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"Las especies son como ladrillos en la construcción de una
casa. Podemos perder una o dos docenas de ladrillos sin que
está se tambalee. Pero si desaparece el 20% de las especies,
la estructura entera se desestabiliza y se derrumba".
Donald Falk
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
aporte importante para la
economía ecuatoriana
787 razas distribuidas en
todo el mundo
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Inferir el mérito genético de un individuo, evaluando directamente los genes más favorables
para ciertas características fenotípicas (Soria y Corva, 2004).
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 Preservar la genética del criollo (adaptación y resistencia)
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ALCANCE DE LA INVESTIGACIÓN
IDENTIFICAR GENES ESTRECHAMENTE RELACIONADOS CON LA
EFICIENCIA REPRODUCTIVA.
TOROS CON POTENCIAL REPRODUCTIVO.
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PUEDE CONTENER ENTRE 30 – 40
MIL GENES (ELSIK Y COL., 2009)
CROMOSOMA 1
ITGB5 (integrina beta 5)
interacción espermatozoide– óvulo
CROMOSOMA 2
STK11IP (proteína interactuante
serina/Treonina kinasa 11)
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normales
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𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
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DESCRIPCIÓN DEL OBJETO EN ESTUDIO
Jaspeado
manabita
Colorado Hosco
Blanco
con negro
Blanco Porotillo
Colorado
overo
Bayo
SISTEMA DE VARIABLES
• Genes
Independiente
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testiculares
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MEDIDAS MORFOMETRICAS TESTICULARES
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CONSISTENCIA TESTICULAR
1 = Muy firme y muy elástico
2 = Firme y elástico
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FORMATO TESTICULAR
Tipo 1: Alargado: ancho/alto ≤ 0,5
Tipo 2: Alargado moderado: ancho/alto ≤ 0,65
Tipo 3: Oval moderado: ancho/alto ≤ 0,75
Tipo 4: Oval esférico: ancho/alto ≤ 0,86
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genera estimulaciones rítmicas provocadas
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Pulsos eléctricos muy leves que estimulan la
próstata y vesículas seminales provocando
erección y eyaculación
VOLUMEN COLOR
ASPECTO OLOR
En una micro-cubeta se agregará 7 μL de semen puro
CONCENTRACIÓN ESPERMÁTICA
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MASAL Se diluirá el semen a una
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  • 1.
  • 2. "Las especies son como ladrillos en la construcción de una casa. Podemos perder una o dos docenas de ladrillos sin que está se tambalee. Pero si desaparece el 20% de las especies, la estructura entera se desestabiliza y se derrumba". Donald Falk
  • 3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA aporte importante para la economía ecuatoriana 787 razas distribuidas en todo el mundo Características genéticas que han permitido la adaptabilidad y resistencia
  • 5. Caracteristicas fenotípicas >Tiempo >Costo < heredabilidad Biotecnologías < Tiempo >Costo <Heredabilidad Genómica <Tiempo >Costo >Heredabilidad (Presición) Inferir el mérito genético de un individuo, evaluando directamente los genes más favorables para ciertas características fenotípicas (Soria y Corva, 2004).
  • 6. PROBLEMA PERDIDA DE LA DIVERSIDAD GENÉTICA LIMITA LA CAPACIDAD DE MANTENER Y MEJORAR LA PRODUCCIÓN, LA PRODUCTIVIDAD Y LA SOSTENIBILIDAD REDUCE LA APTITUD PARA HACER FRENTE A LAS CONDICIONES AMBIENTALES CAMBIANTES “Si se ´pierden las razas se pierden los genes”
  • 7. NÚMERO DE RAZAS DE CADA UNA DE LAS 7 ESPECIES PRINCIPALES DE ANIMALES DOMÉSTICOS QUE ESTÁN REGISTRADAS EN LA FAO (FAO GLOBAL DATABANK FOR ANIMAL GENETIC RESOURCES), Y LAS ESTIMADAS EN PELIGRO DE EXTINCIÓN.
  • 8. CENSO DE GANADO CRIOLLO EN EL CANTÓN EL CARME, PROVINCIA DE MANABÍ – ECUADOR 2018 13446 según el III Censo Nacional Agropecuario 2012 (SINAGAP, 2018)
  • 9. CRITERIOS PARA DETERMINAR SI UNA ESPECIE ESTA EN PELIGRO DE EXTINCIÓN
  • 10. Desconocimiento de que estas razas son portadoras de genes valiosos con respuesta a mejoras genéticas No hay estudios relacionados a genes para rasgos reproductivos
  • 11. PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN ¿Cuáles son los genes más importantes que regulan la eficiencia reproductiva del toro criollo? General ¿Qué marcadores se encuentran asociados a LOCI de importancia reproductiva en el toro ? Específico ¿Cuál es el grado de asociación de los genes con las variables de la eficiencia reproductiva del toro? Específico
  • 12. OBJETIVOS Identificar los genes más importantes que regulan la eficiencia reproductiva del toro criollo General Establecer los marcadores que se encuentran asociados a LOCI de importancia reproductiva en el toro Específico Determinar el grado de asociación de los genes con la eficiencia reproductiva del toro Específico
  • 13. JUSTIFICACIÓN INTERÉS POR CONSERVAR ESTAS RAZAS Genético productivo Diversidad Viabilidad de las poblaciones Adaptación a diferentes ambientes
  • 14. INTERÉS POR CONSERVAR ESTAS RAZAS Histórico - cultural Patrimonio genético Historia viva y paralela Para el desarrollo de la humanidad
  • 15. INTERÉS POR CONSERVAR ESTAS RAZAS Ecológico - ambiental Equilibrio en la naturaleza Pérdida de biodiversidad Deterioro del medio ambiente
  • 16. INTERÉS POR CONSERVAR ESTAS RAZAS Científico Detectar genes únicos y valiosos Mejorar genéticamente Excelente material de investigación
  • 17. Las investigaciones de los genes y las vías genéticas Desarrollo de marcadores genéticos Selección asistida por marcadores (SAM)  Preservar la genética del criollo (adaptación y resistencia)  Mejorar la fertilidad  Incrementar el progreso genético anual  Optimizar los programas de mejoramiento genético
  • 18. ALCANCE DE LA INVESTIGACIÓN IDENTIFICAR GENES ESTRECHAMENTE RELACIONADOS CON LA EFICIENCIA REPRODUCTIVA. TOROS CON POTENCIAL REPRODUCTIVO. GENES VALIOSOS SOBRE PARÁMETROS REPRODUCTIVOS. TOROS CON ALTO VALOR GENÉTICO.
  • 19. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN PUEDE CONTENER ENTRE 30 – 40 MIL GENES (ELSIK Y COL., 2009)
  • 20. CROMOSOMA 1 ITGB5 (integrina beta 5) interacción espermatozoide– óvulo
  • 21. CROMOSOMA 2 STK11IP (proteína interactuante serina/Treonina kinasa 11) espermatogénesis y la fertilidad INHA (alfa inhibina) circunferencia escrotal, % de espermatozoides normales
  • 22. CROMOSOMA 5 HELB (helicasa B) proliferación de células de Sertoli INHBE (Inhibin subunit beta E) y INHBC (Inhibin subunit beta C) codifican la inhibina beta
  • 23. CROMOSOMA 14 IGF1 (factor de crecimiento similar a la insulina 1) circunferencia escrotal
  • 24. CROMOSOMA 18 ZNF541 (zinc finger) remodelación de la cromatina durante la espermatogénesis
  • 25. CROMOSOMA 19 TMEM95 (proteína 95 transmembrana) éxito reproductivo de toros
  • 26. CROMOSOMA 25 TEKT4 Motilidad espermatica CACNA1H (calcium chanel) flujo de calcio durante la reacción del acrosoma
  • 27. CROMOSOMA 27 DYNCII2 (Dysneina) y LOC784935 espermatogénesis y fertilidad SPAG11 edad a pubertad y calidad espermática
  • 28. CROMOSOMA X TAF9B TAF1 AR ( receptor de andrógenos) Arkansas POU3f4 SERPINA7 STK11IP PLAG1 IGF1 NXF2 CYLC1 TEX11 y DIAPH2
  • 29. METODOLOGÍA • Empirista Inductivo Enfoque epistemológico • Transeccional Tipo de investigación • No experimental Diseño de la investigación
  • 30. UBICACIÓN DEL EXPERIMENTO 0º 16’11’’ l Sur 79º 25’26’’ l Oeste 245 msnm 24.5 °C 2806 mm clima Köppen- Geiger Monzónico (Am)
  • 31. POBLACIÓN Y MUESTRA 13446 según el III Censo Nacional Agropecuario (SINAGAP, 2018) 𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑛 = 67
  • 32. DESCRIPCIÓN DEL OBJETO EN ESTUDIO Jaspeado manabita Colorado Hosco
  • 35. SISTEMA DE VARIABLES • Genes Independiente • Características biométricas testiculares • Producción y calidad seminal • Morfometría espermática • Subpoblaciones espermáticas Dependiente
  • 36. GENES A ESTUDIAR ITGB5 (integrina beta 5) STK11IP (proteína interactuante serina/Treonina kinasa 11) TMEM95 (proteína 95 transmembrana) TEKT4 DYNCII2 (Dysneina)
  • 37.
  • 38.
  • 39.
  • 40.
  • 41.
  • 42. MEDIDAS MORFOMETRICAS TESTICULARES Paquímetro (pie de rey) cinta escrotímetra autoajustable Coulter
  • 43. CONSISTENCIA TESTICULAR 1 = Muy firme y muy elástico 2 = Firme y elástico 3 = Blando y esponjoso 4 = Muy blando y muy esponjoso FORMATO TESTICULAR Tipo 1: Alargado: ancho/alto ≤ 0,5 Tipo 2: Alargado moderado: ancho/alto ≤ 0,65 Tipo 3: Oval moderado: ancho/alto ≤ 0,75 Tipo 4: Oval esférico: ancho/alto ≤ 0,86 Tipo 5: Esférico: alto/ancho >0,86
  • 45. COLECTA DE SEMEN Electroeyaculador “Electrodo conectado a una batería que genera estimulaciones rítmicas provocadas por descargas < a 20 voltios” Pulsos eléctricos muy leves que estimulan la próstata y vesículas seminales provocando erección y eyaculación
  • 47. En una micro-cubeta se agregará 7 μL de semen puro CONCENTRACIÓN ESPERMÁTICA
  • 48. MOTILIDAD MASAL Se diluirá el semen a una relación 1:10 con citrato de sodio al 2.9% y se agregará una gota de 5 μL de dilución sobre un portaobjetos atemperado MOTILIDAD INDIVIDUAL Y RECTILINEA
  • 51. TÉCNICAS E INSTRUMENTOS PARA LA COLECCIÓN DE DATOS
  • 52. PROCESAMIENTO Y ANÁLISIS DE DATOS AGRUPACIÓN DE FERTILIDAD POR DATOS FENOTÍPICOS (ALTO , MEDIO, BAJO) ESTUDIOS DE ASOCIACIÓN GENÓMICA PARA PREDECIR INTERACCIONES GEN-VARIABLE Y CONSTRUIR UNA RED DE ASOCIACIÓN GENÉTICA VISUALIZADAS EN CYTOSCAPE (FORTES Y COL., 2011).
  • 53. MARCO – ADMINISTRATIVO Talento humano • Tutor • Asesores • Investigador • Un especialista en estadística multivariada • Técnico especialista en colección de semen • Técnico de laboratorio de genética • Técnico de biotecnología de la reproducción • Colaboradores Equipos • Electroeyaculador • Espectrofotómetro (spermacue- minitub) • Microscopio óptico (olympus, cx-21) • Microscopio nikon, modelo eclipse (e-200) • Cámara de vídeo sony • Procesador pentium iv de 950 MHz • Placa térmica • Vortex • Centrifuga • Micro centrifuga • Baño María • Kit de extracción de ADN • PCR • Termociclador GeneProTM (Bioer Technology Co., China) Reactivos • Citrato de sodio al 2.9% • Eosina- nigrosina • Agua desionizada estéril • Isopropanol • Etanol 70% • Cloruro de amonio • Bicarbonato de potasio • EDTA • SDS • Acetato de amonio
  • 54. MARCO – ADMINISTRATIVO Materiales • Paquímetro • Cinta escrotímetra autoajustable Coulter • Tubos colectores graduados (Pirec® de 15 ml) • Papel aluminio • Microcubeta • Porta y cubre objetos • Lámina camaraleja • Tubos vacutainer con anticoagulante • Tubos Falcon de 15 ml y Eppendorf estériles de 1.5 ml • Micro pipetas • Puntas estériles • Guantes • Papel absorbente • Estuche gotaq® Flexi (Promega, EUA) • Material de oficina • Calculadora Software • ASMA • TouchDown • DNABaser • CodonCode Aligner • Permut Matrix • Cytoscape
  • 57.
  • 58.
  • 59.
  • 60.
  • 61.