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Presentado por
Prof. Antônio Fco. Do Carmo.
http://cpma.comunidades.net
O MICROSCÓPIO
Instrumento óptico
destinado a observar
certos objetos e os
organismos
extremamente
pequenos.
É uma ferramenta
básica para o estudo
na Biologia Geral.
Do micro- (pequeño) e scopio,
(observar)
Para o estudo do material biológico se dispõe
de varios tipos de microscopios, os quais se
podem classificar basicamente de acordo com
o tipo de fonte luminosa que usam:
• Ópticos o luminosos:
- Campo claro
- Campo oscuro
- Contraste de fases
- Fluorescência
- Ultravioleta
• Eletrônicos
- Exploração
- Transmissão
O microscópio óptico
convencional é composta
porque tem dois principais
sistemas convergentes lentes
(oculares e objetivos). A
maioria dos modelos atuais são
binóculos, embora haja
monocular. O microscópio
composto convencional é
chamado de "campo de luz" ou
"campo claro", porque todo o
campo é iluminado com uma
lente condensadora comum que
projeta fotônica leves.
Microscópio óptico de campo claro
Sistema mecânico:
segurando o sistema
óptico e contém os
elementos necessários
para a iluminação e
concentrar a preparação.
Sistema de iluminação
tornam-se os
componentes responsáveis
pela recolha a luz, a
dose e dirigi-la através
do preparado
sistema óptico: inclui
O condensador projecta um
cone de luz sobre as células
que estão a ser examinadas ao
microscópio. Depois de
atravessar as células, o feixe
de luz, em forma de cone,
penetra o alvo; a lente projecta
uma imagem ampliada no plano
focal da ocular, o que
novamente de largura.
Finalmente, a imagem fornecida
pelo ocular pode ser percebido
pela retina do olho
Limite de resolução: é a menor distância que
deve existir entre dois objetos para que eles
possam ser exibidos separadamente. Quando um
objeto é iluminado, os pontos de sua superfície
reflete ondas de luz. Próximos dois pontos
sobre a superfície como será diferente se a
distância entre eles é grande em comparação
com o comprimento de onda recebida.
Se a distância entre elas é menor do que o
comprimento de onda que ilumina a vista
aparece como dois pontos em conjunto.
Comparação de limites de resolução entre
microscópio óptico, eletrônico e olho
humano.
LR= λC/NA
onde:
λ= longitude de onda de la luz (em
µm)
C= constante de proporcionalidade
NA= abertura numérica
Cálculo do límite de resolução
Longitude de onda
O comprimento de onda é a distância
entre dois vértices consecutivos, em
outras palavras, o tempo que é
descrito onda.
No espectro visível, as diferenças de
comprimento de onda são
manifestados como diferença de cor.
Se a amostra é iluminada com luz
branca, ele é considerado o
comprimento de onda verde e amarelo
(0,55 um)
Constante de
proporcionalidade
Constante de proporcionalidade está
relacionada com o grau de
sobreposição dos dois pontos de
modo que possam ser resolvidas pelo
olho humano.
Esta constante é 0,61
Abertura
numérica
É uma medida da capacidade do
microscópio para refrações de grupo da
luz produzida pelos detalhes finos do
objeto, uma vez que determina o
tamanho do feixe de luz que é capturada
pelo alvo depois através do objeto. É
uma característica de cada objetivo,
rapidez faz parte das inscrições sobre
os objetos.
A qualidade de um objeto é maior
quanto maior for a sua abertura
numérica.
Cálculo da abertura numérica
onde:
n é o índice de refracção do
meio em que a lente é
θ é metade do ângulo máximo
de aceitação que pode entrar
ou sair da lente.
NA=n sen Θ
Calcule o limite de resolução do
microscópio óptico para objetos
diferentes
10 x
LR= λC/NA
LR= 0,55 µm(0,61) /
0,30
LR= 1,12 µm 40 x
LR= λC/NA
LR= 0,55 µm(0,61) /
0,65
LR= 0,52 µm
100x
LR= λC/NA
LR= 0,55 µm(0,61) /
1,30
LR= 0,26 µm
Calcule o limite de resolução do
microscópio óptico objetivos diferentes.
Microscópios ópticos modernos têm
um limite de resolução de 0,2 a 0,4
um, cerca de l / 20 do diâmetro de
um eritrócito humano normal
Para reduzir o LR podemos usar uma
fonte com menor comprimento de
onda (o caso extremo é o de
microscópios de elétrons) ou
aumentar n, para as quais podemos
escolher entre a preparação é a
mais densa do que o ar.
ME características que a
diferenciam de microscopia
de luz e melhora o limite de
resolução do último. feixes
de electrões são conseguidos
com um comprimento de onda
de 0,05 nm, o poder de
resolução é de 0,2 nm,
enquanto o comprimento de
onda da luz visível varia em
torno de 500 nm, e o seu
poder de resolução é 0, 2 ^
m
Características importantes do
microscopio
Aumento total
Poder de penetração
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  • 2.
  • 3. O MICROSCÓPIO Instrumento óptico destinado a observar certos objetos e os organismos extremamente pequenos. É uma ferramenta básica para o estudo na Biologia Geral. Do micro- (pequeño) e scopio, (observar)
  • 4. Para o estudo do material biológico se dispõe de varios tipos de microscopios, os quais se podem classificar basicamente de acordo com o tipo de fonte luminosa que usam: • Ópticos o luminosos: - Campo claro - Campo oscuro - Contraste de fases - Fluorescência - Ultravioleta • Eletrônicos - Exploração - Transmissão
  • 5.
  • 6. O microscópio óptico convencional é composta porque tem dois principais sistemas convergentes lentes (oculares e objetivos). A maioria dos modelos atuais são binóculos, embora haja monocular. O microscópio composto convencional é chamado de "campo de luz" ou "campo claro", porque todo o campo é iluminado com uma lente condensadora comum que projeta fotônica leves.
  • 7. Microscópio óptico de campo claro Sistema mecânico: segurando o sistema óptico e contém os elementos necessários para a iluminação e concentrar a preparação. Sistema de iluminação tornam-se os componentes responsáveis pela recolha a luz, a dose e dirigi-la através do preparado sistema óptico: inclui
  • 8. O condensador projecta um cone de luz sobre as células que estão a ser examinadas ao microscópio. Depois de atravessar as células, o feixe de luz, em forma de cone, penetra o alvo; a lente projecta uma imagem ampliada no plano focal da ocular, o que novamente de largura. Finalmente, a imagem fornecida pelo ocular pode ser percebido pela retina do olho
  • 9.
  • 10. Limite de resolução: é a menor distância que deve existir entre dois objetos para que eles possam ser exibidos separadamente. Quando um objeto é iluminado, os pontos de sua superfície reflete ondas de luz. Próximos dois pontos sobre a superfície como será diferente se a distância entre eles é grande em comparação com o comprimento de onda recebida. Se a distância entre elas é menor do que o comprimento de onda que ilumina a vista aparece como dois pontos em conjunto.
  • 11. Comparação de limites de resolução entre microscópio óptico, eletrônico e olho humano.
  • 12. LR= λC/NA onde: λ= longitude de onda de la luz (em µm) C= constante de proporcionalidade NA= abertura numérica Cálculo do límite de resolução
  • 13. Longitude de onda O comprimento de onda é a distância entre dois vértices consecutivos, em outras palavras, o tempo que é descrito onda. No espectro visível, as diferenças de comprimento de onda são manifestados como diferença de cor. Se a amostra é iluminada com luz branca, ele é considerado o comprimento de onda verde e amarelo (0,55 um)
  • 14.
  • 15. Constante de proporcionalidade Constante de proporcionalidade está relacionada com o grau de sobreposição dos dois pontos de modo que possam ser resolvidas pelo olho humano. Esta constante é 0,61
  • 16. Abertura numérica É uma medida da capacidade do microscópio para refrações de grupo da luz produzida pelos detalhes finos do objeto, uma vez que determina o tamanho do feixe de luz que é capturada pelo alvo depois através do objeto. É uma característica de cada objetivo, rapidez faz parte das inscrições sobre os objetos.
  • 17. A qualidade de um objeto é maior quanto maior for a sua abertura numérica.
  • 18. Cálculo da abertura numérica onde: n é o índice de refracção do meio em que a lente é θ é metade do ângulo máximo de aceitação que pode entrar ou sair da lente. NA=n sen Θ
  • 19. Calcule o limite de resolução do microscópio óptico para objetos diferentes 10 x LR= λC/NA LR= 0,55 µm(0,61) / 0,30 LR= 1,12 µm 40 x LR= λC/NA LR= 0,55 µm(0,61) / 0,65 LR= 0,52 µm
  • 20. 100x LR= λC/NA LR= 0,55 µm(0,61) / 1,30 LR= 0,26 µm Calcule o limite de resolução do microscópio óptico objetivos diferentes.
  • 21. Microscópios ópticos modernos têm um limite de resolução de 0,2 a 0,4 um, cerca de l / 20 do diâmetro de um eritrócito humano normal Para reduzir o LR podemos usar uma fonte com menor comprimento de onda (o caso extremo é o de microscópios de elétrons) ou aumentar n, para as quais podemos escolher entre a preparação é a mais densa do que o ar.
  • 22. ME características que a diferenciam de microscopia de luz e melhora o limite de resolução do último. feixes de electrões são conseguidos com um comprimento de onda de 0,05 nm, o poder de resolução é de 0,2 nm, enquanto o comprimento de onda da luz visível varia em torno de 500 nm, e o seu poder de resolução é 0, 2 ^ m
  • 23. Características importantes do microscopio Aumento total Poder de penetração Distância focal Poder definição Poder de resolução