O documento descreve a composição química dos óleos essenciais extraídos de seis espécies de plantas do gênero Baccharis encontradas na região de Campos de Altitude em São Paulo. Os óleos essenciais foram analisados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas e identificados 67 compostos, predominantemente sesquiterpenos. As composições químicas variaram entre as espécies, com pouca sobreposição de compostos.

1. Universidade Federal de
Goiás – Campus Catalão
Curso Cromatografia gasosa –
espectrometria de massas
Patricia T. Baraldi
ptbaraldi@yahoo.com.br
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2. Óleos essenciais
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3. Bill Gates foi convidado por uma escola secundária para uma palestra. Chegou de helicóptero, tirou o
papel do bolso onde havia escrito onze itens. Leu tudo em menos de 5 minutos, foi aplaudido por mais
de 10 minutos sem parar, agradeceu e foi embora em seu helicóptero. O que estava escrito é muito
interessante, leiam:
1. A vida não é fácil — acostume-se com isso.
2. O mundo não está preocupado com a sua auto-estima. O mundo espera que você faça alguma coisa
útil por ele ANTES de sentir-se bem com você mesmo.
3. Você não ganhará R$20.000 por mês assim que sair da escola/universidade. Você não será vicepresidente de uma empresa com carro e telefone à disposição antes que você tenha conseguido
comprar seu próprio carro e telefone.
4. Se você acha seu professor rude, espere até ter um chefe. Ele não terá pena de você.
5. Vender jornal velho ou trabalhar durante as férias não está abaixo da sua posição social. Seus avós
têm uma palavra diferente para isso: eles chamam de oportunidade.
6. Se você fracassar, não é culpa de seus pais. Então não lamente seus erros, aprenda com eles.
7. Antes de você nascer, seus pais não eram tão críticos como agora. Eles só ficaram assim por pagar as
suas contas, lavar suas roupas e ouvir você dizer que eles são “ridículos”. Então antes de salvar o
planeta para a próxima geração querendo consertar os erros da geração dos seus pais, tente limpar seu
próprio quarto.
8. Sua escola pode ter eliminado a distinção entre vencedores e perdedores, mas a vida não é assim. Em
algumas escolas você não repete mais de ano e tem quantas chances precisar até acertar. Isto não se
parece com absolutamente NADA na vida real. Se pisar na bola, está despedido… RUA!!! Faça certo da
primeira vez!
9. A vida não é dividida em semestres. Você não terá sempre os verões livres e é pouco provável que
outros empregados o ajudem a cumprir suas tarefas no fim de cada período.
10. Televisão NÃO é vida real. Na vida real, as pessoas têm que deixar o barzinho ou a boate e ir
trabalhar.
11. Seja legal com os CDFs (aqueles estudantes que os demais julgam que são uns babacas). Existe uma
grande probabilidade de você vir a trabalhar PARA um deles.
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4. Óleo essencial
Os óleos essenciais compreendem uma mistura de substâncias
voláteis extraída de plantas. Podem se revelar como matérias-primas de
importância para as indústrias cosmética, farmacêutica e alimentícia,
sendo geralmente os componentes de ação terapêutica de plantas
medicinais
Óleos essenciais são compostos que possuem aromas “aromáticos”
voláteis extraídos de plantas aromáticas por processos de destilação,
compressão de frutos ou extração com o uso de solventes. Geralmente
são altamente complexos, compostos às vezes de mais de uma centena
de componentes químicos.
http://pt.wikipedia.org/wiki/%C3%93leo_essencial
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5. Óleo essencial
O que define o fato de um extrato ser um óleo essencial é o processo de
obtenção, não sua composição química. Um óleo essencial de flor de
laranjeira (óleo essencial de neroli) é obtido por hidrodestilação (ou arraste
a vapor) e contém componentes voláteis
Um óleo essencial de laranja, obtido por prensagem do fruto,seguida de
centrifugação, contém componentes voláteis (terpenos, ésteres, aldeídos),
mas também contém ceras, pigmentos e flavonóides, dentre outras classes
de constituintes não voláteis. Assim, a definição de óleo essencial não se
limita somente à volatilidade de sua composição
Extratos obtidos com o uso de solventes, fluidos supercríticos, ceras e
graxas NÃO SÃO definidos como óleos essenciais, embora sejam também
extratos de compostos com aromas “aromáticos”
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6. Óleo essencial
Óleos essenciais não possuem ácidos graxos e se volatilizam com
extrema facilidade na sua grande maioria. Vários ácidos graxos,
embora pouco voláteis, podem ser destilados junto com componentes
terpênicos, sendo encontrados nos óleos essenciais, como o mirístico e
o palmítico
Na atualidade são produtos empregados como flavorizantes de
alimentos, na confecção de perfumes nobres, na indústria para síntese
de compostos aromáticos e remédios, como recurso terapêutico na
aromaterapia e aromatologia
Dada à sua complexidade química, os óleos essenciais desenvolvem
vasta amplitude de ações terapêuticas.
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7. Óleo essencial
Óleos essenciais no Brasil
Pau-rosa 1967 (1º registro de extração)
perfume Chanel n° 5 e de vários perfumes europeus e
americanos.
Eucalipto, capim limão, menta, laranja, canela e sassafrás
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8. Óleo essencial
Dependendo da espécie vegetal em questão, os óleos essenciais
podem
estar
presentes
em
diferentes
partes,
tais
como
(folhas, flores, madeira, ramos, galhos, frutos, rizomas) e raízes
Após sua biossíntese, são armazenados em células e locais especiais,
tais como dutos, canais e bolsas secretoras, além de tricomas e
glândulas
Estão
presentes
principalmente
em
espécies
das
famílias Apiaceae, Lauraceae, Myristicaceae, Lamiaceae, Asteraceae,
Myrtaceae, Rosaceae, Piperaceae e Rutaceae, as quais podem ser
encontradas em praticamente todos os continentes
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9. Óleo essencial
Os óleos essenciais compreendem uma complexa mistura de
substâncias, podendo chegar até várias centenas delas
Porém, sempre há a predominância de uma até três substâncias que
caracterizaram a espécie vegetal em questão, por exemplo lhe
conferindo um aroma característico.
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10. Óleo essencial
Mentol
Existe também mentol sintético
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11. Óleo essencial
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12. Óleo essencial
Erva-baleeira (Cordia verbenacea) usada por pescadores no litoral
das regiões Sul e Sudeste
É a matéria-prima do medicamento. Também é chamada de ervada-praia e maria-milagrosa
O creme terá o nome comercial de Acheflan e é eficaz para casos de
dores musculares
Atividade biológica associada ao:
o Alfa-humuleno
o Extraído durante a 2ª metade da destilação
o Ao contrário do que literatura: artemitina.
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13. Óleo essencial
A erva é natural da mata atlântica e mais freqüente no litoral que vai
de São Paulo a Santa Catarina
O creme teve liberação da Anvisa (Agência Nacional de Vigilância
Sanitária), que classificou o produto na classe dos fitomedicamentos,
que são fármacos que têm em sua composição apenas substâncias
ativas extraídas de plantas, sem a mistura de princípios ativos sintéticos
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14. Óleo essencial
As folhas frescas de “baleeira” produzem cerca de 0,23% de óleo
essencial
800 kg da erva para a obtenção de 1 litro de óleo essencial, que é o
princípio do creme
12 hectares da erva no centro de pesquisas da Unicamp em Paulínia
(SP), para garantir a extração de 120 litros anuais de óleo
Suficientes para atender à produção durante esta fase de lançamento
do produto
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15. Óleo essencial
Os pesquisadores precisaram de oito anos de esforços para adaptar o
vegetal às novas condições de plantio, adequadas à produção do
medicamento
O equipamento utilizado na produção do óleo custou R$ 240 mil
Laboratório Aché comercializa o medicamento
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16. Óleo essencial
“Os estudos clínicos realizados apontam que o alfa-humuleno é tão
eficaz quanto o diclofenaco dietilamônico no tratamento de tendinite
crônica e de dores miofasciais, com a vantagem de não causar reações
adversas, como dores gástricas ou alergia local”
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17. Óleo essencial
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18. Óleo essencial
O gênero Baccharis L. (Asteraceae)
Espécimes na forma de arbustos ou até mesmo como árvores
pequenas, conta com aproximadamente 400 espécies América do Sul
120 Brasil
Espécies do sul e sudeste do país
Regiões de Campos de Altitude que consistem em biomassa que
compreendem uma série de formações fresco-úmidas, dominadas por
gramíneas e arbustos, restritas às regiões mais elevadas (que começam
em alturas de 1800-2000 m) da região da Mata Atlântica
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19. Óleo essencial
Diversas espécies de Baccharis são usadas na medicina popular para
tratamento de dor de cabeça, diabetes e desordens hepáticas,
principalmente devido ao acúmulo de metabólitos secundários
bioativos, tais como terpenóides, flavonóides, cromenos
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20. Óleo essencial
Diversas espécies de Baccharis são usadas na medicina popular para
tratamento de dor de cabeça, diabetes e desordens hepáticas,
principalmente devido ao acúmulo de metabólitos secundários
bioativos, tais como terpenóides, flavonóides, cromenos
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21. Óleo essencial
Baccharis articulata
B. caprariaefolia cognata
B. crispa
B. coridifolia,
B. dracunculifolia
B. erioclada
B. halimifolia,
B. latifolia
B. linearis
B. microcephala
B. milleflora
B. myriocephala, etc
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22. Óleo essencial
Influência
de
diferentes
fatores,
tais
como
parâmetros
microclimáticos, altitude, sazonalidade, desenvolvimento, nutrientes
e/ou disponibilidade hídrica na produção e/ou acúmulo de metabólitos
secundários, tais como óleos essenciais
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23. Óleo essencial
Objetivo avaliar as diferenças nos parâmetros encontrados nas
regiões de Campos de Altitude, para descrever a composição química
dos óleos essenciais das folhas de seis espécies de Baccharis coletadas
na cidade de Campos do Jordão, estado de São Paulo
B. dracunculifolia DC., B. trimera (Less) DC., B. uncinella DC., B.
schultzii Baker, B. regnelli Sch. Bip. e B. microdonta DC.
Composição dos óleos essenciais das três ultimas espécies descrita
pela primeira vez neste trabalho
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24. Óleo essencial
Os rendimentos dos óleos essenciais obtidos das folhas de
B.dracunculifolia, B. microdonta, B. regnelli, B. uncinella, B. Schultzii e
B. trimera variaram entre 0,08–0,21%
Foram identificados 67 compostos (que correspondem a 70–92% do
conteúdo total dos óleos)
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25. Óleo essencial
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26. Óleo essencial
A diferenciação estrutural dos metabólitos voláteis detectados nas
espécies de Baccharis estudadas mostrou-se significativa
Dos 67 compostos identificados, apenas seis foram detectados
simultaneamente em quatro ou cinco espécies
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27. Óleo essencial
α-pineno (B. microdonta, B. regnelli, B. schultzii, B. trimera e B.
uncinella)
β-pineno (B. dracunculifolia, B. microdonta, B.schultzii e B. Uncinella)
E-cariofileno (B. dracunculifolia, B. microdonta, B. schultzii e B.
uncinella)
Aromadendreno (B. dracunculifolia, B. microdonta, B. trimera e B.
uncinella)
Biciclogermacreno (B. dracunculifolia, B. microdonta, B. regnelli, B.
schultzii e B. trimera)
δ-cadineno (B. microdonta, B. regnelli, B. schultzii e B. uncinella)
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28. Óleo essencial
Observa-se uma tendência no acúmulo de sesquiterpenos como
componentes principais dos óleos essenciais das folhas de espécies do
gênero Baccharis coletadas em região de “Campos de Altitude”.
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29. Óleo essencial
Extração dos óleos essenciais
Procedimento de hidrodestilação em um aparelho de Clevenger
durante 4 h
Após a extração com CH2Cl2, secou-se, e evaporou-se o solvente
para pesagem, o rendimento de cada óleo essencial foi calculado tendo
como base a massa de óleo essencial e de folhas frescas:
Baccharis dracunculifolia (0,21%), B. microdonta (0,09%), B. regnelli
(0,12%), B. schultzii (0,08%), B. trimera (0,15%) e B. uncinella (0,17%)
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30. Óleo essencial
coluna capilar HP-5
modo “split” (1:20)
Programação de temperatura do forno:
60 a 280°C
60/1/3 °C/min/280/10
T =inj 220 e Tdet 280 °C
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31. Óleo essencial
A identificação dos componentes foi baseada na comparação de
seus espectros de massas com aqueles da base de dados do
espectrômetro (Bibliotecas Wiley e NIST) e confirmada pela
determinação de seus índices de Kovats, que foram calculados
relativamente aos tempos da retenção de uma série de n-alkanos
Referência:
Adams, R. P.; Identification of essential oil components by gas
chromatography/quadrupole mass spectrometry, Academic Press: San
Diego, 1995.
Adams RP, ed. 2007. Identifi cation of Essential Oil Components by Gas
Chromatography/Mass Spectrometry, 4th edn. Allured: Carol Stream,
IL
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32. Óleo essencial
Kovats retention index (shorter Kovats index, retention index;
plural retention indices)
Índice de Kovats
É um conceito usado em Cromatografia gasosa para converter o
tempo de retenção em constantes de sistemas indepentendes
O índice foi criado pelo química Húngaro – Suíço Ervin Kováts
Durante os anos de 1950 quando ele pesquisava composições de
óleos essenciais
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33. Óleo essencial
O índice de retenção de certos compostos químicos é o tempo de
retenção normalised (pôr num estado normal – dar a mm situação –
padronização) para o tempo de retenção da eluição de seus adjacentes
n-alcanos
Enquanto que os tempos de retenção variam com o sistema
cromatográfico individual (comprimento da coluna, espessura do filme,
diâmetro, velocidade do gás, pressão e tempo vazio)
Os índices de retenção derivados são mais independentes desses
parâmetros e permitem uma comparação de valores medidos pela
diferença de laboratórios analíticos sobre várias condições
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34. Óleo essencial
Tabelas de índice de retenção podem ajudar a identificar
componentes pela comparação encontrada experimentalmente do
índice de retenção com os valores conhecidos
O método tem vantagens de ser uma relação linear entre os valores
de log (t´r) e número de átomos de carbonos em uma molécula
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35. Óleo essencial
O valor do índice de Kovats é usualmente representado pela
expressão pela expressão matemática
A aplicação é restrita para compostos orgânicos
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36. Óleo essencial
Para cromatografia tem temperatura constante
O índice de Kovats é dado pela equação
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37. Óleo essencial
Para cromatografia de temperatura programada
O índice de Kovats é dado pela equação
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38. Óleo essencial
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39. Óleo essencial
Compostos voláteis de plantas são identificados usando CG em
combinação com
1.
EM por comparação/combinação dos espectros
2.
FID por quantificação das áreas dos picos de desconhecidos
3.
Comparação de índice de retenção
Um simples extrato de planto pode conter centenas de terpenóides
similares que produzem um EM similar
Assim, apenas a combinação do EM é um erro
Combinação pela comparação de tempos de retenção com padrões
no mesmo sistema é impraticável já que muitos compostos de plantas
não são comercialmente disponíveis
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40. Óleo essencial
Índices de retenção publicados são mais adequados do que os
tempos de retenção por comparação entre diferentes sistemas
cromatográficos
A combinação combinada do Espectro de massas e índice de
retenção podem facilitar a identificação positiva de mais de 100
compostos de um extrato de planta com apenas poucos cromatogramas
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41. Óleo essencial
Calculadora para índice de retenção (IR) pela determinação de IR
dos voláteis do óleo essencial de Koeberlinia spinosa Zucc.
Um padrão contendo 5ng/mL de 18 hidrocarbonetos de n-alcanos
(heptano até n-pentacosano) foi analisado inicialmente (corrida dos
hidrocarbonetos isolados) antes dos extratos de óleos essenciais
O tempo de retenção de cada alcano padrão eluído foi então
carregado na calculadora que os pesquisadores estavam investigando
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42. Óleo essencial
Calculadora para índice de retenção (IR) pela determinação de IR
dos voláteis do óleo essencial de Koeberlinia spinosa Zucc.
Um padrão contendo 5ng/mL de 18 hidrocarbonetos de n-alcanos
(heptano até n-pentacosano) foi analisado inicialmente (corrida dos
hidrocarbonetos isolados) antes dos extratos de óleos essenciais
O tempo de retenção de cada alcano padrão eluído foi então
carregado na calculadora que os pesquisadores estavam investigando e
obtiveram um gráfico
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43. Óleo essencial
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44. Óleo essencial
Este método permite o usuário comparar os resultados do índice de
retenção relatado no banco de dados dos IR de óleos essenciais do
livro do Adam
Ou pelos IR determinado pelo seu grupo
O gráfico do número de hidrocarbonetos contra o tempo de
retenção aparece como uma linha e um valor de R2 como com
regressão linear
O gráfico ajuda a acessar a linearidade dos tempos de retenção dos
n-alcanos
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45. Óleo essencial
Pontos fora da reta ou valores de R2 significantemente menores que
1 podem indicar problemas com o sistema cromatográfico ou com
identificação dos compostos
Uma vez conseguido os tempos de retenção dos n-alcanos e as
relações de linearidade
Próxima etapa é transferir o tempo de retenção dos compostos
desconhecidos, separados com os mesmos parametros instrumentais
de CG
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46. Óleo essencial
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47. Óleo essencial
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48. Óleo essencial
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49. Óleo essencial
Identificação dos compostos
Uma identificação positiva de compostos orgâncios geralmetne
requerem aplicação de 2 ou mais técnicas analíticas
Voláteis de plantas combinação do cruzamento dos EM e IR é
conveniente desde que ambos sejam realizados nas mesmas condições
de corrida cromatográfica
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50. Óleo essencial
Um segundo fator a considerar na avaliação de diferenças entre
tempos de retenção relatados e observados é a diferença entre os tr
relatado e observado para outros compostos dentro do mesmo extrato
Exemplo
Se um extrato contem tricicleno (IR = 930)
alfa-pineno (IR = 942)
e um composto desconhecido com o espectro compara-se a canfeno
e o IR = 950
o composto desconhecido não é provável que seja canfeno
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51. Óleo essencial
Se um extrato contem tricicleno (IR = 930)
alfa-pineno (IR = 942)
e um composto desconhecido com o espectro compara-se a canfeno
e o IR = 950
o composto desconhecido não é provável que seja canfeno
Embora o IR calculado está dentro de 2 unidade IR = 953 de canfeno
no extrato de Dalea formosa extracts
Indicando tricliceno e alfa-pineno no mesmo extrato são mais altos
que os IR mencionados para os compostos de outras literatura
Portanto, seria de esperar canfeno, que elui dentro de um minuto de
tricicleno e alfa-pineno, também ter um índice um pouco maior do que
a média
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52. Óleo essencial
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53. Óleo essencial
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54. Óleo essencial
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55. Óleo essencial
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56. Óleo essencial
Extração assistida por ultrasom (UAE) em conjugação com
microextração líquida-líquida dispersiva (DLLME)
Coupling the extraction process with a preconcentration method such
as dispersive liquid–liquid microextraction (DLLME) (Rezaee, M. et al.,
2006 Journal of Chromatography A, 1116(1–2), 1–9)
DLLME é um método simples e rápido para extração e préconcentração de compostos orgânica de amostras aquosas
The DLLME method offers the advantages such as simplicity and a fast
procedure, with high efficiency, recovery, and enrichment factor
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57. Óleo essencial
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58. Óleo essencial
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59. Óleo essencial
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60. Óleo essencial
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61. Óleo essencial
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62. Óleo essencial
http://www.redetec.org.br/inventabrasil/acheflan.htm
http://www.sboe.net.br/
http://www.youtube.com/watch?v=uOwEovBld1Y
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63. Óleo essencial
Algumas sugestões:
Importante calcular o Rendimento da extração
Verificar se existe a planta de estudo na chapada dos Guimarães e
Veadeiros e verificar a variação de composição
Talvez colher a planta em diferentes épocas do ano, Serrado bem
seco de maio a agosto
Importante fazer o arraste de vapor não apenas com água, mas
também com solventes voláteis – Éter etílico
Verificar quais compostos presentes nos óleos tem atividade
biológica associada e ensaiar esses óleos em modelos eficazes e
direcionados (humuleno)
Análise quimiométrica – Tenho indicações, Teórica – apenas
aprender a usar o software
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64. Óleo essencial
Análise em triplicata
o colheu 60g de folhas, faça 3 extrações simultâneas com 20g de
folhas
o Garante que vc não tem erro na amostra
Injeção no FID e no EM
Organizar os dados em uma tabela do excel
Podemos escrever uma revisão de óleo essencial, métodos de
extração mais comuns, diferenças, vantagens e desvantagens de cada
método, tipo de ensaio biológico mais comum realizado com o óleo, e
depois fazer uma seleção e ver quantos pesquisadores brasileiros e de
fora do país trabalham com isso!
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