bioquimica 6D

1. 1-6-2017
PRÁCTICA BIOQUÍMICA
PROTEÍNAS
CETis 62
QFB. MARTHA GABRIELA ACEVES CASTILLO
INTEGRANTES:
HIGAREDA SÁNCHEZ BELÉN DEL ROSARIO
JASSO SOSA LESLYE VANESSA.
MARTÍNEZ GARCÍA DIANA ALEJANDRA.
REYES GALLEGOS SILVIA HERZEBETH.
VARGAS OLIVARES MARIA FERNANDA.
VILLASEÑOR CASTRO DORALI.

2. IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
OBJETIVO
Realizar experimentos para identificar las proteínas, como la configuración y la
identificación por el reactivo BIURET.
MARCO TEORICO
Proteína, cualquiera de los numerosos compuestos orgánicos constituidos por
aminoácidos unidos por enlaces peptídicos que intervienen en diversas funciones
vitales esenciales, como el metabolismo, la contracción muscular o la respuesta
inmunológica. Se descubrieron en 1838 y hoy se sabe que son los componentes
principales de las células y que suponen más del 50% del peso seco de los
animales. El termino proteína deriva del griego proteico, que significa primero.
El plasma sanguíneo normal contiene de 6.5 a 7.5gr de proteínas por 100al. Las
proteínas plasmáticas pueden dividirse en 3 grupos: a) fibrinógenos; b) globulinas;
c) albuminas. Cada una de estas variedades pueden ser precipitadas en bases a
su solubilidad en soluciones salinas, y se logra una separación simple o burda
mediante precipitación salina de dichas proteínas o fuerzas iónicas diferentes.
La precipitación salina con sulfato de amonio es una etapa preliminar útil en
muchas técnicas de aislamiento de proteínas en particular de enzimas. Existen 2
tipos de lograr esta etapa de purificación o bien sea añadiendo sulfato de amonio
sólido, o bien sea con una solución saturada (100 por 100) neutra del mismo. En el
primer caso, existe ventaja de mantener en un mínimo el aumento de volumen; en
cambio la solución saturada presenta la ventaja de una manipulación más
cómoda.
Las moléculas proteicas van desde las largas fibras insolubles que forman el tejido
conectivo y el pelo, hasta los glóbulos compactos solubles, capaces de atravesar
la membrana celular y desencadenar reacciones metabólicas. Tienen un peso
molecular elevado y son específicas de cada especie y de cada uno de sus
órganos. Se estima que el ser humano tiene unas 30.000 proteínas distintas, de
las que solo un 2% se ha descrito con detalle. Las proteínas sirven sobre todo
para construir y mantener las células, aunque su descomposición química también
proporciona energía, con un rendimiento de 4 kilocalorías por gramo, similar al de
los hidratos de carbono.
Las enzimas son proteínas, al igual que la insulina y casi todas las demás
hormonas, los anticuerpos del sistema inmunológico y la hemoglobina…

3. REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS (BIURET)
MATERIAL
1 gradilla pescado, espinaca, levadura,
Tubos de ensaye
Albúmina, grenetina y caseína
REACTIVOS
NaOH al 10%
Espinaca
Pescado
Levadura

4. Sulfato cúprico al 1% en gotero
PROCEDIMIENTO
1. En cada tubo de ensaye colocar 2ml de solución de proteína (diluida al 1%).
Aquí se observa que
en cada tubo de
ensaye le agregamos
2ml de cada solución
de proteína

5. 2. Añadir a cada tubo 2ml de NaOH al 10% y agitar.
3. Agregar gota a gota solución de sulfato cúprico al 1% hasta la aparición de
un color rosa o violeta (máximo 10 gotas).
Agregamos a cada tubo sulfato
cúprico poniéndole de gota en
gota hasta que observamos si
aparecía un color rosa o
violeta

6. 4. Reportar a que gota aparece el color.
En esta imagen se
observa en que
tubos de ensaye
al agregar las
gotas de sulfato
cúprico se
coloreo violeta

7. Resultados
Solución de proteínas Apareció el color No. De gotas a las que
apareció el color
Espinaca × ×
Caseína Si 4 gotas
Albumina Si 7 gotas
Pollo Si 8 gotas
Grenetina Si 3 gotas
Levadura Si 6 gotas
REACCION XANTOPROTEICA
MATERIAL
Tubosde ensaye
Gradilla
Baño maría

8. REACTIVOS
Proteínas Espinacas, leche, levadura,
grenetina, pescado y clara de huevo
NaOH concentrado
HNO3 concentrado
PROCEDIMIENTO
1. Colocar en cada tubo de ensaye 3ml de proteína.
Espinaca Leche Levadura Grenetina Pescado Clara de Huevo
2. Añadir con cuidado y lentamente 1ml de HNO3 concentrado.

9. 3. Calentar en baño maría por 2min, y enfriar a chorro de agua.
4. Agregar gota a gota solución de NaOH concentrado (máximo 10 gotas)
a él vire de color. Observar y reportar resultados.
TABLA DE RESULTADOS
PROTEÍNA GOTAS RESULTADO
Espinaca 9 SI
Leche 8 SI
Levadura 10 NO
Grenetina 6 SI
Pescado 7 SI
Clara de huevo 8 SI

10. COAGULACION POR CALOR
MATERIAL
16 tubos de ensaye
 Gradillla
 Baño maria
REACTIVOS
 Acido acético al
1%
 Acetona
 Éter
 Tetracloruro de
carbono
 Butanol
 Proteínas
 NaOH
concentrado con
gotero
PROCEDIMIENTO
1. Calentar a hervir 5ml de solución de proteína
2. Añadir 2 gotas de acido acético al 1%

11. 3. Colocar en 4 tubos, la solución repartida por igual y agregar de la siguiente
manera:
Tubo1= 1ml acetona
Tubo2= 1ml de éter
Tubo3= 1ml de butanol
Tubo4= 1ml tolueno
4. Agitar fuertemente para tratar de disolver el coagulo. Reportar en tabla.
5. Los tubos que no disolvieron el coagulo, agregar 3 gotas de NaOH
concentrado, y agitar.
6. Observar y anotar diferencias.
OBTENCION DE CASEINA DE LA LECHE
MATERIAL REACTIVOS
2 vasos de precipitados de 250 ml Leche entera
1 probeta de 10ml HCl 0.2 N
1 embudo Acetona
2 papel filtro Eter

12. PROCEDIMIENTO
1. Colocar 100ml de leche en un vaso de precipitado
2. Agregar 100ml de agua destilada
3. Con una pipeta añadir HCl 0.2N hasta obtener un pH de 4.8
4. Dejar reposar hasta que el sedimento precipite.
5. Suspender el precipitado en 100ml de agua destilada y dejar reposar.
6. Repetir este lavado 4 veces.

13. 7. Filtrar el precipitado final en un embudo Buchner, colectando en el papel la
proteína.
8. Suspender la caseína en 25ml de agua destilada, agitar para homogeneizar
y filtrar. Repetir 4 veces
.
9. Después del último lavado, suspender la proteína en 5ml de éter y 5ml de
acetona, y filtrar.
10.Colocar el polvo obtenido en un desecador con cloruro de calcio y pesar el
polvo 24 horas después.
La caseína no se filtró por falta de tiempo, por lo que no pudimos pesarla
Resultados:
Acetona Eter Butanol Tolueno
Levadura NO NO SI NO
Espinaca SI SI SI NO
Huevo SI SI SI SI
Pescado SI NO NO NO
Observaciones:
En esta práctica pudimos observar que al momento de meter los tubos al agua hirviendo
lo que ocurrió fue que la sustancia que tenía el tubo se coagulo por el calor y al
momento de echarle las otras sustancias a cada uno y agitarlos nos dimos cuenta que a
la mayoría de los tubos si se les disolvió el coagulo.

14. CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de las PROTEINAS?
Se llama desnaturalización de las proteínas a la pérdida de las estructuras
de orden superior (secundaria, terciaria y cuaternaria), quedando la cadena
polipeptídica reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura
tridimensional fija.
2. Cuál de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización?
3. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?
Usando la prueba de Biuret, que es la que determina las proteínas
4. Que coloración da la reacción del Biuret?
Morado
5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?
Si
6. Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es
positiva o negativa? ¿Por qué?
Saldrá positiva, porque forma parte de las proteínas
7. Explica la reacción Xantoproteíca.
Es un método que se puede utilizar para determinar la presencia de
proteínas solubles en una solución