOS
INMUNOLÓGICOS
INMUNOLÓGICOS
MÉTODOS INDIRECTOS
MÉTODOS INDIRECTOS
INMUNOLÓGICOS
INMUNOLÓGICOS
Son los que permiten suponer la presencia
Son los que permiten suponer la presencia
de parásitos u hongos en el organismo,
de parásitos u hongos en el organismo,
mediante el estudio de la
mediante el estudio de la respuesta del
respuesta del
hospedero
hospedero (producción de Anticuerpos
(producción de Anticuerpos
específicos, reacciones de hipersensibilidad
específicos, reacciones de hipersensibilidad
tardía, producción de linfoquinas, etc.).
tardía, producción de linfoquinas, etc.).

19. TÉCNICAS DE PRECIPITACIÓN
TÉCNICAS DE PRECIPITACIÓN
EN GEL DE AGAR
EN GEL DE AGAR
TÉCNICAS DE PRECIPITACIÓN
TÉCNICAS DE PRECIPITACIÓN
EN GEL DE AGAR
EN GEL DE AGAR

20. TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN
TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN
•Aglutinación directa:
Suspensiones de parásitos enteros
son enfrentadas a sueros de pacientes.
Los Ac (Y) presentes aglutinan los
parásitos, formando acúmulos
consistentes.
•Aglutinación de partículas
(látex, betonita, carbón,etc.):
Suspensiones de partículas inertes, con
su superficie cubiertas de Ag
parasitarios, son enfrentadas a sueros
de pacientes. Los Ac presentes
aglutinan estas partículas, formando
acúmulos consistentes.
Y
Y
Y
Y
Y

21. TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN
TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN
TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN
TÉCNICAS DE AGLUTINACIÓN

22. TÉCNICAS DE MARCADO
TÉCNICAS DE MARCADO
DE LA REACCIÓN Ag
DE LA REACCIÓN Ag-
-Ac
Ac
TÉCNICAS DE MARCADO
TÉCNICAS DE MARCADO
DE LA REACCIÓN Ag
DE LA REACCIÓN Ag-
-Ac
Ac

23. TÉCNICAS DE MARCADO
TÉCNICAS DE MARCADO
DE LA REACCIÓN Ag
DE LA REACCIÓN Ag-
-Ac
Ac

24. SEGÚN LA FINALIDAD
SEGÚN LA FINALIDAD
DEL ESTUDIO
DEL ESTUDIO
SEGÚN LA FINALIDAD
SEGÚN LA FINALIDAD
DEL ESTUDIO
DEL ESTUDIO

Técnicas de screening:
Técnicas de screening: utilizadas para estudio
utilizadas para estudio
de grandes poblaciones.
de grandes poblaciones.

Técnicas confirmatorias:
Técnicas confirmatorias: utilizadas para
utilizadas para
confirmar un diagnóstico en forma específica.
confirmar un diagnóstico en forma específica.

25. CLASIFICACIÓN
CLASIFICACIÓN
Técnicas Inmunológicas
Técnicas Inmunológicas
CLASIFICACIÓN
CLASIFICACIÓN
Técnicas Inmunológicas
Técnicas Inmunológicas
1.
1. CUALITATIVOS:
CUALITATIVOS: positivos o negativos
positivos o negativos
2.
2. CUANTITATIVOS:
CUANTITATIVOS: miden la concentración
miden la concentración
del Ac a estudiar.
del Ac a estudiar.

26. CUANTITATIVOS
CUANTITATIVOS
CUANTITATIVOS
CUANTITATIVOS

TÍTULOS:
TÍTULOS: máxima dilución del suero problema qu
máxima dilución del suero problema qu
arroja un resultado positivo (Ej: 1/16; 1/128; 1/2048)
arroja un resultado positivo (Ej: 1/16; 1/128; 1/2048)

UNIDADES PREDETERMINADAS:
UNIDADES PREDETERMINADAS: cuando el valor
cuando el valor
obtenido como resultado es comparado a un patrón
obtenido como resultado es comparado a un patrón
predeterminado de densidad óptica, fluorescencia ,
predeterminado de densidad óptica, fluorescencia ,
luminiscencia o concentración conocida de Ac
luminiscencia o concentración conocida de Ac
específicos, que expresa el “punto de corte” de la
específicos, que expresa el “punto de corte” de la
técnica (cutoff o valor límite que diferencia positivos y
técnica (cutoff o valor límite que diferencia positivos y
negativos) (Ej: UI/ml; Index Value; MIU/ml; OD; etc.)
negativos) (Ej: UI/ml; Index Value; MIU/ml; OD; etc.)

27. COMPORTAMIENTO DE LAS
COMPORTAMIENTO DE LAS
TÉCNICAS SEROLÓGICAS I
TÉCNICAS SEROLÓGICAS I
COMPORTAMIENTO DE LAS
COMPORTAMIENTO DE LAS
TÉCNICAS SEROLÓGICAS I
TÉCNICAS SEROLÓGICAS I
DESDE EL PUNTO DE VISTA ANALÍTICO
DESDE EL PUNTO DE VISTA ANALÍTICO

 SENSIBILIDAD:
SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de la técnica para
expresa la capacidad de la técnica para
detectar las menores concentraciones posibles de los
detectar las menores concentraciones posibles de los
anticuerpos (o antígenos) buscados.
anticuerpos (o antígenos) buscados.

 ESPECIFICIDAD:
ESPECIFICIDAD: expresa la capacidad de esa técnica
expresa la capacidad de esa técnica
para diferenciar los anticuerpos específicos (o antígenos)
para diferenciar los anticuerpos específicos (o antígenos)
buscados de otros presentes en el material en estudio
buscados de otros presentes en el material en estudio.
.

28. DESDE EL PUNTO DE VISTA CLÍNICO
DESDE EL PUNTO DE VISTA CLÍNICO

SENSIBILIDAD:
SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de la
expresa la capacidad de la
misma para diagnosticar casos positivos en el
misma para diagnosticar casos positivos en el
conjunto de personas estudiadas.
conjunto de personas estudiadas.

ESPECIFICIDAD:
ESPECIFICIDAD: expresa, la capacidad de
expresa, la capacidad de
determinar resultados verdaderos.
determinar resultados verdaderos.
COMPORTAMIENTO DE LAS
COMPORTAMIENTO DE LAS
TÉCNICAS SEROLÓGICAS II
TÉCNICAS SEROLÓGICAS II
COMPORTAMIENTO DE LAS
COMPORTAMIENTO DE LAS
TÉCNICAS SEROLÓGICAS II
TÉCNICAS SEROLÓGICAS II

29. AUTOMATIZACIÓN
AUTOMATIZACIÓN
AUTOMATIZACIÓN
AUTOMATIZACIÓN

 Existen equipos electrónicos, que permiten la automatización de
Existen equipos electrónicos, que permiten la automatización de
los procedimientos y el análisis computacional de los resultados.
los procedimientos y el análisis computacional de los resultados.

 La lectura y medida de la [ Acs
La lectura y medida de la [ Acs-
-Ag ] se hace mediante
Ag ] se hace mediante
colorímetros, fluorómetros, fotómetros, etc.,
colorímetros, fluorómetros, fotómetros, etc.,

 Facilitando la padronización y reproducibilidad de las técnicas,
Facilitando la padronización y reproducibilidad de las técnicas,
mayor precisión y registro de resultados, mejor cuantificación y
mayor precisión y registro de resultados, mejor cuantificación y
valoración de los mismos.
valoración de los mismos.

 Disminuye los errores y permite un mejor control de calidad.
Disminuye los errores y permite un mejor control de calidad.

30. photodiodo
photodiodo
Tira
Tira
Cono fase sólida y pipeteo
Cono fase sólida y pipeteo
Buffer lavado
Buffer lavado Substrato
Substrato
Muestra
Muestra Diluyente
Diluyente Conjugado
Conjugado
REACCION INMUNOLOGICA
REACCION INMUNOLOGICA REACCION ENZIMATICA
REACCION ENZIMATICA
EJEMPLO
EJEMPLO
EJEMPLO
EJEMPLO

31. CUIDADOS PARTICULARES
CUIDADOS PARTICULARES
CUIDADOS PARTICULARES
CUIDADOS PARTICULARES
•
• ETAPA PREANALÍTICA:
ETAPA PREANALÍTICA: registro de datos,
registro de datos,
recolección, preparación y conservación de la
recolección, preparación y conservación de la
muestra...
muestra...
•
• ETAPA ANALÍTICA:
ETAPA ANALÍTICA: manejo de la muestra,
manejo de la muestra,
bioseguridad, calidad operacional, control de
bioseguridad, calidad operacional, control de
calidad interno y externo...
calidad interno y externo...
•
• ETAPA POSTANALÍTICA:
ETAPA POSTANALÍTICA: registro,
registro,
interpretación y validación de los resultados,
interpretación y validación de los resultados,
expresión de los resultados, expresión de los
expresión de los resultados, expresión de los
valores de referencia...
valores de referencia...

32. PREGUNTAS?
PREGUNTAS?