Diese Präsentation wurde erfolgreich gemeldet.
Wir verwenden Ihre LinkedIn Profilangaben und Informationen zu Ihren Aktivitäten, um Anzeigen zu personalisieren und Ihnen relevantere Inhalte anzuzeigen. Sie können Ihre Anzeigeneinstellungen jederzeit ändern.

ICH S2 (Guidance on Genotoxicity Testing and Data Interpretation for Pharmaceuticals Intended for Human Use)

Руководство по испытаниям на генотоксичность лекарственных препаратов для медицинского применения и интерпретации их результатов (ICH S2)

  • Als Erste(r) kommentieren

  • Gehören Sie zu den Ersten, denen das gefällt!

ICH S2 (Guidance on Genotoxicity Testing and Data Interpretation for Pharmaceuticals Intended for Human Use)

  1. 1. МЕЖДУНАРОДНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ ПО ГАРМОНИЗАЦИИ ТЕХНИЧЕСКИХ ТРЕБОВАНИЙ К РЕГИСТРАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ ГАРМОНИЗИРОВАННОЕ ТРЕХСТОРОННЕЕ РУКОВОДСТВО ICH РУКОВОДСТВО ПО ИСПЫТАНИЯМ НА ГЕНОТОКСИЧНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ И ИНТЕРПРЕТАЦИИ ИХ РЕЗУЛЬТАТОВ S2(R1) Текущая версия (этап 4) от 9 ноября 2011 г. Настоящее руководство разработано соответствующей экспертной рабочей группой ICH и согласовано с уполномоченными органами в соответствии с процессом ICH. На этапе 4 процесса окончательный проект передается уполномоченным органам Европейского союза, Японии и США на утверждение
  2. 2. 2 S2(R1) История документа Код История Дата S2A: Руководство по частным аспектам регуляторных испытаний на генотоксичность лекарственных препаратов S2A Одобрено Управляющим комитетом в качестве этапа 2 и издано для публичного обсуждения 10 марта 1994 г. S2A Одобрено Управляющим комитетом в качестве этапа 4 и передано трем уполномоченным органам ICH на утверждение 19 июля 1995 г. S2B: Генотоксичность: стандартная батарея испытаний на генотоксичность лекарственных препаратов S2B Одобрено Управляющим комитетом в качестве этапа 2 и издано для публичного обсуждения 2 октября 1996 г. S2B Одобрено Управляющим комитетом в качестве этапа 4 и передано трем уполномоченным органам ICH на утверждение 16 июля 1997 г. S2(R1): Пересмотр руководства S2A и S2B, которые подверглись слиянию при пересмотре S2(R1) S2(R1) одобрен Управляющим комитетом в качестве этапа 2 и издан для публичного обсуждения 6 марта 2008 г. Текущая версия (этап 4) S2(R1) S2(R1) одобрен Управляющим комитетом в качестве этапа 4 и передан трем уполномоченным органам ICH на утверждение. 9 ноября 2011 г.
  3. 3. 3 РУКОВОДСТВО ПО ИСПЫТАНИЯМ НА ГЕНОТОКСИЧНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ И ИНТЕРПРЕТАЦИИ ИХ РЕЗУЛЬТАТОВ Гармонизированное трехстороннее руководство ICH Достигнув этапа 4 процесса ICH на заседании Управляющего комитета ICH 9 ноября 2011 г., настоящее руководство передается трем уполномоченным органам ICH на утверждение СОДЕРЖАНИЕ 1. Введение...............................................................................................................................................5 1.1 Цели руководства........................................................................................................................5 1.2 Предпосылки ...............................................................................................................................5 1.3 Сфера применения ......................................................................................................................5 1.4 Общие принципы ........................................................................................................................5 2. Стандартная батарея тестов на генотоксичность.............................................................................5 2.1 Обоснование ................................................................................................................................6 2.2 Описание двух вариантов стандартной батареи ......................................................................6 2.3 Модификация батареи тестов ....................................................................................................8 2.3.1 Поисковые клинические исследования...............................................................................8 2.3.2 Испытание соединений, токсичных для бактерий .............................................................8 2.3.3 Соединения, имеющие структурные признаки генотоксической активности.................8 2.3.4 Ограничения проведения in vivo испытаний......................................................................8 2.4 Обнаружение мутагенов для генеративных клеток.................................................................9 3. Рекомендации по проведению испытаний in vivo............................................................................9 3.1 Повторение испытаний и интерпретация их результатов.......................................................9 3.2 Рекомендуемый протокол испытания на бактериальные мутации ........................................9 3.2.1 Выбор высшей дозы..............................................................................................................9 3.2.2 Дизайн исследования/протокол испытаний........................................................................9 3.3 Рекомендуемые протоколы испытаний на клетках млекопитающих ..................................10 3.3.1 Выбор максимальной концентрации.................................................................................10 3.3.2 Дизайн исследования/протокол испытаний......................................................................10 3.3.3 Положительные контроли ..................................................................................................11 4. Рекомендации по проведению in vivo испытаний..........................................................................11 4.1 Тесты обнаружения хромосомных повреждений in vivo.......................................................11 4.2 Прочие in vivo испытания на генотоксичность ......................................................................11 4.3 Выбор дозы для in vivo испытаний..........................................................................................12 4.3.1 Краткосрочные исследования ............................................................................................12 4.3.2 Исследования с многократным введением .......................................................................12 4.3.3 Испытание соединений, токсичных для крови и костного мозга...................................13 4.4 Подтверждение достижения экспозиции в тканях-мишенях при отрицательных результатах in vivo испытаний .............................................................................................................13
  4. 4. 4 4.4.1 Получение положительных результатов in vitro испытаний на генотоксичность (или отсутствие результатов испытаний)................................................................................................13 4.4.2 Получение отрицательных результатов in vitro испытаний на генотоксичность .........14 4.5 Режим взятия образцов в in vivo испытаниях.........................................................................14 4.6 Число проанализированных животных...................................................................................14 4.7 Использование самцов/самок крыс в in vivo испытаниях на генотоксичность...................15 4.8 Путь введения............................................................................................................................15 4.9 Использование в in vivo исследованиях положительных контролей ...................................15 5. Руководство по оценке результатов испытаний и стратегии проведения проверочных испытаний..................................................................................................................................................15 5.1 Оценка биологической значимости.........................................................................................16 5.2 Оценка результатов, полученных в in vitro испытаниях .......................................................16 5.2.1 Оценка положительных результатов, полученных in vitro в тесте на бактериальные мутации ..............................................................................................................................................16 5.2.2 Оценка положительных результатов, полученных in vitro в испытаниях на клетках млекопитающих.................................................................................................................................16 5.2.3 Оценка отрицательных результатов, полученных in vitro...............................................17 5.3 Оценка результатов, полученных в in vivo испытаниях........................................................17 5.4 Проверочные стратегии при получении положительных результатов................................17 5.4.1 Проверочные меры в зависимости от результатов, полученных in vitro в испытаниях на клетках млекопитающих..............................................................................................................17 5.4.2 Верификация положительных результатов in vivo микроядерного теста......................18 5.5 Верифицирующее испытание на генотоксичность в связи с обнаружением опухолей в биологическом испытании на канцерогенность.................................................................................19 6. Примечания........................................................................................................................................19 7. Глоссарий...........................................................................................................................................25 8. Ссылки................................................................................................................................................28
  5. 5. 5 РУКОВОДСТВО ПО ИСПЫТАНИЯМ НА ГЕНОТОКСИЧНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ И ИНТЕРПРЕТАЦИИ ИХ РЕЗУЛЬТАТОВ 1. ВВЕДЕНИЕ 1.1 Цели руководства Настоящее руководство заменяет и объединяет руководства ICH S2A и S2B. Цель пересмотра заключается в оптимизации стандартной батареи исследований генетической токсикологии для прогнозирования потенциальных рисков у человека и представления рекомендаций по интерпретации результатов с конечной целью совершенствования характеристики рисков возникновения канцерогенного действия, обусловленного изменениями генетического материала. В пересмотренном руководстве описаны международно согласованные стандарты проверочных испытаний и интерпретации положительных результатов стандартной батареи in vitro и in vivo исследований генетической токсикологии, включая оценку незначимых результатов. Настоящее руководство распространяется лишь на продукты, разрабатываемые в качестве лекарственных препаратов для медицинского применения. 1.2 Предпосылки В соответствующих случаях учтены рекомендации руководств Организации экономического сотрудничества и развития (ОЭСР) и отчетов Международной группы по испытаниям на генотоксичность (МГИГ). В определенных случаях имеются отступления от рекомендаций ОЭСР и МГИГ, которые обозначены в тексте. Настоящее руководство неразрывно связано с остальными руководствами ICH. 1.3 Сфера применения Настоящее руководство сосредоточено на испытаниях новых фармацевтических субстанций, представляющих собой «небольшие молекулы», оно не распространяется на биологические препараты. Рекомендации по срокам проведения исследований относительно клинической разработки содержатся в руководстве ICH M3(R2). 1.4 Общие принципы Испытания на генотоксичность можно определить как in vitro и in vivo испытания, направленные на обнаружение соединений, индуцирующих повреждение генетического материала за счет различных механизмов. Эти испытания позволяют выявить вред в отношении повреждения ДНК и ее репарации. Репарация повреждения ДНК, обусловленного генными мутациями, более масштабным повреждением хромосом и рекомбинацией, в целом, считается обязательной для реализации наследуемых эффектов и многоэтапного процесса онкогенеза — комплексного процесса, в котором генетические изменения, вероятно, играют лишь ограниченную роль. Изменение числа хромосом также приводит к туморогенезу и свидетельствует о потенциальной анеуплоидии генеративных клеток. Соединения, давшие положительные результаты в испытаниях, направленных на обнаружение подобного повреждения, могут являться канцерогенами и (или) мутагенами человека. Поскольку для человека показана зависимость между экспозицией определенными химическими соединениями и канцерогенностью, тогда как аналогичную зависимость сложно подтвердить в отношении наследственных заболеваний, испытания на генотоксичность преимущественно проводят для прогнозирования канцерогенности. Тем не менее, поскольку мутации в генеративных линиях однозначно приводят к заболеваниям у человека, подозрение на то, что соединение может индуцировать наследуемые эффекты, признается столь же серьезным, как и подозрения на то, что соединение может вызывать рак. Кроме того, результаты испытаний на генотоксичность представляют ценность для интерпретации результатов исследований канцерогенности.
  6. 6. 6 2. СТАНДАРТНАЯ БАТАРЕЯ ТЕСТОВ НА ГЕНОТОКСИЧНОСТЬ 2.1 Обоснование Регистрация лекарственных препаратов требует всесторонней оценки их генотоксического потенциала. Глубокий анализ показал, что многие соединения, являющиеся мутагенами в испытании на обратные мутации у бактерий (тест Эймса), являются канцерогенами грызунов. Добавление in vitro испытаний у млекопитающих повышает чувствительность обнаружения канцерогенов грызунов и расширяет спектр выявляемых генетических явлений, но оно также снижает специфичность прогнозирования, т.е. повышает частоту положительных результатов, не коррелирующих с канцерогенностью у грызунов. Тем не менее, подход, основанный на батарее тестов, все же обоснован, поскольку ни один тест сам по себе не позволяет обнаружить все генотоксические механизмы, значимые для туморогенеза. Общие характеристики стандартной батареи тестов: i. Оценка мутагенности в испытании на обратные генные мутации у бактерий. Показано, что это испытание позволяет обнаруживать значимые генетические изменения и большинство генотоксичных канцерогенов грызунов и человека. ii. Генотоксичность также следует оценить in vitro и (или) in vivo на клетках млекопитающих в соответствии с нижеописанным. Широко используется несколько in vitro тест-систем на основе клеток млекопитающих, которые признаны достаточно валидированными: in vitro испытание на хромосомные аберрации в метафазу, микроядерный тест in vitro (Примечание 1) и in vitro испытание на мутации гена Tk (тимидинкиназы) в L5178Y-клетках мышиной лимфомы (ИМЛ). Эти три испытания в настоящее время признаны одинаково пригодными, и поэтому являются взаимозаменяемыми для количественного определения хромосомного повреждения при комплексном использовании в комплексе с другими испытаниями на генотоксичность в рамках стандартной батареи тестов лекарственных препаратов при использовании протоколов испытаний, рекомендуемых настоящим руководством. В батарею тестов включено(ы) испытание(я) in vivo, поскольку некоторые агенты мутагенны in vivo, но не in vitro (Примечание 2), а также в связи с желательностью проведения испытаний, учитывающий такие факторы, как абсорбция, распределение, метаболизм и выведение. По этой причине в настоящее время предусмотрен выбор между анализом микроядер в эритроцитах (в крови или костном мозге) или хромосомных аберраций в клетках костного мозга, находящихся в состоянии метафазы (Примечание 3). Также в целях цитогенетического анализа можно использовать культивированные лимфоциты, взятые у экспериментальных животных, подвергшихся экспозиции, однако опыт проведения таких анализов более ограничен. In vitro и in vivo испытания, определяющие хромосомные аберрации в клетках метафазы, способны обнаруживать широкий спектр изменений целостности хромосом. Разрыв хроматид и хромосом, приводящий к образованию ацентрического фрагмента, может приводить к формированию микроядер, поэтому испытания, способные обнаруживать хромосомные аберрации или микроядра признаны подходящими для обнаружения кластогенов. Микроядра также могут образовываться, если одна или более цельных хромосом задерживаются в анафазе, поэтому микроядерные тесты способны обнаруживать некоторые индукторы анеуплоидии. ИМЛ обнаруживает мутации в гене Tk, которые могут быть обусловлены как генными мутациями, так и повреждением хромосом. Имеются некоторые данные, что ИМЛ способно также обнаруживать потерю хромосом. Разработано несколько дополнительных in vivo испытаний, которые можно включить в батарею или использовать в качестве проверочных испытаний для получения подтверждающих данных при оценке результатов in vitro и in vivo испытаний (см. ниже). Отрицательные результаты подходящих in vivo испытаний (как правило, двух) с достаточным обоснованием выбранных конечных точек и подтверждением достижения экспозиции (см. раздел 4.4), в целом, достаточны для подтверждения отсутствия значимого генотоксического риска. 2.2 Описание двух вариантов стандартной батареи Следующие два варианта стандартной батареи признаны одинаково пригодными (Примечание 4):
  7. 7. 7 Вариант 1 i. Испытание на генные мутации у бактерий. ii. Цитогенетическое испытание на хромосомные повреждения (in vitro испытание на хромосомные аберрации в метафазу или микроядерный тест in vitro) или in vitro испытание на мутации гена Tk в мышиной лимфоме. iii. In vivo испытание на генотоксичность, как правило, испытание на повреждение хромосом в кроветворных клетках грызунов, либо на предмет микроядер, либо хромосомных аберраций в метафазу. Вариант 2 i. Испытание на генные мутации у бактерий. ii. In vivo оценка генотоксичности на двух различных тканях, как правило, микроядерный тест в кроветворных клетках грызунов и второе in vivo испытание. В отсутствие обоснования иного (см. ниже, а также раздел 4.2 и Примечание 12), это, как правило, испытание на разрыв цепочек ДНК в печени. Накоплен больший исторический опыт в отношении варианта 1, отчасти в связи с тем, что он основан на S2A и B. Тем не менее, аргументация между выбором вариантов 1 и 2 одинаково приемлема: при получении положительного результата в in vitro испытании на клетках млекопитающих однозначно отрицательные результаты двух должным образом проведенных in vivo испытаний с подходящими тканями и подтвержденной достаточной экспозицией признаются достаточным подтверждением отсутствия генотоксического потенциала in vivo (см. раздел 5.4.1.1). Таким образом, стратегия испытаний с проведением двух in vivo тестов тождественна стратегии, принимаемой при перепроверке положительных результатов in vitro (Примечание 4). При обоих вариантах стандартной батареи можно использовать дизайны исследований острой токсичности или токсичности при многократном введении. При многократном введении следует предпринять усилия по включению в исследования токсичности, если это научно обосновано, генотоксических конечных точек. При оценке нескольких in vivo конечных точек предпочтительно включить их в одно исследование. Зачастую до начала исследования имеется достаточно сведения о потенциальной пригодности доз в исследовании токсичности с многократным введением, их можно использовать для определения пригодности острого или комплексного исследования. Если по завершении любого из вариантов стандартной батареи тестов, проведенных и проанализированных в соответствии с действующими рекомендациями, соединения дают отрицательные результаты, как правило, признают достаточное подтверждение отсутствия генотоксической активности и отсутствие необходимости проведения дополнительных тестов. Соединения, дающие положительные результаты в стандартной батарее тестов, могут, в зависимости от показания к применению, требовать проведения более интенсивных испытаний (см. раздел 5). Разработано несколько in vivo испытаний, которые можно использовать в качестве второй части оценки in vivo в рамках варианта 2 (см. раздел 4.2), некоторые из них можно включить в исследования токсичности при многократном введении. Исходя из экспозиции и метаболизирующей активности, предпочтительной тканью, как правило, является печень, однако выбор in vivo ткани и испытания должен основываться на таких факторах, как знание потенциального механизма, метаболизма in vivo, или тканей, подвергающихся экспозиции, рассматриваемых в качестве значимых. Информацию о численных изменениях можно получить в in vitro испытаниях на клетках млекопитающих или микроядерных тестах in vitro или in vivo. Элементами стандартных протоколов, способными обнаруживать такой потенциал, являются увеличение митотического индекса, индукция полиплоидии и оценка микроядер. Получены также экспериментальные данные о том, что с помощью ИМЛ можно обнаружить веретенные яды. С целью включения более прямой возможности обнаружения хромосомных потерь (потенциал возникновения анеуплоидии) предпочтительным in vivo цитогенетическим испытанием в рамках варианта 2 является микроядерный тест, а не испытание на хромосомные аберрации.
  8. 8. PharmAdvisor библиотека научно-правовых актов, научных и административных руководств ICH, EC и США На этом сайте представлен бесплатный фрагмент документа. Купите полную версию на www.pharmadvisor.ru info@pharmadvisor.ru +7 999 828 0097

×