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Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoide

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Sérodiagnostic 
de la polyarthrite 
rhumatoïde 
Par S / Abdessemed 
Abdsalah
Abdsalah 
Introduction 
• La polyarthrite rhumatoïde est une 
maladie inflammatoire du tissu 
conjonctif atteignant surtou...
• C’est une des 
affections 
rhumatismales 
des plus 
répandues, 
avec une nette 
prédominance 
féminine. 
Abdsalah

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Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoide

  1. 1. Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde Par S / Abdessemed Abdsalah
  2. 2. Abdsalah Introduction • La polyarthrite rhumatoïde est une maladie inflammatoire du tissu conjonctif atteignant surtout le synoviale des articulations, Son retentissement fonctionnel est grave puisqu’elle provoque souvent des déformations et des destructions articulaires irréversibles.
  3. 3. • C’est une des affections rhumatismales des plus répandues, avec une nette prédominance féminine. Abdsalah
  4. 4. • La découverte du Facteur Rhumatoide remonte à 1940. Elle est due à WAALER et sera complétée par ROSE en 1948. • Ces auteurs ont démontré que les sérums de sujets atteints de polyarthrite rhumatoïde agglutinent les hématies de mouton sensibilisées par un sérum de lapin anti hématies de mouton. Abdsalah
  5. 5. • Les techniques classiques reposent toutes sur des réactions d’agglutinations passives entre des Facteurs Rhumatoides de classe igM et des igG fixées sur un support (hématies ou particules de latex). Abdsalah
  6. 6. Abdsalah Réaction de Waaler-Rose modifiée
  7. 7. Abdsalah Principe • Des hématies de mouton sont sensibilisées avec du sérum de lapin anti-hématies de mouton (igG). • La réaction est basée sur les propriétés hémagglutinantes spécifiques du FR, utilisées dans les réactions type WAALER-ROSE.
  8. 8. Abdsalah Principe Hématies sensibilisées FR de classe igM Agglutination
  9. 9. Abdsalah Matériel et réactifs - Hématies test - Hématie contrôle - Compte gouttes délivrant 50μl/gouttes - Agitateur à usage unique - Lame de verre quadrillé
  10. 10. Abdsalah Mode opératoire Sur une lame de verre : -déposer sur la lame dans chaque case T et R 50 μl de sérum à examiner -Agiter soigneusement les suspensions d’hématies témoin et révélateur.
  11. 11. - Ajouter dans la case T une goutte de réactif témoin « A » et dans la case R une goutte de réactif révélateur « B ». -Mélanger les deux gouttes en utilisant un agitateur à usage unique. NB : Abdsalah Lire les résultats pendant les deux premiers minutes de la manipulation.
  12. 12. Abdsalah Lecture  Réaction positive : • case T : absence d’agglutination • Case R : agglutination visible à l’oeil nu.  Réaction négative : • case T : Absence d’agglutination • Case R : Absence d’agglutination
  13. 13. Réaction d’agglutination au Abdsalah LATEX
  14. 14. Abdsalah Principe • Le test FR –Latex est un test d’agglutination rapide pour la détection directe et semi quantitative sur carte des facteurs rhumatoides (FR). • L’antigène, est une suspension de particules de latex recouvertes de gamma globulines humaines, qui s’agglutinent en présence des facteurs rhumatoides présents dans le sérum des patients.
  15. 15. Abdsalah Réactifs Antigène FR- Latex: 2,5 ml, Suspension de particules de latex recouvertes de gamma globulines humaines, azide de sodium 0,95 g/l la sensibilité de l’antigène est calibrée de manière à détecter environ 08UI/Ml d’une préparation internationale de référence de sérum de polyarthrite rhumatoïde (WHO). Contrôle positif: 1ml sérum humain, azide de sodium 0,95 g/l. Contrôle négatif: 1 ml sérum animal, azide de sodium 0,95 g/l.
  16. 16. Matériel  Agitateur rotatif réglable à 100 r.p.m  Cartes tests  Agitateurs à usage Abdsalah unique
  17. 17. Abdsalah Echantillons Sérum : stable pendant 48h à 2-8°C. • Les sérums hémolysés et lipémiques ne sont pas adéquats pour le test ; ils risquent de donner des résultats erronés.
  18. 18. Abdsalah Protocole • Préalablement, sortir les réactifs et les laisser s’équilibrer à la température de la pièce. • Déposer 50μl d’échantillon et une goutte de chaque contrôle dans les cercles individualisés sur la carte test. • Agiter légèrement le flacon d’antigène avant de l’utiliser. Déposer une goutte de réactif FR- Latex dans chaque cercle près de l’échantillon à tester.
  19. 19. • Mélanger avec agitateur à usage unique de manière à recouvrir totalement l’ère définie par le cercle. Utiliser un nouvel agitateur pour chaque échantillon. • Faire tourner la carte à 100 r.p.m. pendant 2 minutes Abdsalah
  20. 20. Lecture et Interprétation • Apres avoir retiré la carte de l’agitateur rotatif, examiner à l’oeil nu la présence ou l’absence d’agglutination dans la minute qui suit . • Une agglutination visible indique la présence de facteur rhumatoïde ≥08UI/ml. Abdsalah
  21. 21. • Un sérum positif doit être titré. Pour titrer, faire des dilutions de deux en deux dans une solution saline à 9 g /l. • le titre d’un sérum est défini comme étant la plus grande dilution donnant un résultat positif. • Le taux approximatif d’un sérum en FR (UI /mL) peut être obtenu en multipliant le titre par la limite de sensibilité (08 UI/mL). Abdsalah
  22. 22. Abdsalah Limites de la Méthode • Un diagnostic ne peut reposer uniquement sur ce test qui doit venir en complément d’autres tests biologiques (ex : Waaler-Rose) et de l’examen clinique. • L’incidence de résultats positifs avec des sérums de sujet apparemment sains est de l’ordre de 3-5%.
  23. 23. • Des réactions positives peuvent être obtenues non seulement dans le cas de polyarthrite rhumatoïde, mais aussi de mononucléose infectieuse, d’hépatite, de syphilis, et de patients âgés. Abdsalah
  24. 24. Abdsalah Notes • la sensibilité du test diminue à basse température. Les meilleurs résultats son obtenus à des températures supérieures à 10°C. • une lecture différée peut résulter en une surestimation du titre de FR.
  25. 25. Abdsalah

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