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Nutrition des plantes :
     Innover pour une agriculture
        compétitive et durable
    15 & 16 novembre 2012 - Montpellier SupAgro INRA

www.rencontres–qualimediterranee.fr
Pourquoi et comment
améliorer la nutrition en fer
      des plantes ?




             BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
           en fer des plantes ?
Le fer est un élément essentiel du monde
vivant

• 4ème élément le plus abondant sur la planète

• Fe = métal de transition
      • Fe2+ = fer ferreux, réduit
      • Fe3+ = fer ferrique, oxydé
      • Impliqué dans toutes les réactions d’oxydo-réduction et
        dans les chaînes de transfert d’électrons des cellules


                           Mais….
                              BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
              en fer des plantes ?
Le fer est un facteur limitant de la production de
                    biomasse
• Fer = facteur limitant dans 30 à 40 % des océans pour la production
  primaire de phytoplancton (Martin & Fitzwater 1988 Nature 331: 341-343)




• Egalement facteur limitant pour la production de biomasse des
  végétaux supérieurs (Ravet et al 2009 Plant Journal 57: 400-412 )



                                    BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
            en fer des plantes ?
Le fer est peu disponible

               Fe3+       Fe2+

      pH > 7


           Fe(OH)3 insoluble




   • 1 / 3 des sols cultivés sont concernés (sols calcaires)
   • Carence en fer = chlorose inter-nervaire



                                   BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
             en fer des plantes ?
   La chlorose ferrique impacte le rendement et la
           qualité des produits végétaux
Chloroplastes = organites des feuilles contenant la chlorophylle
       + photosynthèse : assimilation CO2 ---> squelette C des
molécules organiques
       + N et S assimilation ---> Synthèse des Acides Aminés et
                                                     des Vitamines



       + Fe                      - Fe




                                 BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
            en fer des plantes ?
La qualité des produits végétaux (contenu en fer)
            impacte la santé humaine
• La diète de 2/3 de la population mondiale repose sur des produits
  végétaux
• 100 g de farine de céréales contiennent moins de 10% de la
  recommandation journalière d’apport de fer.

                        En conséquence :

• 3 milliards d’humains sont carencés en fer (retard du
  développement psycho-moteur, fatigue chronique, plus grandes
  susceptibilité aux infections …)
                        source : http://www.who.int/nutrition/topics/ida/en/index.html


                                   BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
            en fer des plantes ?
Le chlorose ferrique est réversible




 • 50% de fer et de chlorophylle en moins dans les feuilles après
   dix jours de carence en fer
 • Réversible 48 h après apport de fer.


                               BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
            en fer des plantes ?
Le fer en excès peut-être toxique
             (Superoxide ion )
Fe2+ + O2  Fe3+ + O2•-
                                                  Stress Oxydatif
Fe2+ +   H2O2   Fe3+ +   HO•
                          +     HO-
              (Hydroxyl radical)

         Reaction de Fenton



    • Humains = hémochromatose
    • Plantes = « bronzing » (Riz)



                                      BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
           en fer des plantes ?
Les acteurs moléculaires de la nutrition en fer :
       acquisition du fer par les racines
                            SOIL                  ROOTS
                             H+       AHA2
                                             H+           NON-GRAMINEES
                            Fe3+      FRO2
                            Fe2+      IRT1         Fe2+

                                          Phytosiderophores
                                PS    TOM1     PS
                                      YS1     Fe3+-PS     GRAMINEES
                            Fe3+-PS
 • Avantage écologique
   des graminées en sol   • 2 principes :
   calcaire                       • réduction
                                  • chélation
                          BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
            en fer des plantes ?
 Les acteurs moléculaires de la nutrition en fer :
       distribution entre organes et tissus

• Combinatoire de transporteurs
  membranaires et de petites
  molécules organiques (citrate et
  nicotianamine) affines pour Fe2+ et
  / ou Fe3+
    (Curie et al 2009 Ann Bot 103: 1-11)

• Les 2 principes réduction et
  chélation s’appliquent aussi à ce
  niveau



                                      BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
           en fer des plantes ?
Les acteurs moléculaires de la nutrition en fer :
           répartition intracellulaire
               • Trois compartiments clés du métabolisme
                 cellulaire du fer : vacuoles, mitochondries et
                 chloroplastes
               • Répartition coordonnée du fer entre ces trois
                 compartiments par transporteurs membranaires,
                 petites molécules organiques affines du fer, en
                 utilisant les deux principes de réduction et de
                 chélation
               • Machineries de biogenèse de l’hème et des
                 centre Fe-S dans chloroplastes et mitochondries
                 = cœur du métabolisme cellulaire (respiration /
                 photosynthèse) et donc de la production végétale

                    (Briat et al 2007 Curr Opin Plant Biol 10: 276-282)
                          BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
            en fer des plantes ?
      Les solutions agronomiques : cibler les
        variables réduction et / ou chélation
• Augmenter la disponibilité du fer du sol : acidification,
  amendements organiques (acides humiques) et phosphatés

• Pratique culturale : cultures alternées graminées / non graminées
  (avantageux pour non graminées mais pas l’inverse)

• « Fer – tilisation » : chélates organiques (Fe-EDDHA =
  sequestrène; monopole CIBA GEIGY (BASF depuis 2009)
      • cher donc réservé aux cultures à haute valeur ajoutée
      • apport annuel
      • EDDHA entre dans la plante

                               BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
            en fer des plantes ?
      Les solutions génétiques (amélioration des
                       plantes)
• Variabilité naturelle du contenu en fer : pour les graines entre 5 et
  22 mg x kg-1 chez le riz, 10 et 160 mg x kg-1chez le maïs et 15 et
  360 mg x kg-1 chez le blé (White and Broadley 2005 Trends Plant Sci 10: 386-593)

• Cependant les variétés cultivées ont faibles niveaux en fer =
  minimum journalier requis dans la diète pas atteint. [Fe] grains de
  blé stable entre 1845 et 1960, puis décroit rapidement depuis
  introduction des variétés à haut rendement (Fan MS et al 2008 J Trace Elem
   Med Biol 22: 315-324)


• Programmes amélioration contenu minéral des graines de
  légumineuses (introgression, utilisation marqueurs moléculaires)

                                      BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
             en fer des plantes ?
             Les solutions biotechnologiques
        (transgenèse) pour la nutrition des plantes

• Levée de chlorose et augmentation du rendement en grain d’un
  facteur 8 de riz cultivé en sol calcaire après manipulation par génie
  génétique de ses propriétés
       • de réduction (surexpression réductase ferrique des racines
          [Ishimaru et al 2007 PNAS 104 : 7373-7378])
       • de chélation du fer (augmentation production sidérophores
          par surexpression de la nicotiananmine aminotransférase
          [Takahashi et al 2001 Nature Biotech 19 : 466-469])




                                  BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
Pourquoi et comment améliorer la nutrition
              en fer des plantes ?
    Les solutions biotechnologiques (transgenèse)
         pour la qualité des produits végétaux
                      (biofortification)
                 (Murgia et al 2011 Trends Plant Sci 17: 47-55)
• Plantes (laitue, maïs, riz, banane …) surexprimant les ferritines (Lucca
  et al 2002 J Am Coll Nutr 21: 184S-190S)
      • crée un puits de fer
      • induit les systèmes de transport des racines
      • 1,5 à 3 fois plus de fer dans les organes ciblés (feuilles,
         graines)
• Nicotianamine (NA) et transporteur YSL =
      • Facteur limitant pour acheminement Fe dans les graines
      • Riz transgénique surexprimant NA synthase, YSL et ferritine =
         X [Fe] et [Zn] grains par 4,4 à 6 fois et 1,6 fois respectivement
           (Masuda et al 2012 Scientific Report 2 : 543)


                                             BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
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  • 2. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 3. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Le fer est un élément essentiel du monde vivant • 4ème élément le plus abondant sur la planète • Fe = métal de transition • Fe2+ = fer ferreux, réduit • Fe3+ = fer ferrique, oxydé • Impliqué dans toutes les réactions d’oxydo-réduction et dans les chaînes de transfert d’électrons des cellules Mais…. BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 4. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Le fer est un facteur limitant de la production de biomasse • Fer = facteur limitant dans 30 à 40 % des océans pour la production primaire de phytoplancton (Martin & Fitzwater 1988 Nature 331: 341-343) • Egalement facteur limitant pour la production de biomasse des végétaux supérieurs (Ravet et al 2009 Plant Journal 57: 400-412 ) BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 5. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Le fer est peu disponible Fe3+ Fe2+ pH > 7 Fe(OH)3 insoluble • 1 / 3 des sols cultivés sont concernés (sols calcaires) • Carence en fer = chlorose inter-nervaire BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 6. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? La chlorose ferrique impacte le rendement et la qualité des produits végétaux Chloroplastes = organites des feuilles contenant la chlorophylle + photosynthèse : assimilation CO2 ---> squelette C des molécules organiques + N et S assimilation ---> Synthèse des Acides Aminés et des Vitamines + Fe - Fe BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 7. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? La qualité des produits végétaux (contenu en fer) impacte la santé humaine • La diète de 2/3 de la population mondiale repose sur des produits végétaux • 100 g de farine de céréales contiennent moins de 10% de la recommandation journalière d’apport de fer. En conséquence : • 3 milliards d’humains sont carencés en fer (retard du développement psycho-moteur, fatigue chronique, plus grandes susceptibilité aux infections …) source : http://www.who.int/nutrition/topics/ida/en/index.html BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 8. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Le chlorose ferrique est réversible • 50% de fer et de chlorophylle en moins dans les feuilles après dix jours de carence en fer • Réversible 48 h après apport de fer. BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 9. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Le fer en excès peut-être toxique (Superoxide ion ) Fe2+ + O2  Fe3+ + O2•- Stress Oxydatif Fe2+ + H2O2  Fe3+ + HO• + HO- (Hydroxyl radical) Reaction de Fenton • Humains = hémochromatose • Plantes = « bronzing » (Riz) BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 10. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Les acteurs moléculaires de la nutrition en fer : acquisition du fer par les racines SOIL ROOTS H+ AHA2 H+ NON-GRAMINEES Fe3+ FRO2 Fe2+ IRT1 Fe2+ Phytosiderophores PS TOM1 PS YS1 Fe3+-PS GRAMINEES Fe3+-PS • Avantage écologique des graminées en sol • 2 principes : calcaire • réduction • chélation BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 11. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Les acteurs moléculaires de la nutrition en fer : distribution entre organes et tissus • Combinatoire de transporteurs membranaires et de petites molécules organiques (citrate et nicotianamine) affines pour Fe2+ et / ou Fe3+ (Curie et al 2009 Ann Bot 103: 1-11) • Les 2 principes réduction et chélation s’appliquent aussi à ce niveau BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 12. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Les acteurs moléculaires de la nutrition en fer : répartition intracellulaire • Trois compartiments clés du métabolisme cellulaire du fer : vacuoles, mitochondries et chloroplastes • Répartition coordonnée du fer entre ces trois compartiments par transporteurs membranaires, petites molécules organiques affines du fer, en utilisant les deux principes de réduction et de chélation • Machineries de biogenèse de l’hème et des centre Fe-S dans chloroplastes et mitochondries = cœur du métabolisme cellulaire (respiration / photosynthèse) et donc de la production végétale (Briat et al 2007 Curr Opin Plant Biol 10: 276-282) BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 13. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Les solutions agronomiques : cibler les variables réduction et / ou chélation • Augmenter la disponibilité du fer du sol : acidification, amendements organiques (acides humiques) et phosphatés • Pratique culturale : cultures alternées graminées / non graminées (avantageux pour non graminées mais pas l’inverse) • « Fer – tilisation » : chélates organiques (Fe-EDDHA = sequestrène; monopole CIBA GEIGY (BASF depuis 2009) • cher donc réservé aux cultures à haute valeur ajoutée • apport annuel • EDDHA entre dans la plante BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 14. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Les solutions génétiques (amélioration des plantes) • Variabilité naturelle du contenu en fer : pour les graines entre 5 et 22 mg x kg-1 chez le riz, 10 et 160 mg x kg-1chez le maïs et 15 et 360 mg x kg-1 chez le blé (White and Broadley 2005 Trends Plant Sci 10: 386-593) • Cependant les variétés cultivées ont faibles niveaux en fer = minimum journalier requis dans la diète pas atteint. [Fe] grains de blé stable entre 1845 et 1960, puis décroit rapidement depuis introduction des variétés à haut rendement (Fan MS et al 2008 J Trace Elem Med Biol 22: 315-324) • Programmes amélioration contenu minéral des graines de légumineuses (introgression, utilisation marqueurs moléculaires) BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 15. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Les solutions biotechnologiques (transgenèse) pour la nutrition des plantes • Levée de chlorose et augmentation du rendement en grain d’un facteur 8 de riz cultivé en sol calcaire après manipulation par génie génétique de ses propriétés • de réduction (surexpression réductase ferrique des racines [Ishimaru et al 2007 PNAS 104 : 7373-7378]) • de chélation du fer (augmentation production sidérophores par surexpression de la nicotiananmine aminotransférase [Takahashi et al 2001 Nature Biotech 19 : 466-469]) BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP
  • 16. Pourquoi et comment améliorer la nutrition en fer des plantes ? Les solutions biotechnologiques (transgenèse) pour la qualité des produits végétaux (biofortification) (Murgia et al 2011 Trends Plant Sci 17: 47-55) • Plantes (laitue, maïs, riz, banane …) surexprimant les ferritines (Lucca et al 2002 J Am Coll Nutr 21: 184S-190S) • crée un puits de fer • induit les systèmes de transport des racines • 1,5 à 3 fois plus de fer dans les organes ciblés (feuilles, graines) • Nicotianamine (NA) et transporteur YSL = • Facteur limitant pour acheminement Fe dans les graines • Riz transgénique surexprimant NA synthase, YSL et ferritine = X [Fe] et [Zn] grains par 4,4 à 6 fois et 1,6 fois respectivement (Masuda et al 2012 Scientific Report 2 : 543) BRIAT Jean-François /CNRS-UMR B&PMP